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中国2020年制造业职业性噪声所致听力损失人数估算

中国职业医学 2023年第5期50卷 512-517页

作者：艾丽梅李欣欣柳安琪王丹王敬鑫胡伟江万霞中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院流行病与卫生统计学系北京100005 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所北京100050

目的估算2020年中国制造业中职业性噪声所致听力损失(ONHL)的劳动者人数。方法整合多统计口径数据,基于中国疾病预防控制中心“职业病及健康危害因素监测信息系统”收集制造业劳动者信息,按劳动者年龄构成比拆分2018年“第四次全国经济... 详细信息

目的估算2020年中国制造业中职业性噪声所致听力损失(ONHL)的劳动者人数。方法整合多统计口径数据,基于中国疾病预防控制中心“职业病及健康危害因素监测信息系统”收集制造业劳动者信息,按劳动者年龄构成比拆分2018年“第四次全国经济普查”和2020年“全国职业病危害现状调查”中劳动者汇总人数;基于吉林省年龄结构调整普通人群听力损失患病数据,基于第七次人口普查中就业人口年龄构成对接噪率进行标准化处理。其次,估算归因比例(AF)。比较接触职业性噪声(以下简称“接噪”)劳动者与普通人群的听力损失患病率,计算患病率比值(PR)。估算接噪劳动者中ONHL占所有听力损失的比例和归因人数(AC)。结合AF与发生听力损失的劳动者人数,估算ONHL的人数。结果2020年我国制造业有30059525名劳动者接触噪声环境,粗接噪率为28.94%,标化接噪率为28.52%。接噪劳动者的听力损失患病率随年龄的增长呈上升趋势,其中共有8054789人患有听力损失,主要集中在45~<55岁人群。合计PR及其95%不确定性区间(UI)为2.83(2.58~3.06),合计AF及其95%UI为64.63%(61.22%~67.30%),峰值皆位于30~<45岁;合计AC及其95%UI为5205980(4930620~5420345)人,主要集中于40~<55岁。结论职业性噪声对中国制造业劳动者听力健康造成了严重威胁,尤其是中青年人群。

关键词：制造业职业性噪声听力损失归因比例归因人数估算

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稳定敲除Mcart⁃1下调RAW264.7巨噬细胞增殖能力和氧化磷酸化水平

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基础医学与临床 2023年第4期43卷 568-575页

作者：赵永晶仇佳星张迪雅郭泓江王钰铖鞠瑞郭磊中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、药理学系北京100005

目的基于CRISPR/Cas9原理构建Mcart-1稳定敲除的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株RAW264.7,检测其细胞增殖能力和能量代谢水平。方法用Cas9慢病毒和sgRNA慢病毒分两步感染RAW264.7巨噬细胞,并挑选单克隆细胞:qPCR和Western blot检测Cas9表... 详细信息

目的基于CRISPR/Cas9原理构建Mcart-1稳定敲除的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株RAW264.7,检测其细胞增殖能力和能量代谢水平。方法用Cas9慢病毒和sgRNA慢病毒分两步感染RAW264.7巨噬细胞,并挑选单克隆细胞:qPCR和Western blot检测Cas9表达水平和Mcart-1敲除效果;单细胞测序分析突变位点;细胞能量代谢分析仪Seahorse检测细胞耗氧速率(OCR)和能量代谢表型;试剂盒测定细胞内总ATP含量;细胞计数仪计数和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色检测细胞增殖。结果成功构建Mcart-1稳定敲除的RAW264.7细胞株(记为Mcart-1^(-/-)-RAW264.7);该细胞株中Mcart-1发生移码突变;与野生型RAW264.7细胞系(记为RAW264.7)相比,Mcart-1^(-/-)-RAW264.7细胞氧气消耗速率(OCR)下降,胞外酸化速率(ECAR)升高;与RAW264.7细胞相比,Mcart-1^(-/-)-RAW264.7细胞内总ATP含量下降(P<0.05),线粒体ATP产生速率下降(P<0.01),而糖酵解ATP产生速率升高(P<0.01);与RAW264.7细胞相比,Mcart-1^(-/-)-RAW264.7细胞增殖能力下降(P<0.001)。结论稳定敲除Mcart-1后RAW264.7细胞增殖能力和氧化磷酸化水平均下降。该细胞株可作为探索肿瘤微环境细胞功能的重要工具。

关键词： CRISPR/Cas9 巨噬细胞 Mcart-1 代谢表型

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基于医疗大数据开展药品上市后监测与评价研究的偏倚及其控制

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中国药物警戒 2022年第3期19卷 239-243页

作者：王丽王晓墨杨晨露中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病学和卫生统计学系北京100005

目的介绍国内外基于医疗大数据库开展上市后药品监测与评价研究的现状、存在的偏倚及其可能的控制方法,为我国药品风险监测与管理提供参考。方法系统总结欧美发达国家基于医疗大数据开展药品上市后监测与评价的具体实践,分析我国存在的... 详细信息

目的介绍国内外基于医疗大数据库开展上市后药品监测与评价研究的现状、存在的偏倚及其可能的控制方法,为我国药品风险监测与管理提供参考。方法系统总结欧美发达国家基于医疗大数据开展药品上市后监测与评价的具体实践,分析我国存在的差距;评价在研究设计、数据收集与标准化、统计分析等方面存在的问题及可以改进的方法;探讨我国目前面临的机遇与挑战。结果与结论欧美国家已经基于医疗大数据建立了高效、可持续的药品上市后监测警戒系统;充分考虑并控制研究设计、实施和统计分析中的潜在偏倚是确定药品与不良反应因果关系的前提;应借鉴欧美先进经验,完善和整合现有医疗大数据,开展药物流行病学方法学研究。

关键词：医疗大数据药品上市后监测选择偏倚信息偏倚混杂药物流行病学

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ATF6调控生殖相关基因HSPA1L表达的分子机制

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基础医学与临床 2024年第1期44卷 37-42页

作者：汪媛媛朱席琳伍晓盼刘英中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、生物化学与分子生物学系北京100005

目的探究内质网应激活化转录因子6(ATF6)对生殖相关基因热休克蛋白A1样蛋白(HSPA1L)表达的影响并初步阐明其调控分子机制。方法在人胚肾细胞系HEK-293T中转染ATF6过表达质粒,RT-qPCR和Western blot验证过表达效率;利用雄性ATF6敲除小鼠... 详细信息

目的探究内质网应激活化转录因子6(ATF6)对生殖相关基因热休克蛋白A1样蛋白(HSPA1L)表达的影响并初步阐明其调控分子机制。方法在人胚肾细胞系HEK-293T中转染ATF6过表达质粒,RT-qPCR和Western blot验证过表达效率;利用雄性ATF6敲除小鼠睾丸组织转录物组测序信息,筛选ATF6下游5个生殖相关基因;双荧光素酶报告基因实验选择启动子活性较高的下游基因并检测过表达ATF6对其启动子活性的影响;通过gene-regulation预测ATF6和下游基因启动子可能的结合位点;RT-qPCR和Western blot检测在HEK-293T细胞中过表达ATF6对于下游基因表达的影响;利用凝胶迁移实验(EMSA)确定ATF6与下游基因启动子是否结合。结果转染后HEK-293T细胞中ATF6的mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.05)表达水平明显升高。转录物组测序及双荧光素酶报告基因实验筛选出ATF6下游的生殖相关基因HSPA1L。ATF6能够促进HSPA1L的截短启动子活性(P<0.001)。过表达ATF6后,HSPA1L的表达量明显升高(P<0.001)。差异均有统计学意义。ATF6蛋白能与HSPA1L的启动子DNA序列aagtcgtcac相结合。结论内质网应激的关键分子ATF6通过结合生殖相关基因HSPA1L的启动子调控后者表达水平,这将为预防或治疗与内质网应激(ERS)有关的男性不育的深入研究奠定基础。

关键词：活化转录因子6 热休克蛋白A1样蛋白男性生殖基因调控

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基于直接TaqMan-PCR的无创检测脂质代谢相关SNP基因分型技术

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基础医学与临床 2024年第6期44卷 858-865页

作者：孙元宏谢吕范利华郑直中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、生物化学与分子生物学系北京100005

目的建立一种基于直接TaqMan-PCR的无创多重单核苷酸多态性分型技术用于高通量检测与脂质代谢相关的rs688和rs964184位点,以满足风险人群快速筛查的需求。方法采用提取的DNA对设计的TaqMan探针进行PCR退火延伸温度和扩增程序的优化;将... 详细信息

目的建立一种基于直接TaqMan-PCR的无创多重单核苷酸多态性分型技术用于高通量检测与脂质代谢相关的rs688和rs964184位点,以满足风险人群快速筛查的需求。方法采用提取的DNA对设计的TaqMan探针进行PCR退火延伸温度和扩增程序的优化;将口腔拭子放入样品处理液后进行短暂震荡和离心,取少量上清进行直接qPCR扩增分析;探索探针冻融稳定性和样品保存时间对分型结果的影响。结果本方法仅需对口腔拭子样本简单处理后即可进行qPCR分析,并且可在室温情况下保存4 d。优化后的方法能够较好地区分rs688和rs964184位点的野生纯合子、突变纯合子及杂合子。结论建立了一种快速便捷、高通量、低成本的SNP分型新技术,为大规模筛查携带易感基因的风险人群提供了高效且准确的新方法。

关键词：直接PCR 核酸提取 SNP基因分型高通量

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RNA结合蛋白RBPMS调控急性髓系白血病细胞系THP-1增殖与迁移

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基础医学与临床 2024年第5期44卷 619-625页

作者：赵羚延何浏马艳妮余佳中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、生物化学与分子生物学系北京100005

目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;... 详细信息

目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;通过高通量测序检测RBPMS过表达后对THP-1细胞转录组的影响。分别用CCK-8法和流式细胞仪检测RBPMS过表达对白血病细胞增殖以及迁移能力的影响。结果RBPMS在携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病干细胞中异常低表达。RBPMS过表达后THP-1细胞的增殖和迁移能力显著降低(P<0.0001,P<0.05)。结论RBPMS可以抑制携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系的细胞增殖与迁移。

关键词： RBPMS MLL-AF9 急性髓系白血病急性髓系白血病细胞系(THP-1)

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基于复合多聚体材料的缓释局麻药在慢性痛动物模型中的应用

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协和医学杂志 2022年第3期13卷 433-439页

作者：孙丰润李默晗贺渝淼王涛马超黄宇光中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005 中国医学科学院北京协和医院麻醉科北京100730 中国医学科学院北京协和医院麻醉-疼痛联合实验室北京100730

目的对复合多聚体材料组成的局麻药缓释载体的药物释放特征和镇痛效果进行测评。方法使用静电纺丝技术制备含盐酸布比卡因的PLGA(聚乳酸-羟基乙酸共聚物)缓释膜(静电纺丝膜,M组),并以PLGA-PEG(聚乙二醇)-PLGA温敏凝胶包裹纺丝膜制备成... 详细信息

目的对复合多聚体材料组成的局麻药缓释载体的药物释放特征和镇痛效果进行测评。方法使用静电纺丝技术制备含盐酸布比卡因的PLGA(聚乳酸-羟基乙酸共聚物)缓释膜(静电纺丝膜,M组),并以PLGA-PEG(聚乙二醇)-PLGA温敏凝胶包裹纺丝膜制备成含盐酸布比卡因的缓释递送系统(凝胶包裹静电纺丝膜形成的复合缓释载体,G组),评定两组体外释放特征、体内镇痛效果及安全性。结果体外条件下,M组对盐酸布比卡因的累积释放时间可达5 d以上,G组累积释放时间可延长至10 d。体内条件下,M组和G组对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠模型的镇痛时间均可达14 d,两组镇痛效果无显著差异(P>0.05)。M组盐酸布比卡因血药浓度在术后第1天达峰值[(0.294±0.029)μg/L],G组于术后第3天达峰值[(0.192±0.064)μg/L],且峰值较M组降低,两组盐酸布比卡因血药浓度均在安全范围内。HE染色示,M组、G组大鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏组织均未见明显病理改变。结论本研究制备的以盐酸布比卡因纳米纺丝缓释膜为基础,PLGA-PEG-PLGA温敏凝胶包裹为介质的复合缓释材料,可进一步延长盐酸布比卡因缓释时间,具有长效镇痛效果且无毒性作用。

关键词：缓释局麻药静电纺丝温敏凝胶聚合物药物递送载体盐酸布比卡因

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沙门氏菌感染巨噬细胞的动态转录物组分析

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基础医学与临床 2024年第6期44卷 779-785页

作者：宋博渊吴雪丽李雪媛王莉莎陈阳中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、生物化学与分子生物学系北京100005

目的本文研究了巨噬细胞RAW 264.7感染鼠伤寒沙门氏菌SL1344后在分子水平上发生的时序变化,旨在全面了解感染期间的动态转录物图谱。方法使用鼠伤寒沙门氏菌SL1344感染巨噬细胞RAW 264.7,分别在0 h、8 h和16 h收集细胞样本进行转录物组... 详细信息

目的本文研究了巨噬细胞RAW 264.7感染鼠伤寒沙门氏菌SL1344后在分子水平上发生的时序变化,旨在全面了解感染期间的动态转录物图谱。方法使用鼠伤寒沙门氏菌SL1344感染巨噬细胞RAW 264.7,分别在0 h、8 h和16 h收集细胞样本进行转录物组测序(RNA-sequencing,RNA-seq)。通过对转录物组数据进行上下游分析,包括差异基因表达、聚类和功能注释,再结合分子网络研究,来阐明巨噬细胞信号通路的变化。结果感染的巨噬细胞呈现出明显的形态和转录水平变化。差异基因分析确定了显著的上调和下调模式。聚类揭示了六个基因簇,涉及多种信号通路,包括免疫反应、膜转运和脂质代谢等。结论巨噬细胞对沙门氏菌感染表现出动态响应,具有明显的时序基因表达模式。免疫反应、膜转运和脂质代谢通路的协同激活暗示了巨噬细胞对外源感染的多层次细胞适应性,为了解巨噬细胞响应沙门氏菌感染的分子机制提供了重要见解。

关键词：巨噬细胞感染模型免疫反应转录物组时序分析

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XRCC6调节RYBP表达的分子机制与功能

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医学研究杂志 2024年第12期53卷 31-36页

作者：刘薇佳李唐嫒陈修远夏婉娉陈等中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系 100005

目的研究X-射线修复交叉互补蛋白6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)结合和下调RING1和YY1结合蛋白(ring1 and YY1 binding protein,RYBP)表达的分子机制与功能。方法采用蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光方法分析XRCC6与RYBP之间... 详细信息

目的研究X-射线修复交叉互补蛋白6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)结合和下调RING1和YY1结合蛋白(ring1 and YY1 binding protein,RYBP)表达的分子机制与功能。方法采用蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光方法分析XRCC6与RYBP之间的相互作用;采用Western blot法检测XRCC6对RYBP表达水平的影响;采用Western blot法和蛋白质免疫共沉淀法检验XRCC6对RYBP蛋白稳定性的调节作用;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测XRCC6是否通过RYBP调节基因表达。结果内源性RYBP与XRCC6之间存在相互作用;XRCC6负性调节RYBP蛋白水平;过表达XRCC6促进RYBP的多聚泛素化和蛋白酶体降解,显著缩短其半衰期;XRCC6负调节H2AK119Ub1,通过调节RYBP抑制下游基因的表达。结论XRCC6结合并通过蛋白酶体途径下调RYBP表达,进而调节RYBP下游基因的表达。

关键词： XRCC6 RYBP 蛋白质相互作用蛋白酶体途径基因表达调节

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探讨ANCA在嗜酸性肉芽肿性多血管炎分类中的价值

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中华临床免疫和变态反应杂志 2024年第2期18卷 110-118页

作者：刘怡彤程蕴琦彭敏张婷杨沛然施举红中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院呼吸与危重症医学科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院北京100730 呼吸和共病全国重点实验室生理学系中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005

目的嗜酸性肉芽肿性多血管炎(eosinophilic granulomatosis with polyangiitis,EGPA)中以血管炎为主要特征和以嗜酸性粒细胞浸润为主要特征的两种亚型分类标准尚未明确,本研究探讨EGPA两种亚型的准确、简明分类方式。方法回顾性收集2000... 详细信息

目的嗜酸性肉芽肿性多血管炎(eosinophilic granulomatosis with polyangiitis,EGPA)中以血管炎为主要特征和以嗜酸性粒细胞浸润为主要特征的两种亚型分类标准尚未明确,本研究探讨EGPA两种亚型的准确、简明分类方式。方法回顾性收集2000年1月—2023年11月北京协和医院呼吸内科、全科医学科、风湿免疫科等多科确诊的EGPA患者临床资料,将患者根据单纯抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)、ANCA与组织病理活检结果相结合以及MIRRA标准三种分类方法分为不同的阳性组和阴性组,分析患者的临床特征。结果共纳入245例患者。根据ANCA结果分类时,阳性组51例,阴性组194例,相较于阴性组,阳性组患者的年龄(60.9比55.4)、NEUT%(59.12比51.87)、PLT(312.94比264.64)、ESR(55.40比27.62)、CRP(46.51比23.57)均较高,上述指标均达显著统计学意义;阳性组肾脏系统(47.1%比25.8%)和神经系统(72.5%比58.2%)的受累比例也显著高于阴性组。根据ANCA结果和组织病理活检结果分类时,阳性组88例,阴性组157例,两组间的分析结果与第一种分类方法一致。根据MIRRA标准分类时,MIRRA标准组患者161例,MIRRA非标准组患者84例,MIRRA标准组的NEUT%(55.39比49.58)显著高于MIRRA非标准组,而LY%(18.57比21.30)和HGB(128.80比136.36)显著低于MIRRA非标准组。结论根据ANCA结果可将EGPA患者分为血管炎亚型和嗜酸性粒细胞浸润亚型;尽管ANCA联合组织病理活检结果也可明确区分血管炎亚型与嗜酸性粒细胞浸润亚型,但由于病理活检存在风险,需根据患者的具体情况进行个体化评估;而MIRRA标准不能准确区分两类亚型。

关键词：嗜酸性肉芽肿性多血管炎抗中性粒细胞胞浆抗体 MIRRA研究

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