检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2012年第7期32卷 761-766页

作者：王乐卢雅彬熊霞辉朱宁陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究Txndc5基因在小鼠前成骨细胞增殖中的作用。方法用雌激素诱导小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1,或在MC3T3-E1细胞中分别用质粒载体过表达Txndc5和用siRNA抑制Txndc5的表达后,Western blot检测Txndc5和细胞周期蛋白水平,荧光实时定量PC... 详细信息

目的研究Txndc5基因在小鼠前成骨细胞增殖中的作用。方法用雌激素诱导小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1,或在MC3T3-E1细胞中分别用质粒载体过表达Txndc5和用siRNA抑制Txndc5的表达后,Western blot检测Txndc5和细胞周期蛋白水平,荧光实时定量PCR检测Cyclin A的mRNA水平,MTS法和细胞计数法检测细胞增殖速度,流式细胞术检测细胞周期。结果雌激素诱导MC3T3-E1增殖加快时,Txndc5的蛋白水平亦上升。抑制Txndc5的表达阻止雌激素的促细胞增殖作用。过表达Txndc5使MC3T3-E1细胞增殖速度加快,S期细胞比例增加,同步化细胞进入细胞周期18 h时,过表达Txndc5组Cyclin A的表达升高,且S期细胞比例为18.69%±4.08%,而对照组仅为8.15%±3.68%。抑制Txndc5的表达则使MC3T3-E1细胞增殖速度减慢,S期细胞比例减少,Cyclin A的表达下降。抑制Cyclin A的表达减弱Txndc5的促细胞增殖作用。结论 Txndc5通过上调Cyclin A的表达介导雌激素的促前成骨细胞增殖作用。

关键词： Txndc5 MC3T3-E1细胞细胞增殖雌激素

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人载脂蛋白E7转基因小鼠肾脏cDNA削减文库与cDNA文库

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中国实验动物学报 2002年第2期10卷 86-90页

作者：田增遂琦祖和薛越强中国医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学室

目的　以人apoE7基因制备的高脂血症转基因小鼠模型已建成 ,要用于探查这一突变基因致病的分子机制 ,首先揭示人apoE7在小鼠体内诱发了那些基因的表达异常 ,是重要的环节之一。cDNA削减文库是寻找异常高表达的已知和未知基因有效的手段 ... 详细信息

目的　以人apoE7基因制备的高脂血症转基因小鼠模型已建成 ,要用于探查这一突变基因致病的分子机制 ,首先揭示人apoE7在小鼠体内诱发了那些基因的表达异常 ,是重要的环节之一。cDNA削减文库是寻找异常高表达的已知和未知基因有效的手段 ,而cDNA文库更是获取全长基因所必须。方法　自正常小鼠与转基因小鼠肾脏同时提取总RNA ,再分离mRNA ,逆转录制备cDNA后 ,用两次分子杂交削除转基因鼠cDNA中与正常小鼠相同的部分 ,再用PCR与择需PCR法扩增转基因鼠特异的基因 ,克隆入pGEM T载体后 ,制备削减文库。未经削减的转基因小鼠cDNA克隆入λgt11载体 ,制备基因表达文库。结果和结论　自高脂血症转基因小鼠肾脏构建的削减文库得到约 4 0 0个削减克隆 ,测定了部分克隆的序列 ,并进行同源性比较。λgt11 cDNA文库滴度 1 7× 10 7pfu ml,随机测定的克隆其插入片段长约 5 0 0bp以上。

关键词：人载脂蛋白E7 转基因小鼠肾脏 cDNA削减文库 cDNA文库

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小RNA(MicroRNA)研究方法

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第10期22卷 772-779页

作者：王芳余佳张俊武中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系北京100005

小RNA（microRNA）是一类新发现的长度约为21～25个核苷酸的RNA,它在转录后水平调节靶基因表达.已有研究表明,小RNA在发育、细胞增殖、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥重要作用.针对小RNA的研究方法主要... 详细信息

小RNA（microRNA）是一类新发现的长度约为21～25个核苷酸的RNA,它在转录后水平调节靶基因表达.已有研究表明,小RNA在发育、细胞增殖、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥重要作用.针对小RNA的研究方法主要包括两大类：一是以传统实验技术方法为基础建立起来的小RNA特有的技术方法,二是已成熟应用的生物信息学技术.前者侧重于小RNA表达的检测和功能机制的阐明,后者则包括新小RNA基因及小RNA靶基因的预测.两者相辅相成,互为补充,为深入地研究这类分子的功能和分子机制提供了大量功能线索及确凿的实验证据.

关键词：小RNA 基因表达调控小RNA特有技术生物信息学技术

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差示杂交技术

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基础医学与临床 1990年第2期10卷 116-119页

作者：王智中国医学科学院基础医学研究所生物化学和分子生物学室

本文介绍一种切实可行的差示杂交技术,并对其技术的关键步骤及其可能的应用前景,进行了简要的评述。

关键词：差示杂交技术信使核糖核酸 Rot值

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我国人异常血红蛋白的研究——Ⅰ.一例血红蛋白Е复合地中海贫血的血红蛋白一级结构分析

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中国医学科学院学报 1980年第1期2卷 9-16页

作者：梁植权,陈松森,贾佩臣,王琳芳,程锡元中国医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室解放军307医院北京

对一例严重贫血患者进行检查,醋酸纤维薄膜电泳显示其红细胞内含有一种泳动速度比HbA慢而与HbA2相同的异常血红蛋白。对它进行一级结构分析证明它是HbE(α2β226Glu→Lys)。结合临床症状和血细胞学检查结果,初步认为患者具有血红蛋白Е... 详细信息

对一例严重贫血患者进行检查,醋酸纤维薄膜电泳显示其红细胞内含有一种泳动速度比HbA慢而与HbA2相同的异常血红蛋白。对它进行一级结构分析证明它是HbE(α2β226Glu→Lys)。结合临床症状和血细胞学检查结果,初步认为患者具有血红蛋白Е复合地中海贫血双重杂合子。其父具有与患者相同的异常血红蛋白为HbE杂合子。

关键词：血红蛋白患者手术前后电泳分析地中海贫血地中海贫血双重杂合子醋酸纤维薄膜纸电泳珠蛋白结构分析分析(力学)

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氯霉素乙酰转移酶检测(CAT assay)

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基础医学与临床 1990年第3期10卷 183-187页

作者：王智中国医学科学院基础医学研究所生物化学和分子生物学室

本文介绍一种快速方便的外源基因在哺乳动物细胞中瞬间表达检测系统,即氯霉索乙酰转移酶检测系统。该项检测技术不仅对基因的调控顺序(Cis-acting elements)如启动子、增强子等检测提供了有效的工具,而且为真核基因在哺乳动物细胞表达... 详细信息

本文介绍一种快速方便的外源基因在哺乳动物细胞中瞬间表达检测系统,即氯霉索乙酰转移酶检测系统。该项检测技术不仅对基因的调控顺序(Cis-acting elements)如启动子、增强子等检测提供了有效的工具,而且为真核基因在哺乳动物细胞表达体系中,质粒的构建及筛选提供了行之有效的手段。并介绍了该技术的全过程及其操作要点。

关键词： CTA检测表达质粒瞬间表达

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核Run—off转录活性测定

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基础医学与临床 1990年第2期10卷 120-123页

作者：王智中国医学科学院基础医学研究所生物化学和分子生物学室

本文介绍一种在真核基因转录调控研究中,十分重要的检测技术——核Run-off转录活性的分析,并详细叙述了操作的具体步骤,特别强调了因各实验室选择样品材料的不同,需首先确定核转录的最适条件,如核染色体DNA模板数量,掺入同位素量和反应... 详细信息

本文介绍一种在真核基因转录调控研究中,十分重要的检测技术——核Run-off转录活性的分析,并详细叙述了操作的具体步骤,特别强调了因各实验室选择样品材料的不同,需首先确定核转录的最适条件,如核染色体DNA模板数量,掺入同位素量和反应最适时间等,以便能成功地应用此项技术。

关键词：转录前体RNA 杂交

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急性髓系白血病患者来源白血病干细胞的分选与鉴定

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白血病．淋巴瘤 2010年第9期19卷 523-525页

作者：肖卫纯路金芝李涛陈伟京卢圣栋中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系北京100005

目的分选急性髓系白血病患者白血病干细胞并进行鉴定,为白血病干细胞的进一步研究奠定基础.方法采用Ficoll密度梯度离心法从患者骨髓中分离单个核细胞.采用流式细胞术从单个核细胞中分选CD34^＋CD123^＋白血病干细胞,通过集落形成能... 详细信息

目的分选急性髓系白血病患者白血病干细胞并进行鉴定,为白血病干细胞的进一步研究奠定基础.方法采用Ficoll密度梯度离心法从患者骨髓中分离单个核细胞.采用流式细胞术从单个核细胞中分选CD34^＋CD123^＋白血病干细胞,通过集落形成能力和鹅卵石形成能力检测分选后白血病干细胞的自我更新与分化能力,同时检测CD34^＋CD123^＋细胞纯度,观察其细胞形态.结果分选后的CD34^＋CD123^＋白血病干细胞比例占总分选细胞的10.7%,具有集落形成能力和鹅卵石形成能力,CD34^＋CD123^＋细胞纯度为62.1%.结论成功分选与鉴定了白血病干细胞,可用于其后的进一步研究工作.

关键词：白血病,粒细胞,急性 CD34^+CD123^+细胞造血干细胞分选鉴定

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瘦素及其相关信号通路在腹主动脉瘤发生与进展中的影响作用

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中国医学科学院学报 2022年第6期44卷 1075-1081页

作者：任金锐刘长征顾光超吴建强李方达张慧吉磊陈梦寅郑月宏中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血管外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所生物化学与分子生物学系北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院医学科学研究中心北京100730

腹主动脉瘤(AAA)是长期慢性动脉扩张性疾病,与动脉粥样硬化、感染、外伤等病因相关,目前对其研究多集中在炎症反应、衰老、动脉壁微环境变化,而关于AAA发生与进展过程中代谢变化的研究较少,如糖代谢、脂代谢等变化过程。瘦素作为内分泌... 详细信息

腹主动脉瘤(AAA)是长期慢性动脉扩张性疾病,与动脉粥样硬化、感染、外伤等病因相关,目前对其研究多集中在炎症反应、衰老、动脉壁微环境变化,而关于AAA发生与进展过程中代谢变化的研究较少,如糖代谢、脂代谢等变化过程。瘦素作为内分泌、糖代谢、脂代谢过程中重要的调控因子,通过KEGG信号通路分析发现瘦素与多种信号通路相关,如腺苷酸活化蛋白激酶、酪氨酸激酶/信号传导及转录激活蛋白、细胞因子-细胞因子等信号通路,并且已有研究证明这些信号通路参与调控AAA的形成过程。同时,瘦素影响多种疾病的发生,如肥胖、糖尿病(DM)、高脂血症等,这些疾病同样影响着AAA的发生与进展,DM可能是AAA形成的保护因素,而高脂血症、肥胖与AAA形成的关系尚不明确。因此,瘦素可能在AAA发生与进展过程中发挥重要作用,通过进一步研究瘦素对AAA的影响作用,可能揭示AAA潜在的研究方向及治疗靶点。

关键词：腹主动脉瘤瘦素信号通路发病机制

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转录起始位点的测定

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基础医学与临床 1990年第4期10卷 58-60,57页

作者：王智中国医学科学院基础医学研究所生物化学和分子生物学室

本文简要评述了核糖核酸酶谱(RNase Mapping)分析和S_1核酸酶谱(S_1-nuclease mapping)分析两种转录起始点测定方法;着重介绍了前者测定方法及详细的操作步骤,并简要讨论了转录起始点测定技术在真核基因表达调控研究中的重要作用及可能... 详细信息

本文简要评述了核糖核酸酶谱(RNase Mapping)分析和S_1核酸酶谱(S_1-nuclease mapping)分析两种转录起始点测定方法;着重介绍了前者测定方法及详细的操作步骤,并简要讨论了转录起始点测定技术在真核基因表达调控研究中的重要作用及可能的应用前景。

关键词：转录测定位点

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