检索结果-内蒙古大学图书馆

成骨诱导或干扰素γ预处理对胎儿骨髓源Flk-1^+间充质干细胞免疫活性的调节

中国组织工程研究与临床康复 2008年第43期12卷 8529-8534页

作者：张斌刘瑞朱希山豆晓伟刘星霞陈媛赵春华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程研究中心北京市100005

背景:骨髓间充质干细胞在修复异基因组织最终分化为特定细胞后,理论上会因MHC及共刺激分子上调而引起组织排斥,但实际上并没有发生排斥反应。推测骨髓间充质干细胞在异基因组织分化诱导及炎性因子微环境作用下,有可能分化成一种仍具有... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞在修复异基因组织最终分化为特定细胞后,理论上会因MHC及共刺激分子上调而引起组织排斥,但实际上并没有发生排斥反应。推测骨髓间充质干细胞在异基因组织分化诱导及炎性因子微环境作用下,有可能分化成一种仍具有免疫调节活性的终末细胞,不被机体的免疫识别系统清除掉。目的:在体外运用成骨诱导及干扰素γ预处理来模拟体内组织分化及炎性因子微环境,观察在此作用下胎儿骨髓源Flk-1+间充质干细胞是否能够保持其在自然条件下所呈现的免疫学活性。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-09/2008-05在北京协和医学院基础学院完成。材料:2例骨髓样品取自流产胎儿,由北京回龙冠妇产医院提供。外周血样品取自15~35岁健康志愿者,由北京三○七医院提供。地塞米松等诱导因子和干扰素γ为美国Sigma公司产品。方法:Ficoll法分离胎儿骨髓单个核细胞,取白环层以上细胞,以1×106/cm2密度接种,贴壁法纯化,采用阴性分选法去除CD45+、GlyA+和CD34+细胞,分离扩增得到Flk-1+骨髓间充质干细胞。以淋巴细胞分离液梯度离心分离外周血单个核细胞,用于混合淋巴细胞培养实验及有丝分裂原刺激的淋巴细胞增殖实验。主要观察指标:流式细胞仪鉴定细胞表型,用成骨、成脂、成软骨和成内皮诱导液检测其分化潜能,成骨诱导或干扰素γ预处理后细胞表面抗原表达、对淋巴细胞增殖及活化抗原CD69、CD25表达的影响,对白细胞介素10和转化生长因子β分泌水平的影响。结果:光镜下骨髓来源的间充质干细胞为成纤维细胞样贴壁生长,均高表达Flk-1,同时高表达黏附分子CD29、CD44、CD105,造血细胞标志CD34、CD45呈阴性;可向成骨、成脂肪、成软骨和成内皮方向分化;低表达MHC-Ⅰ类分子,不表达MHC-Ⅱ类分子,成骨诱导能上调MHC-Ⅰ表达,干扰素γ预处理可上调MHC-Ⅱ表达。骨髓源Flk-1+间充质干细胞经成骨诱导7d或干扰素γ预处理48h后,仍呈低免疫原性,不激发异基因淋巴细胞增殖,抑制植物血凝素刺激的淋巴细胞增殖效果明显增强(t=2.57,P<0.05),可进一步抑制CD69和CD25的表达,ELISA检测显示其培养上清分泌白细胞介素10水平增强(t=2.66,P<0.05),但分泌转化生长因子β水平经成骨诱导后无明显变化,干扰素γ预处理后则明显升高。结论:经成骨诱导或干扰素γ预处理后,骨髓源Flk-1+间充质干细胞仍能保持低免疫原性,且免疫调节活性进一步提高。

关键词：骨髓间充质干细胞成骨干扰素γ 免疫调节活性

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糖原累积病Ⅱ型（Pompe病）17例临床特点和转归

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中华儿科杂志 2012年第6期50卷 415-419页

作者：张寒冰张为民仇佳晶孟岩邱正庆中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科 100730 中心实验室中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学遗传学系

目的总结分析国内糖原累积病Ⅱ型（Pompe病）患者的临床表现及疾病转归的特点。方法回顾性分析17例经酶学确诊的糖原累积病Ⅱ型患者临床资料，通过设计临床调查表进行电话随访，总结归纳临床和转归特点。结果17例糖原累积病Ⅱ型患者中，... 详细信息

目的总结分析国内糖原累积病Ⅱ型（Pompe病）患者的临床表现及疾病转归的特点。方法回顾性分析17例经酶学确诊的糖原累积病Ⅱ型患者临床资料，通过设计临床调查表进行电话随访，总结归纳临床和转归特点。结果17例糖原累积病Ⅱ型患者中，4例为婴儿型，生后2-6个月发病，均有肌酶升高和心脏受累，伴或不伴呼吸肌受累。4例均未进行治疗。其余13例为晚发型，发病年龄2-22岁，均有肌酶升高。其中11例以肌肉无力起病，2例表现为呼吸肌受累，2例表现为脊柱侧弯，1例表现为肌酶高伴肝功能异常。除3例曾接受呼吸机辅助治疗外，其余10例未接受相关治疗。全部患者仪-1，4-葡萄糖苷酶活性数值均低于正常人10％以下；14例行病理肌活检检测，9例提示糖原累积病Ⅱ型；10例行基因检测，6例检测到2个致病突变。成功电话随访12例，随访率70％。婴儿型4例中，3例在3岁之内死于呼吸衰竭，存活的1例目前1岁7个月。成功随访的晚发型8例中，4例于发病3-5年死亡，均死于呼吸衰竭，存活的4例中3例自觉肌肉无力症状加重，1例自住院时使用呼吸机治疗，至今病情无明显改变。12例随访者中7例死亡，总死亡率58％。结论糖原累积病Ⅱ型在临床表现上存在差异。婴儿型表现为全身性肌肉无力，心脏受累明显，病情凶险，死亡率高。晚发型以慢性进行性肌肉无力，呼吸功能不全为主。经α-1，4-葡萄糖苷酶活性测定、肌肉活检以及基因检测诊断。患者的预后与发病年龄、有无呼吸肌受累相关。

关键词：糖原累积病Ⅱ型 Pompe病临床转归

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Ferumoxide标记Flk1^+CD31^-CD34^-人骨髓间充质干细胞及其在食蟹猴脑内移植示踪观察

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中国医学科学院学报 2008年第5期30卷 559-563,I0002页

作者：冯铭王任直朱华张楠王常郡魏俊吉卢姗李秦尹晓明韩钦马文斌秦川赵春华安沂华孔燕国中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所病理室北京100021 煤炭总医院神经外科北京100018 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100730 北京神经外科研究所神经干细胞室北京100050

目的探讨Ferumoxide-PLL标记Flk1+CD31-CD34-人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的方法及其在食蟹猴脑实质内移植活体示踪的可行性。方法采用Ferumoxide-PLL标记hBMSC,台盼蓝染色、普鲁士蓝染色和透射电镜扫描鉴定标记效率及细胞活力。体外磁共... 详细信息

目的探讨Ferumoxide-PLL标记Flk1+CD31-CD34-人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的方法及其在食蟹猴脑实质内移植活体示踪的可行性。方法采用Ferumoxide-PLL标记hBMSC,台盼蓝染色、普鲁士蓝染色和透射电镜扫描鉴定标记效率及细胞活力。体外磁共振成像(MRI)分别扫描标记和未标记细胞,计算T2*的弛豫时间和弛豫率(R2*)变化。通过立体定向手术将标记的hBMSC移植入食蟹猴右侧基底节区,采用MRI扫描活体示踪细胞。采用免疫组织化学、普鲁士蓝和HE染色对脑组织切片进行干细胞存活、分化及病理学研究。结果Ferumoxide-PLL标记hBMSC效率为96%,普鲁士蓝染色、电镜可显示标记hBMSC细胞质内铁颗粒。1×106和5×105两组Ferumoxide-PLL标记细胞的T2*的弛豫时间分别为68.86和79.88ms,而未标记细胞分别为12.71和15.24ms。标记细胞的R2*分别为78.68和65.61/s,分别是未标记细胞(14.52和12.52/s)的5.4和5.2倍。移植后3周MRI扫描T2WI仍可发现hBMSC呈明显的低信号。病理及免疫荧光结果显示hBMSCs在移植区大量存活,移植区有大量新生血管,但未见hBMSC向神经细胞分化。结论Ferumoxide-PLL可高效标记hBMSC,能显著增加其MRI图像对比度。MRI可活体示踪干细胞。移植入食蟹猴脑内的hBMSC可大量存活并促进新生血管形成。

关键词：超顺磁性氧化铁间充质干细胞细胞移植磁共振成像食蟹猴

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ER和PR在甲状腺乳头状癌的表达及意义

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基础医学与临床 2010年第6期30卷 635-639页

作者：张璐孙永亮陈实平董红燕刘跃武中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院基本外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所细胞生物系北京100005

目的探讨雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在甲状腺乳头状癌中的表达,以及ER、PR与肿瘤生物学特征的关系。方法取新鲜甲状腺乳头状癌标本69例,结节性甲状腺肿7例,用免疫组织化学方法检测ER、PR的表达。分析受体与肿瘤生物学特征的关系。... 详细信息

目的探讨雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在甲状腺乳头状癌中的表达,以及ER、PR与肿瘤生物学特征的关系。方法取新鲜甲状腺乳头状癌标本69例,结节性甲状腺肿7例,用免疫组织化学方法检测ER、PR的表达。分析受体与肿瘤生物学特征的关系。结果在甲状腺乳头状癌中,ER和PR的表达率分别为52.17%和46.38%,结节性甲状腺肿没有ER和PR表达,ER和PR的表达与患者性别、肿瘤大小以及MACIS评分无关,但是PR与肿瘤浸润甲状腺包膜以及淋巴结转移成正相关(P<0.05),ER与患者年龄成负相关。结论甲状腺乳头状癌中ER、PR的表达高于结节性甲状腺肿,甲状腺乳头状癌中PR的表达反映肿瘤浸润甲状腺包膜和淋巴结转移情况,ER表达随着患者年龄增加而减少。

关键词：甲状腺乳头状癌免疫组化雌激素受体孕激素受体

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抵御新发、突发病毒性传染病的新思路--天然免疫机制的系统医学研究和针对宿主的广谱抗病毒药物的研发

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中国科学：生命科学 2015年第1期45卷 1-9页

作者：秦晓峰蒋太交程根宏中国医学科学院基础医学研究所&北京协和医学院基础学院系统医学研究中心北京100005 苏州系统医学研究所苏州215123

病毒性传染疾病是人类社会的重大威胁,严重危害人民生命安全和国家、社会安定.随着国内外经济发展,城镇化、都市化、全球化的进程加快,新发和突发病毒性传染病呈现不断增高的趋势,如艾滋病病毒、严重急性呼吸综合征病毒、禽流感病毒、... 详细信息

病毒性传染疾病是人类社会的重大威胁,严重危害人民生命安全和国家、社会安定.随着国内外经济发展,城镇化、都市化、全球化的进程加快,新发和突发病毒性传染病呈现不断增高的趋势,如艾滋病病毒、严重急性呼吸综合征病毒、禽流感病毒、甲流感病毒、埃博拉病毒等近年来一次又一次在世界不同地区频繁发生并蔓延、流行.本次埃博拉病毒在西非的爆发和疫情失控更再次警示我国和国际社会关于发展有效防治新发、突发病毒性传染病措施的重要性和紧迫性.天然免疫与宿主抗病研究领域的突破性进展为解决该世界性难题开辟了新的思路和途径.

关键词：新发突发病毒性传染病埃博拉病毒天然免疫宿主抗病干扰素广谱抗病毒药物

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高浓度葡萄糖通过下调自噬增加体外培养雪旺细胞的凋亡

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基础医学与临床 2013年第8期33卷 1009-1013页

作者：屈岭顾蓓张宏石玥梁晓春中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院中医科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所细胞中心北京100005

目的观察高浓度葡萄糖对雪旺细胞自噬活性的影响以及自噬对高糖条件下雪旺细胞增殖活性及凋亡的影响。方法体外培养RSC96细胞,Western blot和免疫荧光法检测beclin1和caspase-3蛋白表达,MTT检测细胞增殖活性。结果高浓度葡萄糖组RSC96细... 详细信息

目的观察高浓度葡萄糖对雪旺细胞自噬活性的影响以及自噬对高糖条件下雪旺细胞增殖活性及凋亡的影响。方法体外培养RSC96细胞,Western blot和免疫荧光法检测beclin1和caspase-3蛋白表达,MTT检测细胞增殖活性。结果高浓度葡萄糖组RSC96细胞beclin1的表达减少(P<0.05),细胞增殖活性降低(P<0.05,P<0.01)。自噬被抑制后加剧了高糖对细胞增殖活性的削弱作用(P<0.01),同时增加了高糖促进caspase-3的活化作用(P<0.01)。结论高浓度葡萄糖通过下调自噬活性增加细胞凋亡。

关键词：雪旺细胞高糖自噬 beclin1 凋亡

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10种中草药成分对体外过表达Aβ的影响及机制探讨

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药学学报 2014年第6期49卷 800-806页

作者：朱燃黄田喜赵雪梅张冀民梁平中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理系北京100005 美国哈佛大学医学院神经疾病研究中心波士顿02115

筛选对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）患者脑内老年斑的组成成分β-淀粉样蛋白（β-amyloid peptide，Aβ）有抑制作用的中草药成分，并探讨其可能机制。从资料中选出10种具有潜在治疗AD的中草药成分，分别以不同药物浓度（0... 详细信息

筛选对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）患者脑内老年斑的组成成分β-淀粉样蛋白（β-amyloid peptide，Aβ）有抑制作用的中草药成分，并探讨其可能机制。从资料中选出10种具有潜在治疗AD的中草药成分，分别以不同药物浓度（0．5～100μmol·L1）作用于两种双基因转染细胞模型（117细胞模型：过表达Aβ和β-分泌酶；146细胞模型：过表达Aβ和γ-分泌酶），一定时间后，用ELISA法测定各组细胞外Aβ水平，初筛出具有降低细胞外Aβ的中草药成分，并估算其最佳药物浓度范围，然后分别观察其对细胞形态、活力及凋亡率的影响，并分析其对模型细胞内Aβ水平、β、γ-分泌酶活性的作用效果。初筛结果显示，10种中草药成分中有4种能浓度依赖性降低两种模型外Aβ水平，分别为隐丹参酮、黄芪总皂苷、天麻素和芍药苷，其浓度分别在0．5～5．0、0．5～5．0、5．0～50和1．0～25μmol·L_。内时效果最为显著。进一步的研究表明，这4种中草药成分对细胞活性无抑制作用，对细胞内Aβ的降低水平大于细胞外，黄芪总皂苷和天麻素还分别对β-分泌酶、γ-分泌酶活性有浓度依赖性抑制作用；其中，黄芪总皂苷对卢一分泌酶活性的最高抑制率达78．2％，天麻素对γ-分泌酶活性的最高抑制率达80．3％。综上所述，隐丹参酮、黄芪总皂苷、天麻素和芍药苷对细胞模型产生的Aβ均有浓度依赖性抑制作用，其中黄芪总皂苷、天麻素抑制Aβ的作用机制可能分别与抑制β-分泌酶活性、γ-分泌酶活性有关。

关键词：阿尔茨海默病黄芪总皂苷天麻素淀粉样蛋白分泌酶

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2011—2013年云南省宣威市居民人群死亡报告漏报情况分析

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中华预防医学杂志 2015年第6期49卷 541-545页

作者：陈功博黄河苍马祥云宁伯福任红艳万霞邹小农杨功焕北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院 100021 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院云南省宣威市疾病预防控制中心中国科学院地理科学与资源研究所

目的为研究云南省宣威地区死亡模式，对该地区常规死因报告系统的完整性进行评价。方法采用多阶段分层随机抽样方法选择云南省宣威市30个行政村或社区为调查点，将死亡率〉600．00／10万，400．00／10万～600．00／10万及400．00／10万... 详细信息

目的为研究云南省宣威地区死亡模式，对该地区常规死因报告系统的完整性进行评价。方法采用多阶段分层随机抽样方法选择云南省宣威市30个行政村或社区为调查点，将死亡率〉600．00／10万，400．00／10万～600．00／10万及400．00／10万以下的区域分别定义为死亡率高、中、低地区。入户询问居民近3年家中人口变动情况（包括出生及死亡人口），并将调查发现的死亡案例与常规死因报告系统上报的死亡案例进行匹配，按照捕捉－再捕捉的原理计算2011—2013年的死因漏报率。结果宣威地区死亡报告的漏报率为31．88％。其中14岁以下为33．35％，15—39岁为34．93％，40～59岁为29．10％，60岁以上为32．88％，不同年龄差异无统计学意义（χ^2=7．24，P=0.065）。男性死亡漏报率为31．72％，女性为32．02％，不同性别差异无统计学意义（χ^2=0．06，P=0.803）。高、中、低死亡率地区的漏报率分别为17．48％、38．01％和36．22％，差异有统计学意义（χ^2=213．25，P〈0.001）。按不同死因、诊断方式、最高诊断单位和死亡地点等因素分层调整后，相应构成无明显变化。将高、中、低死亡率地区以相应的漏报率分层进行漏报调整后，2011—2013年宣威地区人群总死亡率为776．47／10万，男性和女性分别为918．73／10万和617．46／10万。结论宣威地区常规死因报告系统漏报率较高，要准确估计该地区人群的死亡水平和死亡模式必须对报告死亡率进行漏报调整。

关键词：死亡原因人群监测宣威漏报

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包载雷帕霉素的乳酸-乙醇酸共聚物纳米粒子对人脐动脉平滑肌细胞bcl-2、p27^(kip1)表达及细胞凋亡的影响

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中国医学科学院学报 2015年第6期37卷 633-640页

作者：苗立夫崔永亮尹燕平陈莲凤张华刘佩毛朱文玲宋存先杨菁清华大学第一附属医院心脏中心北京100016 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院心脏内科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理室北京100730 中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程所天津市生物材料重点实验室天津300192

目的观察雷帕霉素(RPM)及其乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)形成的载药纳米粒子(RPM-PLGA-NPs)在不同浓度和作用时间下对离体培养人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs)细胞凋亡及调控基因bcl-2、p27kip1表达的影响。方法离体培养HUASMCs细胞并分别予不... 详细信息

目的观察雷帕霉素(RPM)及其乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)形成的载药纳米粒子(RPM-PLGA-NPs)在不同浓度和作用时间下对离体培养人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs)细胞凋亡及调控基因bcl-2、p27kip1表达的影响。方法离体培养HUASMCs细胞并分别予不同浓度的RPM、RPM-PLGA-NPs作用12和24 h,设立生理盐水及空白PLGANPs对照组,免疫组织化学方法检测p27kip1与bcl-2表达阳性率和表达水平的差异,采用流式细胞仪、DNA片段琼脂糖凝胶电泳及末端原位标记法检测各组HUASMCs凋亡及细胞凋亡率,噻唑蓝比色法观察不同浓度RPM和RPM-PLGA-NPs对HUASMCs存活率的影响。结果 RPM及RPM-PLGA-NPs组抑制HUASMCs增殖并呈剂量依赖关系,HUASMCs DNA电泳呈梯度条带阳性。流式细胞仪检测RPM 100 ng/ml和RPM-PLGA-NPs 500 ng/ml组的细胞凋亡百分率分别为(45.45±2.36)%和(35.04±5.64)%,显著高于对照组的(2.60±0.95)%(P<0.01)。末端原位标记法检测高剂量干预组的24 h凋亡指数显著高于12 h组(P<0.05,P<0.01)。RPM 100 ng/ml组和RPM-PLGA-NPs 500 ng/ml组的p27kip1蛋白阳性表达指数(PEI)分别为(0.178±0.077)%和(0.192±0.052)%,显著高于对照组的(0.101±0.035)%(P<0.05)。Spearman秩相关检验显示RPM及RPM-PLGA-NPs组凋亡指数值与p27kip1的PEI无相关性。RPM-PLGA-NPs 50 ng/ml及RPM 10 ng/ml组bcl-2的PEI分别为(6.44±1.31)%和(5.49±1.06)%,显著高于对照组的(1.84±0.47)%和(2.06±0.53)%(P<0.05)。结论 RPM及RPM-PLGA-NPs上调离体培养的HUASMCs的p27kip1表达、促进细胞凋亡,并无下调抗细胞凋亡基因bcl-2表达的作用。相当载药量的RPM-PLGA-NPs较RPM促进血管平滑肌细胞凋亡的作用更明显,但与p27kip1表达水平无线性相关。

关键词：雷帕霉素乳酸-乙醇酸共聚物纳米粒子细胞凋亡人脐动脉平滑肌细胞

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人骨髓间充质细胞脑内移植治疗食蟹猴脑缺血

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基础医学与临床 2013年第1期33卷 33-38页

作者：朱华冯铭卢珊李秦刘颖安沂华赵春华王任直秦川中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心卫生部比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所北京100005 中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所Motac合作实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院北京神经外科研究所北京100039

目的评价人骨髓间充质干细胞脑内移植对食蟹猴脑缺血模型的治疗作用。方法健康成年食蟹猴18只,光化学法造模4周后,用脑立体定位法在缺血灶周围植入人骨髓间充质干细胞5×106和1×106,对照组等体积0.9%氯化钠注射液。利用影像学(... 详细信息

目的评价人骨髓间充质干细胞脑内移植对食蟹猴脑缺血模型的治疗作用。方法健康成年食蟹猴18只,光化学法造模4周后,用脑立体定位法在缺血灶周围植入人骨髓间充质干细胞5×106和1×106,对照组等体积0.9%氯化钠注射液。利用影像学(MRI、PET)、行为学(神经功能评分、精准上肢测试系统)和组织病理学对干细胞移植效果进行评价。结果神经功能评分和精准上肢运动测试分别在在干细胞植入2周和3 d后显著降低(P<0.05)。PET结果显示干细胞移植后4、6周高、低剂量组缺血灶周围皮质、基底节核团的SUV%值比对照组显著升高(P<0.05)。MRI显示剂量组缺血灶的修复速度大于对照组。病理检查可见低剂量组坏死灶面积小于对照组(P<0.05),出血灶周围有大量新生血管生成。结论在缺血灶周围植入hBMSC可促进食蟹猴损伤神经组织的恢复,为进一步研究干细胞治疗神经系统疾病的临床应用提供了参考。

关键词：间充质干细胞脑缺血移植食蟹猴

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