检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：何海龙赵欣宇常笛王进达曹凯周春媛梁新童郭雅楠万修华首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科研究所北京市眼科学与视觉科学重点实验室100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院100005 首都医科大学附属北京友谊医院 100050 首都医科大学附属北京世纪坛医院 100038

目的:系统评价临床实践中影响白内障手术患者舒适度的因素,为提高白内障手术患者舒适度提供可靠依据。方法:计算机检索中文全文期刊数据库(CNKI)、万方数据库、维普数据库、PubMed、Embase、Cochrane Library搜集有关文章,2位评价者独... 详细信息

目的:系统评价临床实践中影响白内障手术患者舒适度的因素,为提高白内障手术患者舒适度提供可靠依据。方法:计算机检索中文全文期刊数据库(CNKI)、万方数据库、维普数据库、PubMed、Embase、Cochrane Library搜集有关文章,2位评价者独立进行文献检索、筛选、质量评价及数据提取,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:文章共纳入52篇随机对照研究中行白内障手术的患者12 911名,将影响白内障患者手术的因素进行分类,依次为护理方式、麻醉药物的种类及作用部位,未归入上述的影响因素按作用时间分为术前影响因素如是否口服镇静药物、术中影响因素如是否辅助吸氧、术后影响因素如术后是否盖眼垫等。将可进行数据分析的影响因素进行处理,Meta分析结果显示:与常规护理相比,协同护理可提高白内障手术患者舒适度相对危险度为1.21,95%置信区间( CI):1.13,1.30( P<0.001);与利多卡因相比,其他表面麻醉药在麻醉效果及影响患者舒适度方面无明显差异,均值差为-0.69,95% CI:-1.51,0.14( P<0.001);较平衡盐溶液相比,静脉输注芬太尼组可明显降低患者自控的镇痛装置按压给药的次数,进而反映出静脉输注芬太尼可提高患者舒适度[ MD=-1.77,95% CI:-2.19,-1.39;P<0.001];Tendon囊下麻醉较表面麻醉相比,麻醉效果及患者舒适度方面更好[ MD=-1.02,95% CI:-1.33,-0.71;P<0.001];其他可提升患者舒适度的因素由于研究文献少或统计结果难以合并遂未行Meta分析,但将其结论进行系统综述。结论:影响白内障手术患者舒适度的因素较多,在临床中可逐步开展,进一步提高手术舒适度,提升患者生活质量。

关键词：白内障手术舒适度影响因素系统评价 Meta分析

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通过阵列式标签高通量测序高效鉴定点突变单克隆细胞

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基础医学与临床 2020年第7期40卷 903-911页

作者：韩玲杨科薛征吕湘中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的建立阵列式标签标记的高通量测序方法并结合多克隆预筛选实现对点突变单克隆细胞株的高效鉴定。方法通过CRISPR/Cas9介导的同源重组修复(HDR)在K562细胞的rs826415位点引入G到T点突变。侯选细胞按每孔10~20个的密度接种培养多克隆,... 详细信息

目的建立阵列式标签标记的高通量测序方法并结合多克隆预筛选实现对点突变单克隆细胞株的高效鉴定。方法通过CRISPR/Cas9介导的同源重组修复(HDR)在K562细胞的rs826415位点引入G到T点突变。侯选细胞按每孔10~20个的密度接种培养多克隆,以带有标签(barcode)的引物区分各多克隆细胞,PCR扩增含rs826415位点的区段,产物合并进行二代测序。生物信息学分析各多克隆细胞的同源重组率及插入/缺失率。将阳性率最高孔内的细胞进一步单克隆培养并鉴定基因型。结果通过CRISPR/Cas9同源重组法和有限稀释获得96个rs826415位点打靶的多克隆细胞。经阵列式标签高通量测序法分析各孔细胞同源重组且不伴随插入/缺失(HDR without indel)的比率,96个多克隆的平均阳性率为0.21%,最高达4.35%,将该多克隆细胞进一步单克隆培养,从30个单克隆中成功获得rs826415位点由G/G突变为T/G的杂合型细胞株。结论通过阵列式标签高通量测序策略结合多克隆细胞预筛选,实现了定点突变单克隆细胞株的高效鉴定,相比常规方法显著降低了工作量和成本。

关键词： CRISPR/Cas9 同源重组阵列式标签高通量测序克隆筛选

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应用协和大籽蒿变应原点刺液诊断大籽蒿花粉过敏性疾病的有效性和安全性

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中华临床免疫和变态反应杂志 2020年第3期14卷 214-220页

作者：周俊雄李俊达王瑞琦王良录顾建青关凯文利平徐涛尹佳中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院变态(过敏)反应科过敏性疾病精准诊疗研究北京市重点实验室国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院统计学教研室北京100730

目的通过皮肤点刺试验(skin prick test,SPT)评价协和大籽蒿花粉变应原点刺液诊断蒿花粉症的有效性和安全性。方法对1026例在北京协和医院变态反应科门诊就诊的过敏患者用协和大籽蒿花粉变应原点刺液进行SPT,15 min后判读平均风团直径(m... 详细信息

目的通过皮肤点刺试验(skin prick test,SPT)评价协和大籽蒿花粉变应原点刺液诊断蒿花粉症的有效性和安全性。方法对1026例在北京协和医院变态反应科门诊就诊的过敏患者用协和大籽蒿花粉变应原点刺液进行SPT,15 min后判读平均风团直径(mean wheal diameter,MWD),以血清蒿花粉特异性IgE(specific immunoglobulin E,sIgE)作为判断标准进行受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析。评价在不同诊断界值下大籽蒿花粉点刺液用于诊断蒿花粉过敏的准确性,记录不良反应事件以评价SPT安全性。结果本研究共入组1026例无脱落病例。全分析集(full analysis set,FAS)及符合方案集(per protocol set,PPS)分别为992例和804例,其ROC曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.901和0.901。根据PPS的ROC曲线分析结果,SPT诊断蒿花粉过敏的平均风团直径(最佳诊断界值)为5.25 mm;对应95%特异度的诊断界值为5.75 mm。在安全集(save set,SS)1026例中,共7例发生8次不良事件,主要表现为点刺部位出现较大风团、鼻痒、流涕、眼痒,咳嗽,胸闷及轻度哮喘等,无严重不良事件发生。结论协和大籽蒿变应原点刺液用于SPT操作简便且安全,能有效地诊断蒿花粉过敏。

关键词：大籽蒿花粉变应原点刺液皮肤点刺试验免疫球蛋白E

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β-654地中海贫血小鼠骨髓红系终末分化的阶段特异性转录组特征

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基础医学与临床 2020年第9期40卷 1182-1189页

作者：史丽芳余东林刘雪会吕湘中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探索β-654地中海贫血小鼠骨髓红系终末分化的阶段特异性转录组特点。方法对β-654地中海贫血小鼠及同窝野生对照小鼠进行基因型鉴定及外周血涂片染色分析,而后对其骨髓细胞做流式细胞分选,收集原始红、早幼红、中幼红和晚幼红细胞... 详细信息

目的探索β-654地中海贫血小鼠骨髓红系终末分化的阶段特异性转录组特点。方法对β-654地中海贫血小鼠及同窝野生对照小鼠进行基因型鉴定及外周血涂片染色分析,而后对其骨髓细胞做流式细胞分选,收集原始红、早幼红、中幼红和晚幼红细胞用于转录组测序;测序数据过滤后进行基因差异表达分析,进一步对差异基因做GO富集分析并通过STRING数据库和Cytoscape软件对其中的上调基因进行蛋白质间相互作用网络和关键基因分析。结果β-654地中海贫血小鼠骨髓红系细胞与同期正常对照间的差异基因随分化进程逐渐增多;GO分析显示地中海贫血早幼红-晚幼红细胞分化过程中分子伴侣介导的蛋白质折叠过程被逐渐激活,早幼红-中幼红时期氧化还原酶活性上调,中幼红-晚幼红时期泛素蛋白连接酶结合增强;蛋白质间相互作用分析发现分子伴侣中的热休克蛋白(Hsp)家族成员位于地中海贫血红系调控网络核心,且随贫血细胞向晚期分化该家族核心网络成员逐渐增多。结论β-654地中海贫血小鼠骨髓红系细胞终末分化具有阶段特异性转录组变化,Hsp家族介导的蛋白质折叠过程随贫血细胞分化逐渐增强,早中幼红时期激活氧化还原反应,而中晚幼红时期以泛素化介导的蛋白降解为主。

关键词：转录组 β-654地中海贫血热休克蛋白蛋白质折叠

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儿茶酚胺类应激激素促进小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入

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基础医学与临床 2020年第7期40卷 897-902页

作者：曹明月李高翔陈昱竹黄薇杨楠刘雁勇中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院药理学系北京100005 西藏大学医学院西藏自治区拉萨850000

目的探讨应激激素对小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入的作用及机制。方法CD44和CD133流式抗体染色确定H22细胞中是否存在肿瘤干细胞;体外应激激素皮质酮(CORT)、肾上腺素(EPI)和去甲肾上腺素(NE)处理H22细胞48 h后,Ki-67和PI流式抗... 详细信息

目的探讨应激激素对小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入的作用及机制。方法CD44和CD133流式抗体染色确定H22细胞中是否存在肿瘤干细胞;体外应激激素皮质酮(CORT)、肾上腺素(EPI)和去甲肾上腺素(NE)处理H22细胞48 h后,Ki-67和PI流式抗体染色检测G0期细胞比例以及细胞周期变化;相应的受体拮抗剂验证介导G0期细胞周期再入的受体亚型;Western blot检测细胞周期相关蛋白Skp2和p27^kip1表达水平。结果H22细胞中肿瘤干细胞(CD44^+CD133^+)比例为0.80%±0.15%;与对照组相比,皮质酮处理后G0期细胞比例不变,而儿茶酚胺类应激激素EPI和NE处理后G 0期细胞分别降低了62.50%和53.00%,同时,EPI和NE组H22细胞总数增加,G2/M和S期细胞比例升高;Skp2蛋白表达显著升高(P<0.05),p27^kip1蛋白表达显著降低(P<0.05);与EPI和NE组相比,添加α1肾上腺素能受体拮抗剂特拉唑嗪和哌唑嗪处理后G0期细胞比例升高;哌唑嗪处理后Skp2蛋白表达显著降低(P<0.05),p27 kip1蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论儿茶酚胺类应激激素通过激活α1肾上腺素能受体促进小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入,其机制可能与S期激酶相关蛋白Skp2表达升高及其靶蛋白p27^kip1的降解有关。

关键词：肝细胞癌 G0期细胞应激激素儿茶酚胺肾上腺素能受体

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抗人转化生长因子β1纳米抗体的制备及功能鉴定

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基础医学与临床 2020年第5期40卷 632-638页

作者：王玥李峥陈慧张建民何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005 北京格根生物科技有限公司北京100005

目的制备并鉴定羊驼来源的高特异性、高亲和力的抗人转化生长因子β1(TGF-β1)的纳米抗体。方法构建真核表达质粒并瞬时转染人胚胎肾上皮细胞HEK-293T,获得重组TGF-β1蛋白;用该蛋白混合弗氏佐剂免疫羊驼,分离外周血单核细胞,提取RNA进... 详细信息

目的制备并鉴定羊驼来源的高特异性、高亲和力的抗人转化生长因子β1(TGF-β1)的纳米抗体。方法构建真核表达质粒并瞬时转染人胚胎肾上皮细胞HEK-293T,获得重组TGF-β1蛋白;用该蛋白混合弗氏佐剂免疫羊驼,分离外周血单核细胞,提取RNA进行巢式PCR,扩增抗体重链可变区(VHH),并构建VHH噬菌体展示文库;利用ELISA筛选能与TGF-β1重组蛋白特异性结合的抗体株,原核表达并纯化抗TGF-β1的纳米抗体;利用免疫印迹、免疫荧光和ForteBio Octer等方法鉴定纳米抗体的特异性及亲和力。结果成功构建cFUGW-TGF-β1表达载体并纯化了3 mg TGF-β1蛋白;羊驼经过5次免疫后得到容量为1.2×108的TGF-β1-VHH噬菌体展示文库;通过4轮ELISA筛选,得到7株能与重组TGF-β1蛋白特异性结合的抗体株;免疫印迹及免疫荧光实验结果均显示原核表达纯化的TGF-β1纳米抗体B3和C8能特异性识别肺癌细胞系NCI-H520表达的天然TGF-β1;ForteBio Octer结果显示B3、C8与重组TGF-β1的亲和力分别达到1.48×10-9 mol/L、9×10-9 mol/L。结论TGF-β1纳米抗体B3和C8能特异性结合TGF-β1,特异性强、亲和力高,或可开发用于肿瘤的免疫治疗。

关键词：人转化生长因子β1 纳米抗体噬菌体展示文库

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北京市大学生乙肝相关知识、态度、行为及健康教育需求

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基础医学与临床 2020年第8期40卷 1149-1153页

作者：师悦刘胜兰王雪竹羽思徐海峰刘伟郑永昌中国医学科学院北京协和医学院北京100730 北京大学医学部公共卫生学院北京100191 中国医学科学院北京协和医院肝脏外科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005

目的了解北京市大学生乙肝防治知识、态度、行为状况以及相关健康教育需求情况,为北京市高校开展健康教育提供科学依据。方法用随机整群抽样的方法,抽取524名学生开展问卷调查。问卷内容包括人口学特征、知识、态度、行为及对健康教育... 详细信息

目的了解北京市大学生乙肝防治知识、态度、行为状况以及相关健康教育需求情况,为北京市高校开展健康教育提供科学依据。方法用随机整群抽样的方法,抽取524名学生开展问卷调查。问卷内容包括人口学特征、知识、态度、行为及对健康教育的需求尤其是对新媒体这一教育形式的需求。结果北京市大学生对乙肝知识总知晓率为71.3%;平均分为(9.27±2.78)分;乙肝主要传染途径知晓率仅67.2%;大多数人去正规医院拔牙、做手术,不去非正规场所打耳洞或纹身,46.6%的人偶尔与他人共用牙刷、剃须刀等;北京市大学生最希望获得信息的途径前3位是:学校教育(80.3%)、广播/电视/电影/网络/音像资料(65.6%)、医生宣传(50.6%);最喜欢的宣传材料是图画为主的材料如宣传画/折页/连环画(54.0%);最喜欢的网络查询形式是到医学专业的网站上查看(62.6%);最喜欢的网络传播知识的形式是文字+图片(68.5%)。结论北京市大学生乙肝防治知识和行为都有所欠缺。今后应利用高校为主要阵地,同时辅以新媒体手段,对大学生开展健康教育。

关键词：乙肝防治大学生知信行健康教育需求

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结缔组织病相关肺动脉高压的遗传学

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中华临床免疫和变态反应杂志 2020年第6期14卷 581-586页

作者：师悦李慕聪赵久良王迁赵秀丽李梦涛中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院风湿免疫科风湿免疫病学教育部重点实验室国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心北京100730 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学遗传学系

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)在结缔组织病(connective tissue disease,CTD)中是一类少见却致死率很高的并发症。现有针对CTD-PAH的一些全基因组关联分析研究显示该疾病具有一定的遗传易感性。目前初步研究显示遗传... 详细信息

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)在结缔组织病(connective tissue disease,CTD)中是一类少见却致死率很高的并发症。现有针对CTD-PAH的一些全基因组关联分析研究显示该疾病具有一定的遗传易感性。目前初步研究显示遗传性PAH以常染色体显性方式遗传的BMPR2基因与CTD-PAH的发生并不具有显著的相关性。然而在遗传性PAH患者家系中发现的内皮素糖蛋白基因(ENG)等TGF-β受体信号通路相关基因突变被证明与CTD患者发生PAH具有一定的相关性,并且与炎症信号通路相关的SDF-1、HIF1α、CBLN2、EBF1和STAT4等基因突变也可能会增加CTD患者肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞受累的易感性,这些基因有望成为潜在的早期检测生物标志物。本文就CTD-PAH的遗传学研究进展进行综述。

关键词：结缔组织病相关肺动脉高压遗传学基因全基因组关联分析

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