检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2025年第3期45卷 317-322页

作者：郝思嘉杨振丽卞晓翠侯昱宏刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心北京100005

目的建立小鼠肝癌H22瘤株的细胞系及稳定表达tdTomato红色荧光标记和萤火虫荧光素酶的细胞系(H22-luc2-tdT),建立细胞系来源的移植瘤体内成像模型。方法利用小鼠肝癌H22移植瘤,进行原代培养,建立连续传代的细胞系。检测细胞体外增殖,进... 详细信息

目的建立小鼠肝癌H22瘤株的细胞系及稳定表达tdTomato红色荧光标记和萤火虫荧光素酶的细胞系(H22-luc2-tdT),建立细胞系来源的移植瘤体内成像模型。方法利用小鼠肝癌H22移植瘤,进行原代培养,建立连续传代的细胞系。检测细胞体外增殖,进行染色体分析、体内成瘤监测、体内生长、HE梁色和免疫组化检测、aFP、CK7、CK15等标志物表达,并将移植瘤组取材后进行类器官培养。确认建系成功后,通过慢病毒感染的方式使H22细胞稳定表达红色荧光蛋白和萤光素酶融合蛋白Luc2-tdT,后经流式分选获得的Luc2-tdT阳性细胞群,进行体内、体外荧光成像观察。对所建细胞系进行支原体检测、种属检测。结果连续培养的H22细胞系体外已传代至P50。第22代的细胞在C57小鼠皮下和腹腔移植,成瘤率均为100%。皮下移植瘤HE观察形态与原瘤株一致、CK阳性、AFP阳性,表明其为肝癌来源。染色体众数40~44条染色体、端着丝粒。体外细胞生长d0~d3为潜伏期,d3~d5为指数增殖期,d6出现下降趋势。将P22代的H22细胞转染luc2-tdT质粒,筛选后荧光阳性率100%,命名为H22-luc2-tdT细胞,形态与H22细胞一致,荧光显微镜下观察和体内移植瘤活体观察荧光表达强。H22细胞的移植瘤组织可培养形成类器官。细胞培养上清支原体检测阴性,PCR种属鉴定证明来源于小鼠。结论成功建立了双荧光标记的小鼠肝癌细胞系,便于体外、体内肝癌模型及肝癌转移示踪模型的建立和应用,利用活体成像可全周期观察肿瘤生长及转移情况,还可通过荧光定量进行定量研究。已由国家生物医学实验细胞资源库(http://***)收藏、提供共享。

关键词：小鼠肝癌细胞系荧光标记活体成像类器官

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基于人工智能的心血管疾病预测模型研究现状

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蚌埠医科大学学报 2025年第1期50卷 6-13页

作者：彭石娟王小满高琴陈厚早蚌埠医科大学卫生管理学院安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学基础医学院生理学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学心脑血管疾病基础与临床重点实验室安徽蚌埠233030 中国医学科学院基础医学研究所暨北京协和医学院生物化学与分子生物学系重大疾病共性机制研究国家重点实验室北京100005

心血管疾病(CVD)是全球的主要死因,早期预测对CVD.预防、诊断和治疗至关重要。二十世纪末,研究者根据不同权重将多种危险因素组成风险评分来预测CVD风险,以便确定最有可能从预防性干预措施中获益的人群,为一些国家带来重大利益。然而,... 详细信息

心血管疾病(CVD)是全球的主要死因,早期预测对CVD.预防、诊断和治疗至关重要。二十世纪末,研究者根据不同权重将多种危险因素组成风险评分来预测CVD风险,以便确定最有可能从预防性干预措施中获益的人群,为一些国家带来重大利益。然而,传统的风险模型通常无法捕捉危险因素之间的非线性关系。人工智能(AI)技术,特别是监督式机器学习和深度学习,为CVD预测提供了新视角和工具。近几年,基于电子病历、多模态影像等临床数据和衰老大数据可以准确地预测CVD的发病和死亡风险,因此,本文将从传统评分、基于AI的临床数据和衰老大数据的CVD预测模型研究现状分别进行阐述,为促进AI结合CVD提供思路。

关键词：心血管疾病人工智能预测模型衰老生物学年龄

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阻断Kv1.3通道可增强RAW264.7巨噬细胞的吞噬功能

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中国科学：生命科学 2015年第9期45卷 871-880页

作者：祝红闫莉谷婧丽郝维曹济民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学系.北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理生理学系北京100005

本研究旨在阐明电压门控性钾通道1.3(Kv1.3)在巨噬细胞吞噬功能中的作用.利用RAW264.7巨噬细胞吞噬鸡红细胞的半定量检测系统及吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(***)k-12的流式细胞术定量检测系统测定巨噬细胞的吞噬功能.研究发现,用... 详细信息

本研究旨在阐明电压门控性钾通道1.3(Kv1.3)在巨噬细胞吞噬功能中的作用.利用RAW264.7巨噬细胞吞噬鸡红细胞的半定量检测系统及吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(***)k-12的流式细胞术定量检测系统测定巨噬细胞的吞噬功能.研究发现,用海葵神经毒素(Sh K)(100 pmol/L)选择性阻断Kv1.3通道能显著增强处于静息状态的和被脂多糖(LPS)激活的RAW264.7巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;Sh K也可增强静息RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的能力,但由于LPS刺激吞噬的效应近乎饱和,Sh K并不能进一步增加被LPS激活的RAW264.7细胞吞噬大肠杆菌的数量.Sh K促进LPS激活的RAW264.7细胞释放一氧化氮(NO),但并不增加静息RAW264.7细胞的NO释放.Sh K(100 pmol/L)自身并不影响静息RAW264.7细胞释放细胞因子,但能抑制LPS激活的RAW264.7细胞释放白细胞介素-1?.Sh K(100 pmol/L)对RAW264.7细胞的活力无明显影响.RAW264.7细胞表达Kv1.3通道蛋白;LPS使RAW264.7细胞的Kv1.3蛋白表达下调,菲律宾菌素Ⅲ(小凹蛋白依赖性内吞途径抑制剂)使Kv1.3蛋白表达上调,细胞松弛素D对Kv1.3蛋白表达无明显影响.研究表明,RAW264.7细胞表达Kv1.3蛋白;阻断Kv1.3通道可增强RAW264.7细胞的吞噬能力和NO生成.结果提示,Kv1.3通道可能是RAW264.7细胞吞噬活动的负调节因子,有可能成为治疗巨噬细胞吞噬功能异常相关疾病的一个靶点.

关键词： Kv1.3通道吞噬巨噬细胞激活综合征免疫调节

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取向纳米纤维聚合物膜引导内皮细胞生长的作用

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高等学校化学学报 2008年第5期29卷 1070-1073页

作者：韩昭昭孔桦孟洁王超英朱广瑾解思深许海燕北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所生物医学工程学系北京100005 北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所生理学和病理生理学系北京100005 中国科学院物理研究所北京100080

采用高压静电纺丝技术构建了聚氨酯（PU）取向纳米纤维聚合物膜，研究了其引导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）生长的作用．通过扫描电子显微镜对PU取向纳米纤维聚合物膜的形貌进行了观察；通过细胞增殖试验，研究了PU取向纳米纤维聚合物膜对... 详细信息

采用高压静电纺丝技术构建了聚氨酯（PU）取向纳米纤维聚合物膜，研究了其引导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）生长的作用．通过扫描电子显微镜对PU取向纳米纤维聚合物膜的形貌进行了观察；通过细胞增殖试验，研究了PU取向纳米纤维聚合物膜对HUVEC生长的促进作用；通过激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架中肌动蛋白、微管蛋白及纽蛋白纤维的形成情况，探讨了取向纳米纤维聚合物膜对细胞迁移、骨架发育的影响．此外，还通过ELESA方法检测了生长在不同聚合物膜上的HUVEC分泌组织因子（TF）的数量，探讨了取向纳米纤维结构对HUVEC抗凝血功能的影响．实验结果表明，PU取向纳米纤维聚合物膜取向良好，直径为300～500nm；该薄膜可明显促进HUVEC增殖；引导HUVEC沿纺丝方向定向排列生长且呈抗凝血表型，组织因子分泌量明显低于对照组PU光滑膜．因此，PU取向纳米纤维聚合物膜可提供适合内皮细胞的良好生存与增殖环境，在血管的修复与再生方面具有潜在的重要应用价值．

关键词：取向纳米纤维聚合物膜电纺丝血管内皮细胞

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Cas9稳定表达人肿瘤细胞株的建立及其基因编辑活性

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中华病理学杂志 2017年第1期46卷 43-48页

作者：卞晓翠杨振丽冯海凉赵晓梅顾蓓李姜孙昊刘玉琴北京协和医学院基础学院病理学系中国医学科学院基础医学研究所 100005 北京协和医学院基础学院细胞资源中心中国医学科学院基础医学研究所 100005

目的：建立多种Cas9蛋白稳定表达的人肿瘤细胞株，验证细胞中Cas9的基因编辑活性，方便后续研究中目的基因的编辑。方法在15种来自不同组织的人肿瘤细胞株中通过慢病毒感染pLv-EF1α-Cas9-Flag-Neo或pLv-EF1α-Cas9-Flag-Puro及克隆筛... 详细信息

目的：建立多种Cas9蛋白稳定表达的人肿瘤细胞株，验证细胞中Cas9的基因编辑活性，方便后续研究中目的基因的编辑。方法在15种来自不同组织的人肿瘤细胞株中通过慢病毒感染pLv-EF1α-Cas9-Flag-Neo或pLv-EF1α-Cas9-Flag-Puro及克隆筛选的方式建立Cas9稳定表达的细胞株；在其中3个细胞株中瞬时转入靶向TSC22基因的向导RNA，挑选单克隆，通过基因组PCR、测序及Western blot检测Cas9蛋白的基因编辑活性。结果筛选得到了69株Cas9稳定表达的人肿瘤细胞株，瞬时转入向导RNA后成功造成了细胞中TSC22基因的大片段缺失。结论成功建立了69株Cas9稳定表达的人肿瘤细胞株，其中的Cas9蛋白具有基因编辑活性。这些细胞株在大规模药物筛选、新药作用靶点的筛选以及基因功能研究等方面有潜在应用价值。

关键词：细胞系,肿瘤基因编辑

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天麻素、黄芪总皂苷和芍药苷对阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-淀粉样多肽表达的影响及其机制

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中华病理学杂志 2016年第11期45卷 780-785页

作者：周楠楠朱燃赵雪梅梁平中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的：观察天麻素、黄芪总皂苷和芍药苷3种中药成分对5XFAD阿尔茨海默病（ AD）模型小鼠脑内β-淀粉样多肽（ Aβ）斑块及学习记忆和认知能力的影响。方法1.5个月龄5XFAD AD模型小鼠70只分为天麻素高、低剂量组（天麻素-H、天麻素-L）... 详细信息

目的：观察天麻素、黄芪总皂苷和芍药苷3种中药成分对5XFAD阿尔茨海默病（ AD）模型小鼠脑内β-淀粉样多肽（ Aβ）斑块及学习记忆和认知能力的影响。方法1.5个月龄5XFAD AD模型小鼠70只分为天麻素高、低剂量组（天麻素-H、天麻素-L），黄芪总皂苷高、低剂量组（黄芪总皂苷-H、黄芪总皂苷-L）及芍药苷高、低剂量组（芍药苷-H、芍药苷-L），阳性对照组，每组10只；另取同窝阴性小鼠10只作为阴性对照组。药物干预4个月后，观察各组小鼠行为学变化及脑部病理学变化情况，并用模型细胞探讨其相关的作用机制。结果与阳性对照组相比，在行为学水迷宫试验中，天麻素-H、黄芪总皂苷-H和芍药苷-H组隐形平台寻找时间分别缩短，平台撤后在原目标象限停留时间分别延长（ P＜0.01）；在病理形态学检测中，天麻素-H、黄芪总皂苷-H和芍药苷-H组海马区Aβ斑块阳性面积分别降低70.1％、62.4％和57.6％（ P＜0.01），皮层区Aβ斑块阳性面积分别降低81.0％、69.6％和66.6％（ P＜0.01）；各干预组小鼠行为学改善和脑部Aβ斑块减少呈药物剂量依赖性；各干预组小鼠脑匀浆中及模型细胞培养上清液中Aβ水平均有降低；分泌酶表达结果显示，天麻素降低模型细胞β分泌酶基因转录水平达32.9％（ P＜0.01），降低β分泌酶蛋白表达水平达47.9％（ P＜0.01），黄芪总皂苷和芍药苷对β分泌酶在转录和蛋白表达水平无影响。结论天麻素、黄芪总皂苷和芍药苷均可明显改善5XFAD模型小鼠的学习认知及记忆能力，且均可明显抑制小鼠脑内Aβ斑块及脑组织中Aβ多肽，其中天麻素-H作用效果最好；天麻素抑制Aβ斑块可能与抑制β分泌酶进而减少Aβ的产生有关，而黄芪总皂苷和芍药苷未观察到对β分泌酶的影响。

关键词：阿尔茨海默病淀粉样β蛋白前体天麻属黄芪芍药属大脑皮质海马

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嵌合抗原受体修饰T细胞研究进展及肿瘤靶抗原的选择

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解剖学报 2017年第1期48卷 115-120页

作者：唐海军刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系北京100005

嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T)是目前恶性肿瘤免疫治疗的一种新方法。CAR-T细胞对肿瘤的杀伤不依赖主要组织相容性复合体(MHC),并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境和突破宿主免疫耐受状态,因此,CAR-T细胞在治疗肿瘤方面具有独特的优势。CA... 详细信息

嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T)是目前恶性肿瘤免疫治疗的一种新方法。CAR-T细胞对肿瘤的杀伤不依赖主要组织相容性复合体(MHC),并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境和突破宿主免疫耐受状态,因此,CAR-T细胞在治疗肿瘤方面具有独特的优势。CAR-T细胞的构建和选择合适的靶分子是CAR-T细胞免疫治疗的两个关键的问题,我们在文中将围绕这两个问题做一综述。

关键词：嵌合抗原受体肿瘤免疫治疗

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移植P选择素糖蛋白配体1过表达内皮祖细胞促进裸鼠缺血组织新生血管形成

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中华病理学杂志 2010年第9期39卷 621-626页

作者：李玲黄丽杨浩尹洪超中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的探讨细胞黏附的重要分子P选择素糖蛋白配体1（PSGL-1）在内皮祖细胞过表达对内皮祖细胞黏附能力以及促新生血管形成的影响.方法将人PSGL-1 cDNA亚克隆至穿梭质粒,包装扩增病毒.用所产病毒转染大鼠内皮祖细胞,用逆转录聚合酶链反应... 详细信息

目的探讨细胞黏附的重要分子P选择素糖蛋白配体1（PSGL-1）在内皮祖细胞过表达对内皮祖细胞黏附能力以及促新生血管形成的影响.方法将人PSGL-1 cDNA亚克隆至穿梭质粒,包装扩增病毒.用所产病毒转染大鼠内皮祖细胞,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot等方法检测PSGL-1在内皮祖细胞中的表达,用黏附实验检测PSGL-1的功能.将过表达PSGL-1的内皮祖细胞（实验组）移植裸鼠下肢缺血模型,同时设置对照组（转染空载体的内皮祖细胞移植组）和空白组（注射PBS组）,用免疫组织化学方法检测缺血部位新生毛细血管的形成,用激光多普勒检测缺血部位的血流恢复情况.结果 PSGL-1基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度可达3.1×1011 pfu/ml.该重组腺病毒转染内皮祖细胞后,PSGL-1表达显著增加,内皮祖细胞的黏附活性增高;细胞移植至裸鼠缺血下肢后,缺血部位实验组新生毛细血管数量为[（41.0±2.2）个/高倍视野]较对照组[（21.0±2.5）个/高倍视野]及空白组[（10.0±1.6）个/高倍视野]显著增加（P＜0.01）;缺血部位的血流恢复也明显增加[实验组（119.1%±7.0%）、对照组（93.3%±3.0%）、空白组（76.3%±12.0%）,P＜0.01].结论转染PSGL-1可增加内皮祖细胞的黏附活性,移植高表达PSGL-1的内皮祖细胞能促进缺血组织新生血管形成,为改善移植内皮祖细胞治疗缺血性疾病提供了实验依据.

关键词：内皮细胞干细胞 P选择素新生血管化生理性

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荧光标记肿瘤转移体内模型的建立

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中华病理学杂志 2009年第2期38卷 110-116页

作者：冯海凉刘玉琴顾蓓卞晓翠杨振丽杨丽娟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的建立一种带荧光标记的肿瘤转移模型并探讨其应用价值。方法人胃癌MGC-803细胞和小鼠宫颈癌U14细胞进行体外传代培养，转染pEGFP—N1质粒，24h检测转染效率，用无限稀释法筛选稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）的单克隆细胞株MGC．803-GFP... 详细信息

目的建立一种带荧光标记的肿瘤转移模型并探讨其应用价值。方法人胃癌MGC-803细胞和小鼠宫颈癌U14细胞进行体外传代培养，转染pEGFP—N1质粒，24h检测转染效率，用无限稀释法筛选稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）的单克隆细胞株MGC．803-GFP和***。分别体内移植于BALB／c—nu裸鼠和C57BL／6J小鼠，观察成瘤潜伏期，绘制体内生长曲线，利用活体荧光成像系统活体连续观察GFP在体内的表达，观察肺部和淋巴结的转移情况，计算转移率。免疫组织化学检测与转移相关的分子CD44和E—cadherin在移植瘤中的表达。结果MGC-803细胞和U14细胞pEGFP—N1转染24h后的转染效率分别为30％和60％。获得了GFP（＋）的单克隆MGC-803-GFP细胞株和U14-GFP细胞株。MGC-803-GFP在BALB／c—nu裸鼠和***在C57BL／6J小鼠移植成瘤的潜伏期分别是3～5d和2～4d，成瘤率均为100％。利用活体荧光成像系统连续观察，可以清楚直观地观察表达GFP的MGC-803-GFP移植瘤在体内的生长，接种后第60天处死全部荷瘤鼠，解剖后仅有1只可见同侧腋窝下淋巴结的转移。接种U14-GFP后，分别在第28、37和52天观察了荷瘤小鼠肿瘤转移的发展过程。在U14-GFP原发瘤体积达到≥5cm^3时，肺部和淋巴结转移率分别为67％和100％。在MGC-803-GFP和U14-GFP的移植瘤中都可以检测到CD44的表达，而无E—cadherin的表达。结论成功建立了表达绿色荧光蛋白单克隆细胞株MGC-803-GFP和U14-GFP，体内移植建立了荧光标记的肿瘤转移模型。该模型可用于可视化肿瘤体内的研究。

关键词：肿瘤转移绿色荧光蛋白质类模型动物

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GDC-0941联合AZD6244对KRAS突变非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用

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中华病理学杂志 2013年第5期42卷 330-335页

作者：李占稳杨振丽冯海凉卞晓翠刘艳艳刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的探讨选择性P13K抑制剂联合MEK抑制剂对携带KRAS／VI＇EN双突变的非小细胞肺癌细胞系NCI-H157的生长增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法常规培养NCI-H157细胞并分别用不同浓度的P13K抑制剂GDC-0941和MEK抑制剂AZD6244单独或联合... 详细信息

目的探讨选择性P13K抑制剂联合MEK抑制剂对携带KRAS／VI＇EN双突变的非小细胞肺癌细胞系NCI-H157的生长增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法常规培养NCI-H157细胞并分别用不同浓度的P13K抑制剂GDC-0941和MEK抑制剂AZD6244单独或联合作用，四甲基偶氮唑盐（MTT）法初步观察对细胞生长增殖的影响。根据观察结果确定联合给药的浓度。然后分为无药对照组、P13K抑制剂单独用药组（GDC-0941，0．5和5．0μmol／L）、联合I组（0．5μmol／LAZD6244＋0．5μmol／LGDC-0941）及联合Ⅱ组（5．0μmol／LAZD6244＋5．0μmol／LGDC-0941）。细胞经过不同的作用后，MTT法绘制增殖抑制曲线；平板集落形成法检测集落形成能力的改变；流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布；Westernblot检测不同组中抑制剂靶点下游周期及凋亡相关蛋白表达的差异。结果抑制剂单独作用于NCI-H157细胞可抑制其生长增殖。联合用药组与P13K抑制剂单独用药组相比，细胞的生长增殖抑制作用增强，联合I组表现为两药协同作用，联合Ⅱ组表现为两药相加作用；集落形成能力下降[（77．20±1．54）个／孔比（61．50±2．12）个／孔。P〈0．01]和[（51．004-4．00）个／孔比（22．50±3．53）个／孔，P〈0．01]；凋亡率增加[（18．30±0．82）％比（21．32±0．56）％，P〈0．01]和[（27．14±1．58）％比（42．45±4．42）％，P〈0．01]；细胞周期发生改变，联合用药组G0／G1期细胞增加，S期细胞减少（P〈0．05）。Westernblot显示，联合用药组与P13K单独用药组相比，eyelinD1、eyelinB1表达量减少，p21表达量和PARP剪切增加，bel-2／bax的比值下降。结论P13K抑制（AZD6244）可协同MEK抑制（GDC-0941）诱导NCI-H157细胞发生生长增殖抑制和凋亡，但联合用药效果受到药物剂量的影响。

关键词：癌非小细胞肺肿瘤细胞培养的协同用药

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