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西安交通大学学报（医学版） 2009年第3期30卷 295-300页

作者：马杰史明霞李炳宗李静房佰俊孙慧赵春华郑州大学第一附属医院血液科河南郑州450052 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院组织工程研究中心北京100005 河南省肿瘤医院血液科河南郑州450008

目的观察放射对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMMSCs)体外成骨潜能及体内骨髓造血干细胞(hematologic stemcells,HSCs)龛位的影响。方法分离、培养正常及接受4 Gy放射后不同时间点小鼠BMMSCs,用碱性磷酸酶(a... 详细信息

目的观察放射对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMMSCs)体外成骨潜能及体内骨髓造血干细胞(hematologic stemcells,HSCs)龛位的影响。方法分离、培养正常及接受4 Gy放射后不同时间点小鼠BMMSCs,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法和实时定量RT-PCR检测成骨分化相关基因,鉴定BMMSCs体外成骨分化潜能的改变,并通过骨组织形态学和免疫组织化学的方法检测放射后小鼠体内成骨细胞及纺锤形的、表达神经钙黏附分子的成骨细胞(spindle-shaped N-cadherin-expressing osteoblasts,SNOs)数量的变化。结果全身照射(total body irradiation,TBI)后早期小鼠BMMSCs的成骨潜能增强,但随后迅速降低;TBI后28 d小鼠骨髓中成骨细胞和SNOs的数量均显著减少。结论4 Gy放射损伤后远期小鼠BMMSCs的成骨潜能显著降低,体内HSCs龛位也明显缩小。

关键词：放射损伤骨髓间充质干细胞成骨潜能骨髓造血干细胞

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载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白对内毒素血症小鼠的作用

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中华医学杂志 2009年第44期89卷 3147-3150页

作者：苗志敏卢恕来李长贵赵世华阎胜利王颜刚韩琳刘世国陈保生王云龙青岛大学医学院附属医院痛风病实验室 266003 青岛市市立医院口腔科中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨载脂蛋白A．I及其半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白（rHDL）的抗炎作用。方法选择了前期构建的4种载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体[A—I（N74C）、A—I（G129C）、A—I（K195C）、A．I（S228C）]及野生型A—I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱... 详细信息

目的探讨载脂蛋白A．I及其半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白（rHDL）的抗炎作用。方法选择了前期构建的4种载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体[A—I（N74C）、A—I（G129C）、A—I（K195C）、A．I（S228C）]及野生型A—I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）构建rHDL（rHDL74、rHDI．129、rHDLl95、rHDL228、rHDLwt）干预组，用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法验证5种rHDL干预后对肿瘤坏死因子（TNF）-α，自细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）的影响。并分别设脂多糖（LPS）组，生理盐水组对照。结果LPS注射24h后，rHDL74组比rHDLwt组血清中TNF—α和IL-1β水平更低[TNF—α：（24±3）pg／ml比（135±12）pg／ml、IL-1[3（45±5）pg／ml比（82±8）pg／ml，P〈0．05]的水平，与LPS组比较只有rHDL74组能降低IL-6水平[（1936±58）pg／ml比（2022±73）pg／ml，P〈0．05]。同时组织切片HE染色显示，rHDL74组能明显抑制炎症细胞的浸润，肺泡壁的增厚。结论rHDL74拥有更强的抗炎能力，它可能会成为临床上极具潜力的抗炎药物之一。

关键词：脂蛋白类 HDL 载脂蛋白A—I 肿瘤坏死因子α 白细胞介素类

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人骨髓间充质干细胞移植对食蟹猴脑出血模型损伤的修复作用

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中国比较医学杂志 2009年第10期19卷 1-4,I0002,I0003页

作者：刘嘉琳李加美朱华代小伟刘颖李秦肖冲陈云新卢珊韩钦冯铭魏俊杰黄澜马春梅刘亚莉赵春华王任直秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心北京100021 中国医学科学院实验动物研究所Motac合作实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所北京100005 中国医学科学院北京协和医院北京100730

目的观察人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)移植4周和8周后,对食蟹猴脑出血模型脑组织损伤的修复作用。方法在脑定位仪定位下,通过自体血注入法制成食蟹猴脑出血模型,并将其随机分为高剂量治疗组、低剂量治疗组... 详细信息

目的观察人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)移植4周和8周后,对食蟹猴脑出血模型脑组织损伤的修复作用。方法在脑定位仪定位下,通过自体血注入法制成食蟹猴脑出血模型,并将其随机分为高剂量治疗组、低剂量治疗组和模型组,分别在脑出血部位附近注入高、低密度的hMSCs和生理盐水。应用整体病理切片扫描、HE染色及免疫组织化学的方法观察hMSCs移植治疗食蟹猴脑出血4周和8周后脑损伤部位的病理变化。结果脑出血模型组可见脑出血损伤部位脑组织大面积变性坏死,多量吞噬含铁血黄素的泡沫细胞增生,周围少许肉芽组织增生伴局部纤维组织形成。hMSCs治疗组,整体切片扫描结果提示,与模型组相比,hMSCs低剂量及高剂量治疗组均可见脑组织变性坏死范围减小,且低剂量治疗组略好于高剂量治疗组;HE染色可见大脑注射部位局部脑组织变性坏死、吞噬含铁血黄素的泡沫细胞增生,周围肉芽组织增生伴局部纤维组织形成。免疫组化发现治疗组出血区内可见神经巢蛋白(Nestin)阳性细胞内散在分布,而在模型组中呈阴性表达。结论hMSCs可促进食蟹猴脑出血脑组织损伤的修复,且治疗效果可能与治疗剂量有一定相关性。

关键词：人骨髓间充质干细胞移植食蟹猴脑出血

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Anti-TCRγδ抗体和磷酸抗原体外扩增人外周血γδT细胞的比较

Anti-TCRγδ抗体和磷酸抗原体外扩增人外周血γδT细胞的比较

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全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议

作者：周建华王丽芳康宁崔莲仙何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系

研究背景γδT细胞是具有以MHC非限制性方式直接识别多种肿瘤相关抗原、广谱抗肿瘤活性、兼具NK、CTL和Th细胞的功能特点的免疫细胞,在肿瘤免疫治疗中具有很大优势。国外已有用γδT细胞进行过继免疫治疗的研究,主要采用磷酸抗原对人外... 详细信息

研究背景γδT细胞是具有以MHC非限制性方式直接识别多种肿瘤相关抗原、广谱抗肿瘤活性、兼具NK、CTL和Th细胞的功能特点的免疫细胞,在肿瘤免疫治疗中具有很大优势。国外已有用γδT细胞进行过继免疫治疗的研究,主要采用磷酸抗原对人外周血γδT细胞进行扩增。本课题组前期的研究表明,人外周血γδT细胞在固相化anti-TCRγδ抗体刺激下也可以大量扩增。但二者扩增效果的异同尚不明确。目的比较anti-TCRγδ抗体和磷酸抗原对人外周血γδT细胞扩增效果的异同,以选择更合理的γδT细胞制剂制备方法。方法分离人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,分别以1μg/mlanti-TCRγδ抗体和10μM磷酸抗原（帕米磷酸二钠）刺激γδT细胞的体外扩增,并于培养1w、2w、3w和4w收集细胞。采用台盼兰染色计数法计算细胞数量和存活率;采用免疫荧光染色法考察γδT细胞的纯度和表型;采用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）法检测γδT细胞对人淋巴瘤细胞系（Daudi）的杀伤作用。结果***-TCRγδ抗体的刺激γδT细胞的扩增效率明显高于磷酸抗原,且随培养时间增加,优势更加明显。2.两种方法扩增的细胞存活率均>95%。3.1w时,抗体扩增的细胞纯度低于磷酸抗原;但从2w起前者扩增的细胞纯度逐渐超过后者。4.磷酸抗原扩增的γδT细胞以Vδ2亚型为主,Vδ1亚型<5%;抗体扩增者包括Vδ1和Vδ2两种亚型,且在培养过程中始终保持外周血中二者的原始构成比。5.两种方法扩增的细胞,其CD27-CD45RA-细胞比例均随培养时间的增加而减少,而CD27CD45RA细胞比例均随培养时间的增加而增多;NKG2D比例亦均有增加趋势。6.磷酸抗原扩增的细胞中颗粒酶A、颗粒酶B和穿孔素的表达量略高于抗体扩增者;二者的TNF-α和IFN-γ的分泌量相近。7.两种方法扩增的细胞对Daudi的杀伤作用相近。结论anti-TCRγδ抗体和磷酸抗原体外扩增的γδT细胞在分泌生物活性分子和杀伤肿瘤细胞方面的能力相近。但前者具有扩增效率高、所获细胞纯度高的优势,且扩增了在体内具有独特分布特性和肿瘤杀伤能力的Vδ1细胞亚型。由此可见,anti-TCRγδ抗体体外扩增法在大量制备临床过继免疫治疗用γδT细胞制剂方面具有更大的优势。

关键词： γδT细胞 anti-TCRγδ抗体磷酸抗原过继免疫治疗

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SLE患者外周血Vγ9 Vδ2 T细胞受体CDR3区特征的研究

SLE患者外周血Vγ9 Vδ2 T细胞受体CDR3区特征的研究

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全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议

作者：王丽芳李小燕康宁崔莲仙巴德年何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系

目的:γδT细胞作为一类独特的T细胞亚群,可以在无抗原呈递细胞参与的情况下识别保守的内源性抗原和压力诱导的抗原,提示γδT细胞可能参与自身免疫性疾病的发生及疾病的进展。本研究拟通过比较系统性红斑狼疮(systemic lupus erythemat... 详细信息

目的:γδT细胞作为一类独特的T细胞亚群,可以在无抗原呈递细胞参与的情况下识别保守的内源性抗原和压力诱导的抗原,提示γδT细胞可能参与自身免疫性疾病的发生及疾病的进展。本研究拟通过比较系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)

关键词： TCRγδ CDR3 SLE

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对系统性红斑狼疮患者外周血中γδT细胞的初步研究

对系统性红斑狼疮患者外周血中γδT细胞的初步研究

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全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议

作者：李小燕王丽芳康宁崔莲仙何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系

目的:探讨系统性红斑狼疮(Sys temic lupus erythematosus,SLE)患者外周血中.T细胞的数量、亚群构成以及功能表型与健康人的异同,并考察其与疾病发生、发展及转归的关系,为.T细胞与自身免疫性疾病的相关性研究奠定基础。

关键词： γδT细胞 SLE 细胞亚群

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绝经后妇女长期低剂量激素替代疗法的研究——Ⅳ.脑代谢产物的磁共振波谱分析

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生殖医学杂志 2009年第4期18卷 333-337页

作者：左萍萍胡凌岳赟刘雁勇董毅龙杨楠葛秦生中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院药理室北京100005 北京协和医学院北京协和医院北京100730

目的应用质子磁共振波谱(MRS)观察长期低剂量激素替代疗法(HRT)对绝经后妇女脑组织代谢产物的影响,并与载脂蛋白E不同基因型(ApoEε3和ε4)携带者进行比较分析。方法筛选北京协和医院151例绝经后健康女职工纳入了本研究,其中68例采用了... 详细信息

目的应用质子磁共振波谱(MRS)观察长期低剂量激素替代疗法(HRT)对绝经后妇女脑组织代谢产物的影响,并与载脂蛋白E不同基因型(ApoEε3和ε4)携带者进行比较分析。方法筛选北京协和医院151例绝经后健康女职工纳入了本研究,其中68例采用了小剂量HRT(4～33年,平均11.7年),为HRT组。对照组83例为未经HRT的本院志愿者。所有研究对象采用聚合酶链反应限制性内切酶多型性(PCR-RFLP)方法测定ApoE基因分型,并采用3.0T VH3扫描仪行脑部MRS分析,以谱线下积分面积计算脑代谢产物N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、胆碱化合物(Cho)、肌醇(mI)和肌酸(Cr)。结果 NAA主要存在于神经元及其轴索。在ApoEε3基因者中,HRT组和对照组灰质、白质和海马的代谢产物无明显差异,但在ApoEε4基因携带者中,NAA/Cr比值HRT组为(1.54±0.08),对照组为(1.45±0.13),呈显著性差异(P<0.05)。结论 HRT对与认知相关的脑海马神经元有保护作用,特别对携带阿尔兹海默病(AD)的易感基因携带者具有重要意义。

关键词：绝经后妇女激素替代疗法 ApoE基因型海马神经元磁共振波谱

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主成分分析在基因芯片聚类分析中的适用性评估

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中国医药生物技术 2009年第3期4卷 207-211页

作者：马宁张正国中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生物医学工程系北京100005

目的探讨在基因芯片聚类分析前对数据进行主成分分析是否有助于提高聚类的准确性。方法选取3组包含大量被生物学家人为分类基因的芯片数据集Budding yeast、Saccharomyces cerevisiae、Central nervous system作为实验数据，分别计算对... 详细信息

目的探讨在基因芯片聚类分析前对数据进行主成分分析是否有助于提高聚类的准确性。方法选取3组包含大量被生物学家人为分类基因的芯片数据集Budding yeast、Saccharomyces cerevisiae、Central nervous system作为实验数据，分别计算对原数据直接聚类和提取主成分后聚类的结果，并以信息变化量为指标衡量这些结果与人为分类的匹配度。采用启发式算法搜寻最优主成分组合，比较欧几里德距离和相似系数2种距离度量方法以及层次聚类和K-重心聚类2种聚类算法的结果。结果在3组数据集中，层次聚类算法相比K-重心聚类算法效果均略好，且以主成分代替原数据进行聚类分析都没有显著提高聚类的准确性，有些情况下甚至不如后者。仅在Saccharomyces cerevisiae数据集中，当主成分个数足以覆盖原数据中90％-95％方差时，特定的主成分组合才展现出一定优势，但这种组合与主成分大小顺序并无规律可循。结论在基因芯片数据模型不清时，应避免盲目地使用数据中提取的主成分作为聚类分析的输入。

关键词：主成分分析寡核苷酸序列分析聚类分析计算生物学

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子宫颈癌及其癌前病变的筛查

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中华全科医师杂志 2009年第8期8卷 518-521页

作者：胡尚英赵方辉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病与卫生统计学系 100005 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所流行病室

宫颈癌是全球女性第二大恶性肿瘤。据估计，2002年全球有近50万新发病例和27万死亡病例；我国每年约有13．8万新发病例，5万死亡病例。我国第3次死因回顾抽样调查显示，全国宫颈癌的死亡率由20世纪70年代的11．35／10万下降至90年代的3... 详细信息

宫颈癌是全球女性第二大恶性肿瘤。据估计，2002年全球有近50万新发病例和27万死亡病例；我国每年约有13．8万新发病例，5万死亡病例。我国第3次死因回顾抽样调查显示，全国宫颈癌的死亡率由20世纪70年代的11．35／10万下降至90年代的3．89／10万，再到本世纪初的2．86／10万，然而，中西部地区宫颈癌的死亡率仍居高不下。现将目前宫颈癌及癌前病变的筛查研究进展做一综述，以期更多的医生了解宫颈癌筛查相关知识，提高宫颈癌筛查覆盖面和防治水平。

关键词：宫颈癌筛查子宫颈癌癌前病变死亡病例新发病例中西部地区筛查覆盖面恶性肿瘤

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应用微阵列芯片分析人髓母细胞瘤及瘤旁组织miRNA表达谱差异

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首都医科大学学报 2009年第3期30卷 355-359页

作者：刘巍晁腾飞龚燕华袁建刚甲戈马振宇赵继宗首都医科大学附属北京天坛医院神经外科中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学与国家重点实验室

目的检测人髓母细胞瘤(medulloblastomas,MB)与非肿瘤脑组织中微小RNA(miRNA)的表达差异情况,探讨异常表达miRNA参与MB发生的可能分子机制。方法选取经手术切除的MB组织标本及瘤旁正常小脑组织,分别提取总RNA和小分子RNA,在miRNA微阵列... 详细信息

目的检测人髓母细胞瘤(medulloblastomas,MB)与非肿瘤脑组织中微小RNA(miRNA)的表达差异情况,探讨异常表达miRNA参与MB发生的可能分子机制。方法选取经手术切除的MB组织标本及瘤旁正常小脑组织,分别提取总RNA和小分子RNA,在miRNA微阵列芯片中杂交检测,通过芯片扫描和数据分析,并通过实时荧光定量RT-PCR验证,获得该病异常miRNAs表达谱。结果筛选出9个MB的相关miRNAs,其中表达上调4个,表达下调5个。其中miR-17、miR-100、miR-106b和miR-218的差异表达情况得到定量RT-PCR的证实。结论miRNA微阵列分析技术是一种快速、高效的研究生物信息的分子生物学技术;筛选出的差异表达miRNAs可能参与MB发病,为此病诊治提供了新的思路,值得进一步研究。

关键词：髓母细胞瘤微小RNA 微阵列靶基因肿瘤发生

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