目的探讨在Co Cl2模拟低氧条件下,低氧诱导因子1α(HIF-1α)对于过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)是否具有调控作用。方法用real time PCR和Western blot检测Co Cl2模拟低氧条件下PPARγ2和低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及蛋白...
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目的探讨在Co Cl2模拟低氧条件下,低氧诱导因子1α(HIF-1α)对于过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)是否具有调控作用。方法用real time PCR和Western blot检测Co Cl2模拟低氧条件下PPARγ2和低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及蛋白表达。用双荧光报告系统检测HIF-1α对于PPARγ调控的剂量依赖性,并通过染色质免疫共沉淀技术进一步验证。结果 Co Cl2模拟低氧条件下PPARγ2和HIF-1α的mRNA及蛋白表达水平均随着诱导时间的增加而增加。过表达HIF-1α导致PPARγ2表达上调(P<0.01),而抑制HIF-1α则导致PPARγ2表达下调(P<0.05)。HIF-1α对PPARγ2基因的表达具有正调控作用,通过结合于PPARγ2上游调控区特定的低氧应答元件(HRE)而调控其表达。结论 PPARγ2通过HIF-1α依赖的途径在Co Cl2模拟的低氧条件下发挥低氧适应作用。
目的:探讨转移相关基因2(metastasis-associated gene 2,MTA2)在食管癌组织中的表达以及对食管癌KYSE510细胞增殖和迁移的影响。方法:选取2014年在河北医科大学第四医院进行手术切除的50例食管癌组织及其相应的癌旁组织,应用实时荧光定量PCR检测MTA2和转录因子特异性蛋白1(specifi city protein 1,Sp1)m RNA的表达。将MTA2-si RNA和阴性对照si RNA片段转染至食管癌KYSE510细胞后,应用MTS实验和Transwell实验检测KYSE510细胞的增殖、迁移和侵袭情况,应用蛋白质印迹法检测KYSE510细胞中与上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达情况。结果:食管癌组织中MTA2 m RNA的表达水平显著高于相应的癌旁组织(P<0.05),并且与肿瘤的TNM分期(P<0.05)、淋巴结转移和血管浸润有关(P值均<0.01)。食管癌组织中Sp1 m RNA的表达水平显著高于相应的癌旁组织(P<0.05),且MTA2 m RNA的表达水平与Sp1 m RNA的表达水平呈正相关(r=0.407,P=0.028)。MTA2-si RNA转染组细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著低于阴性对照组(KYSE510细胞转染阴性对照si RNA片段)和空白对照组(KYSE510细胞未进行任何转染)(P值均<0.05)。MTA2-si RNA转染组细胞中E-cadherin的表达水平上调(P<0.05),而N-cadherin、vimentin和CD24蛋白的表达水平下调(P<0.05、P<0.01和P<0.05)。结论:食管癌中MTA2 m RNA的表达水平上调,可能与转录因子Sp1的表达水平升高有关。MTA2-si RNA可抑制食管癌KYSE510细胞的增殖、迁移和侵袭,这一作用可能与EMT有关。
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