检索结果-内蒙古大学图书馆

短重复序列PCR产物变性胶电泳影子带新解──正负链电泳行为的差异

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 283-284页

作者：赵红珊黄尚志李辉梁承宇袁波中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室北京100005

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人LDB1 cDNA的分离与克隆

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科学通报 1999年第7期44卷 755-760页

作者：周严杜光伟汪俊华陈建和袁建刚强伯勤医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

根据与鼠LIM结构域结合蛋白Ldb1有较高一致性的人ESTAA45 2 734设计筛库引物 ,在人胎脑cDNA文库中筛出一长度为 2 398bp的cDNA克隆 .其开放读码框编码 34 7个氨基酸 ,与鼠Ldb1、爪蟾XLdb1及果蝇Chip蛋白高度同源 ,含LIM相互作用结构域... 详细信息

根据与鼠LIM结构域结合蛋白Ldb1有较高一致性的人ESTAA45 2 734设计筛库引物 ,在人胎脑cDNA文库中筛出一长度为 2 398bp的cDNA克隆 .其开放读码框编码 34 7个氨基酸 ,与鼠Ldb1、爪蟾XLdb1及果蝇Chip蛋白高度同源 ,含LIM相互作用结构域及核定位信号 .该基因命名为LDB1 (LIMDomainBindingprotein 1 ) ,GenBank接受号为AF0 5 2 ***杂交示LDB1基因在心、脑、肺中表达较高 ,其蛋白产物LDB1作为LIM结构域结合蛋白可能与发育相关 .

关键词： LIM结构域结构蛋白分离克隆 LDB1 cDNA

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应用改进的SSP-抑制PCR技术扩增cDNA片段旁侧序列

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基础医学与临床 1999年第4期19卷 87-91页

作者：陈渝萍薛社普中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院细胞生物室北京100005

结合抑制PCR和单链特异引物PCR技术，降低RACE过程中由公用引物引发的非特异扩增、增加目的cDNA在原始模板中的相对比例，从而提高RACE特异性，有效地扩增靶序列。

关键词： RACE 抑制PCR cDNA片段旁侧序列

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人和鼠GRY-RBP cDNA的克隆

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科学通报 1999年第19期44卷 2088-2094页

作者：杜光伟潘美辉周严陈建和姚辉袁建刚强伯勤中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmot... 详细信息

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmotifs,RRMs)和一个富含甘氨酸 (G)、精氨酸 (R)、酪氨酸 (Y)的羧基端 .经数据库比较发现该蛋白与许多RRMRNA结合蛋白有较高的相似性 .还以鼠脑cDNA文库为模板 ,利用PCR扩增了鼠GRY RBPcDNA的全编码区和部分非编码区 .Northern杂交发现人GRY RBP在所检测的 8种成人组织中都有表达 ,在心脏。

关键词： cDNA RNA结合蛋白 GRY-RBP 克隆

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类风湿性关节炎患者2H4^+T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析

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中国免疫学杂志 1999年第3期15卷 132-134页

作者：吴福国邱翠娥韩晓琳朱立平蒋明山东济宁医学院生化教研室中国医学科学院基础医学研究所单克隆抗体研究室北京协和医院内科

目的：了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化，探讨其发病机制。方法：使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１１例ＲＡ患者和１２例健康人的外周血Ｔ淋巴细胞进行了研究。结果：ＲＡ患者与对照组比较ＣＤ３＋Ｔ细胞和ＣＤ４＋Ｔ... 详细信息

目的：了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化，探讨其发病机制。方法：使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１１例ＲＡ患者和１２例健康人的外周血Ｔ淋巴细胞进行了研究。结果：ＲＡ患者与对照组比较ＣＤ３＋Ｔ细胞和ＣＤ４＋Ｔ细胞无明显变化，ＣＤ８＋Ｔ细胞明显减少，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值增加。ＣＤ４＋２Ｈ４＋Ｔ细胞在ＣＤ４＋Ｔ细胞中的比例减少，而ＣＤ４＋４Ｂ４＋Ｔ细胞的比例增加。进一步研究发现，ＲＡ患者活化的ＣＤ２５＋Ｔ淋巴细胞比率增加。此外，血清学研究发现，ＲＡ患者ＩｇＧ含量显著增加，ＩｇＭ和ＩｇＡ含量与正常组比较无明显差别。结论：ＲＡ患者存在细胞免疫和体液免疫的功能紊乱，而大量自身免疫球蛋白的产生可能是辅助性Ｔ淋巴细胞升高，抑制性Ｔ淋巴细胞减少以及活化Ｔ淋巴细胞增加的结果，因此，Ｔ淋巴细胞亚群比例失衡在ＲＡ的发病中可能起着更为重要的作用。

关键词：类风湿性关节炎 T细胞亚群流式细胞仪

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改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列

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生物化学与生物物理进展 1999年第6期26卷 600-602页

作者：李竹红刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对传统的反向ＰＣＲ技术作了一些改进：用巢式ＰＣＲ扩增含量极少的靶序列；ＰＣＲ反应体系中加入５％的甲酰胺以减少非特异性扩增．结果表明，改进的反向ＰＣＲ体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法．

关键词：反向PCR 旁侧序列转移基因

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一个新的人类硫氧化还原蛋白基因的克隆

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科学通报 1999年第12期44卷 1307-1310页

作者：周彦潘美辉袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读... 详细信息

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读框 ,一个 1 32bp的 5′非翻译序列和一个 2 0 9bp的 3′非翻译序列以及典型的polyA加尾信号 .其推断的氨基酸序列与人硫氧化还原蛋白同源 ,而且含有硫氧化还原蛋白的保守的活性位点序列 .将它命名为人的类硫氧化还原蛋白基因 (humanthioredoxinlikegene ,hTRXL) .

关键词：差异显示硫氧化还原蛋白胎脑基因克隆

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脊肌萎缩症的产前基因诊断

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中华医学遗传学杂志 1999年第6期16卷 400-401页

作者：袁丽芳刘天慈马素参周文敏杨涛吴沪生孙念怙赵时敏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室北京100005 首都医科大学附属儿童医院北京协和医院

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一个人类α-甘露糖苷酶全长cDNA的分子克隆

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基础医学与临床 1999年第5期19卷 25-31页

作者：李波马凤蓉史耕先赵方萄李景李琳汪燚蔡有余朱立平中国药品生物制品检定所北京100050 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室北京100005 中国医学科学院实验动物研究所北京100050

用我们以往克隆到的1358bp6A8cDNA片段作探针，籍southernblot从一个人扁桃体细胞λgtllCDNA文库筛选，再用RACE方法，克隆到了一个长3300bp的6A8全长CDNA。此CDNA内有一长3188hp（57～3245hp）的开放阅读框架，编码1064个氨基酸的蛋白... 详细信息

用我们以往克隆到的1358bp6A8cDNA片段作探针，籍southernblot从一个人扁桃体细胞λgtllCDNA文库筛选，再用RACE方法，克隆到了一个长3300bp的6A8全长CDNA。此CDNA内有一长3188hp（57～3245hp）的开放阅读框架，编码1064个氨基酸的蛋白质。此蛋白质的氨基酸序列与大鼠一个ER－α－甘露糖苦酶（1040个氨基酸）的相同性和相似性高达78％和82％，与一个酵母－α－甘露糖着酶（1083个氨基酸）的相同性和相似性亦达33％和47％。另外，值得注意的是其260～432位氨基酸序列与人类、猪、大鼠和小鼠的多种α－甘露糖甘醇的相应氨基酸序列的相同性均高于20％，提示这段保守序列与α－甘露糖着酶的功能可能有关。

关键词： cDNA克隆序列分析 α-甘露糖苷酶

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维持细胞内铜离子浓度稳定的分子机制

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生物工程进展 1999年第6期19卷 22-27,31页

作者：罗文琴陈建和袁建刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对生命而言，铜是一种必须的微量元素，它以辅基的形式参与细胞内多种重要的代谢途径。赖氨酸氧化酶参与结缔组织的形成和胶原交联，超氧化物歧化酶清除胞内自由基，细胞色素氧化酶是呼吸链电子传送蛋白，酪氨酸酶参与色素形成途径，多... 详细信息

对生命而言，铜是一种必须的微量元素，它以辅基的形式参与细胞内多种重要的代谢途径。赖氨酸氧化酶参与结缔组织的形成和胶原交联，超氧化物歧化酶清除胞内自由基，细胞色素氧化酶是呼吸链电子传送蛋白，酪氨酸酶参与色素形成途径，多巴胺β羟化酶则与神经传导有关。细胞内铜离子浓度过低会影响这些酶的活性及相应的生理代谢途径，影响细胞的生存。但细胞内铜离子浓度超过生理需求也会引起严重的问题。铜离子能氧化蛋白，脂类和ＤＮＡ，同时促进形成自由基，引起细胞死亡［１］。人体很多疾病都是由于铜离子代谢异常引起的，其中最著名的就是Ｗｉｌｓｏｎ［２］和Ｍｅｎｋｓ［３］病，它们分别是由过多铜离子在细胞内堆积和细胞内铜离子浓度过低导致的。另外，铜离子缺乏还会引起心脏疾病［４］。所以，将细胞内铜离子浓度维持在一稳定水平对细胞生存至关重要。生理性铜离子浓度的维持主要在于四个环节：铜离子进入胞内（ｕｐｔａｋｅ）、胞内运送（ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ）、合成金属蛋白（ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）及清除过多铜离子（ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ）［５］。对于过高或过低的铜离子浓度，细胞主要是通过改变流入量（ｉｎｆｌｕｘ）和流出量（ｅｆｆｌｕｘ）来应答。另外，金属硫蛋白可?

关键词：细胞铜离子浓度细菌酵母调控铜离子代谢

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