检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 293-301页

作者：周国岭宋崴付湘辉辛立唐晓彬冯冬晓刘光刘德培中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的用人珠蛋白转基因鼠模型建立染色质构象捕获的技术体系,探讨人α类珠蛋白基因簇的染色质构象变化与基因表达调控的关系。方法使人α类珠蛋白转基因纯合子公鼠与KM母鼠交配,从怀孕14.5d的母鼠体内取出珠蛋白基因表达组织胎肝和非表... 详细信息

目的用人珠蛋白转基因鼠模型建立染色质构象捕获的技术体系,探讨人α类珠蛋白基因簇的染色质构象变化与基因表达调控的关系。方法使人α类珠蛋白转基因纯合子公鼠与KM母鼠交配,从怀孕14.5d的母鼠体内取出珠蛋白基因表达组织胎肝和非表达组织胎脑细胞,用甲醛交联固定细胞核内的染色质构象,限制性内切酶NcoⅠ消化后用T4DNA连接酶连接,解交联后提取并纯化连接的基因组DNA,在连接位点的两侧设计引物,用半定量PCR分析胎肝和胎脑中人α类珠蛋白基因簇染色质构象模式。结果以含HS40的限制性酶切片段作固定片段时,在胎脑中其他限制性酶切片段与其交联效率随线型距离增加而降低;而在胎肝中,表达的珠蛋白基因α2、α1的酶切片段与其交联效率明显高于胎脑,含有已关闭珠蛋白基因ζ的酶切片段与其交联效率与胎脑相当。以含α2的限制性酶切片段作固定片段时,在胎脑中其他限制性酶切片段与其交联效率随线型距离增加而降低;而在胎肝中,上游调控元件HS40和33与其交联效率明显高于胎脑;HS10和8与其交联效率略低于胎脑。结论在表达组织中,人α类珠蛋白基因簇上游远端调控元件通过形成染色质环与下游表达基因靠近,从而调控α类珠蛋白基因的表达;而在非表达组织中,无此染色质环形成。

关键词：珠蛋白基因簇转基因鼠染色质构象

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ERBIN蛋白PDZ结构域结合蛋白的筛选和鉴定

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 307-311,I0001-I0002页

作者：宋春娇郑德先刘彦信中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的筛选和鉴定ERBIN蛋白的PDZ结构域结合蛋白。方法以ERBIN蛋白的PDZ结构域为诱饵,采用酵母双杂交系统从人淋巴细胞白血病细胞系的MATCHMAKER cDNA文库中筛选ERBIN PDZ结合蛋白,使用β-半乳糖苷酶(LacZ)活性的定性分析和免疫共沉淀技... 详细信息

目的筛选和鉴定ERBIN蛋白的PDZ结构域结合蛋白。方法以ERBIN蛋白的PDZ结构域为诱饵,采用酵母双杂交系统从人淋巴细胞白血病细胞系的MATCHMAKER cDNA文库中筛选ERBIN PDZ结合蛋白,使用β-半乳糖苷酶(LacZ)活性的定性分析和免疫共沉淀技术鉴定所获结合蛋白识别和结合ERBIN PDZ结构域的结合特性。结果TAX1蛋白能选择性与ERBIN蛋白的PDZ结构域发生特异性结合。结论TAX1蛋白是ERBIN结合蛋白家族中的一个新成员。

关键词： ERBIN TAX1 酵母双杂交免疫共沉淀

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去乙酰化酶SIRT1的研究进展

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 441-447页

作者：陈厚早张祝琴韦玉生刘德培中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

去乙酰化酶Sir2基因家族对细胞的生存、凋亡、衰老等生理活动起着十分重要的调节作用,可能是所有生物共同的寿命控制基因之一。去乙酰化酶(SIRT1)是SIR2的同源物,以许多非组蛋白和组蛋白为底物,与代谢综合征、基因稳定性、肿瘤,神经退... 详细信息

去乙酰化酶Sir2基因家族对细胞的生存、凋亡、衰老等生理活动起着十分重要的调节作用,可能是所有生物共同的寿命控制基因之一。去乙酰化酶(SIRT1)是SIR2的同源物,以许多非组蛋白和组蛋白为底物,与代谢综合征、基因稳定性、肿瘤,神经退行性疾病的发生相关。能量限制可通过增加SIRT1活性来延长啮鼠动物的寿命。因此,SIRT1可作为治疗不同疾病的靶点逐渐被人们所重视。

关键词：去乙酰化酶能量限制衰老

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载脂蛋白的结构和功能与病毒病的预防和治疗

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 448-451页

作者：陈保生中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

载脂蛋白(apo)是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alph... 详细信息

载脂蛋白(apo)是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alpha螺旋结构是其结合及转运脂质的结构基础。在HIV外壳结构中的一种糖蛋白(gp)也具有这种alpha螺旋结构。近年研究表明,载脂蛋白和由载脂蛋白组成的脂质体还具有抗肝炎病毒、抗HIV病毒、抗单纯疱疹和中和细菌内毒素的功能。以脂蛋白和载脂蛋白为主要成分构成的脂质体已成为运载抗病毒和抗肿瘤药物受体的靶向性载体。

关键词：载脂蛋白A1 双性alpha螺旋冠状病毒抗病毒

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活性氧激活线粒体凋亡通路是亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的重要机制

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 324-328页

作者：卫玮韩兵社关丽英黄方冯磊杨洋许彩民中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,活性氧引起的线粒体膜电位丧失及凋亡作用的相关机制。方法用活性氧荧光探针DCFH-DA探测经亚硒酸钠诱导的NB4细胞内活性氧的含量。流式细胞术检测细胞凋亡率及线粒体膜电位变化。Western blot检... 详细信息

目的探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,活性氧引起的线粒体膜电位丧失及凋亡作用的相关机制。方法用活性氧荧光探针DCFH-DA探测经亚硒酸钠诱导的NB4细胞内活性氧的含量。流式细胞术检测细胞凋亡率及线粒体膜电位变化。Western blot检测胞浆中细胞色素C含量的变化及细胞总蛋白中Bcl-xl、Bax和Bid的含量变化及切割行为。同时应用活性氧清除剂MnTmPy及活性氧激活剂BSO预处理细胞,观察Bid及凋亡的变化。结果活性氧清除剂MnTmPy可有效抑制亚硒酸钠诱导的NB4细胞凋亡、线粒体膜电位丧失及Bid的切割;而BSO可促进线粒体膜电位丧失。结论亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的可能机制是通过刺激细胞产生活性氧,一方面下调抗凋亡蛋白Bcl-xl,另一方面激活线粒体打孔蛋白Bax和Bid,损伤线粒体使膜电位降低,促使线粒体释放细胞色素C。

关键词：活性氧细胞凋亡线粒体膜电位

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HZF1在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备

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中国医学科学院学报 2007年第6期29卷 772-776页

作者：彭瀚张昕杜占文张俊武中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的在大肠杆菌中表达HZF1融合蛋白,制备抗HZF1抗体。方法构建包含编码HZF1非锌指区DNA的重组表达质粒pET30a-HZF1,转化大肠杆菌并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达相应的融合蛋白,采用镍柱纯化。以纯化蛋白作为免疫抗原,对新西兰大... 详细信息

目的在大肠杆菌中表达HZF1融合蛋白,制备抗HZF1抗体。方法构建包含编码HZF1非锌指区DNA的重组表达质粒pET30a-HZF1,转化大肠杆菌并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达相应的融合蛋白,采用镍柱纯化。以纯化蛋白作为免疫抗原,对新西兰大白兔实施多次免疫(间隔时间分别为3、2和2周)。用ELISA和Westernblot检测抗体效价和特异性。结果获得兔抗HZF1抗体,经过ELISA检测,效价在1:100000以上。Westernblot显示兔抗HZF1抗体能够特异性检测氯高铁血红素诱导的K562细胞中的HZF1蛋白。结论得到高特异性的兔抗HZF1抗体,为HZF1的功能研究以及组织和细胞中HZF1的检测奠定了一定基础。

关键词： HZF1基因原核表达亲和纯化抗体

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microRNAs在血液细胞分化及相关肿瘤中的作用

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 425-429页

作者：杨桂花王芳张俊武中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

microRNAs（miRNAs）是一类普遍存在的长度约为21-25个核苷酸的小分子RNA，通过与靶mRNA3^＋端非编码区互补结合在转录后水平抑制靶基因的表达。血细胞形成是一个包括多个基因有序的开启和关闭，复杂而又精密的调控过程，调控异常会导... 详细信息

microRNAs（miRNAs）是一类普遍存在的长度约为21-25个核苷酸的小分子RNA，通过与靶mRNA3^＋端非编码区互补结合在转录后水平抑制靶基因的表达。血细胞形成是一个包括多个基因有序的开启和关闭，复杂而又精密的调控过程，调控异常会导致各种血液病的发生。miRNA参与了造血调控并与某些血液系统肿瘤的发生相关。

关键词： miRNAs 血细胞分化血液系统肿瘤

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神经系统特异性转录因子Nhlh2的研究进展

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 436-440页

作者：胡娟彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

Nhlh2(nescient helix-loop-helix2)基因,又名HEN2(HUA ENHANCER2)和NSCL2(neuronal stem cell leukemia2)(或NSCL-2),其编码蛋白是碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子家族的新成员,在神经系统中尤其是神经内分泌组织中特异性表达。目前已在鸡、小鼠、大鼠、牛和人类等多种真核生物中发现其同源基因,该基因的功能研究主要集中在神经内分泌系统、视网膜发育和肿瘤等相关领域,对其分子调控机制的探询已经取得一些初步成果。本文将从Nhlh2的基因和编码蛋白的特性、表达时空、功能研究以及调控与被调控机制等方面对其研究进展进行综述,并对今后的研究提出了展望和思考。

关键词：神经系统特异性转录因子 Nhlh2

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人类肿瘤组织中非编码RNA-NC28和NC119的鉴定及表达

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中国医学科学院学报 2007年第5期29卷 618-621页

作者：孙贞媛袁艳华刘长宁赵屹黄洁夫桑新亭毛一雷卢欣王歈常永生赵海涛中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肝脏外科北京100730 北京大学临床肿瘤学院生物诊疗中心北京100036 中国科学院计算技术研究所生物信息学研究组北京100080 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的寻找并验证与肿瘤相关的非编码RNA。方法采用RT-PCR和Northern blot分析非编码RNA在肿瘤组织及细胞系中的表达情况。结果RT-PCR在实体肿瘤和细胞系中鉴定了2个非编码RNA-NC28和NC119的表达,Northernblot检测发现NC28转录子长度大约... 详细信息

目的寻找并验证与肿瘤相关的非编码RNA。方法采用RT-PCR和Northern blot分析非编码RNA在肿瘤组织及细胞系中的表达情况。结果RT-PCR在实体肿瘤和细胞系中鉴定了2个非编码RNA-NC28和NC119的表达,Northernblot检测发现NC28转录子长度大约为1800个核苷酸,NC119转录子长度大约为1200个核苷酸。结论这两种非编码RNA具有一定的肿瘤共享性,非编码RNA在肿瘤发生发展中可能发挥一定作用。

关键词：肿瘤非编码RNA 肿瘤特异性差异表达表达序列标签

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生物发光显像技术对血管生成抑制因子vasostatin在肿瘤细胞PC3中活性监测

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 312-317,I0003页

作者：胡洁淼邱飞婵阴彬龚燕华袁建刚强伯勤王世真彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室国家人类基因组北方基因中心北京100005

目的应用非侵入性活体显像技术研究血管生成抑制因子vasostatin。方法采用融合表达方案,将治疗基因vasostatin和报告基因fluc偶联构建融合表达载体,使表达的融合蛋白中两个蛋白互相不干扰,并有天然的特性。结果将稳定表达FLuc阳性对照和... 详细信息

目的应用非侵入性活体显像技术研究血管生成抑制因子vasostatin。方法采用融合表达方案,将治疗基因vasostatin和报告基因fluc偶联构建融合表达载体,使表达的融合蛋白中两个蛋白互相不干扰,并有天然的特性。结果将稳定表达FLuc阳性对照和V10FL融合蛋白的PC3细胞进行体外生物发光显像。用稳定表达Fluc的PC3细胞构建荷瘤模型,用生物发光显像能检测到肿瘤的发生。结论可应用非侵入性活体显像技术进行体内和体外基因表达的检测与监控。

关键词：生物发光显像 vasostatin 血管生成

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