检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动脉硬化杂志 2004年第2期12卷 159-161页

作者：刘舒王绿娅王伟吕树铮勇强石凤茹郭恒怡吴其夏北京协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所病理生理学教研室北京市100005 北京市安贞医院心肺血管疾病研究所北京市100029 北京中医药大学中心实验室北京市100029

观察家兔髂动脉球囊损伤后葛根素抑制损伤部位平滑肌细胞增殖的药效。复制球囊损伤家兔髂动脉造成血管狭窄模型 ,实验分为 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组、10 0mg (kg·d)葛根素治疗组和手术对照组 ,通过体外超声定期检测血管腔直... 详细信息

观察家兔髂动脉球囊损伤后葛根素抑制损伤部位平滑肌细胞增殖的药效。复制球囊损伤家兔髂动脉造成血管狭窄模型 ,实验分为 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组、10 0mg (kg·d)葛根素治疗组和手术对照组 ,通过体外超声定期检测血管腔直径 ,病理切片观察血管内膜和中膜面积。结果发现 ,球囊损伤术后第 5周 5 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.6 6± 0 .4 1mm)和 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组的血管直径 (1.5 9± 0 .17mm)显著高于对照组(1.13± 0 .4 3mm)。病理切片结果发现 10 0mg (kg·d)葛根素治疗组内膜 /中膜面积比 (36 %± 18% )显著低于对照组(12 4 %± 6 4 % )。结果提示 ,葛根素对球囊损伤术后血管平滑肌细胞增殖有一定抑制作用。

关键词：药理学葛根素抑制血管损伤后平滑肌细胞增殖计算机图像分析葛根素球囊损伤再狭窄平滑肌细胞

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实验性自身免疫性脑脊髓炎中枢神经系统浸润细胞凋亡的研究

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2004年第5期11卷 277-279页

作者：吕佩源陈慧芳陈竞清翟金萍林嘉友河北省人民医院神经内科河北石家庄050051 河北医科大学附属第三医院骨科河北石家庄050053 河北省人民医院病理科河北石家庄050051 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学室北京100005

目的　探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎 ( EAE)中枢神经系统 ( CNS)中浸润细胞的凋亡情况。方法　用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 ( TUNEL)技术动态检测 EAE病程不同阶段大鼠 CNS中浸润细胞的凋亡变化。结果　TUNEL阳性细... 详细信息

目的　探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎 ( EAE)中枢神经系统 ( CNS)中浸润细胞的凋亡情况。方法　用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 ( TUNEL)技术动态检测 EAE病程不同阶段大鼠 CNS中浸润细胞的凋亡变化。结果　TUNEL阳性细胞的数量随病情进展呈单峰曲线 ,形态学观察支持 TUNEL阳性细胞主要为淋巴细胞、巨噬细胞和小胶质细胞。结论　细胞凋亡是 EAE动物 CNS中浸润细胞的重要清除方式。

关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎中枢神经系统细胞凋亡 TUNEL

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红系细胞中Cre重组酶介导的位点特异性片段交换(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第10期35卷 947-951页

作者：李兴国严皓珩刘德培郝德龙梁植权北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所

Cre介导的片段交换技术利用重组酶Cre的位点特异性重组特性 ,在基因组的特定位点进行靶片段与目的片段的交换。运用互为反向的Lox位点 ,在鼠红白血病MEL细胞中进行靶载体的整合和交换载体的交换 ,探讨在特定的染色质环境下红系特异性顺... 详细信息

Cre介导的片段交换技术利用重组酶Cre的位点特异性重组特性 ,在基因组的特定位点进行靶片段与目的片段的交换。运用互为反向的Lox位点 ,在鼠红白血病MEL细胞中进行靶载体的整合和交换载体的交换 ,探讨在特定的染色质环境下红系特异性顺式作用元件的功能。电穿孔转染MEL细胞后从含有潮霉素 (hygromycin)的选择性半固体培养基中挑取MEL细胞单克隆 ,通过PCR和Southern杂交鉴定整合完整性和拷贝数 ,获得三种整合有靶载体p1L HyTk L1 β EGFP neo的细胞株A ,B和D。交换载体pL1 HS2 1L(含有 732 bp的人β 珠蛋白基因簇 5′DNaseI高敏位点 2核心片段 )和Cre表达载体pBS185共转染细胞株A ,9 (1,3 二羟 2丙氧甲基 )鸟嘌呤 (gancyclovir)负筛选后挑取单细胞克隆A HS。PCR检测显示HS2片段以反方向进行了交换。流式细胞仪分析显示平均的荧光细胞百分比 (2 .4 2 % )低于未交换的细胞株A (35 .94 % )。A HS中EGFP的低表达可能是处于非容许方向的HS2片段出现方向依赖性基因沉默所致。

关键词：染色体整合位点特异性重组 Cre/Lox 珠蛋白基因基因沉默

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Ca^(2+)经钙激活非选择性阳离子通道进入ECV304内皮细胞

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中国药理学通报 2003年第7期19卷 764-767页

作者：于德洁鲍光宏林琳郑永芳中国医学科学院基础医学研究所.协和医科大学基础医学院生理室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所.协和医科大学基础医学院生物物理室北京100005

目的　研究钙离子进入ECV30 4内皮细胞株的途径和血管紧张素Ⅱ (AⅡ )对钙内流的影响。方法　用膜片钳的细胞贴附式和全细胞方式记录ECV30 4内皮细胞的通道活动。结果　 (1 )在记录单通道电流时电极液含 1 2 0mmol·L- 1 CaCl2 ,细... 详细信息

目的　研究钙离子进入ECV30 4内皮细胞株的途径和血管紧张素Ⅱ (AⅡ )对钙内流的影响。方法　用膜片钳的细胞贴附式和全细胞方式记录ECV30 4内皮细胞的通道活动。结果　 (1 )在记录单通道电流时电极液含 1 2 0mmol·L- 1 CaCl2 ,细胞浴液不含K+ 、Na+ 时 ,Ca2 + 经非选择性阳离子通道 (CAN)内流的电导为γ0 =(1 2 90± 2 1 1 ) pS(n =4)。1× 1 0 - 7mol·L- 1 AⅡ可显著增强通道电流幅度和延长通道开放时 ,其电导增大为γ1 =(2 2 1 8± 2 2 9)pS(n =4)。全细胞记录得到的结果与单通道的一致。 (2 )用全细胞方式记录到ECV30 4内皮细胞的电压依赖性钙通道电流 ,记录到该峰值电流为 (2 9 32± 3 56)pA(n =4) ,2 0 μmol·L- 1 nifedepine能抑制这个峰值电流 ,被抑制后的电流峰值为 (6 0 0± 3 94)pA(n =4)。 2 μmol·L- 1 BayK8644能显著激活通道活动。结论　Ca2 + 经CAN进入ECV30 4细胞。

关键词：内皮细胞株ECV304 钙激活非选择性阳离子通道钙通道血管紧张素Ⅱ

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高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞NF-κB的激活和血小板源生长因子B链的表达

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中华病理学杂志 2003年第4期32卷 354-359页

作者：周礼董继红于淼尹洪超佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导... 详细信息

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导通路的影响。方法　胃饲高胆固醇乳剂建立高胆固醇血症大鼠模型 ,免疫组织化学染色法 [链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶 (SP)法 ]明确主动脉内皮细胞NF κB激活后发生核转位的情况 ;应用原位杂交技术观察内皮细胞PDGF BmRNA的表达 ,同时应用免疫组织化学染色法 (SP法 )观察内皮细胞合成PDGF B链的情况。结果　与对照组相比 ,胃饲高胆固醇乳剂 6周后 ,2个月龄大鼠出现高胆固醇血症 ,主动脉内皮细胞NF κB核转位的比例明显增加 ,PDGF BmRNA的表达也增多。 10个月龄对照组Wistar大鼠的主动脉内皮细胞几乎不表达PDGF BmRNA ,摄入高胆固醇乳剂 16周后 ,内皮细胞表达PDGF BmRNA明显增多。较之摄入胆固醇同时期的 2个月龄大鼠 ,NF κB的核转位及内皮细胞PDGF B链的合成均增多(0 4 6 1± 0 0 75比 0 35 0± 0 0 94 ;0 2 30± 0 0 4 0比 0 185± 0 0 37) ,其差异有显著性意义 (P <0 0 5 ;P <0 0 0 1)。结论　高胆固醇血症能激活大鼠主动脉内皮细胞的NF κB 。

关键词：高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞血小板源生长因子B链基因表达细胞核因子KB

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脂筏的结构与功能

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生物化学与生物物理进展 2003年第1期30卷 54-59页

作者：陈岚许彩民袁建刚潘华珍中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

脂筏是膜脂双层内含有特殊脂质及蛋白质的微区 .小窝是脂筏的一种类型 ,由胆固醇、鞘脂及蛋白质组成 ,以小窝蛋白为标记蛋白 .脂筏的组分和结构特点有利于蛋白质之间相互作用和构象转化 ,可以参与信号转导和细胞蛋白质运转 .一些感染性... 详细信息

脂筏是膜脂双层内含有特殊脂质及蛋白质的微区 .小窝是脂筏的一种类型 ,由胆固醇、鞘脂及蛋白质组成 ,以小窝蛋白为标记蛋白 .脂筏的组分和结构特点有利于蛋白质之间相互作用和构象转化 ,可以参与信号转导和细胞蛋白质运转 .一些感染性疾病、心血管疾病、肿瘤、肌营养不良症及朊病毒病等可能与脂筏功能紊乱有着密切的关系 .

关键词：膜结构脂筏结构功能小窝蛋白信号转导糖肌醇磷脂-锚固蛋白膜脂双层

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体外肿瘤细胞对血管内皮细胞影响的观察

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中华病理学杂志 2003年第4期32卷 360-363页

作者：刘玉琴顾蓓王春景张宏高进任民峰中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　观察肿瘤细胞与血管内皮细胞的关系及其在体外直接接触培养时内皮细胞的形态变化。方法　免疫磁珠阳性选择法分离培养大鼠肺血管内皮细胞 ,生长至汇合状态时加入不同的肿瘤细胞 (小鼠树突状细胞肉瘤细胞DCS、人胃癌细胞MGC 80 3... 详细信息

目的　观察肿瘤细胞与血管内皮细胞的关系及其在体外直接接触培养时内皮细胞的形态变化。方法　免疫磁珠阳性选择法分离培养大鼠肺血管内皮细胞 ,生长至汇合状态时加入不同的肿瘤细胞 (小鼠树突状细胞肉瘤细胞DCS、人胃癌细胞MGC 80 3、小鼠肺腺癌细胞LA795 )共培养 ,光镜、扫描电镜、免疫组织化学、transwell法及荧光分子传递等方法观察内皮细胞的形态、功能的变化。结果　培养的内皮细胞部分呈卵石样 ,部分呈长梭形。长至汇合状态的内皮细胞再加入肿瘤细胞后 ,内皮细胞形态发生明显变化 ,汇合细胞中间出现许多圆形管腔样结构 ;肿瘤细胞往往分布在新形成的腔隙内 ;肿瘤细胞条件培养基可支持内皮细胞的生长 ,促进内皮细胞的运动 ;lucifferyellow分子可直接从肿瘤细胞传递到内皮细胞。结论　肿瘤细胞与内皮细胞可进行通讯。

关键词：体外肿瘤细胞血管内皮细胞功能表型细胞结构细胞运动

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氧化低密度脂蛋白诱导人载脂蛋白AI转基因小鼠血管平滑肌细胞差异表达基因的研究

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中华医学杂志 2003年第6期83卷 494-497页

作者：于淼谷素敏周礼赵高峰余立清张华佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　为研究人载脂蛋白AI(h ApoA I)抗氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所导致的平滑肌细胞增生及脂质浸润的分子机制 ,克隆并分析可明显抑制动脉内膜脂质沉积和粥样斑块形成的h apoA I转基因小鼠血管平滑肌细胞 (vSMC)抗ox LDL所致AS过程中... 详细信息

目的　为研究人载脂蛋白AI(h ApoA I)抗氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所导致的平滑肌细胞增生及脂质浸润的分子机制 ,克隆并分析可明显抑制动脉内膜脂质沉积和粥样斑块形成的h apoA I转基因小鼠血管平滑肌细胞 (vSMC)抗ox LDL所致AS过程中表达的相关基因。方法　以ox LDL为刺激物作用于培养的转基因小鼠vSMC ,应用抑制性差减杂交方法构建减除文库 ,筛选、克隆差异表达基因 ,并进行序列测定及同源性比较。同时用SMART技术构建了ox LDL诱导的转基因小鼠vSMC全长噬菌体文库。结果　从 5 7个差异克隆中随机选取 15个克隆测序并分析 ,得到 3个表达序列标签 (EST) ,均为与免疫系统有关的功能基因片段 ,即 :补体C1 抑制物 (C1 INH)、植物凝集素及T细胞受体 β(TCRβ)。有明显抗内膜脂质沉积能力的h apoA I转基因小鼠的vSMC在被ox LDL诱导后 ,筛选出的 3个EST均与免疫系统有关 ,其中C1 INH及植物凝集素与补体系统密切相关。结论　ox LDL致AS及h ApoA I抗AS可能有免疫机制参与 ,且与补体活化及其调控密切相关。其中C1 INH作为抗AS的潜在靶点值得关注。

关键词：氧化低密度脂蛋白诱导载脂蛋白AI 转基因小鼠血管平滑肌细胞差异表达基因动脉粥样硬化

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D构象丝氨酸在中枢神经系统中的功能研究进展

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生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 852-854页

作者：阳洪波袁建刚彭小忠中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细... 详细信息

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细胞而非神经元来源的“异常”构象氨基酸作为一种新型神经递质 ,不仅更新了传统“神经递质”的定义。

关键词： D构象丝氨酸丝氨酸消旋酶 NMDA受体中枢神经系统功能

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病毒载体与造血干细胞基因治疗

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Acta Genetica Sinica 2003年第4期30卷 383-388页

作者：董文吉祖振响刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干... 详细信息

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干细胞转导条件 ,其介导的腺苷脱氨酶缺陷引起的严重联合免疫缺陷和X染色体连锁的严重联合免疫缺陷的基因治疗已经获得初步成功 ;其他整合型病毒载体如慢病毒和腺相关病毒载体 ,也在临床前造血干细胞基因治疗研究中得到广泛应用。从病毒载体。

关键词：造血干细胞反转录病毒载体慢病毒载体腺相关病毒载体基因治疗

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