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解剖学报 2010年第2期41卷 276-280页

作者：常青钱晓菁许增禄张成侠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系

目的探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药对睾丸精母细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用的影响。方法本实验采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式[棉酚12.5mg/(kg·d)+去氧孕烯125μg/(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸... 详细信息

目的探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药对睾丸精母细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用的影响。方法本实验采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式[棉酚12.5mg/(kg·d)+去氧孕烯125μg/(kg·d)+炔雌醇25μg/(kg·d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg·d)],与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,用药4、6和8周取睾丸组织,应用体视学、原位缺口末端标记(TUNEL)和油红O染色的方法,观察精母细胞和球形精子细胞数量、凋亡和支持细胞吞噬作用。结果联合用药中,甾体激素成分可明显减少精母细胞和球形精子细胞的数量,精母细胞凋亡增加并同时伴有生精上皮油红O染色的增强。结论精母细胞凋亡并被支持细胞吞噬是联合用药抗生育机制之一。

关键词：棉酚甾体激素精母细胞吞噬体视学大鼠

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低剂量棉酚与甾体激素联合应用对大鼠睾丸Cdc25A、cyclinB1及雄激素受体蛋白表达的影响

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解剖学报 2010年第3期41卷 440-445页

作者：张凤枝刘昉许增禄钱晓菁邵金辉黄卉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系北京100005

目的探讨低剂量棉酚与甾体激素联合应用(棉甾联合用药)对大鼠睾丸Cdc25A、cyclinB1及雄激素受体(AR)蛋白表达的影响。方法采用大鼠喂服棉酚12.5mg/(kg.d)+激素[去氧孕烯125μg/(kg.d)+炔雌醇25μg/(kg.d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg.d)]联... 详细信息

目的探讨低剂量棉酚与甾体激素联合应用(棉甾联合用药)对大鼠睾丸Cdc25A、cyclinB1及雄激素受体(AR)蛋白表达的影响。方法采用大鼠喂服棉酚12.5mg/(kg.d)+激素[去氧孕烯125μg/(kg.d)+炔雌醇25μg/(kg.d)+十一酸睾丸酮100mg/(kg.d)]联合用药的方式,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服甲基纤维素溶剂的大鼠相对照,通过免疫组织化学染色和免疫印迹法,观察Cdc25A、CyclinB1及AR蛋白表达的变化。结果各时间点(6周、8周和10周)激素组和棉甾联合用药组Cdc25A在顶体和间质中的表达较对照组减弱,均有显著性差异(P<0.05)。用药6周和8周时,棉酚组、激素组和棉甾联合用药组Cdc25A在精母细胞中表达较对照组增强(P<0.05);用药10周后,只有激素组显著下降(P<0.05)。各时间点激素组和棉甾联合用药组中CyclinB1在间质细胞中的表达量明显降低(P<0.05),但在圆形精子细胞中的表达量无明显改变。各时间点激素组和棉甾联合用药组间质细胞的AR阳性出现在细胞核,而对照组定位于细胞质。Western blotting结果显示,各用药组大鼠睾丸组织中Cdc25A的表达量与免疫组织化学染色结果的变化趋势基本一致。CyclinB1的含量在各组中无明显差异。结论棉甾联合用药影响Cdc25A、cyclin B1和AR蛋白在生精细胞和Leydig细胞中的表达,进而影响减数分裂和圆形精子的变态过程;甾体激素的重要作用是抑制间质细胞的功能发挥。

关键词：棉酚甾体激素 Cdc25A CyclinB1 雄激素受体生精细胞免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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sTβRⅡ拮抗新生大鼠心肌成纤维细胞内TGF-β1诱导的Smad信号和肌成纤维细胞分化

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中国临床解剖学杂志 2010年第2期28卷 184-187页

作者：廉瑞青陈跃杰许增禄张晓东中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005 清华大学医学院北京100084

目的研究可溶性转化生长因子-β1Ⅱ型受体(sTβRⅡ)对新生大鼠心肌成纤维细胞内TGF-β1诱导的Smad信号和肌成纤维细胞分化的抑制效应。方法培养新生大鼠的心肌成纤维细胞,随机分为4组:PBS对照组、TGF-β1(5ng/ml)组、sTβRⅡ(50ng/ml)组... 详细信息

目的研究可溶性转化生长因子-β1Ⅱ型受体(sTβRⅡ)对新生大鼠心肌成纤维细胞内TGF-β1诱导的Smad信号和肌成纤维细胞分化的抑制效应。方法培养新生大鼠的心肌成纤维细胞,随机分为4组:PBS对照组、TGF-β1(5ng/ml)组、sTβRⅡ(50ng/ml)组和TGF-β1+sTβRⅡ组。30min、1h和2h后,免疫细胞化学染色检测P-Smad2和Smad3的表达;24h后,免疫细胞化学染色检测α-SMA的表达。结果与PBS对照组相比,TGF-β1组P-Smad2、Smad3(核阳性率)和α-SMA的表达显著性升高(P<0.05);与TGF-β1组相比,TGF-β1+sTβRⅡ组P-Smad2、Smad3(核阳性率)和α-SMA的表达明显降低(P<0.05)。结论sTβRⅡ可拮抗新生大鼠心肌成纤维细胞内TGF-β1诱导的Smad2/Smad3蛋白的磷酸化与核转位,阻断Smad信号转导通路,抑制肌成纤维细胞分化。

关键词： sTβRⅡ 心肌成纤维细胞 TGF-β1 信号转导肌成纤维细胞分化

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低剂量棉酚与甾体激素联合用药抗男性生育协同作用

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解剖学报 2009年第2期40卷 312-316页

作者：常青邵金辉许增禄张成侠钱晓菁中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖学与组织胚胎学系

目的探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药发挥抗男性生育的药物协同作用。方法采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式[棉酚12.5mg/（kg·d）＋去氧孕烯125μg/（kg·d）＋炔雌醇25μg/（kg·d）＋十一酸睾丸酮100mg/（kg... 详细信息

目的探讨低剂量棉酚和甾体激素联合用药发挥抗男性生育的药物协同作用。方法采用大鼠喂服棉酚与甾体激素联合用药方式[棉酚12.5mg/（kg·d）＋去氧孕烯125μg/（kg·d）＋炔雌醇25μg/（kg·d）＋十一酸睾丸酮100mg/（kg·d）],与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服载体溶剂的大鼠相对照,应用形态学观察、半定量检测和体视学睾丸组织结构定量研究的方法,探讨低剂量棉酚和甾体激素抗生育的药物协同作用。结果在睾丸重量、附睾重量、睾丸精子产量和睾丸组织结构定量方面,低剂量棉酚和甾体激素无药物协同作用;在降低附睾精子计数和精子活动度方面,联合用药组的效果强于其他3组,低剂量棉酚和甾体激素具有药物协同作用。结论与单用低剂量棉酚和甾体激素比较,两者联合用药可以更快地减少附睾精子的数量和活动度,从而快速达到避孕效果。

关键词：棉酚甾体激素抗男性生育协同作用大鼠

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低剂量棉酚与甾体激素联合应用对生精细胞凋亡和iNOS蛋白表达的影响

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解剖学报 2009年第3期40卷 491-495页

作者：张成侠许增禄常青钱晓菁张凤枝邵金辉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖学与组织胚胎学系

目的研究低剂量棉酚与甾体激素联合应用（棉甾联合用药）对大鼠睾丸生精细胞凋亡和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达的影响。方法本实验采用大鼠喂服棉酚12.5mg/（kg.d）＋激素[去氧孕烯125μg/（kg.d）＋炔雌醇25μg/（kg.d）＋十... 详细信息

目的研究低剂量棉酚与甾体激素联合应用（棉甾联合用药）对大鼠睾丸生精细胞凋亡和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达的影响。方法本实验采用大鼠喂服棉酚12.5mg/（kg.d）＋激素[去氧孕烯125μg/（kg.d）＋炔雌醇25μg/（kg.d）＋十一酸睾丸酮100mg/（kg.d）]联合用药的方式,与单独喂服相同剂量的棉酚或激素的大鼠及喂服甲基纤维素溶剂的大鼠相对照,通过原位缺口末端标记（TUNEL）染色,观察生精细胞凋亡的情况;通过免疫组织化学染色和免疫印迹法,观察诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达的变化。结果TUNEL染色显示,在正常对照组,阳性着色主要分布在Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ期生精小管的残余体中,偶见于粗线期精母细胞中。棉甾联合用药组和激素组,阳性着色主要分布在粗线期精母细胞中,随用药时间的延长,阳性着色的细胞数量增多（P〈0.01）。iNOS免疫组织化学显示,在正常对照组,在残余体、精原细胞和粗线期精母细胞中的表达具有期依赖性。在Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ期生精小管,iNOS主要在残余体中表达;在Ⅸ-Ⅻ期生精小管,精原细胞和粗线期精母细胞的核中可见少量表达。在棉甾联合用药组,iNOS在残余体中的表达,随用药时间的延长表达量降低（P〈0.05）;iNOS在粗线期精母细胞、精原细胞胞核中的表达,随用药时间的延长表达量增高（P〈0.05）。iNOS在正常对照组的间质细胞中持续表达,棉甾联合用药组4周降至最低,3时间点表达量无统计学差别。结论iNOS蛋白在低剂量棉酚加甾体激素联合应用大鼠睾丸中各部位的表达变化趋势不一致,分别产生不同的功能;生精细胞凋亡数增加,可能与iNOS的表达增多有关。

关键词：棉酚甾体激素诱导型一氧化氮合酶生精细胞免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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鱼鳍的再生

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生命的化学 2009年第2期29卷 265-267页

作者：邵金辉许增禄中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005

鱼鳍被部分切除后,在正常情况下能够再生形成完整的鳍。相对简单和易获得的尾鳍成为解析骨等再生分子机制的良好体系。鱼鳍的再生一般要经历表皮细胞迁移等五个阶段,伴随有多种基因表达的改变,并发现多种药物对鳍再生有影响。本文综述... 详细信息

鱼鳍被部分切除后,在正常情况下能够再生形成完整的鳍。相对简单和易获得的尾鳍成为解析骨等再生分子机制的良好体系。鱼鳍的再生一般要经历表皮细胞迁移等五个阶段,伴随有多种基因表达的改变,并发现多种药物对鳍再生有影响。本文综述了鱼鳍再生研究进展。

关键词：再生鱼鳍基因药物

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成年女性骶棘韧带区的临床应用解剖研究

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生殖医学杂志 2009年第4期18卷 349-353页

作者：张庆霞郎景和朱兰王乃利李文婷寇印华中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科北京100730 中日友好医院妇产科北京100029 北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所人体解剖与组织胚胎学系北京100005

目的研究骶棘韧带(sacrospinous ligament,SSL)区的血管神经解剖特点,为骶棘韧带固定术(sacrospinous ligament fixation,SSLF)提供解剖学基础。方法对10具(20侧)成人女性尸体的SSL区进行解剖、观查并测量其与周围血管神经的解剖关系。... 详细信息

目的研究骶棘韧带(sacrospinous ligament,SSL)区的血管神经解剖特点,为骶棘韧带固定术(sacrospinous ligament fixation,SSLF)提供解剖学基础。方法对10具(20侧)成人女性尸体的SSL区进行解剖、观查并测量其与周围血管神经的解剖关系。结果 SSL的长度是(52.3±4.2)mm,距离坐骨棘2.5 cm处的宽度为(12.0±2.1)mm。大部分臀下血管(15/20)出骨盆前经过SSL外侧一半的后方或紧邻上缘,且大部分(18/20)在近SSL上缘处发出尾动脉,它在SSL上缘处距离坐骨棘(15.7±5.6)mm。阴部神经在坐骨棘内侧从内上向外下斜行跨越SSL背侧进入坐骨小孔,位于阴部内血管的内侧或内上方,在SSL上、下缘其最内界与坐骨棘的距离分别是(23.4±3.6)mm和(15.7±1.3)mm。15个半骨盆中(15/20)找到肛提肌神经,其跨越SSL上缘处与坐骨棘的距离是(39.6±8.3)mm。结论 SSLF中,选择缝合SSL距离坐骨棘至少2.5 cm处、宽度为韧带靠近下缘的1/2、深度为韧带全层厚度的浅层之1/2,即宽度约5 mm,深度约1 mm,可避免损伤其后方及上缘的血管神经。

关键词：骶棘韧带臀下血管阴部神经阴部内动脉

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小鼠实验性肺纤维化上皮细胞-间充质细胞转变及骨桥蛋白的表达

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解剖学报 2008年第3期39卷 420-425页

作者：吕娟许增禄仇文颖钱晓菁徐园园常青张成侠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖学与组织胚胎学系北京100005

目的从形态学上证实小鼠实验性肺纤维化上皮细胞-间充质细胞转变(EMT)及骨桥蛋白(OPN)的表达变化。方法将60只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水对照组和博来霉素(BLM)模型组,采用口咽抽吸法经咽部注入气管50μl博来霉素溶液,对照组... 详细信息

目的从形态学上证实小鼠实验性肺纤维化上皮细胞-间充质细胞转变(EMT)及骨桥蛋白(OPN)的表达变化。方法将60只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水对照组和博来霉素(BLM)模型组,采用口咽抽吸法经咽部注入气管50μl博来霉素溶液,对照组注入50μl生理盐水。分别在造模后第3d、7d、14d、21d及28d 5个时间点处死对照组及模型组小鼠。取小鼠左肺制备石蜡切片,行苏木素-伊红(HE)染色及天狼猩红染色观察肺组织形态变化及胶原增生情况;行表面活性物质相关蛋白-C(SP-C)、上皮型钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(vimentin)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)和骨桥蛋白(OPN)免疫组织化学染色,观察肺纤维化上皮细胞-间充质细胞转变(EMT)形态与OPN表达,利用图像分析软件Image-Pro Plus 6.0(IPP6.0)测量切片积分吸光度(IA),并进行统计分析。结果HE及天狼猩红染色显示出小鼠肺组织正常结构和纤维化形态变化,并且模型组小鼠肺组织的胶原生成量随时间推移而增加(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,模型组小鼠肺OPN表达量随病程进展持续升高,在纤维化期达到峰值,而对照组表达量很少(P<0.05);对照组SP-C在Ⅱ型肺泡细胞恒定表达,模型组SP-C持续增加,且胞体增大;对照组E-Cadherin表达量多,而模型组在肺实变部位几乎不表达,但肺实变部位产生波形蛋白及FSP1,这些蛋白提示肺纤维化存在EMT。结论BLM诱导性肺纤维化中存在EMT,且与显著增加的OPN有潜在关系。

关键词：肺纤维化上皮细胞-间充质细胞转变骨桥蛋白免疫组织化学小鼠

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成人毛囊器官培养模型中敏乐定促毛囊生长机制的研究

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解剖学报 2008年第1期39卷 93-97页

作者：仇文颖许增禄徐园园中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖学与组织胚胎学系北京100005

目的探讨敏乐定促进毛囊生长的机制。方法选用无血清成人毛囊器官培养模型,体外加入不同浓度的敏乐定,测量毛囊生长速度。在不同时间点取培养毛囊,进行组织化学及免疫组织化学染色,检测I型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、转化生长... 详细信息

目的探讨敏乐定促进毛囊生长的机制。方法选用无血清成人毛囊器官培养模型,体外加入不同浓度的敏乐定,测量毛囊生长速度。在不同时间点取培养毛囊,进行组织化学及免疫组织化学染色,检测I型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、转化生长因子β1(TGFβ1)、整合素β1及K19的表达情况。结果培养毛囊在前3d增长较快,而后期增长趋缓,1mg/L敏乐定对毛囊生长促进作用最明显。敏乐定组毛囊退化表现出现较晚,I型胶原蛋白含量较对照组多,MMP-1表达减少;TGFβ1表达较对照组减少;整合素β1和K19与对照组相比没有显著差异。结论敏乐定能够延缓器官培养毛囊的退化期出现而延长生长期,促进毛囊的增长。敏乐定的这种作用可能是通过抑制TGFβ1的过度表达而实现的。

关键词：培养敏乐定毛囊组织化学免疫组织化学人

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磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶在大鼠睾丸的表达

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解剖学报 2008年第2期39卷 214-218页

作者：钱晓菁常青许增禄徐园园仇文颖北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所人体解剖学与组织学胚胎学系北京100005

目的研究丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）的3个亚家族成员细胞外信号调节激酶（ERK）、c-Jun N-端激酶（JNK）和p38 MAPK的活化形式在睾丸中的定位,了解MAPKs在生精过程中所起的作用。方法免疫组织化学方法检测正常大鼠睾丸中磷酸化的p-ERK... 详细信息

目的研究丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）的3个亚家族成员细胞外信号调节激酶（ERK）、c-Jun N-端激酶（JNK）和p38 MAPK的活化形式在睾丸中的定位,了解MAPKs在生精过程中所起的作用。方法免疫组织化学方法检测正常大鼠睾丸中磷酸化的p-ERKJ、NK、p38 MAPK的表达情况。结果正常大鼠睾丸中p-ERK主要分布于精原细胞、细线前期到粗线期的初级精母细胞以及9~12期长形精子细胞的细胞核,p-JNK则主要位于支持细胞与支持细胞、支持细胞与生精细胞（尤其是19期精子细胞）之间,而p-p38 MAPK除了在生精小管的部分细胞胞质中有分布外,其表达最明显的部位是在间质细胞的细胞质。结论ERKJ、NK和p-38 MAPK分别定位于正常大鼠睾丸内的不同部位,提示MAPKs不同的亚家族成员分别在精子发生的不同环节中发挥主要作用。ERK可能参与生精细胞增殖、分化的信号转导,JNK则可能通过调节细胞的黏附而最终影响生精细胞的迁移与精子释放过程,而p38 MAPK除了可能与JNK一起参与精子释放的调节外,最主要的作用可能是睾酮合成分泌的调节。

关键词：睾丸丝裂原活化蛋白激酶免疫组织化学大鼠

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