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第八届全国医学生物化学与分子生物学、第五届全国临床应用生物化学与分子生物学、2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会

作者：高友鹤中国医学科学院基础医学研究所生理与病理生理学系医学分子生物学国家重点实验室

虽然质谱仪的灵敏度和鉴定速度提高很快，生物标志物的研究没有像很多人预想的那样很快地取得很多成果。最近几十年来我们关注的标志物来源基本就是血液。百分之九十几的生物标志物文章都含有血，血浆或者血清。毕竟血液和所有的器官都...

虽然质谱仪的灵敏度和鉴定速度提高很快，生物标志物的研究没有像很多人预想的那样很快地取得很多成果。最近几十年来我们关注的标志物来源基本就是血液。百分之九十几的生物标志物文章都含有血，血浆或者血清。毕竟血液和所有的器官都联系的那么直接和紧密，获取也不是那么的困难和痛苦。但是有可能我们寻找标志物的地方不对吗？

关键词：

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尿液有可能成为生物标志物的金矿吗?

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中国科学：生命科学 2013年第8期43卷 708-708页

作者：高友鹤中国医学科学院&北京协和医学院基础医学研究所生理与病理生理学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

生物标志物的研究没有像很多人预想的那样很快地取得很多成果．人们主要关注的还是血液中的标志物，毕竟血液和所有的器官都联系的那么直接和紧密．有可能寻找标志物的地方不合适吗？有可能有更好的生物标志物金矿吗？

关键词：生物标志物金矿尿液直接和血液

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PDZ结构域中间序列结合特性及其临床应用

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基础医学与临床 2012年第10期32卷 1230-1234页

作者：牟一蔡鹏飞高友鹤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005 中国医学科学院病原生物学研究所北京协和医学院寄生虫学实验室北京100730

PDZ结构域在生物体中广泛存在,介导着大量的蛋白质相互作用,参与和执行多种生物过程和生理功能。PDZ结构域常规地结合配体蛋白C末端4～5个氨基酸残基。然而,蛋白质的相互作用可能比想象中复杂得多。研究发现PDZ结构域还存在着非常规的... 详细信息

PDZ结构域在生物体中广泛存在,介导着大量的蛋白质相互作用,参与和执行多种生物过程和生理功能。PDZ结构域常规地结合配体蛋白C末端4～5个氨基酸残基。然而,蛋白质的相互作用可能比想象中复杂得多。研究发现PDZ结构域还存在着非常规的结合特性,PDZ结构域非常规结合的特性研究有助于丰富蛋白质相互作用网络,发现蛋白质新功能,并能以结合特性为基础研发安全有效的药物应用于相关疾病的治疗。

关键词： PDZ结构域非常规结合特性中间序列临床应用

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泛素连接酶LNX1的表达、活性测定和功能初探

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 523-526页

作者：郭正光高友鹤中国医学科学院基础医学研究所生理学与病理生理学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的:在大肠杆菌中表达重组人泛素连接酶LNX1,并研究其对钾离子通道蛋白Kv1.4的泛素化作用。方法:构建人LNX1重组蛋白原核表达载体pGEX-LNX1,在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达重组蛋白,表达产物经GSTrap FF纯化,并通过体外泛素化(in vitrou... 详细信息

目的:在大肠杆菌中表达重组人泛素连接酶LNX1,并研究其对钾离子通道蛋白Kv1.4的泛素化作用。方法:构建人LNX1重组蛋白原核表达载体pGEX-LNX1,在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达重组蛋白,表达产物经GSTrap FF纯化,并通过体外泛素化(in vitroubiquitination)方法测定其泛素连接酶活性,同样用体外泛素化方法研究其对含有Kv1.4的C端的人工底物的泛素化。结果:获得了纯化的有泛素连接酶活性的重组人LNX1蛋白,重组LNX1可以在体外泛素化体系中泛素化含有Kv1.4的C端的人工底物。结论:重组人LNX1原核表达成功,具有泛素连接酶活性,并催化Kv1.4的泛素化。

关键词：泛素连接酶表达酶活性测定 LNX1 Kv1.4

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生长因子受体结合蛋白7(Grb7)研究进展

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基础医学与临床 2011年第4期31卷 467-470页

作者：张丹高友鹤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005

Grb7蛋白是Grb7蛋白家族的成员之一,该蛋白有3种结构区域:N末端富含脯氨酸,中间结构域与线虫(Caenorhabditis elegans)的MIG-10蛋白有着很高的同源性,C末端为SH2结构域。Grb7通过3种结构域尤其是SH2结构域,参与细胞各种信号传导途径。... 详细信息

Grb7蛋白是Grb7蛋白家族的成员之一,该蛋白有3种结构区域:N末端富含脯氨酸,中间结构域与线虫(Caenorhabditis elegans)的MIG-10蛋白有着很高的同源性,C末端为SH2结构域。Grb7通过3种结构域尤其是SH2结构域,参与细胞各种信号传导途径。研究其不同结构域在肿瘤细胞中所发挥的作用,将对Grb7高表达的肿瘤治疗产生重要影响。

关键词： Grb7 结构域

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人源DTD蛋白激活人神经母细胞瘤细胞非选择性阳离子通道

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基础医学与临床 2009年第2期29卷 139-143页

作者：朱镜羲阳洪波于晓霞郝维鲍光宏曹济民龚燕华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系北京100005

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜... 详细信息

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜片钳技术检测SH-SY5Y细胞全细胞电位。结果h-DTD具有体外脱酰酶活性,并在脑组织中高表达。在h-DTD蛋白存在的情况下,游离的D-氨基酸及L谷-氨酸能激活谷氨酸敏感的非选择性阳离子通道,导致细胞膜通透性增加。结论在神经系统,h-DTD蛋白可能通过维持游离D-氨基酸的浓度来影响非选择性阳离子通道的功能。

关键词：人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶表达谱非选择性阳离子通道

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NADE与MATH2蛋白相互作用的研究

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中国分子心脏病学杂志 2009年第2期9卷 75-78页

作者：温见燕龚燕华王程阴彬潘琳于长安柯元南中日友好医院全国中西医结合心血管病中心北京100029 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室北京10005 北京大学医学部生理与病理生理学系 100191 中日友好医院临床医学研究所北京100029

目的探讨NADE与MATH-2蛋白之间相互作用及MATH-2对NADE蛋白功能的调控效应。方法用GST-pulldown与免疫共沉淀(CoIP)和细胞共定位方法验证NADE与MATH-2蛋白之间的相互作用,用通过流式细胞仪检测蛋白相互作用对凋亡的影响。结果NADE与MRTH... 详细信息

目的探讨NADE与MATH-2蛋白之间相互作用及MATH-2对NADE蛋白功能的调控效应。方法用GST-pulldown与免疫共沉淀(CoIP)和细胞共定位方法验证NADE与MATH-2蛋白之间的相互作用,用通过流式细胞仪检测蛋白相互作用对凋亡的影响。结果NADE与MRTH2蛋白存在相互作用,这两个蛋白能共定位于SH-SY5Y细胞的胞浆中。二者之间的相互作用能够降低UV引起的细胞凋亡。结论研究首次证实了NADE与MATH2之间的相互作用,发现该相互作用可能通过干扰NADE对紫外线诱发的细胞凋亡产生影响。

关键词： NADE MATH2 相互作用

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验证性筛选PDZ结构域结合配体文库快速研究HtrA2/Omi PDZ结构域的结合特性

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中国科学（C辑） 2007年第1期37卷 107-116页

作者：马素参宋婀莉高诗娟田瑞高友鹤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室蛋白质组学研究中心病理生理学系北京100005

HtrA2/Omi是一种线粒体丝氨酸蛋白酶,在哺乳动物细胞中具有双重功能,即诱导细胞凋亡和参与维持线粒体活性的动态平衡.PDZ结构域是最重要的蛋白质相互作用结构域之一,参与多种生物学过程,如细胞信号转导、蛋白质降解、细胞骨架组织等.最... 详细信息

HtrA2/Omi是一种线粒体丝氨酸蛋白酶,在哺乳动物细胞中具有双重功能,即诱导细胞凋亡和参与维持线粒体活性的动态平衡.PDZ结构域是最重要的蛋白质相互作用结构域之一,参与多种生物学过程,如细胞信号转导、蛋白质降解、细胞骨架组织等.最近研究发现,HtrA2/Omi蛋白的PDZ结构域与配体的相互作用,可以调节HtrA2/Omi蛋白自身的水解酶活性.以HtrA2/Omi PDZ结构域为研究对象,用酵母双杂交系统验证性筛选PDZ结构域结合配体文库,快速研究该结构域的结合特性,并在人类全蛋白质组范围内预测并发现该结构域新的相互作用蛋白,最后分析这些新的相互作用所能够形成的最小相互作用网络来评估其可信度.研究结果揭示了HtrA2/Omi PDZ结构域新的结合特性,即:不仅能够结合已报道的II类PDZ配体而且还可以结合I类和III类PDZ配体,并且配体-3位氨基酸具有一定范围内的可变性.而且,发现了7个新的HtrA2/Omi PDZ结构域相互作用蛋白,为进一步阐明HtrA2/Omi蛋白的生物学功能提供了重要线索.同时证明了验证性筛选目的结构域结合配体文库,这一结构域结合特性研究新策略的实用性和高效性.

关键词： HtrA2/Omi PDZ结构域结构域结合特性验证性筛选蛋白质相互作用生物信息学

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PICK1:一个功能多样的药靶蛋白

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第9期23卷 697-705页

作者：宋婀莉高友鹤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室蛋白质组学研究中心病理生理学系北京100005

蛋白质是生命功能的执行者.生命体中某些关键蛋白的功能异常往往是导致疾病发生的根本原因.这些疾病相关蛋白极有可能成为药物靶点,为新药研发和疾病治疗提供重要线索.PICK1蛋白(protein interacting with Cαkinase1)结合能力广泛、功... 详细信息

蛋白质是生命功能的执行者.生命体中某些关键蛋白的功能异常往往是导致疾病发生的根本原因.这些疾病相关蛋白极有可能成为药物靶点,为新药研发和疾病治疗提供重要线索.PICK1蛋白(protein interacting with Cαkinase1)结合能力广泛、功能多样以及在多种重要疾病(如:癌症、精神分裂症、疼痛、帕金森综合症等)的发生发展过程中发挥潜在的作用,使其成为一个可能的药靶蛋白.PICK1与绝大多数配体蛋白的相互作用是通过其PDZ结构域与配体C末端区域的结合介导的,使PICK1的PDZ结构域成为一个潜在的药物靶点.因此,可以利用生物小分子物质特异性地结合PICK1的PDZ结构域,干扰或阻断PICK1与配体蛋白的天然相互作用,最终达到治疗相关疾病的目的.

关键词： PICK1(protein interacting with Cαkinase 1) PDZ结构域药物靶点阻断性多肽

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中国南方健康女性跟骨超声骨密度测量评估

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基础医学与临床 2007年第4期27卷 382-385页

作者：余跃刘伟朱自强徐成丽朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

目的了解我国南方地区健康女性跟骨超声骨密度随年龄、身高、体重等变化的规律及骨质疏松患病率的情况，为确定我国南方地区女性超声骨密度的参考值和骨质疏松症的诊断标准提供科学依据。方法用美国Lunar公司生产的Achilles Express... 详细信息

目的了解我国南方地区健康女性跟骨超声骨密度随年龄、身高、体重等变化的规律及骨质疏松患病率的情况，为确定我国南方地区女性超声骨密度的参考值和骨质疏松症的诊断标准提供科学依据。方法用美国Lunar公司生产的Achilles Express跟骨超声骨密度测定仪，测定2498名年龄在10～87岁的女性跟骨硬度指数（SI），每10岁为一个年龄组，69岁以上合并为1组，共7组，对相关数据进行相应的统计学分析。结果 SI随年龄增长呈现先升后降的变化趋势，骨峰值年龄出现在20～29岁年龄组。Pearson相关分析显示，SI与年龄呈显著负相关，与身高、体重呈正相关。骨质疏松患病率随年龄增加逐步升高。结论我国南方地区女性硬度指数与年龄、身高、体重均有显著相关性，本研究获得的硬度指数将为确定我国女性超声骨密度的参考值和骨质疏松症的诊断标准提供重要的参考依据。

关键词：跟骨骨质疏松症定量超声

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