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HPV18 L2保守中和表位肽协同MF59与CpG-ODN免疫可诱发广谱中和抗体反应

现代生物医学进展 2020年第20期20卷 3801-3806页

作者：马铭饶郝亚茹张婷刘洪洋王志荣夏百成周艳许雪梅中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005

目的:人乳头瘤病毒(HPV)次要外壳蛋白L2保守中和表位肽可诱发交叉中和抗体,研究L2保守中和表位肽免疫原性的特点利于HPV通用疫苗的研发。HPV18是第二常见的优势流行高危型,但18L2保守表位肽的免疫活性未见报道。方法:本研究采用化学法合... 详细信息

目的:人乳头瘤病毒(HPV)次要外壳蛋白L2保守中和表位肽可诱发交叉中和抗体,研究L2保守中和表位肽免疫原性的特点利于HPV通用疫苗的研发。HPV18是第二常见的优势流行高危型,但18L2保守表位肽的免疫活性未见报道。方法:本研究采用化学法合成HPV18 L2N端多肽(18RG-1)并偶联KLH获得18RG1-KLH肽;联合MF59/CpG-ODN复合佐剂或弗氏佐剂皮下免疫BALB/c小鼠5次,用假病毒中和实验检测抗血清针对α6、α7、α9及α11亚属中多个致癌型HPV的中和抗体。结果:MF59/CpG-ODN复合佐剂多肽组抗血清对所有6种检测型别的中和活性与弗氏佐剂多肽组的相当。MF59/CpG-ODN佐剂多肽组抗血清具有广谱中和活性,中和范围至少包括14种致癌型HPV,中和抗体滴度最高的为HPV45(438)和HPV18(325),其次为HPV68(163)和HPV70(150),这四种优势中和型别均为α7亚属。结论:首次发现HPV18 L2 RG1保守中和表位免疫血清可诱发广谱中和抗体反应(其中对α7亚属的HPV中和活性最强,为优势中和型别)。研究结果为基于L2保守表位的广谱HPV疫苗研发奠定基础。

关键词：人乳头瘤病毒18型 L2保守中和表位广谱中和抗体

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原发性肝癌的分层筛查与监测指南(2020版)

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中华肝胆外科杂志 2021年第1期27卷 12-29页

作者：中华预防医学会肝胆胰疾病预防与控制专业委员会中国研究型医院学会肝病专业委员会中华医学会肝病学分会中华预防医学会肿瘤预防与控制专业委员会感染性肿瘤防控学组杨永平卢实春丁惠国屠红曲春枫曹广文庄辉赵平徐小元不详解放军总医院肝病医学部北京100853 解放军总医院肝胆胰外科医学部北京100853 首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化中心上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室免疫室海军军医大学基础医学部流行病学教研室北京大学医学部基础医学院病原生物学系中国癌症基金会学术部北京大学第一医院感染科

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数占全球55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践... 详细信息

中国原发性肝癌(简称肝癌)年龄调整发病率呈逐年下降趋势,但肝癌发病人数占全球55%,肝癌所导致的疾病负担仍呈上升趋势,患者5年生存率无显著性提高。肝硬化和未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎是中国肝癌的主要病因。指南推荐了适合临床实践的低危、中危、高危和极高危4个层次的肝癌风险人群辨识特征。在医院和社区人群中筛查伴肝癌风险的患者,并科学地进行分层监测。伴有肝癌风险的患者需要终生监测,指南根据风险层次推荐了不同的肝癌监测间隔和工具,对于肝癌高危人群,6个月1次腹部超声联合血清甲胎蛋白监测(常规监测);对于肝癌极高危人群,3个月1次常规监测,6~12个月增强CT或MRI检查1次,以提高早期肝癌诊断率和降低监测成本;低中危人群中,肝癌年发生率低,可延长监测间隔为1年或以上。指南部分推荐意见的成本-效益仍需要进一步评价。

关键词：肝肿瘤肝硬化慢性乙型肝炎筛查监测

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Dicer1缺失对小鼠早期神经发育的影响

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基础医学与临床 2021年第6期41卷 818-824页

作者：刘高澳彭小忠舒鹏程中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005 中国医学科学院医学生物研究所云南昆明650118

目的利用Dicer1条件敲除小鼠,通过RNA-seq技术在转录组水平分析microRNAs(miRNAs)对哺乳动物大脑早期发育的影响。方法构建D6-Cre-Dicer1条件敲除小鼠,实验分为对照组(Ctrl)和条件敲除组(cKO)。苏木精-伊红和免疫荧光染色比较敲除前后... 详细信息

目的利用Dicer1条件敲除小鼠,通过RNA-seq技术在转录组水平分析microRNAs(miRNAs)对哺乳动物大脑早期发育的影响。方法构建D6-Cre-Dicer1条件敲除小鼠,实验分为对照组(Ctrl)和条件敲除组(cKO)。苏木精-伊红和免疫荧光染色比较敲除前后组织形态差异;选取E14.5 D6-Cre介导的Dicer1条件性敲除的小鼠背侧皮质,提取总RNA,利用RNA-seq技术分析Dicer1敲除前后转录水平差异。结果与对照组相比,条件敲除组1个月左右致死,P3时皮层神经元发育异常,皮层和海马结构部分缺失;通过RNA-seq分析,共筛选出差异表达基因45个,上调基因11个,下调基因34个(P<0.05)。差异基因富集于NF-κB信号通路、Wnt信号通路、MAPK-ERK信号通路、JAK-STAT信号通路和DNA损伤应激通路等。结论在发育早期E14.5时Dicer1参与调节多条信号通路,影响部分皮层层次标志物的表达,抑制lncRNA Xist的表达,调节皮质发育。

关键词： Dicer1 D6-Cre 大脑背侧皮质 RNA-seq lncRNA Xist

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200例成骨不全症高风险胎儿的产前基因诊断

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中华医学杂志 2019年第42期99卷 3328-3334页

作者：赵秀丽高劲松李璐璐李闪汪涵肖继芳张静米欢杨玉姣赵飞跃管鑫曹一璇吴易阳卢超霞杨涛张学中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学遗传学系北京100005 中国医学科学院北京协和医院妇产科北京100730

目的在完成大样本成骨不全症(OI)家系致病基因突变鉴定的基础上,为OI高风险胎儿提供遗传咨询和产前诊断.方法采用酚/氯仿法提取先证者与胎儿父母外周血及胎儿绒毛、羊水细胞或脐带血基因组DNA;联合应用聚合酶链反应(PCR)-Sanger测序方... 详细信息

目的在完成大样本成骨不全症(OI)家系致病基因突变鉴定的基础上,为OI高风险胎儿提供遗传咨询和产前诊断.方法采用酚/氯仿法提取先证者与胎儿父母外周血及胎儿绒毛、羊水细胞或脐带血基因组DNA;联合应用聚合酶链反应(PCR)-Sanger测序方法对来自158个OI家系的200例高风险胎儿和他们的父母进行相应位点的基因型鉴定;当胎儿与其母均为患病基因型时,应用微卫星标记等位基因分析的方法排除因胎儿基因组样本的母源DNA污染造成的假阳性.结果在200例OI高风险胎儿中检出OI患者83例(41.5%),隐性遗传携带者12例(6.0%).83例OI胎儿中包含COL1A1突变杂合子45例,COL1A2突变杂合子32例,IFITM5突变杂合子1例,FKBP10复合杂合突变2例,WNT1纯合突变1例,SEC24D复合杂合突变1例和CRTAP突变复合杂合子1例;12例隐性遗传携带者中包含WNT1杂合子7例、SERPINF1杂合子4例和SERPINH1杂合子1例;当母亲和胎儿同为OI致病基因型时,胎儿基因组DNA样本未见母源DNA污染,排除了胎儿假阳性可能.结论本研究建立了较完善的OI产前基因诊断体系,为200例OI高风险胎儿提供了产前基因诊断和精准遗传咨询.

关键词：成骨不全症 Ⅰ型胶原高风险胎儿产前基因诊断

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指南解读类文献报告规范的制订指南(RIGHT for INT)

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中国循证医学杂志 2022年第5期22卷 497-507页

作者：周奇邢丹李沁原张静怡罗旭飞杨楠王小琴杨克虎田金徽李慧李博蔡羽嘉靳英辉吕兰婷孙凤尚淑贤袁蓓蓓李江马彬李秀霞袁源智吴蕾王斌姜雷王志稳陈耀龙杜亮兰州大学基础医学院循证医学中心兰州730000 中国医学科学院循证评价与指南研究创新单元 2021RU017兰州大学基础医学院兰州730000 兰州大学健康数据科学研究院兰州730000 北京大学人民医院骨关节科北京100044 重庆医科大学附属儿童医院呼吸科儿童发育疾病研究教育部重点实验室国家儿童健康与疾病临床医学研究中心儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆401122 广东省第二人民医院临床流行病与方法学中心广州510317 兰州大学公共卫生学院兰州730000 加拿大麦克马斯特大学Michael G.DeGroote疼痛研究与护理中心汉密尔顿L8S4L8 广东省中医院/广东省中医标准化工程技术研究中心广州510120 首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所北京中医药循证医学中心北京100010 四川大学华西医院中国循证医学中心成都610041 武汉大学中南医院循证与转化医学中心武汉430071 中国人民大学公共管理学院中国人民大学卫生技术评估与医药政策研究中心北京100872 北京大学公共卫生学院北京100191 中国医学科学院皮肤病研究所《中华皮肤科杂志》和《国际皮肤性病学杂志英文》编辑部南京210042 北京大学中国卫生发展研究中心北京100191 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京100021 复旦大学附属中山医院眼科复旦大学循证医学中心上海200032 复旦大学附属中山医院厦门医院厦门361015 广东省中医院呼吸与危重症医学科广州510120 浙江大学医学院附属第一医院骨科杭州310006 兰州大学第一医院普外科兰州730000 北京大学护理学院北京100191

目的研发指南解读类文献的报告规范,以期更好地帮助指南解读者报告指南重要信息。方法RIGHT for INT课题组参考EQUATOR网站推荐的报告规范制订方法,确定了3个阶段的制订流程:第一阶段,通过邮件和微信的途径招募多学科的专家,根据职能划... 详细信息

目的研发指南解读类文献的报告规范,以期更好地帮助指南解读者报告指南重要信息。方法RIGHT for INT课题组参考EQUATOR网站推荐的报告规范制订方法,确定了3个阶段的制订流程:第一阶段,通过邮件和微信的途径招募多学科的专家,根据职能划分成核心制订小组、共识专家组及秘书组3个小组;第二阶段,采用文献调研和头脑风暴的方法收集初始条目;第三阶段,通过德尔菲调查和专家意见咨询,形成最终的RIGHT for INT清单。结果通过核心小组头脑风暴讨论和文献回顾,共收集40个初始条目。经过德尔菲调查和专家意见咨询过程(两轮均为17位专家,回复率均为100%),最终形成27个条目的RIGHT for INT清单。结论RIGHT for INT报告清单为指南解读者提供了撰写指南解读类文章的详细指导。

关键词：临床实践指南指南解读报告规范国际实践指南报告标准

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siCAP2对HCCLM3迁移、侵袭和耐药的影响和在仿生消化道系统中的稳定性研究

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中国医药生物技术 2022年第6期17卷 503-511页

作者：孟金凤闫攀登董志忠中粮营养健康研究院有限公司北京102209 中国医学科学院北京协和医学院基础学院研究生院 100005 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京100850 营养健康与食品安全北京市重点实验室 102209

目的为抑制肝癌转移或抗药性提供新的科学技术方法。方法采用siRNA技术在HCCLM3细胞系中敲低CAP2的表达,观测其对肝癌细胞系迁移、侵袭和耐药性的影响,并采用仿生模拟上消化道技术进一步评估siCAP2核酸分子经上消化道系统的稳定性。结果... 详细信息

目的为抑制肝癌转移或抗药性提供新的科学技术方法。方法采用siRNA技术在HCCLM3细胞系中敲低CAP2的表达,观测其对肝癌细胞系迁移、侵袭和耐药性的影响,并采用仿生模拟上消化道技术进一步评估siCAP2核酸分子经上消化道系统的稳定性。结果CAP2在肝癌组织中以及肝癌细胞系显著高表达。si CAP2显著抑制HCCLM3细胞的迁移和侵袭,si CAP2可促进HCCLM3凋亡,增强其对索拉菲尼、顺铂的药物敏感性。si CAP2在仿生模拟上消化道系统小肠消化2 h后的稳定性为29.8%~35.8%。对照组和抑制CAP2组在体外胃肠消化阶段其核酸含量显著下降,且siRNA和蛋白质或者脂肪溶液复配比单独和水混合在消化系统中的保留率更高。对照组和抑制CAP2组别之间无显著差异。结论siCAP2在HCCLM3发挥抑癌作用,并可以在仿生模拟消化系统中部分稳定保留。

关键词： siCAP2 HCCLM3 迁移侵袭药物敏感性仿生上消化道系统

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hnRNPA3通过影响mRNA出核调控hESCs多能性

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基础医学与临床 2021年第6期41卷 811-817页

作者：杨嘉宾陈仲扬周凡琦余佳马艳妮中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探究RNA结合蛋白异质核核糖核蛋白A3(hnRNPA3)在人胚胎干细胞(hESCs)多能性维持中的生物学功能,揭示其在RNA运输过程中的新机制。方法在hESC中通过核孔复合物免疫共沉淀及细胞核质分离检测hnRNPA3与核孔互作情况及定位;抑制hnRNPA3... 详细信息

目的探究RNA结合蛋白异质核核糖核蛋白A3(hnRNPA3)在人胚胎干细胞(hESCs)多能性维持中的生物学功能,揭示其在RNA运输过程中的新机制。方法在hESC中通过核孔复合物免疫共沉淀及细胞核质分离检测hnRNPA3与核孔互作情况及定位;抑制hnRNPA3内源表达后进行克隆形成及碱性磷酸酶染色实验,qPCR检测多能性/分化标志基因的表达变化,利用RNA荧光原位杂交技术检测对polyA^(+)RNA及OCT4 mRNA核质分布的影响;预测hnRNPA3与已知出核相关蛋白结合情况。结果hnRNPA3定位在细胞核且与核孔互作,抑制hnRNPA3的内源表达后显著抑制了hESCs的克隆形成能力(P<0.05)并导致细胞分化标志基因表达水平升高(P<0.001),同时显著抑制了polyA^(+)RNA及OCT4 mRNA的出核(P<0.001)。蛋白质互作网络预测出hnRNPA3与约1/3的已知出核相关蛋白结合。结论hnRNPA3通过影响mRNA出核调控hESCs多能性。

关键词：人胚胎干细胞异质核核糖核蛋白A3 多能性与自我更新 mRNA运输

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全转录组测序分析精子发生中RNA结合蛋白质的动态表达

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基础医学与临床 2021年第6期41卷 825-830页

作者：李凯邙新雨邹定峰李梦真缪时英王琳芳宋伟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的系统解析RNA结合蛋白质(RBPs)在小鼠精子发生中的动态表达全貌、阶段特异性及协同表达模式,并预测其潜在调控作用。方法整合6种类型生精细胞的全转录组测序数据,分析精子发生全程差异表达的RBPs;利用时间序列分析软件(STEM)分析差... 详细信息

目的系统解析RNA结合蛋白质(RBPs)在小鼠精子发生中的动态表达全貌、阶段特异性及协同表达模式,并预测其潜在调控作用。方法整合6种类型生精细胞的全转录组测序数据,分析精子发生全程差异表达的RBPs;利用时间序列分析软件(STEM)分析差异表达RBPs动态表达模式;利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)鉴定精子发生中协同表达的RBPs;通过ClusterProfiler工具分别对差异表达以及协同表达的RBPs进行GO功能富集分析。结果精子发生中共鉴定519个阶段特异表达的RBPs,并具有7种动态表达模式,其中减数分裂时期的RBPs占比最高;GO分析显示RBPs主要参与mRNA选择性剪接、加工或翻译过程;WGCNA分析获得246个共表达RBPs,其中减数分裂时期共表达RBPs占比最高。结论RBPs在精子发生中呈现阶段特异性,并且以协同表达模式发挥调控作用。其在精子发生早期阶段参与RNA加工或剪接等过程,而在后期阶段参与核糖体组装或RNA翻译等过程。

关键词： RNA结合蛋白质转录组共表达精子发生

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PARP14在3种抑郁症模型小鼠海马区的表达升高及其与神经炎性反应的关系

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基础医学与临床 2021年第5期41卷 641-647页

作者：李辰修建波许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探究ADP核糖聚合酶14(PARP14)与抑郁症是否相关及其是否影响小胶质细胞的炎性反应。方法构建抑郁症小鼠模型,通过实时定量PCR和Western blot对比了慢性束缚(CRS)模型、慢性不可预知压力(CUMS)模型和脂多糖(LPS)模型,3种抑郁症模型... 详细信息

目的探究ADP核糖聚合酶14(PARP14)与抑郁症是否相关及其是否影响小胶质细胞的炎性反应。方法构建抑郁症小鼠模型,通过实时定量PCR和Western blot对比了慢性束缚(CRS)模型、慢性不可预知压力(CUMS)模型和脂多糖(LPS)模型,3种抑郁症模型小鼠抑郁症相关脑区中相比于对照组PARP14的蛋白及mRNA表达水平变化。而后在永生化小胶质细胞系BV2中检测其敲低及过表达Parp14后对炎性反应的影响。结果在3种抑郁症模型小鼠海马区均观察到了PARP 4表达水平相较于对照组的升高(P<0.05),且在CRS模型组中观察到PARP14表达水平与组织中炎性反应因子的表达水平相关(P<0.05)。LPS刺激小鼠永生化小胶质细胞系BV2后PARP14表达水平也随之升高(P<0.05);同时过表达PARP14后的BV2细胞响应LPS刺激表达更多促炎性细胞因子(P<0.01),而敲低Parp14或使用PARP14抑制剂处理后表现与其相反(P<0.05)。结论抑郁模型小鼠海马区PARP14表达水平升高,这可能加剧小胶质细胞响应LPS的炎性反应,从而促使神经炎性反应水平升高。

关键词：重度抑郁症 ADP核糖聚合酶14(PARP14) 神经炎性反应小胶质细胞

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黑色素瘤病理诊断临床实践指南(2021版)

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中华病理学杂志 2021年第6期50卷 572-582页

作者：中华医学会病理学分会中华医学会病理学分会皮肤病理学组苏静应建明刘业强李文才柳剑英李忠武不详北京大学基础医学院病理学系北京大学第三医院病理科100191 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病理科100021 上海市皮肤病医院皮肤病理科 200071 郑州大学第一附属医院病理科郑州大学基础医学院病理学系 450052 北京大学肿瘤医院北京市肿瘤防治研究所病理科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室100142

黑色素瘤是一类起源于黑色素细胞的高度恶性肿瘤,发生于皮肤、黏膜及眼葡萄膜等部位。准确、规范的病理诊断对黑色素瘤的临床治疗及预后判断至关重要。本指南以中国黑色素瘤规范化病理诊断专家共识(2017版)为基础,结合《中国临床肿瘤学... 详细信息

黑色素瘤是一类起源于黑色素细胞的高度恶性肿瘤,发生于皮肤、黏膜及眼葡萄膜等部位。准确、规范的病理诊断对黑色素瘤的临床治疗及预后判断至关重要。本指南以中国黑色素瘤规范化病理诊断专家共识(2017版)为基础,结合《中国临床肿瘤学会(CSCO)黑色素瘤诊疗指南(2020版)》对病理诊断的需求、近年来国内外此领域的研究成果及我国国情,对黑色素病理诊断中的常见问题进行较全面地阐述,并给出指导性建议,旨在提高我国黑色素瘤的病理诊断水平和规范性,更准确地评估黑色素瘤患者的预后,为临床治疗提供可靠依据。

关键词：黑色素瘤病理诊断临床实践指南葡萄膜黑色素细胞高度恶性肿瘤治疗及预后常见问题

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