检索结果-内蒙古大学图书馆

稳定敲除Mcart⁃1下调RAW264.7巨噬细胞增殖能力和氧化磷酸化水平

基础医学与临床 2023年第4期43卷 568-575页

作者：赵永晶仇佳星张迪雅郭泓江王钰铖鞠瑞郭磊中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、药理学系北京100005

目的基于CRISPR/Cas9原理构建Mcart-1稳定敲除的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株RAW264.7,检测其细胞增殖能力和能量代谢水平。方法用Cas9慢病毒和sgRNA慢病毒分两步感染RAW264.7巨噬细胞,并挑选单克隆细胞:qPCR和Western blot检测Cas9表... 详细信息

目的基于CRISPR/Cas9原理构建Mcart-1稳定敲除的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株RAW264.7,检测其细胞增殖能力和能量代谢水平。方法用Cas9慢病毒和sgRNA慢病毒分两步感染RAW264.7巨噬细胞,并挑选单克隆细胞:qPCR和Western blot检测Cas9表达水平和Mcart-1敲除效果;单细胞测序分析突变位点;细胞能量代谢分析仪Seahorse检测细胞耗氧速率(OCR)和能量代谢表型;试剂盒测定细胞内总ATP含量;细胞计数仪计数和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色检测细胞增殖。结果成功构建Mcart-1稳定敲除的RAW264.7细胞株(记为Mcart-1^(-/-)-RAW264.7);该细胞株中Mcart-1发生移码突变;与野生型RAW264.7细胞系(记为RAW264.7)相比,Mcart-1^(-/-)-RAW264.7细胞氧气消耗速率(OCR)下降,胞外酸化速率(ECAR)升高;与RAW264.7细胞相比,Mcart-1^(-/-)-RAW264.7细胞内总ATP含量下降(P<0.05),线粒体ATP产生速率下降(P<0.01),而糖酵解ATP产生速率升高(P<0.01);与RAW264.7细胞相比,Mcart-1^(-/-)-RAW264.7细胞增殖能力下降(P<0.001)。结论稳定敲除Mcart-1后RAW264.7细胞增殖能力和氧化磷酸化水平均下降。该细胞株可作为探索肿瘤微环境细胞功能的重要工具。

关键词： CRISPR/Cas9 巨噬细胞 Mcart-1 代谢表型

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面部精细结构解剖在注射美容操作培训中的意义

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中国美容整形外科杂志 2024年第11期35卷 676-679页

作者：张艺璇孙怡馨陈震王乃利杜奉舟王炳寒黄久佐俞楠泽龙笑中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院整形外科北京100032 中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005

面部注射美容作为整形美容外科的重要项目之一,目前缺乏国家规定的规范操作培训。北京协和医院整形外科与北京协和医学院解剖学系合作,将面部精细结构解剖引入注射美容操作培训。在培训中,特别关注面部脂肪垫与肌肉层次,以及神经血管分... 详细信息

面部注射美容作为整形美容外科的重要项目之一,目前缺乏国家规定的规范操作培训。北京协和医院整形外科与北京协和医学院解剖学系合作,将面部精细结构解剖引入注射美容操作培训。在培训中,特别关注面部脂肪垫与肌肉层次,以及神经血管分布,从而加强对注射技术的理解,提高操作有效性和安全性,以及减少术后并发症,并最终提升患者满意度。另外,通过该形式的培训,年轻医师能够在提高临床参与度的同时拓展科研道路。

关键词：面部注射美容整形外科面部解剖

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丹参细胞色素P450 SmCYP72A395基因克隆及功能研究

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药学学报 2025年第4期60卷 1166-1174页

作者：孙琳可张建红王喆陈泓宇张文颖郑文芳马艺沔何柳孙稚颖罗红梅山东中医药大学药学院山东济南250355 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100193 河北省沧州市中心医院药学部河北沧州061001 中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050

基于丹参(Salvia miltiorrhiza)基因组与转录组数据,克隆获得在丹参根周皮中高丰度表达的细胞色素P450基因,命名为SmCYP72A395。采用多种在线分析工具对其编码蛋白质的理化性质、亚细胞定位、蛋白质二级结构及保守结构域进行预测分析,发... 详细信息

基于丹参(Salvia miltiorrhiza)基因组与转录组数据,克隆获得在丹参根周皮中高丰度表达的细胞色素P450基因,命名为SmCYP72A395。采用多种在线分析工具对其编码蛋白质的理化性质、亚细胞定位、蛋白质二级结构及保守结构域进行预测分析,发现SmCYP72A395基因编码区全长为1578 bp,编码525个氨基酸残基,蛋白质分子量为59.9 kDa,理论等电点为8.68,具有一个跨膜结构域。利用实时荧光定量PCR技术检测发现SmCYP72A395在丹参花、叶和根的周皮部位表达量较高。为进一步研究该基因的生物学功能,分别构建了SmCYP72A395过表达(SmCYP72A395-OE)和RNA干扰(SmCYP72A395-RNAi)转基因毛状根材料,并利用UPLC方法检测阳性株系中丹参酮类化合物的含量。与对照株系(转化空载体的毛状根株系)相比,发现SmCYP72A395-OE株系中,二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I及丹参酮IIA的含量均显著低于对照株系;而在SmCYP72A395-RNAi株系中,二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I的含量显著高于对照株系。以上结果表明SmCYP72A395在丹参酮类化合物的合成积累过程起负调控作用。本研究结果为进一步阐明丹参酮类化合物生物合成及调控途径奠定基础。

关键词：丹参细胞色素P450酶 SmCYP72A395 丹参酮类化合物生物合成调控

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基于医疗大数据开展药品上市后监测与评价研究的偏倚及其控制

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中国药物警戒 2022年第3期19卷 239-243页

作者：王丽王晓墨杨晨露中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病学和卫生统计学系北京100005

目的介绍国内外基于医疗大数据库开展上市后药品监测与评价研究的现状、存在的偏倚及其可能的控制方法,为我国药品风险监测与管理提供参考。方法系统总结欧美发达国家基于医疗大数据开展药品上市后监测与评价的具体实践,分析我国存在的... 详细信息

目的介绍国内外基于医疗大数据库开展上市后药品监测与评价研究的现状、存在的偏倚及其可能的控制方法,为我国药品风险监测与管理提供参考。方法系统总结欧美发达国家基于医疗大数据开展药品上市后监测与评价的具体实践,分析我国存在的差距;评价在研究设计、数据收集与标准化、统计分析等方面存在的问题及可以改进的方法;探讨我国目前面临的机遇与挑战。结果与结论欧美国家已经基于医疗大数据建立了高效、可持续的药品上市后监测警戒系统;充分考虑并控制研究设计、实施和统计分析中的潜在偏倚是确定药品与不良反应因果关系的前提;应借鉴欧美先进经验,完善和整合现有医疗大数据,开展药物流行病学方法学研究。

关键词：医疗大数据药品上市后监测选择偏倚信息偏倚混杂药物流行病学

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“健康日”在胃癌患者与普通人群中测量健康相关生活质量的比较研究

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中华肿瘤防治杂志 2023年第4期30卷 239-244页

作者：石钰霖杨晓莹王秋童王宝华万霞中国医学科学院基础医学研究所·北京协和医学院基础学院北京100005 中国疾病预防控制中心慢性非传染性疾病预防控制中心重点慢病防控实验室北京100050

目的比较健康相关生活质量(HRQOL)量表——“健康日”(HRQOL-5)测量胃癌患者与一般人群的差异,为该量表后续用于构建不同病种的健康状态权重提供依据。方法选取淮河流域14个县(区)在2020-01-01-2021-07-31确诊的670例胃癌新发病例纳... 详细信息

目的比较健康相关生活质量(HRQOL)量表——“健康日”(HRQOL-5)测量胃癌患者与一般人群的差异,为该量表后续用于构建不同病种的健康状态权重提供依据。方法选取淮河流域14个县(区)在2020-01-01-2021-07-31确诊的670例胃癌新发病例纳入病例组,按照1∶2匹配原则进行入户抽样调查选取1 340人纳入对照组。采用χ^(2)检验与Wilcoxon秩和检验比较2组间HRQOL的差异,Spearmen秩相关系数评价各条目间的相关关系,分别采用探索性因子分析与验证性因子分析揭示2组人群中HRQOL-5潜在结构的异同。结果病例组中报告健康状况为不好或非常不好比例,以及身体不健康日、精神不健康日、日常活动受限、自理活动受限的天数均高于对照组,均P<0.05。2组人群中,HRQOL-5各条目均具有相关性,r范围为0.15~0.82,P<0.05。其中日常活动受限与自理活动受限r值最大,病例组和对照组分别为0.79和0.82。HRQOL-5在2组人群中均能提取出两个公因子,分别命名为“一般健康状况”和“活动受限”,验证性因子分析显示模型适配度非常好,结构稳定。结论 HRQOL-5是胃癌患者及普通人群中测量HRQOL可靠的工具,提示未来可区分不同亚组人群的健康状态权重。

关键词：健康相关生活质量健康日胃癌普通人群

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经典名方中高良姜的本草考证

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中国实验方剂学杂志 2023年第5期29卷 94-103页

作者：孙园园冯剑魏建和詹志来刘洋洋中国医学科学院&北京协和医学院、药用植物研究所、海南分所、海南省南药资源保护与开发重点实验室海口570311 中国医学科学院&北京协和医学院、药用植物研究所、中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国中医科学院中药资源中心北京100700

通过查阅历代本草、医书并结合近现代文献资料,笔者对高良姜的名称、基原、学名沿革、产地、品质、采收加工和炮制等方面进行了系统考证。经考证可知,高良姜始载于《名医别录》,历代均以“高良姜”为正名;高良姜历代所用主流基原为姜科... 详细信息

通过查阅历代本草、医书并结合近现代文献资料,笔者对高良姜的名称、基原、学名沿革、产地、品质、采收加工和炮制等方面进行了系统考证。经考证可知,高良姜始载于《名医别录》,历代均以“高良姜”为正名;高良姜历代所用主流基原为姜科山姜属植物高良姜Alpinia officinarum,沿用至今,同属植物大高良姜A. galanga因名称和形态相近而经常混用;古代推崇儋州、雷州所产为佳,奉为道地,现主产于广东、广西、海南等地;近代以来总结其传统性状评价以红棕色、粗壮坚实、皮皱肉凸、味香辣、分枝少者为佳;古时高良姜多于二月、三月采收,现栽培品一般夏末秋初采收,野生品则在五月雨季前采收。历代炮制方法主要为净制和切制,尚有清炒或同辅料拌炒等。基于考证结果,建议开发含高良姜的古代经典名方时,采用姜科山姜属植物高良姜A. officinarum的根茎,净切后生品入药或根据处方炮制要求处理后入药。

关键词：高良姜本草考证经典名方学名沿革产地品质评价中药炮制

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ATF6调控生殖相关基因HSPA1L表达的分子机制

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基础医学与临床 2024年第1期44卷 37-42页

作者：汪媛媛朱席琳伍晓盼刘英中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、生物化学与分子生物学系北京100005

目的探究内质网应激活化转录因子6(ATF6)对生殖相关基因热休克蛋白A1样蛋白(HSPA1L)表达的影响并初步阐明其调控分子机制。方法在人胚肾细胞系HEK-293T中转染ATF6过表达质粒,RT-qPCR和Western blot验证过表达效率;利用雄性ATF6敲除小鼠... 详细信息

目的探究内质网应激活化转录因子6(ATF6)对生殖相关基因热休克蛋白A1样蛋白(HSPA1L)表达的影响并初步阐明其调控分子机制。方法在人胚肾细胞系HEK-293T中转染ATF6过表达质粒,RT-qPCR和Western blot验证过表达效率;利用雄性ATF6敲除小鼠睾丸组织转录物组测序信息,筛选ATF6下游5个生殖相关基因;双荧光素酶报告基因实验选择启动子活性较高的下游基因并检测过表达ATF6对其启动子活性的影响;通过gene-regulation预测ATF6和下游基因启动子可能的结合位点;RT-qPCR和Western blot检测在HEK-293T细胞中过表达ATF6对于下游基因表达的影响;利用凝胶迁移实验(EMSA)确定ATF6与下游基因启动子是否结合。结果转染后HEK-293T细胞中ATF6的mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.05)表达水平明显升高。转录物组测序及双荧光素酶报告基因实验筛选出ATF6下游的生殖相关基因HSPA1L。ATF6能够促进HSPA1L的截短启动子活性(P<0.001)。过表达ATF6后,HSPA1L的表达量明显升高(P<0.001)。差异均有统计学意义。ATF6蛋白能与HSPA1L的启动子DNA序列aagtcgtcac相结合。结论内质网应激的关键分子ATF6通过结合生殖相关基因HSPA1L的启动子调控后者表达水平,这将为预防或治疗与内质网应激(ERS)有关的男性不育的深入研究奠定基础。

关键词：活化转录因子6 热休克蛋白A1样蛋白男性生殖基因调控

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XRCC6调节RYBP表达的分子机制与功能

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医学研究杂志 2024年第12期53卷 31-36页

作者：刘薇佳李唐嫒陈修远夏婉娉陈等中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系 100005

目的研究X-射线修复交叉互补蛋白6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)结合和下调RING1和YY1结合蛋白(ring1 and YY1 binding protein,RYBP)表达的分子机制与功能。方法采用蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光方法分析XRCC6与RYBP之间... 详细信息

目的研究X-射线修复交叉互补蛋白6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)结合和下调RING1和YY1结合蛋白(ring1 and YY1 binding protein,RYBP)表达的分子机制与功能。方法采用蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光方法分析XRCC6与RYBP之间的相互作用;采用Western blot法检测XRCC6对RYBP表达水平的影响;采用Western blot法和蛋白质免疫共沉淀法检验XRCC6对RYBP蛋白稳定性的调节作用;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测XRCC6是否通过RYBP调节基因表达。结果内源性RYBP与XRCC6之间存在相互作用;XRCC6负性调节RYBP蛋白水平;过表达XRCC6促进RYBP的多聚泛素化和蛋白酶体降解,显著缩短其半衰期;XRCC6负调节H2AK119Ub1,通过调节RYBP抑制下游基因的表达。结论XRCC6结合并通过蛋白酶体途径下调RYBP表达,进而调节RYBP下游基因的表达。

关键词： XRCC6 RYBP 蛋白质相互作用蛋白酶体途径基因表达调节

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鼻窦炎-中耳炎-双肺弥漫支气管扩张

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中华结核和呼吸杂志 2022年第11期45卷 1117-1120页

作者：周王继赵新月刘雅萍郑姝颖徐凯峰田欣伦中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院呼吸与危重症医学科疑难重症及罕见病国家重点试验室北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学遗传学系北京100005 北京大学人民医院电镜室北京100044

原发性纤毛运动障碍(PCD)是一种罕见的常染色体隐性或X连锁相关的双等位基因变异遗传病,以纤毛运动障碍为特征。典型表现包括支气管扩张、分泌性中耳炎、鼻窦炎、内脏反位和不孕不育等,常因临床表现相似需与囊性纤维化(CF)鉴别。本文介... 详细信息

原发性纤毛运动障碍(PCD)是一种罕见的常染色体隐性或X连锁相关的双等位基因变异遗传病,以纤毛运动障碍为特征。典型表现包括支气管扩张、分泌性中耳炎、鼻窦炎、内脏反位和不孕不育等,常因临床表现相似需与囊性纤维化(CF)鉴别。本文介绍1例幼年起反复咳嗽、咳痰伴发热的青少年女性,有分泌性中耳炎、鼻窦炎病史,曾考虑诊断CF。后经基因测序发现PCD相关致病基因复合杂合变异,结合临床表现、影像学特点,最终诊断为PCD。

关键词：支气管扩张鼻窦炎青少年女性常染色体隐性囊性纤维化不孕不育分泌性中耳炎内脏反位

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中国60岁及以上老年人群累积体质指数与认知功能的关联

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中华医学杂志 2024年第46期104卷 4229-4239页

作者：王琬玥陈恕凤李建新曹杰黄克勇赵颖馨沈冲胡东生黄建凤顾东风鲁向锋刘芳超中国医学科学院、北京协和医学院、国家心血管病中心、阜外医院流行病研究部北京102300 山东第一医科大学、山东省医学科学院基础医学研究所济南250062 南京医科大学公共卫生学院南京211166 郑州大学公共卫生学院郑州450001 深圳大学公共卫生学院深圳518060 南方科技大学医学院深圳518055

目的分析我国60岁及以上老年人群累积体质指数(BMI)与认知功能的关联。方法研究对象来自中国动脉粥样硬化性心血管疾病风险预测研究(China-PAR),纳入于1992-1994年至2018-2021年至少参加2次体格检查并于2018-2021年参加认知功能调查的27... 详细信息

目的分析我国60岁及以上老年人群累积体质指数(BMI)与认知功能的关联。方法研究对象来自中国动脉粥样硬化性心血管疾病风险预测研究(China-PAR),纳入于1992-1994年至2018-2021年至少参加2次体格检查并于2018-2021年参加认知功能调查的27227名≥60岁老年人。采用简易智力状态检查量表(MMSE)测量认知评分,根据教育水平定义文盲人群MMSE≤17分、小学学历人群MMSE≤20分、中学或以上学历人群MMSE≤24分为认知功能受损。采用多元线性回归或多元logistic回归模型,分析总人群与60~64、65~69、70~74、≥75岁年龄段人群10年加权累积BMI与认知评分或认知功能受损的关联。采用限制性立方样条探讨暴露-反应关系。结果研究对象年龄为(72.3±5.8)岁,男性10639名(39.1%),MMSE得分(24.9±6.8)分,认知功能受损者4171例(15.4%)。总人群中,累积BMI280 kg/m^(2)时,随累积BMI增加,认知评分增加、认知功能受损风险降低(β=0.095,95%CI:0.060~0.130;OR=0.962,95%CI:0.946~0.978);累积BMI≥280 kg/m^(2)时,累积BMI与认知评分、认知功能受损风险的关联均无统计学意义(β=-0.105,95%CI:-0.212~0.001;OR=1.047,95%CI:0.992~1.102)。年龄分层分析显示,75岁老年人群中,累积BMI与认知评分及认知功能受损均呈现潜在“U型关联”;当累积BMI280 kg/m^(2)时,60~64、65~69、70~74岁年龄组累积BMI每增加10 kg/m^(2),与认知功能受损关联OR值(95%CI)分别为0.983(0.904~1.069)、0.953(0.919~0.987)和0.951(0.922~0.982);累积BMI≥280 kg/m^(2)时,OR值(95%CI)分别为1.548(1.134~2.186)、1.037(0.938~1.139)和1.109(1.014~1.208)。而在≥75岁人群中,累积BMI增加与认知评分增加、认知功能受损风险降低相关(β=0.132,95%CI:0.074~0.190;OR=0.961,95%CI:0.944~0.979)。结论总人群中,10年累积BMI280 kg/m^(2)时,随累积BMI增加,认知功能受损风险降低,10年累积BMI≥280 kg/m^(2)时,累积BMI与认知功能的关联在不同年龄段老年人中存在差异,提示应针对不同年龄老年人提供个体化体重管理建议。

关键词：老年人体质指数认知认知功能受损年龄因素前瞻性队列研究

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