检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2022年第12期42卷 1850-1854页

作者：李晶黄炳轩许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005 北京市第一六六中学北京100006

目的探讨鸢尾素对抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分成模型组和健康组,模型组采用开放空间强迫游泳(OSFS)方法建立抑郁小鼠模型,造模成功后将造模组随机分成“模型-对照”组和“模型-鸢尾素”组。健康野生小鼠... 详细信息

目的探讨鸢尾素对抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分成模型组和健康组,模型组采用开放空间强迫游泳(OSFS)方法建立抑郁小鼠模型,造模成功后将造模组随机分成“模型-对照”组和“模型-鸢尾素”组。健康野生小鼠正常饲养,同样随机分为“健康-对照”组和“健康-鸢尾素”组。所有鸢尾素组小鼠通过脑立体定位注射向两侧海马分别注射77 pmol鸢尾素,对照组注射同体积的溶剂(PBS)。利用强迫游泳及悬尾检测等实验对其抑郁样行为进行检测。结果与健康组比较,抑郁模型组小鼠在强迫游泳测试(P<0.01)及悬尾测试(P<0.05)中的不动时间显著延长,证明成功模拟了抑郁症患者的绝望样行为,模型构建成功。与“模型-对照”组相比,鸢尾素可显著缩短“模型-鸢尾素”组小鼠在强迫游泳实验(P<0.001)及悬尾实验(P<0.05)中的不动时间。结论鸢尾素可显著改善开放空间强迫游泳抑郁模型小鼠的抑郁样行为。

关键词：鸢尾素抑郁症体育运动抗抑郁

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RNA靶向的CRISPR/CasRx系统在小鼠精原细胞系GC1-spg中的应用

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基础医学与临床 2021年第5期41卷 653-660页

作者：李梦真柳俊邹定峰缪时英王琳芳宋伟李凯中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探究CRISPR/CasRx介导的RNA水平的基因敲降在小鼠精原细胞系GC1-spg的应用。方法利用同源重组的方法构建EF1a core ***表达质粒(CasRx-gRNA)和***、***、*** 3种荧光蛋白表达质粒。在人胚肾细胞系HEK-293T内瞬时转染3种荧光蛋白表... 详细信息

目的探究CRISPR/CasRx介导的RNA水平的基因敲降在小鼠精原细胞系GC1-spg的应用。方法利用同源重组的方法构建EF1a core ***表达质粒(CasRx-gRNA)和***、***、*** 3种荧光蛋白表达质粒。在人胚肾细胞系HEK-293T内瞬时转染3种荧光蛋白表达质粒和CasRx-gRNA表达质粒,通过荧光强度、Western blot检测外源基因(荧光蛋白、EGFP和mCherry)的敲降情况。在HEK-293T细胞内转染CasRx-gRNA,通过q-PCR检测内源基因mRNA和lncRNA干扰后的表达水平。在小鼠精原细胞系GC1内瞬时转染外源基因egfp、mCherry和CasRx-gRNA表达质粒并通过以上方法检测外源基因(荧光蛋白)沉默效率。结果成功构建了CasRx-gRNA和3种荧光蛋白表达质粒。在HEK-293T细胞内CRISPR/CasRx介导的RNA干扰外源基因(egfp、mCherry)和内源基因(mRNA、lncRNA)后,表达水平均显著下调(P<0.01)。在小鼠精原细胞系GC1内验证CRISPR/CasRx系统,可有效和特异敲降外源基因egfp、mCherry。结论CRISPR/CasRx系统能够在GC1-spg细胞中发挥有效和特异的敲降作用,为雄性生殖发育的研究提供新的基因沉默工具。

关键词： CRISPR/CasRx RNA 敲降 GC1-spg

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双三体胚胎干细胞的增殖与分化特征分析

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中国细胞生物学学报 2021年第5期43卷 922-931页

作者：张美丽肖蓉贾玉艳黄粤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

该文旨在研究双三体胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)在细胞增殖、分化以及畸胎瘤形成等方面的特征,揭示非整倍体与肿瘤发生之间的关系。首先建立了两株常染色体双三体的小鼠ESC株系,通过微阵列比较基因组杂交(array comparative ... 详细信息

该文旨在研究双三体胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)在细胞增殖、分化以及畸胎瘤形成等方面的特征,揭示非整倍体与肿瘤发生之间的关系。首先建立了两株常染色体双三体的小鼠ESC株系,通过微阵列比较基因组杂交(array comparative genomic hybridization,array CGH)和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)实验对双三体ESC株系进行了染色体拷贝数分析和核型鉴定;通过绘制细胞生长曲线检测了双三体ESCs的增殖能力;通过流式细胞术检测了双三体ESCs的细胞周期和细胞凋亡情况;采用细胞克隆形成实验分析了双三体ESCs的克隆形成效率;通过实时荧光定量PCR和免疫荧光染色实验检测了双三体ESCs中多能干细胞标志物的表达;通过撤掉培养体系中的白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)诱导分化和进行拟胚体(embryoid body,EB)形成实验检测了双三体ESCs的分化能力;通过重度联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠皮下接种细胞实验分析了双三体ESCs的畸胎瘤形成能力和体内分化能力。结果显示,这两株双三体细胞分别是3号与6号染色体双三体并伴有Y染色体丢失的ESCs(DTs-3+6),以及6号与8号染色体双三体的ESCs(DTs-6+8)。双三体ESCs表现出相对于野生型细胞较强的生长增殖能力和OCT4、SOX2、NANOG等多能干细胞标志物的高表达。当培养液中不添加LIF时,野生型细胞基本完全走向分化,而双三体细胞形成许多未分化或部分分化的克隆,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)染色阳性。在EB分化早期,双三体细胞中Fgf5、T、Foxa2等三胚层标志物的表达水平较野生型细胞明显降低,分化滞后。当被接种到SCID小鼠皮下后,双三体ESCs形成畸胎瘤的能力较野生型细胞增强,畸胎瘤中包含大量未分化区域。因此,双三体ESCs的生长增殖能力增强,它通过限制细胞分化能力而促进畸胎瘤形成。双三体ESCs是研究非整倍体在肿瘤发生发展过程中作用的重要模型。

关键词：非整倍体双三体胚胎干细胞增殖分化畸胎瘤

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人胚胎肾细胞系HEK293中的翻译调控

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基础医学与临床 2021年第5期41卷 630-635页

作者：柳满任悦高玉风王芳余佳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨人胚胎肾细胞系HEK293中的翻译调控。方法通过Polysome profiling结合Western blot实验检测并验证HEK293细胞中mRNA的翻译活性;通过针对RPL10A和RPS17两种核糖体蛋白的RNA免疫共沉淀、建库测序(RIP-seq)及生物信息学分析,获得参... 详细信息

目的探讨人胚胎肾细胞系HEK293中的翻译调控。方法通过Polysome profiling结合Western blot实验检测并验证HEK293细胞中mRNA的翻译活性;通过针对RPL10A和RPS17两种核糖体蛋白的RNA免疫共沉淀、建库测序(RIP-seq)及生物信息学分析,获得参与HEK293细胞蛋白质合成调控的相关分子。结果在两种核糖体蛋白的RNA免疫共沉淀实验富集的分子中共有129种基因,其中93.8%为蛋白质编码基因;且功能与RNA剪接、分解代谢、MAPK信号通路、染色体定位、RNA转运等相关。结论通过针对核糖体蛋白的RNA免疫共沉淀可以获得HEK293细胞中活跃翻译的mRNA。

关键词：人胚胎肾细胞系293 Polysome profiling RNA结合蛋白免疫共沉淀

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CBL教学法在北京协和医学院4+4医学试点班心血管系统教学中的应用

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基础医学与临床 2021年第10期41卷 1538-1541页

作者：闫莉郭潇潇王婧田然唐琳归航马超荆志成中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理生理学系北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院心血管内科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院新型八年制医学教育办公室北京100730

目的探讨案例学习(CBL)教学法在北京协和医学院4+4医学教学试点班的心血管器官系统整合课基础医学模块中的价值及优化改进方法。方法以北京协和医学院2020级4+4医学教学试点班同学为研究对象,针对心血管器官系统基础医学模块课程内容开... 详细信息

目的探讨案例学习(CBL)教学法在北京协和医学院4+4医学教学试点班的心血管器官系统整合课基础医学模块中的价值及优化改进方法。方法以北京协和医学院2020级4+4医学教学试点班同学为研究对象,针对心血管器官系统基础医学模块课程内容开展6个学时的CBL式教学,同时采用在线考核、问卷调查和师生座谈等方法评价教学效果和改进方案。结果87.5%(28/32)的学生授课后考核成绩较授课前显著提高,授课后全体学生考核成绩为(92.83±2.73)分,显著高于课前的(81.50±3.46)分(P<0.05);问卷调查显示:绝大多数学生认为CBL教学法有助于提高对心血管系统基础知识的掌握程度,调动学习兴趣与主动性,提高临床思辨和逻辑推理能力。结论CBL教学法在器官系统功能模块式教学中有助于基础与临床相融合,助力学生对基础理论知识的理解和掌握,CBL教学法得到了学生的普遍认可,有助于提高整合课基础医学模块教学的教学质量和效果。

关键词：案例学习教学法器官系统整合课程医学基础课心血管系统

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基于多模态MRI图像的耳软骨模型构建

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中国生物医学工程学报 2019年第6期38卷 711-718页

作者：刘晓芳赵成中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院

构建高保真的耳软骨支架一直是耳廓再造的研究核心。传统成像方法对耳软骨和周围组织的区分度较低,为探究可用于耳软骨成像的MRI扫描序列,为耳软骨3D生物打印提供高精度模型,提出超短回波时间(UTE)成像和3D_T2成像序列相结合的扫描方案... 详细信息

构建高保真的耳软骨支架一直是耳廓再造的研究核心。传统成像方法对耳软骨和周围组织的区分度较低,为探究可用于耳软骨成像的MRI扫描序列,为耳软骨3D生物打印提供高精度模型,提出超短回波时间(UTE)成像和3D_T2成像序列相结合的扫描方案。实验共收集40位健康志愿者单侧外耳廓数据。首先,两位有经验的评估者分别根据UTE图像逐层勾勒出耳软骨大致形状,并根据3D_T2图像进一步去除耳垂等其他组织,以此构建耳软骨模型。每名评估者独立重复3次。然后,分析评估者内和评估者间耳软骨分割结果的体积(Cg.V)、表面积(Cg.S)和厚度(***)的相关性,以评价不同评估者是否可以定义相同的感兴趣区域。结果显示,评估者内手动分割结果的精度误差分别为:Cg.V≤3.05%,Cg.S≤1.80%,***≤3.43%,评估者间分别为:Cg.V=2.39%,Cg.S=3.75%,***=3.37%;Cg.V、Cg.S和***的组内相关性分别高于0.95、0.97、0.77,组间相关性分别为0.97、0.89和0.69;Dice相似性系数(DSC)均高于80%。这表明,超短回波时间和3D_T2成像序列结合能够表征耳软骨的形态学差异,是适合耳廓再造研究的扫描方案,可为3D生物打印提供高精度的耳软骨模型。

关键词：耳软骨分割超短回波时间 3D-T2 3D生物打印模型构建

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Snhg3通过促进Sestrin2的表达改善小鼠糖代谢

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基础医学与临床 2025年第6期45卷 714-719页

作者：张明龙高明月解相宏郭泽宇刘晓军闫莉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理生理学系中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系

目的探讨长链非编码RNA-小核仁RNA宿主基因3(lncRNA-Snhg3)在小鼠肝脏糖代谢途径中的作用及调节机制。方法通过尾静脉注射腺病毒的方法在糖尿病模型db/db小鼠过表达Snhg3,检测小鼠葡萄糖耐量和丙酮酸耐量，采用RT-qPCR分析小鼠肝脏糖... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA-小核仁RNA宿主基因3(lncRNA-Snhg3)在小鼠肝脏糖代谢途径中的作用及调节机制。方法通过尾静脉注射腺病毒的方法在糖尿病模型db/db小鼠过表达Snhg3,检测小鼠葡萄糖耐量和丙酮酸耐量，采用RT-qPCR分析小鼠肝脏糖异生相关基因磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶Pepck、葡萄糖-6-磷酸酶G6pc及Snhg3的临近基因应激诱导蛋白2(Sestrin2,Sesn2)的变化；运用双荧光素酶报告基因实验检测293T细胞中Snhg3对Sesn2编码基因的启动子活性的作用。结果腺病毒过表达Snhg3改善db/db小鼠葡萄糖耐量和丙酮酸耐受性，抑制糖异生基因Pepck和G6pc的mRNA表达(P<0.05),促进了Sesn2的mRNA表达(P<0.01)。同时，在293T细胞中过表达Snhg3可明显促进Sesn2启动子活性(P<0.05)。结论 Snhg3通过促进Sestrin2的表达改善小鼠糖代谢稳态。

关键词：小核仁RNA宿主基因3 肝脏糖异生应激诱导蛋白2

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两株红树林来源链霉菌的鉴定和抗菌活性研究

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中国药理学通报 2020年第8期36卷 1134-1139页

作者：叶景静卢覃培贾舒涵郑红芸孙承航黄大林桂林医学院基础医学院微生物实验室广西桂林541004 中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所微生物化学研究室北京100050

目的对分离自广西茅尾海红树林根际土壤的两株链霉菌B353和B486进行鉴定和抗菌活性研究。方法采用4种培养基分离放线菌,ISP2培养基纯化菌株;通过PCR扩增和测序获得菌株16S rRNA基因序列;采用邻接法(Neighbor-Joining)来构建系统进化树;... 详细信息

目的对分离自广西茅尾海红树林根际土壤的两株链霉菌B353和B486进行鉴定和抗菌活性研究。方法采用4种培养基分离放线菌,ISP2培养基纯化菌株;通过PCR扩增和测序获得菌株16S rRNA基因序列;采用邻接法(Neighbor-Joining)来构建系统进化树;采用纸片扩散法(K-B法)测定其抗菌活性;观察两株链霉菌的形态特征;利用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)对活性物质进行初步研究。结果经16S rRNA基因序列比对发现,菌株B353和B486可能是Streptomyces seoulensis NRRL B-24310T的两个变种。抗菌活性筛选表明,B353和B486这两株链霉菌对不同的鉴定菌株都有较好的抗菌活性,其中对金黄色葡萄球菌的抗菌活性较强。TLC的分析结果表明,链霉菌B353和B486产对金黄色葡萄球菌有活性的物质。结论分离自广西茅尾海红树林根际土壤的放线菌有较强抗菌活性,存在从中发现有着天然活性的新抗生素的潜力。

关键词：放线菌链霉菌红树林茅尾海抗菌活性 16S rRNA TLC

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基于磁珠捕获和连接的免核酸提取的恒温扩增技术

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基础医学与临床 2021年第11期41卷 1653-1657页

作者：邱栎臻杨明珠骈红茹郑直中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系北京100005

目的建立基于磁珠捕获和连接的环介导恒温扩增(CLIP-LAMP)方法体系,以适用于大体积样品处理,为病原体检测提供一种新的技术方法。方法在NCBI数据库搜索免疫缺陷病毒(HIV)的一段保守序列,使用实验室特有软件根据该保守序列设计相应的捕... 详细信息

目的建立基于磁珠捕获和连接的环介导恒温扩增(CLIP-LAMP)方法体系,以适用于大体积样品处理,为病原体检测提供一种新的技术方法。方法在NCBI数据库搜索免疫缺陷病毒(HIV)的一段保守序列,使用实验室特有软件根据该保守序列设计相应的捕获探针和检测探针。磁珠表面通过亲和作用偶联寡核苷酸来抓取捕获探针;由于特异性捕获探针的存在使得核酸提取步骤被省略,靶标DNA或RNA直接特异地结合捕获探针;检测探针经过连接步骤后作为最终模板参与荧光定量环介导恒温扩增反应。将此方法用于HIV体外转录(IVT)合成的RNA检测,并且评估方法的灵敏度和特异性。结果构建的方法体系成功应用于HIV的IVT检测;现阶段可以检测到32 CPs/μL。该方法有可能处理>1 mL的大体积样本,并且可在2 h内完成检测。结论建立了基于磁珠的CLIP-LAMP技术,为快速、简便地进行大体积病原体检测提供了新的方法和思路。

关键词：磁珠 HIV 环介导恒温扩增

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TFE3基因突变智力障碍儿童一家系遗传学研究并文献复习

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中国医学前沿杂志（电子版） 2021年第12期13卷 47-52页

作者：张平平高志杰姬辛娜毛莹莹陈倩张学首都儿科研究所附属儿童医院神经内科北京100020 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学遗传学系北京100005

目的报道1例TFE3基因突变所致智力障碍患儿及其家系,并对既往文献报道的该基因突变患儿的临床表型及基因型进行总结。方法收集先证者及其父母的临床资料,对先证者及其父母进行全外显子组测序,确定表型相关致病突变,对先证者及其父母进行... 详细信息

目的报道1例TFE3基因突变所致智力障碍患儿及其家系,并对既往文献报道的该基因突变患儿的临床表型及基因型进行总结。方法收集先证者及其父母的临床资料,对先证者及其父母进行全外显子组测序,确定表型相关致病突变,对先证者及其父母进行Sanger测序验证,明确基因突变位点。对既往文献报道的携带TFE3基因突变患儿的临床表型和基因型进行总结分析。结果在先证者TFE3基因中发现1个新发错义变异c.608T>c,p.L203P,该罕见变异影响氨基酸的高度保守区域,生物信息学分析软件SIFT、PolyPhen2和Mutation-Taster均判断其为有害变异,确定TFE3基因为致病基因。结合国外文献报道共发现携带TFE3基因突变患者20例,典型的临床特征为智力障碍(100%)、特殊面容(100%)和色素失禁(75%),另外癫痫(60%)和孤独症(52.6%)样行为障碍亦常见。20例患者均为杂合变异,包含2种变异类型,其中1例为剪接位点变异,其余均为错义变异,所有变异均发生在4号和3号外显子,为该基因突变热点区域。20例患者变异来源均为新生变异。结论本研究在国内首次报道TFE3基因突变所致智力障碍患儿,发现了1种尚未报道的变异位点,扩大了该基因的表型谱。

关键词：智力障碍 TFE3基因大头畸形

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