检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2013年第1期35卷 24-28页

作者：杨丹丽田晓怡石伟先郑直中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所生物化学与分子生物学系北京100005 北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所北京100013

目的建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段。方法直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以L... 详细信息

目的建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段。方法直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以Luminex微球为基础的多指标同步分析(xMAP)多重检测平台,对一个样品同时检测A和B型流感病毒、A和B型呼吸道合胞病毒、1、2和3型副流感病毒,及偏肺病毒等8种病毒的靶标RNA,可一次实验并行检测96个样品。对该高通量检测系统进行了特异性、灵敏度评价。结果该检测方法可以特异性区分8种病毒的RNA靶标分子,检测下限均低于或等于4695个RNA拷贝。结论初步建立了可靠、灵敏、操作简便、高通量的多种呼吸道病毒RNA并行检测方法,为进一步实现在临床呼吸道样品中高通量检测呼吸道病毒提供了技术基础。

关键词：呼吸道病毒体外转录RNA 多指标同步分析技术信号放大

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主动免疫肌动蛋白样蛋白7a蛋白引起小鼠睾丸曲细精管的损伤

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中国医学科学院学报 2013年第6期35卷 595-600页

作者：付俊宗书东缪时英宋伟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 国家人口和计划生育委员会科学技术研究所生殖生理学实验室北京100081

目的原核表达并纯化全长的人精子肌动蛋白样蛋白7a(ACTL7a)蛋白,检测主动免疫ACTL7a产生抗精子抗体后小鼠睾丸的损伤情况。方法构建重组表达质粒pET30a-ACTL7a,以重组质粒转化*** Rosseta(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表... 详细信息

目的原核表达并纯化全长的人精子肌动蛋白样蛋白7a(ACTL7a)蛋白,检测主动免疫ACTL7a产生抗精子抗体后小鼠睾丸的损伤情况。方法构建重组表达质粒pET30a-ACTL7a,以重组质粒转化*** Rosseta(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过镍离子金属螯合树脂纯化和SDS-PAGE切胶分离目的蛋白,溶胶后以表达的ACTL7a蛋白免疫ICR小鼠。ELISA检测抗体效价,PAS染色检测主动免疫后曲细精管的发育。结果经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达出目的蛋白ACTL7a,纯化后免疫ICR小鼠,经PAS染色发现主动免疫ACTL7a的小鼠其睾丸曲细精管出现生精细胞脱落、核凝聚、生精细胞缺如、生精细胞退化等异常的管腔。结论成功构建了ACTL7a基因全长的原核表达载体,经诱导表达和纯化获得高纯度的目的蛋白。发现ACTL7a蛋白主动免疫ICR小鼠产生抗精子抗体后,小鼠睾丸的曲细精管发生严重损伤。

关键词：肌动蛋白样蛋白7a 表达纯化主动免疫抗精子抗体

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中美医学院校药理学教学的比较与启示

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中华医学教育杂志 2013年第5期33卷 798-800页

作者：朱蕾叶菜英张德昌中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院药理学系北京100005

本文从课程设置、教学方法、教学手段以及考核方式等方面对中国（大陆地区）和美国两国医学院校的药理学教学进行比较,并从两国药理学教学的差异中借鉴一些能够提高我国药理学教学质量的经验,以期为我国药理学教学的改革提供新的思路.

关键词：药理学中国美国教学方法考核方式比较

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兰安生与中国近代公共卫生

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南京医科大学学报（社会科学版） 2013年第1期13卷 13-17页

作者：王勇中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院社会科学系北京100005

兰安生是世界著名公共卫生学家。他出生于中国,也开创其公共卫生事业于中国。他在北京协和医学院创建了中国最早的公共卫生学系,在北京建立了以第一卫生事务所为依托的城市社区医疗卫生服务,在河北定县指导其学生陈志潜建立了中国最早... 详细信息

兰安生是世界著名公共卫生学家。他出生于中国,也开创其公共卫生事业于中国。他在北京协和医学院创建了中国最早的公共卫生学系,在北京建立了以第一卫生事务所为依托的城市社区医疗卫生服务,在河北定县指导其学生陈志潜建立了中国最早的农村基层医疗卫生体系,对我国公共卫生事业的发展起到了奠基作用,这些在中国取得的经验也为国际公共卫生学界所推崇。

关键词：兰安生公共卫生北京协和医学院

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GLP-1受体激动剂Exenatide改善糖尿病大鼠心血管功能

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基础医学与临床 2013年第9期33卷 1171-1175页

作者：洪霓赵倩刘腾张辉刘琦王云王雯中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院机能室北京100005 北京大学首钢医院护理部北京100144 首都医科大学基础医学院生理学与病理生理学系北京100069 首都医科大学附属北京同仁医院干部医疗科北京100730

目的探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂Exenatide(Ex)治疗对糖尿病大鼠心血管功能的影响,为其临床应用提供实验依据。方法用单因素四水平不等重复的完全随机实验进行研究,34只Wistar大鼠随机分成4组:对照组(C,n=7),糖尿病组(DM,n=9)... 详细信息

目的探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂Exenatide(Ex)治疗对糖尿病大鼠心血管功能的影响,为其临床应用提供实验依据。方法用单因素四水平不等重复的完全随机实验进行研究,34只Wistar大鼠随机分成4组:对照组(C,n=7),糖尿病组(DM,n=9),小剂量Ex治疗组(Emin,n=9),大剂量Ex治疗组(Emax,n=9)。检测大鼠空腹血糖水平;使用小动物超声仪观察大鼠左心室射血分数(EF)、左心室短轴缩短率(FS);观察腹主动脉血流速(AF),胸主动脉内膜扫描电镜观察血管内膜损伤。结果 DM组空腹血糖明显升高(P<0.01),Exenatide治疗组空腹血糖较DM组显著降低(P<0.05)。DM组EF、FS较对照明显降低(P<0.01),Exenatide治疗组EF、FS明显升高(P<0.05)。DM组腹主动脉血流速明显降低(P<0.01),血管内膜出现明显损伤;Exenatide治疗组腹主动脉血流速较DM组明显升高(分别P<0.05,P<0.01),血管内膜损伤减轻。结论 Exenatide能够降低糖尿病大鼠血糖水平,并改善糖尿病心脏和血管功能。

关键词： Exenatide 糖尿病大鼠心血管功能

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ICP-OES法与EDTA直接滴定法测定含石膏方剂中钙离子含量研究

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中国实验方剂学杂志 2013年第6期19卷 69-74页

作者：李晓晶马强盛振华葛尔宁苏燕内蒙古科技大学包头医学院基础学院内蒙古包头014060 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物医学工程学系北京100005 浙江中医药大学分析测试中心杭州310053

目的:通过对比EDTA直接滴定法和ICP-OES法测定钙标准液、单煎石膏药液、白虎汤、麻杏石甘汤和竹叶石膏汤同一样品中Ca2+溶出量差异,探讨复方汤剂中有机基底等因素对EDTA直接滴定法测定复方药液中Ca2+溶出量的影响程度并建立一种可信的... 详细信息

目的:通过对比EDTA直接滴定法和ICP-OES法测定钙标准液、单煎石膏药液、白虎汤、麻杏石甘汤和竹叶石膏汤同一样品中Ca2+溶出量差异,探讨复方汤剂中有机基底等因素对EDTA直接滴定法测定复方药液中Ca2+溶出量的影响程度并建立一种可信的测定方剂中Ca2+溶出量的方法。方法:通过对比EDTA直接滴定法和微波消解-ICP-OES法测定钙标准液、单煎石膏药液、白虎汤、麻杏石甘汤和竹叶石膏汤同一样品中Ca2+溶出量。结果:EDTA直接滴定法与ICP-OES法测定钙标准液结果间无显著差异,两方法测定结果相同。两方法测定单煎石膏、白虎汤、麻杏石甘汤和竹叶石膏汤样品中Ca2+溶出量结果间差异显著(P<0.01),EDTA直接滴定法测定结果较ICP-OES法偏大。结论:EDTA直接滴定法测定样品中Ca2+溶出量受样品基底复杂程度影响,影响因素对EDTA直接滴定法测定影响均匀且呈线性关系。EDTA直接滴定法测定复方中Ca2+溶出量偏大,较不适合用于测定中药复方中Ca2+溶出量。

关键词： EDTA直接滴定法 ICP-OES法石膏含石膏方剂方法学比较

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钙激活钾通道KCa3.1对巨噬细胞吞噬功能的抑制性调节作用

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医学研究杂志 2013年第7期42卷 21-24,76页

作者：祝红刘枭李慧闫莉郝维曹济民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系 100005

目的观察巨噬细胞膜的钙激活钾通道KCa3.1与吞噬功能的关系。方法通过光镜下半定量观察RAW264.7巨噬细胞吞噬鸡红细胞,以及采用流式细胞术定量检测RAW264.7巨噬细胞吞噬异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的大肠杆菌(... 详细信息

目的观察巨噬细胞膜的钙激活钾通道KCa3.1与吞噬功能的关系。方法通过光镜下半定量观察RAW264.7巨噬细胞吞噬鸡红细胞,以及采用流式细胞术定量检测RAW264.7巨噬细胞吞噬异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的大肠杆菌(FITC-tagged ***)等方法,研究正常RAW264.7细胞的吞噬活动,以及阻断KCa3.1通道后RAW264.7细胞吞噬能力的改变。结果光镜检测结果显示,未受吞噬刺激因子激活的对照RAW264.7细胞对鸡红细胞有较弱的吞噬能力,其吞噬率为1.67%±0.29%;用KCa3.1通道选择性阻断剂TRAM-34(20nmol/L)处理RAW264.7细胞后,吞噬率增高至5.08%±0.38%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),且单个RAW264.7细胞吞噬鸡红细胞的个数也明显增加。流式细胞术结果显示,阻断KCa3.1通道后,RAW264.7细胞吞噬FITC标记的大肠杆菌的数量明显增多,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 KCa3.1通道的活动对RAW264.7巨噬细胞的吞噬活性有抑制性调节作用。

关键词：钙激活钾通道巨噬细胞吞噬鸡红细胞大肠杆菌

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北京市密云县野栖鼠感染田鼠巴贝西虫的检测

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第4期20卷 218-222页

作者：王振生王小梅窦相峰李旭任海林刘娟卜玲毅王恒中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病原生物学系北京100005 北京市疾病预防控制中心北京100013

针对2012年6月于北京市密云县辖区捕获的15只野栖鼠，检测其巴贝西虫感染状况。通过制备薄血涂片及采集心、肺组织样本提取基因组，结合镜检及聚合酶链式反应确定感染阳性样本，对巴贝西虫核糖体小亚基编码基因虫种特异片段进行扩增并... 详细信息

针对2012年6月于北京市密云县辖区捕获的15只野栖鼠，检测其巴贝西虫感染状况。通过制备薄血涂片及采集心、肺组织样本提取基因组，结合镜检及聚合酶链式反应确定感染阳性样本，对巴贝西虫核糖体小亚基编码基因虫种特异片段进行扩增并测序，通过序列对比及进化树构建对野栖鼠感染的巴贝西虫进行同源性分析及虫种鉴别。本次检测的野栖鼠中1份社鼠Niviventerconfucianus血液镜检阳性，对应的心、肺组织样本检测到巴贝西虫虫种特异DNA片段，同源进化分析表明，该虫株与我国浙江、福建、台湾地区的田鼠巴贝西虫分离株具有高度同源性，属于田鼠巴贝西虫Babesiamicroti。北京市密云县野栖鼠首次被证实存在感染田鼠巴贝西虫的情况。

关键词：田鼠巴贝西虫鼠聚合酶链式反应薄血涂片

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HSD1与微管蛋白在生精细胞中的定位关系研究

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医学研究杂志 2013年第6期42卷 20-22页

作者：宋伟狄茜缪时英王琳芳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系100005

目的确定HSD1与微管蛋白在生精细胞中的定位关系,为进一步研究其在精子发生中的功能奠定基础。方法通过分子克隆方法构建GFP-HSD1和FLAG-HSD1的真核表达质粒,转染精母细胞系GC-2spd(ts),同时筛选稳定表达FLAG-HSD1的细胞株。应用免疫荧... 详细信息

目的确定HSD1与微管蛋白在生精细胞中的定位关系,为进一步研究其在精子发生中的功能奠定基础。方法通过分子克隆方法构建GFP-HSD1和FLAG-HSD1的真核表达质粒,转染精母细胞系GC-2spd(ts),同时筛选稳定表达FLAG-HSD1的细胞株。应用免疫荧光实验观察外源和内源表达的HSD1与微管蛋白α-tubulin在GC-2spd(ts)或小鼠原代生精细胞中的定位分布。结果成功构建稳定表达FLAG-HSD1融合蛋白的GC-2spd(ts)细胞株。外源表达HSD1在GC-2 spd(ts)中与α-tubulin明显共定位;内源表达HSD1与α-tubulin在GC-2spd(ts)和原代小鼠生精细胞中明显共定位。结论 HSD1与微管蛋白α-tubulin在生精细胞中存在明显的共定位关系。

关键词：精子发生 HSD1 微管细胞分裂

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RYBP慢病毒表达载体的构建及对结肠癌细胞HCT116增殖的影响

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医学研究杂志 2013年第9期42卷 37-41页

作者：马雯陈虹黄秉仁陈等中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室100005

目的构建RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP,包装慢病毒颗粒并感染结肠癌细胞HCT116,分析RYBP的表达及对HCT116细胞增殖的影响。方法用DNA克隆技术在慢病毒表达载体pWPI-IRES-EGFP序列中引入Flag标签及多个单酶切位点序列,改造后的载体命名为... 详细信息

目的构建RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP,包装慢病毒颗粒并感染结肠癌细胞HCT116,分析RYBP的表达及对HCT116细胞增殖的影响。方法用DNA克隆技术在慢病毒表达载体pWPI-IRES-EGFP序列中引入Flag标签及多个单酶切位点序列,改造后的载体命名为pWPI-linker。采用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)从肝癌SK-Hep-1细胞总RNA中扩增RYBP的全长开放阅读框序列,克隆入pWPI-linker载体中,得到pWPI-RYBP。利用人胚肾细胞HEK293T包装重组慢病毒颗粒,分析该慢病毒颗粒感染HCT116细胞的效率、RYBP蛋白的表达,用MTS方法分析RYBP过表达对HCT116细胞增殖的影响。结果用改造的pWPI-linker载体成功构建慢病毒表达载体pWPI-RYBP包装的慢病毒颗粒能高效感染HCT116细胞,表达出Flag-RYBP融合蛋白。MTS方法分析表明,RYBP的过表达抑制HCT116细胞的增殖,增殖抑制率达26.1%。结论改建的慢病毒表达载体pWPI-linker带有可供选择的多个单克隆位点和标签蛋白序列,为今后基于pWPI载体的克隆构建和表达蛋白质的分析提供了极大的便利;RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP的构建为进一步研究RYBP的生物学功能及基因治疗奠定了基础。

关键词： RYBP 慢病毒载体 HCT116 细胞增殖

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