检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2002年第2期24卷 149-155页

作者：张坚曾武威陈保生吴钢张文成张可满中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的克隆获得树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶cDNA序列并进行结构分析。方法以树鼩肝脏mRNA逆转录出的Ⅰ链cDNA为模板,运用SMARTRACEPCR扩增技术,扩增得到树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)cDNA序列,并推导出LCAT氨基酸序列。利用分子生物... 详细信息

目的克隆获得树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶cDNA序列并进行结构分析。方法以树鼩肝脏mRNA逆转录出的Ⅰ链cDNA为模板,运用SMARTRACEPCR扩增技术,扩增得到树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)cDNA序列,并推导出LCAT氨基酸序列。利用分子生物学软件DNAMAN对氨基酸序列的一、二级结构及主要结构域进行分析和比较。结果树鼩LCATcDNA序列由1340个核苷酸构成,开放阅读框架1320bp,编码440个氨基酸的LCAT前体(含24个氨基酸构成的信号肽和416个氨基酸组成的成熟蛋白)熏3'非翻译区18bp,终止密码TAA,加尾信号AATAAA和一个25bp的poly(A)尾。树鼩LCATcDNA序列已作为新基因被GenBank接受,登记号AF272861。树鼩与人和狒狒LCATcDNA的同源性分别为90%和89%。结论树鼩LCATcDNA序列与人及其他实验动物高度同源。

关键词：树Qu 卵磷脂酰基转移酶 cDNA

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孟德尔遗传糖尿病研究进展

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中国医学科学院学报 2005年第3期27卷 382-387页

作者：杨燕丽孟雁方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

糖尿病是由多种遗传和环境因素相互作用而引起的一组慢性代谢异常综合征。一些特殊类型的糖尿病,如:青年发病的成年型糖尿病、矮妖精貌综合征、脂肪萎缩性糖尿病和Rabson-Mendenhall综合征为单基因致病并符合孟德尔遗传。本文对孟德尔... 详细信息

糖尿病是由多种遗传和环境因素相互作用而引起的一组慢性代谢异常综合征。一些特殊类型的糖尿病,如:青年发病的成年型糖尿病、矮妖精貌综合征、脂肪萎缩性糖尿病和Rabson-Mendenhall综合征为单基因致病并符合孟德尔遗传。本文对孟德尔遗传糖尿病的研究进展加以综述。

关键词：盂德尔遗传青年发病的成年型糖尿病矮妖精貌综合征脂肪萎缩性糖尿病 Rabson-Mendenhall综合征

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人apoE_7基因在NIH/3T3细胞中瞬时及稳定表达

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中国医学科学院学报 1998年第2期20卷 138-143页

作者：孙明增琦祖和潘燕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的为了探索人apoE_7基因受控于异源启动子MT-I时,能否在鼠类细胞中表达。方法自10.3 kb人apoE_7基因组DNA获得不带自身启动子的人apoE_7基因组DNA片段(60 kb),与小鼠金属硫蛋白启动子(MT-I)重组,构建pME_7真核表达质粒,用Lipofectamin... 详细信息

目的为了探索人apoE_7基因受控于异源启动子MT-I时,能否在鼠类细胞中表达。方法自10.3 kb人apoE_7基因组DNA获得不带自身启动子的人apoE_7基因组DNA片段(60 kb),与小鼠金属硫蛋白启动子(MT-I)重组,构建pME_7真核表达质粒,用Lipofectamine转染NIH/3T3细胞。结果瞬时表达结果表明,重组pME_7质粒能够在NIH/3T3细胞中表达。稳定表达的结果则表明,人apoE_7基因的表达水平与其整合到宿主细胞基因组的拷贝数密切相关。ELISA测定结果显示,人apoE_7基因在NIH/3T3细胞中可以进行正确的转录剪切和翻译加工,合成有生物活性的人apoE_7蛋白;研究结果还表明:重金属可以诱导增强人apoE_7基因的高效表达,诱导后表达水平提高45%～60%。结论人apoE_7基因的表达不仅局限于人类的组织细胞,也可以在鼠类组织细胞中表达;而且MT-I启动子能够诱导表达人apoE_7基因,为人apoE_7转基因小鼠模型的建立奠定了基础。

关键词：真核表达质粒 apoE7基因 MT-I启动子 NIH/3T3

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人hsp90β基因的热诱导表达与染色质活化的关系

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 126-129页

作者：施一江沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的研究人ｈｓｐ９０β基因的热诱导表达与染色质活化的关系。方法采用有机汞亲和层析柱分离热诱导前后Ｊｕｒｋａｔ细胞内的活性和非活性染色质，然后采用狭缝杂交技术比较热诱导前后人ｈｓｐ９０β基因在活性和非活性染色质中的分布... 详细信息

目的研究人ｈｓｐ９０β基因的热诱导表达与染色质活化的关系。方法采用有机汞亲和层析柱分离热诱导前后Ｊｕｒｋａｔ细胞内的活性和非活性染色质，然后采用狭缝杂交技术比较热诱导前后人ｈｓｐ９０β基因在活性和非活性染色质中的分布，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交的方法研究热休克诱导下的ｈｓｐ９０βｍＲＮＡ表达。结果发现热休克诱导使细胞内人ｈｓｐ９０β基因在活性染色质中的含量明显增加，并与内源性的ｈｓｐ９０βｍＲＮＡ表达水平一致。结论首次证实人ｈｓｐ９０β基因的热诱导表达在染色质水平受“基因开关”的调控，为研究人类细胞热应激机制提供了新的模型。

关键词： hsp90β基因亲和层析活性染色质染色质 cDNA

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人扁桃体B淋巴细胞mRNA的差异显示分析及活化B细胞表达的新EST的分离

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中华微生物学和免疫学杂志 1999年第2期19卷 129-132页

作者：殷际义崔莲仙赵庆张正健袁勃中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的分离新的Ｂ细胞活化基因。方法采用差异显示反转录ＰＣＲ技术（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）对人扁桃体活化和静止Ｂ细胞ｍＲＮＡ的差异显示情况进行分析，对显示片段进行克隆并行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析，对Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交阳性的ｃＤＮ... 详细信息

目的分离新的Ｂ细胞活化基因。方法采用差异显示反转录ＰＣＲ技术（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）对人扁桃体活化和静止Ｂ细胞ｍＲＮＡ的差异显示情况进行分析，对显示片段进行克隆并行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析，对Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交阳性的ｃＤＮＡ片段进行测序并比较同源性。结果差异显示分析共获得明显差异表达的ｃＤＮＡ片段６２条，选择主要表达于活化Ｂ细胞上的２０条ｃＤＮＡ片段克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上，并逐一对静止和活化Ｂ细胞ＲＮＡ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析，其中６条ｃＤＮＡ片段在活化Ｂ细胞中呈Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交阳性且与差异显示情况相符，对它们进行测序，然后通过国际互联网与ＧｅｎＢａｎｋ，ＥＭＢＬ和ＤＤＢＪ的ＤＮＡ数据库比较序列同源性，发现其中４个克隆与已发现的基因具明显同源性，一个克隆是新的，另一个克隆虽然与人Ｔ细胞分泌的趋化因子Ｉ－３０９同源性达９５％，但二者转录本不同。结论通过ＤＤＲＴ－ＰＣＲ分离到两个可能为新的Ｂ细胞活化基因的ｃＤＮＡ片段，这为进一步克隆新的Ｂ细胞活化基因奠定了基础。

关键词：扁桃体 B淋巴细胞聚合酶链反应 Northern分析

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人类疾病基因的识别——机遇与挑战

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中国医学科学院学报 2005年第3期27卷 263-264页

作者：沈岩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

人类基因组计划的完成极大推动了人类疾病,尤其是复杂疾病遗传机制的研究。基因组学研究为发现与环境因素作用并最终导致疾病的遗传基础提供了有效的方法。基因组医学研究的突破尚需时日,它需要基础与临床医学研究的合作与共同努力,但... 详细信息

人类基因组计划的完成极大推动了人类疾病,尤其是复杂疾病遗传机制的研究。基因组学研究为发现与环境因素作用并最终导致疾病的遗传基础提供了有效的方法。基因组医学研究的突破尚需时日,它需要基础与临床医学研究的合作与共同努力,但同时也为我们提供了新的机遇和挑战。

关键词：遗传性疾病复杂疾病基因

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中华医学杂志 2004年第19期84卷 1635-1641页

作者：马宏刘彦信刘士廉许瑞安郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 香港大学分子生物学研究所

目的　研究腺相关病毒 (AAV)介导的重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL114 2 81)在体内外的表达规律及其杀伤肿瘤细胞的生物学活性 ,探讨重组腺相关病毒用于肿瘤基因治疗的应用前景。方法　构建编码TRAIL胞外区 114 2 8... 详细信息

目的　研究腺相关病毒 (AAV)介导的重组可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL114 2 81)在体内外的表达规律及其杀伤肿瘤细胞的生物学活性 ,探讨重组腺相关病毒用于肿瘤基因治疗的应用前景。方法　构建编码TRAIL胞外区 114 2 81位氨基酸的多肽的重组腺相关病毒载体rAAV TRAIL114 2 81,转染HEK2 93人胚肾细胞 ,获得高滴度的重组病毒颗粒后 ,转导人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat、人肝癌细胞株HepG2和SMMC 772 1以及人宫颈癌细胞株HeLa等 ,并采用经C5 7BL/ 6小鼠门静脉输入、皮下注射、肌内注射、腹腔注射或口服等不同给药途径 ,研究重组腺相关病毒介导的TRAIL114 2 81蛋白在体内外的表达规律。采用实时PCR方法测定重组病毒滴度。采用酶联免疫吸附实验 (ELISA)、Western印迹法和免疫组化法测定蛋白表达。采用MTT法测定重组rAAV TRAIL114 2 81杀伤肿瘤细胞的生物学活性。结果　成功地获得了rAAV TRAIL114 2 81重组病毒 ,其滴度为每毫升 7 5× 10 12基因组颗粒数 (Gps/ml)。重组病毒转导使TRAIL114 2 81在宿主细胞中高效表达 ,并可显著诱导Jurkat、HeLa和SMMC 772 1等肿瘤细胞凋亡 ,但不能诱导HepG2细胞凋亡。体内实验中 ,经小鼠门静脉输入重组病毒 ,可使TRAIL114 2

关键词： TRAIL 介导重组腺相关病毒表达规律重组病毒滴度体外抗肿瘤活性外源诱导杀伤

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人胎脑mRNA的差异显示分析及脑表达新ESTs的分离

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中国医学科学院学报 1997年第2期19卷 93-99页

作者：潘美辉袁建刚陈斌周彦方鸣武梁植权强伯勤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 南开大学分子生物学研究所

应用mRNA差异显示技术分析人胎脑组织不同发育阶段及不同部位基因表达的差异并研究其特异表达的基因。以3个锚定引物Oligo（dT）12M（M=A，G，C）及20个随机引物，对脑组织mRNA进行了近50次差异显示分析，共分离出上百个差示产物。对其... 详细信息

应用mRNA差异显示技术分析人胎脑组织不同发育阶段及不同部位基因表达的差异并研究其特异表达的基因。以3个锚定引物Oligo（dT）12M（M=A，G，C）及20个随机引物，对脑组织mRNA进行了近50次差异显示分析，共分离出上百个差示产物。对其中部分产物进行克隆、测序获得了39个CDNA序列，长度为100～500bp。其中34个已被Genbank接受并给予新序列编号。

关键词：差异显示反转录 PCR 人胎脑表达序列标签

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医学发展的未来:从基因组学到整合医学

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中华医学杂志 2007年第27期87卷 1873-1875页

作者：叶建伟张勇徐苓朱大海中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院协和医院妇产科北京100005

综观20世纪生命科学发展，从宏观向微观、由表型到机制的探求是其重要特征。以还原论为基础的经典结构生物学、分子生物学与细胞生物学的研究极大地增进了人们对生命本质的理解。人类基因组计划（HGP）完成后，生命科学研究进入到“功... 详细信息

综观20世纪生命科学发展，从宏观向微观、由表型到机制的探求是其重要特征。以还原论为基础的经典结构生物学、分子生物学与细胞生物学的研究极大地增进了人们对生命本质的理解。人类基因组计划（HGP）完成后，生命科学研究进入到“功能基因组学”研究时代，转录组学、蛋白质组学、代谢组学开始迅速发展，生命科学的研究方法不再局限于以还原论为指导的微观拆分，

关键词：功能基因组学整合医学医学发展人类基因组计划生命科学结构生物学细胞生物学分子生物学

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NO-cGMP信号转导系统的上调参与阿片类药物耐受和戒断的生化机制

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药学学报 2000年第8期35卷 566-570页

作者：臧梦维孟爱民沈琦汪青郭菲刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室医学分子生物学国家重点实验室

目的　观察阿片激动剂长时程作用对NO cGMP信号转导系统的影响。方法　选用iNOScDNA稳定表达的NG LNCXiNOS细胞 ,采用NOS活性和cGMP放免测定 ,Western杂交和NADPH黄递酶组化染色技术。结果阿片类药物长时程作用剂量依赖性增高胞浆相iNO... 详细信息

目的　观察阿片激动剂长时程作用对NO cGMP信号转导系统的影响。方法　选用iNOScDNA稳定表达的NG LNCXiNOS细胞 ,采用NOS活性和cGMP放免测定 ,Western杂交和NADPH黄递酶组化染色技术。结果阿片类药物长时程作用剂量依赖性增高胞浆相iNOS活性和胞内cGMP含量 ,药物作用强弱顺序是DPDPE >DADLE >吗啡 ,EC50 都在nmol·L-1数量级。用纳洛酮急性戒断阿片耐受细胞 ,造成酶活性和cGMP水平增加更显著。DPDPE长时程作用还引起iNOS基因表达增强和NADPH黄递酶染色阳性细胞增多。结论　提示NO cGMP信号转导系统上调可能是阿片耐受和成瘾的重要生化改变。

关键词： δ-阿片受体阿片类依赖 NO-cGMP 信号转导

来源：评论

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