检索结果-内蒙古大学图书馆

中华病理学杂志 2018年第9期47卷 714-718页

作者：丁菁李晴牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005 中国医学科学院神经科学中心

目的为了研究蛋白磷酸酶2A催化亚基C（PP2AC）在中枢神经系统中的功能与疾病相关性。探讨其在小鼠脑中与阿尔茨海默病患者脑中的表达情况。方法应用成年野生型小鼠全身组织、不同年龄野生型小鼠脑组织：阿尔茨海默病患者与正常人的额叶... 详细信息

目的为了研究蛋白磷酸酶2A催化亚基C（PP2AC）在中枢神经系统中的功能与疾病相关性。探讨其在小鼠脑中与阿尔茨海默病患者脑中的表达情况。方法应用成年野生型小鼠全身组织、不同年龄野生型小鼠脑组织：阿尔茨海默病患者与正常人的额叶皮质，分别制作石蜡切片和提取组织蛋白。通过免疫组织化学染色检测PP2AC在小鼠各年龄不同脑区和阿尔茨海默病患者及正常人脑样本中的表达：应用免疫印迹法检测PP2AC在小鼠全身各器官和各年龄段大脑皮质中的表达。结果在成年小鼠各器官中，PP2AC在中枢神经系统中的表达丰度最高；从胚胎第18．5天到出生后2年的小鼠脑组织中PP2AC在不同脑区呈显著的时空特异性表达模式，且PP2AC在大脑皮质呈年龄相关性表达升高的趋势。与正常人样本相比较，阿尔茨海默病患者额叶皮质中Aβ1-42表达和Tau蛋白磷酸化水平升高，而PP2AC明显减少。结论PP2AC在小鼠脑中以及在阿尔茨海默病患者脑中表达降低的时空特异性表达模式，提示PP2AC在中枢神经系统中有重要作用，且PP2AC表达下降可能与阿尔茨海默病相关。

关键词：阿尔茨海默病脑脑图年龄因素蛋白磷酸酶

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长链非编码RNA Gm15577参与小鼠小脑神经元增殖与分化

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中华病理学杂志 2015年第7期44卷 504-508页

作者：岳永松张伟龙刘春英牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所神经科学中心北京协和医学院基础学院病理学系 100005 北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室

目的鉴定新的参与奈美亨综合征（NBS）小鼠模型中与小脑发育缺陷相关的长链非编码RNA（1ncRNA），并探讨其与小脑增殖分化相关的功能。方法利用芯片技术分析野生型（野生组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠及Nbs1神经元特异性敲除（突变组，Nbsl^CN... 详细信息

目的鉴定新的参与奈美亨综合征（NBS）小鼠模型中与小脑发育缺陷相关的长链非编码RNA（1ncRNA），并探讨其与小脑增殖分化相关的功能。方法利用芯片技术分析野生型（野生组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠及Nbs1神经元特异性敲除（突变组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠小脑中RNA的表达差异；利用即时荧光定量PCR技术对芯片结果加以验证；针对目的RNA，检测其全身表达及小脑中表达模式、细胞内定位以及对母基因的表达调控模式。结果IncRNA Gm15577是由神经生长调节因子一1（Negrl）基因内部的内含子区反向转录而成，特异性表达于小脑，且在其发育过程中呈动态变化趋势，而Nbs1缺失之后整体表达水平显著降低；同时，与未分化期比较，分化后的小鼠小脑原代神经前体细胞中Gm15577及其母基因Negrl均有显著升高；Gm15577敲低之后导致Negr1以及小脑增殖分化相关因子Shh与β-catenin在RNA水平的表达显著下调；人髓母细胞瘤临床样本数据分析表明Negr1基因在正常人群与肿瘤患者之间有显著的表达差异。结论从神经特异性敲除Nbs1小鼠模型出发报道了一个新的与小鼠小脑发育相关的IncRNA Gm15577，初步结果表明Gm15577通过调控Negr1进而影响小脑神经元增殖与分化进程中的Shh与β—catenin信号通路，其基因行为异常有可能与髓母细胞瘤发病有一定的相关性。

关键词：小脑 Nbs1 细胞增殖细胞分化长链非编码RNA

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异质性细胞核核糖蛋白A2B1在小鼠小脑发育与人髓母细胞瘤中的表达

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中华病理学杂志 2019年第9期48卷 694-699页

作者：赵顺莉赵赋李晴张晶张至玮李春德刘丕楠佟伟民牛亚梅中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系中国医学科学院分子病理中心100005 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科 100050

目的探讨异质性细胞核核糖蛋白(HNRNP)A2B1在小鼠小脑发育及髓母细胞瘤中的表达模式及意义。方法从数据库查询小鼠小脑及人脑中基因的RNA水平。免疫印迹实验与免疫组织化学实验检测不同年龄C57BL/6野生型小鼠小脑中HNRNPA2B1的蛋白水平... 详细信息

目的探讨异质性细胞核核糖蛋白(HNRNP)A2B1在小鼠小脑发育及髓母细胞瘤中的表达模式及意义。方法从数据库查询小鼠小脑及人脑中基因的RNA水平。免疫印迹实验与免疫组织化学实验检测不同年龄C57BL/6野生型小鼠小脑中HNRNPA2B1的蛋白水平。通过免疫组织化学实验检测对照人小脑样本与人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的蛋白水平。m6A-IP-qPCR检测Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA m6A甲基化水平;利用人髓母细胞瘤Daoy细胞检测蛋白酶抑制剂MG132对HNRNPA2B1蛋白丰度的影响。结果小鼠小脑发育期HNRNPA2B1的RNA及总体蛋白水平高于成年小鼠小脑;原位水平上HNRNPA2B1低表达于含有增殖细胞的外颗粒层,而在浦肯野细胞与分子层细胞中高表达。HNRNPA2B1在髓母细胞瘤中的RNA水平显著高于正常人小脑,但免疫组织化学染色阳性强度明显降低,且差异具有统计学意义(P<0.05)。人髓母细胞瘤及Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA上含有m6A修饰;10 μmol/L或20 μmol/L的MG132处理均可引起Daoy细胞中HNRNPA2B1蛋白水平升高。结论HNRNPA2B1在小鼠小脑发育过程中的表达呈动态变化;与对照组相比,人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的RNA水平显著上升,而蛋白水平明显降低,提示HNRNPA2B1可能与小脑发育及髓母细胞瘤进程相关。HNRNPA2B1 RNA m6A修饰及蛋白的泛素化修饰可能是导致其在髓母细胞瘤中RNA丰度升高而蛋白水平降低的原因。

关键词：髓母细胞瘤核糖核蛋白类小脑皮质动物替代试验小鼠,近交C57BL

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与小鼠小脑发育相关的一种长非编码RNA Gm2694的鉴定

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基础医学与临床 2016年第4期36卷 492-497页

作者：刘春英张伟龙牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系中国医学科学院基础医学研究所神经科学中心北京100005 北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的鉴定与小鼠小脑发育相关的长非编码RNA,并验证其各剪接变异体的存在。方法用芯片技术分析小鼠小脑发育不同阶段RNA的表达差异;用实时定量PCR技术对芯片结果加以验证;针对目的 RNA,验证其各剪接变异体的存在及在小鼠小脑中的表达量... 详细信息

目的鉴定与小鼠小脑发育相关的长非编码RNA,并验证其各剪接变异体的存在。方法用芯片技术分析小鼠小脑发育不同阶段RNA的表达差异;用实时定量PCR技术对芯片结果加以验证;针对目的 RNA,验证其各剪接变异体的存在及在小鼠小脑中的表达量。结果 1)长非编码RNA Gm2694在小鼠小脑发育过程中呈动态变化趋势;2)其在小鼠小脑中特异性表达;3)在小鼠小脑中检测到Gm2694有8种表达水平各不相同的剪接变异体,其中除Ensembl数据库预测的7个之外,发现了1个新的表达于小脑的剪接变异体。结论 Gm2694是一种在小鼠小脑特异性表达的长非编码RNA,存在8种表达量各不相同的剪接变异体。

关键词：长非编码RNA Gm2694 小鼠小脑发育剪接变异体

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植物血凝素-ECM830细胞融合法融合黑色素瘤细胞

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中国医学科学院学报 2013年第5期35卷 515-518页

作者：米蕊芳刘福生金贵善首都医科大学附属北京天坛医院北京市神经外科研究所脑肿瘤研究中心北京100050 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理学系北京100005

目的以黑色素瘤细胞为模型,研究高效率肿瘤细胞融合方法。方法慢病毒荧光标记黑色素瘤细胞,ECM830电融合法及改良的植物血凝素(PHA)-ECM830电融合仪细胞融合法融合黑色素瘤细胞,流式分选黑色素瘤融合细胞,碘化亚啶染色法测定DNA含量。... 详细信息

目的以黑色素瘤细胞为模型,研究高效率肿瘤细胞融合方法。方法慢病毒荧光标记黑色素瘤细胞,ECM830电融合法及改良的植物血凝素(PHA)-ECM830电融合仪细胞融合法融合黑色素瘤细胞,流式分选黑色素瘤融合细胞,碘化亚啶染色法测定DNA含量。结果荧光标记带有绿色和红色荧光的黑色素瘤细胞,通过PHAECM830细胞融合法获得黑色素瘤融合细胞,细胞融合效率较ECM830电融合法从0.50%提升到7.18%,流式分选得到单一的黑色素瘤融合细胞,DNA含量分析显示黑色素瘤融合细胞的DNA含量翻倍,体内外实验表明黑色素瘤融合细胞增殖速度降低。结论运用改良的PHA-ECM830细胞融合法成功高效得到黑色素瘤融合细胞,黑色素瘤融合细胞增殖速度降低。

关键词：植物血凝素 ECM830 细胞融合法黑色素瘤细胞

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YTHDC1基因在小鼠小脑发育及人髓母细胞瘤组织中的动态表达

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基础医学与临床 2019年第7期39卷 1001-1006页

作者：吴高锒赵赋张晶李春德牛亚梅刘丕楠佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系/中国医学科学院分子病理中心北京100005 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科北京100050

目的探讨RNA m^6A甲基化结合蛋白(YTH结构域包含蛋白1,YTHDC1)在小脑发育和髓母细胞瘤中的表达模式及其可能发挥的作用。方法分别以小鼠小脑、人髓母细胞瘤和细胞系为研究对象,在转录组测序结果的基础上,分析RNA水平表达模式;用免疫印... 详细信息

目的探讨RNA m^6A甲基化结合蛋白(YTH结构域包含蛋白1,YTHDC1)在小脑发育和髓母细胞瘤中的表达模式及其可能发挥的作用。方法分别以小鼠小脑、人髓母细胞瘤和细胞系为研究对象,在转录组测序结果的基础上,分析RNA水平表达模式;用免疫印迹和免疫组化检测YTHDC1蛋白的表达;在Daoy细胞中敲低甲基转移酶METTL3并通过m^6A-IP-qPCR方法检测YTHDC1 RNA甲基化水平及对YTHDC1蛋白丰度的影响。结果小鼠小脑发育过程中YTHDC1 RNA水平未见明显改变,蛋白表达显著下降(P<0.05)。YTHDC1在P7的小脑内颗粒神经元高表达,而在P60小脑中表达降低。与正常或癌旁组织相比,YTHDC1在肿瘤组织中RNA水平未见明显改变,蛋白水平总体偏低(P<0.05)。YTHDC1在髓母细胞瘤中RNA m^6A甲基化水平显著升高(P<0.05),而METTL3敲低引起YTHDC1 m^6A甲基化水平下降以及蛋白表达上调。结论小鼠小脑发育及人髓母细胞瘤中YTHDC1蛋白表达变化显著,这一过程受到m^6A甲基化介导的转录后调控作用,进而影响小脑发育及髓母细胞瘤的发生。

关键词： RNA m^6A甲基化 YTHDC1 小脑发育髓母细胞瘤

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可移植人髓母细胞瘤PUMC-MBT1瘤株的建立与鉴定

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基础医学与临床 2022年第9期42卷 1339-1343页

作者：王世尊张丹葛明冯海凉刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞中心北京100005 首都医科大学附属北京儿童医院国家儿童医学中心神经外科北京100045

目的建立细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX)体内可连续稳定传代的人髓母细胞瘤研究模型,并分析其生长和形态特点、病理特征。方法采用自建人髓母细胞瘤细胞系(PUMC-MB1)移植于SCID小鼠右侧腋窝,接种细胞数为5×10^(6)个/只。当细胞系... 详细信息

目的建立细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX)体内可连续稳定传代的人髓母细胞瘤研究模型,并分析其生长和形态特点、病理特征。方法采用自建人髓母细胞瘤细胞系(PUMC-MB1)移植于SCID小鼠右侧腋窝,接种细胞数为5×10^(6)个/只。当细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX)长径增长至1.5 cm时处死小鼠,收集肿瘤组织并进行体内传代操作,重复传代10次,于第10代时观察肿瘤生长特点及荷瘤小鼠的生存时间,收集肿瘤进行病理分析。结果CDX来源的人髓母细胞瘤瘤株已在体内连续传代至10代(命名为PUMC-MBT1),成瘤率为100%,在接种第14天左右可触及皮下结节,第29天移植瘤长径达到1.5 cm左右,荷瘤小鼠平均寿命50 d。病理学检查结果显示移植瘤为经典型髓母细胞瘤,Ki-67阳性(80%~90%),Syn阳性(40%~50%),NeuN阳性(20%~30%)。结论本课题组成功建立了人髓母细胞瘤移植瘤瘤株PUMC-MBT1,造模简单便捷,成瘤率高,病理学性质稳定,保持了经典型髓母细胞瘤的特性,为髓母细胞瘤研究提供了更多的体内研究模型。

关键词：髓母细胞瘤细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX) 瘤株

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中国人脑组织库标准化操作方案

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解剖学报 2017年第3期48卷 334-341页

作者：仇文颖马超包爱民竺可青黄越严小新章京钟春玖周江宁申勇郑晓瑛张力伟舒友生唐北沙张振馨段树民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院人体解剖学与组织学胚胎学系北京100005 浙江大学医学院神经生物学系杭州310058 澳大利亚新南威尔士大学医学部医学科学系中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410014 北京大学医学部病理学系北京100191 复旦大学附属中山医院神经内科上海200032 中国科技大学生命科学院合肥230071 北京大学-APEC健康科学研究院/人口研究所/WHO合作中心北京100871 首都医科大学北京天坛医院北京100050 北京师范大学脑与认知研究院北京100875 中南大学湘雅医院长沙410008 中国医学科学院北京协和医院神经内科北京100730

人脑组织库是神经科学和神经系统疾病研究的基础,中国的人脑组织库建设尚处于起步阶段。为了推动国内人脑组织库建设,实现资源共享,国内10家医学院所共同发起和成立了"中国人脑组织库协作联盟"。参考国内外同行实践经验,结合... 详细信息

人脑组织库是神经科学和神经系统疾病研究的基础,中国的人脑组织库建设尚处于起步阶段。为了推动国内人脑组织库建设,实现资源共享,国内10家医学院所共同发起和成立了"中国人脑组织库协作联盟"。参考国内外同行实践经验,结合国内现有脑组织库的现状,联盟学术委员会组织修订了符合中国国情的人脑组织库标准化操作方案,为在我国建立具备国际水准的人脑组织库标准化平台网络和相应的管理规范奠定基础。

关键词：人脑组织库神经科学中国

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荧光探针及流式分选法追踪胰腺癌细胞增殖的研究

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医学研究杂志 2016年第6期45卷 29-32页

作者：米蕊芳潘春晓张俊文刘福生金贵善首都医科大学附属北京天坛医院、北京市神经外科研究所脑肿瘤研究中心 100050 中国医学科学院基础医学研究所/清华大学医学部北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的应用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(5,6-carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE)荧光探针及流式分选的方法追踪胰腺癌细胞增殖情况。方法应用低血清培养法(0.5%)对细胞进行细胞周期同步化;利用CFSE染色追踪胰腺... 详细信息

目的应用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(5,6-carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE)荧光探针及流式分选的方法追踪胰腺癌细胞增殖情况。方法应用低血清培养法(0.5%)对细胞进行细胞周期同步化;利用CFSE染色追踪胰腺癌全基因组突变文库细胞增殖;并于一定的时间点,应用流式分选法分选增殖速度减慢细胞群;通过CCK-8法检测分选前后的细胞增殖曲线。结果 CFSE探针可均匀染色胰腺癌细胞,呈现较强的绿色荧光;在CFSE荧光探针染色后的不同时间点(0、48、96及144h),胰腺癌细胞荧光强度呈现逐级衰减趋势;应用细胞饥饿法对细胞进行同步化后,细胞呈现更好的同步化衰减趋势;在一定的荧光衰减时间点(144h),通过流式分选从细胞突变文库中获得了胰腺癌增殖减慢细胞群;CCK-8实验显示,相对于分选前的细胞,分选出的荧光强度强的胰腺癌细胞群增殖速度明显减慢(P=0.006)。结论 CFSE荧光探针可很好追踪胰腺癌细胞增殖,结合流式分选法可获得肿瘤突变文库中的增殖减慢细胞群。

关键词：胰腺癌荧光探针流式分选 ASPC-1细胞

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