检索结果-内蒙古大学图书馆

修饰后中国山东地方株HPV16 E6E7基因的转化活性检测及免疫原性研究

中华微生物学和免疫学杂志 2002年第4期22卷 427-432页

作者：许雪梅张明策罗利群刘晓娟朱明昭司静懿郭秀婵宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室中国医学科学院中国协和医科大学预防医学科学院病毒所

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的... 详细信息

目的　利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型 (HPV16 )E6E7基因 ,研制HPV16DNA疫苗。方法　定点突变E6的终止密码 ,并保证E7读码框架不变 ;定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的第 2 4位氨基酸。突变修饰后的基因命名为fmE6E7。PCR扩增fmE6E7,重组入pLNCX载体 ,脂质体法转染 3T3细胞 ,免疫荧光组织化学及Westernblot检测转染细胞蛋白的表达。经软琼脂集落培养法和BALB c裸鼠皮下接种法检测fmE6E7的转化活性。然后PCR扩增fmE6E7,构建pVR10 12 fmE6E7真核表达质粒 ,于C5 7BL 6小鼠肌肉内直接进行裸DNA免疫 ,51 Cr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性 ,间接ELISA法检测免疫鼠血清中E7特异性抗体。结果　测序证实获得了预期的突变结果。pLNCX fmE6E7转染细胞体外软琼脂培养 3周未见集落形成 ;裸鼠皮下接种 2月后未见移植瘤形成 (0 3)。免疫鼠获得了较好的E7特异性的抗体E和抗原特异性的CTL。结论　修饰后E6E7基因可融合表达 ,转化活性消除的同时还可诱发特异的细胞免疫和体液免疫 ,表明中国山东地方株的E6E7基因可作为HPV16治疗性DNA疫苗的靶基因。

关键词：免疫原性人乳头瘤病毒16型 E6基因 E7基因 DNA疫苗细胞毒性T淋巴细胞宫颈癌

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病原体抗原对γδT细胞细胞毒活性及细胞因子产生的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 1998年第4期18卷 256-261页

作者：何维林颖李刚于松涛张素梅刘庆丰杜桂书李静中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院100005

目的体外研究病原体抗原活化的γδＴ细胞的细胞毒和细胞因子产生的反应性以及对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的影响，以期进一步澄清γδＴ细胞的功能。方法用洗淘法从外周血中分离纯化出γδＴ细胞，在体外探讨植物血凝素和结核分枝杆菌（Ｍ．... 详细信息

目的体外研究病原体抗原活化的γδＴ细胞的细胞毒和细胞因子产生的反应性以及对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的影响，以期进一步澄清γδＴ细胞的功能。方法用洗淘法从外周血中分离纯化出γδＴ细胞，在体外探讨植物血凝素和结核分枝杆菌（Ｍ．ｔｂ）、人类６型疱疹病毒（ＨＨＶ－６）和阴道毛滴虫（ＴＶ）病原体抗原对γδＴ细胞的细胞毒活性和细胞因子产生的影响，并采用细胞隔离渗透培养法观察γδＴ细胞分泌的细胞因子对ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖的作用。结果Ｍ．ｔｂ比ＴＶ可更强地促进γδＴ细胞对Ｋ５６２细胞的杀伤活性。Ｍ．ｔｂ和ＨＨＶ－６可刺激γδＴ细胞主要分泌ＴＨ１型细胞因子ＩＦＮ－γ，而ＴＶ可刺激γδＴ细胞优势产生ＴＨ２型细胞因子ＩＬ－６。经抗原活化的γδＴ细胞分泌的可溶性因子可促进ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖。结论细胞内感染的病原体是激发γδＴ细胞产生ＴＨ１型细胞因子的诱导因子，并对其杀伤活性有所增强，而细胞外感染病原体可激发γδＴ细胞产生ＴＨ２型的细胞因子。

关键词：抗原病原体 γδT细胞细胞因子细胞毒性

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一种对阿尔茨海默病模型小鼠认知和记忆功能具有明显改善作用的中药方剂

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中国中药杂志 2003年第8期28卷 751-754页

作者：孙华胡愉张建民栗世铀何维中国医学科学院协和医科大学协和医院中医科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的 :探索对阿尔茨海默病 (AD)病人认知和记忆能力具有明显改善作用的中药方剂。方法 :通过Balb/c小鼠侧脑室微量注射聚集态 β 淀粉样多肽 (β AP2 5 35) ,建立模拟AD的小鼠动物模型 ,并通过行为学实验和脑组织组织化学检测 ,研究了... 详细信息

目的 :探索对阿尔茨海默病 (AD)病人认知和记忆能力具有明显改善作用的中药方剂。方法 :通过Balb/c小鼠侧脑室微量注射聚集态 β 淀粉样多肽 (β AP2 5 35) ,建立模拟AD的小鼠动物模型 ,并通过行为学实验和脑组织组织化学检测 ,研究了中医经典药方柴胡加龙骨牡蛎汤、当归芍药散和作者自己研制的两种中药复方CHPI和CHPⅡ对该小鼠模型认知和记忆能力的疗效作用。同时 ,以西药脑复康做对照。结果 :CHPⅡ对AD模型小鼠的认知和记忆能力具有明显的改善。结论

关键词：阿尔茨海默病中医药疗法认知功能记忆功能柴胡加龙骨牡蛎汤当归芍药散

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IgA Fc受体介导的中性粒细胞脱颗粒反应的机理研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第2期21卷 121-125页

作者：毕波张伟石敏鹿佳木斯大学医学院中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的　对IgAFc受体 (FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒行为进行研究。方法　分别用IgA免疫复合物 (IgAIC)和单克隆抗体 (MIP8a)交联中性粒细胞表面的FcαR ,用细胞释放的乳铁蛋白作为脱颗粒反应的指示剂 ,比较不同交联物激活细胞后产生的... 详细信息

目的　对IgAFc受体 (FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒行为进行研究。方法　分别用IgA免疫复合物 (IgAIC)和单克隆抗体 (MIP8a)交联中性粒细胞表面的FcαR ,用细胞释放的乳铁蛋白作为脱颗粒反应的指示剂 ,比较不同交联物激活细胞后产生的脱颗粒现象。结果　MIP8a交联FcαR后中性粒细胞发生迅速脱颗粒反应 ,在胞外无钙离子的情况下 ,该反应减弱。但是在胞外无镁离子的情况下 ,反应不受影响。IgAIC交联FcαR后仅引起缓慢的脱颗粒反应 ,在胞外无钙离子或无镁离子的情况下 ,都不能发生反应。结论　FcαR作为受体 (由IgAIC交联FcαR)和FcαR作为抗原 (由MIP8a交联FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒反应不同。

关键词： Fc受体中性粒细胞脱颗粒 IgA免疫复合物

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皮内试验和血清特异性IgE检测在诊断葎草花粉症中的临床价值

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中华医学杂志 2006年第27期86卷 1906-1911页

作者：尹佳王瑞琦何海娟徐涛岳凤敏王良录张宏誉叶世泰中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院变态反应科 100730 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病统计学系

目的评价皮内试验和血清特异性IgE(sIgE)检测在诊断葎草花粉症中的临床价值。方法对1150例(5-75岁)夏秋季变应性鼻炎和哮喘患者进行葎草花粉等20种吸入过敏原皮内试验和葎草花粉血清sIgE检测。皮内试验所用葎草花粉变应原浸液浓度1:100(... 详细信息

目的评价皮内试验和血清特异性IgE(sIgE)检测在诊断葎草花粉症中的临床价值。方法对1150例(5-75岁)夏秋季变应性鼻炎和哮喘患者进行葎草花粉等20种吸入过敏原皮内试验和葎草花粉血清sIgE检测。皮内试验所用葎草花粉变应原浸液浓度1:100(w／v),其他变应原浓度除蒿属花粉和豚草花粉为1:1000(w／v)外均为1:100(w／v)。对所有入选者进行葎草花粉sIgE检测(Phadia Uni CAP)。根据典型病史、皮内试验和sIgE检测结果建立临床综合诊断标准并以此评价皮内试验和sIgE检测的临床价值。结果以临床综合诊断为诊断标准时葎草花粉皮内试验的敏感度(89．0％)、阳性预期值(77．9％)、阴性预期值(90．6％)和诊断的准确率(80．4％)等指标均高于单纯以sIgE≥0．35 kUa／L为参考标准时皮内试验的各项评价指标,但假阳性率为50．2％;葎草花粉sIgE检测的敏感度(97．6％)、特异度(97．5％)、阳性预期值(98．8%)、阴性预期值(88．0％)和诊断的准确率(92．0％)等指标高于单纯以皮内试验≥5 mm为参考标准时体外试验的各项指标。当以皮内试验≥10 mm为阳性标准时,皮内试验假阳性率从59．9％降至17．4％。在288例葎草花粉皮内试验阳性而sIgE阴性者中,有84例皮内试验≥10 mm。结论皮内试验与sIgE检测有很好的相关性,但其诊断葎草花粉过敏的假阳性率高于sIgE检测。当单独使用皮内试验或sIgE检测诊断葎草花粉症时,应避免仅凭低水平的阳性结果进行免疫治疗。

关键词：花粉症皮内试验特异性IgE 花粉变应原

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基因功能的抑制

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中华病理学杂志 2006年第5期35卷 298-301页

作者：卞晓翠刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

随着人类基因组测序工作的完成,人类基因组109碱基序列中具有功能的基因约3万个,其功能基因的序列已经明了,这些基因功能的研究正在轰轰烈烈的进行中.生物体内编码基因要执行其功能,需要经历DNA的复制、转录和翻译,即基因表达的过程.因... 详细信息

随着人类基因组测序工作的完成,人类基因组109碱基序列中具有功能的基因约3万个,其功能基因的序列已经明了,这些基因功能的研究正在轰轰烈烈的进行中.生物体内编码基因要执行其功能,需要经历DNA的复制、转录和翻译,即基因表达的过程.因而,要了解基因的功能,可以采用转基因、诱导突变观察基因缺失型的表现,进而推测它的功能;或是从基因的DNA、RNA或蛋白水平进行干预,抑制其表达,观察基因抑制后表型变化,研究其功能.转基因和诱导特异的基因突变效率低,相对而言,随着生物技术的发展,后一种方案就简单多了,因此生命科学研究中,出现了多种在DNA、RNA和蛋白水平上抑制某个或某些特定基因发挥功能的方法,而且这些方法也越来越多地应用于基因过度表达的疾病的治疗中。

关键词：基因功能人类基因组生命科学研究基因过度表达碱基序列蛋白水平基因缺失型 DNA 测序工作功能基因

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体外肿瘤细胞对血管内皮细胞影响的观察

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中华病理学杂志 2003年第4期32卷 360-363页

作者：刘玉琴顾蓓王春景张宏高进任民峰中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　观察肿瘤细胞与血管内皮细胞的关系及其在体外直接接触培养时内皮细胞的形态变化。方法　免疫磁珠阳性选择法分离培养大鼠肺血管内皮细胞 ,生长至汇合状态时加入不同的肿瘤细胞 (小鼠树突状细胞肉瘤细胞DCS、人胃癌细胞MGC 80 3... 详细信息

目的　观察肿瘤细胞与血管内皮细胞的关系及其在体外直接接触培养时内皮细胞的形态变化。方法　免疫磁珠阳性选择法分离培养大鼠肺血管内皮细胞 ,生长至汇合状态时加入不同的肿瘤细胞 (小鼠树突状细胞肉瘤细胞DCS、人胃癌细胞MGC 80 3、小鼠肺腺癌细胞LA795 )共培养 ,光镜、扫描电镜、免疫组织化学、transwell法及荧光分子传递等方法观察内皮细胞的形态、功能的变化。结果　培养的内皮细胞部分呈卵石样 ,部分呈长梭形。长至汇合状态的内皮细胞再加入肿瘤细胞后 ,内皮细胞形态发生明显变化 ,汇合细胞中间出现许多圆形管腔样结构 ;肿瘤细胞往往分布在新形成的腔隙内 ;肿瘤细胞条件培养基可支持内皮细胞的生长 ,促进内皮细胞的运动 ;lucifferyellow分子可直接从肿瘤细胞传递到内皮细胞。结论　肿瘤细胞与内皮细胞可进行通讯。

关键词：体外肿瘤细胞血管内皮细胞功能表型细胞结构细胞运动

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山莨菪碱预防大鼠肺水肿时动脉血浆与支气管肺泡洗涤液中PGE_2和LTC_4含量的变化

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中国药理学通报 2000年第4期16卷 436-438页

作者：段金虹程锦轩戴顺龄王振纲中国医学科学院基础医学研究所.中国协和医科大学基础医学院同位素研究室北京100005

目的　通过研究山莨菪碱 (ADM ,6 5 4 2 )预防大鼠肺水肿时 ,对动脉血浆和支气管肺泡洗涤液 (BAL)中的PGE2和LTC4 含量的影响 ,探讨山莨菪碱防治肺水肿的部分机制。方法　先从股静脉注射山莨菪碱 (30mg·kg-1)作为预防 ,再注射肾上... 详细信息

目的　通过研究山莨菪碱 (ADM ,6 5 4 2 )预防大鼠肺水肿时 ,对动脉血浆和支气管肺泡洗涤液 (BAL)中的PGE2和LTC4 含量的影响 ,探讨山莨菪碱防治肺水肿的部分机制。方法　先从股静脉注射山莨菪碱 (30mg·kg-1)作为预防 ,再注射肾上腺素 (0 .3mg·kg-1) ,30min后收集动脉血浆和BAL ,用放射免疫法分别测定正常对照组、肺水肿组、山莨菪碱预防组的PGE2 和LTC4 的含量。结果　肺水肿组动脉血浆中的PGE2 和LTC4 的含量、LTC4 与PGE2 比值高于正常对照组 (P <0 0 1) ,BAL中的PGE2 含量低于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,LTC4 的含量、LTC4 与PGE2 比值高于正常对照组 (P <0 0 1) ;山莨菪碱预防组动脉血浆和BAL中PGE2和LTC4 含量、LTC4 与PGE2 比值均低于肺水肿组 (P <0 0 1)。结论　山莨菪碱能抑制肺水肿时PGE2 和LTC4 的释放 ,从而改善血管的通透性。

关键词：山莨菪碱肺水肿前列腺素动脉血浆 LTC4

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氧化低密度脂蛋白诱导人载脂蛋白AI转基因小鼠血管平滑肌细胞差异表达基因的研究

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中华医学杂志 2003年第6期83卷 494-497页

作者：于淼谷素敏周礼赵高峰余立清张华佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　为研究人载脂蛋白AI(h ApoA I)抗氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所导致的平滑肌细胞增生及脂质浸润的分子机制 ,克隆并分析可明显抑制动脉内膜脂质沉积和粥样斑块形成的h apoA I转基因小鼠血管平滑肌细胞 (vSMC)抗ox LDL所致AS过程中... 详细信息

目的　为研究人载脂蛋白AI(h ApoA I)抗氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所导致的平滑肌细胞增生及脂质浸润的分子机制 ,克隆并分析可明显抑制动脉内膜脂质沉积和粥样斑块形成的h apoA I转基因小鼠血管平滑肌细胞 (vSMC)抗ox LDL所致AS过程中表达的相关基因。方法　以ox LDL为刺激物作用于培养的转基因小鼠vSMC ,应用抑制性差减杂交方法构建减除文库 ,筛选、克隆差异表达基因 ,并进行序列测定及同源性比较。同时用SMART技术构建了ox LDL诱导的转基因小鼠vSMC全长噬菌体文库。结果　从 5 7个差异克隆中随机选取 15个克隆测序并分析 ,得到 3个表达序列标签 (EST) ,均为与免疫系统有关的功能基因片段 ,即 :补体C1 抑制物 (C1 INH)、植物凝集素及T细胞受体 β(TCRβ)。有明显抗内膜脂质沉积能力的h apoA I转基因小鼠的vSMC在被ox LDL诱导后 ,筛选出的 3个EST均与免疫系统有关 ,其中C1 INH及植物凝集素与补体系统密切相关。结论　ox LDL致AS及h ApoA I抗AS可能有免疫机制参与 ,且与补体活化及其调控密切相关。其中C1 INH作为抗AS的潜在靶点值得关注。

关键词：氧化低密度脂蛋白诱导载脂蛋白AI 转基因小鼠血管平滑肌细胞差异表达基因动脉粥样硬化

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β-淀粉样蛋白在阿尔茨海默病发病和免疫治疗中的作用

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中华病理学杂志 2005年第2期34卷 113-114页

作者：于双妮刘立颖梁平作中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

阿尔茨海默病(Alzheimer's diseases, AD)于1907年由Alzheimer最先发现并因此得名.AD是一种最常见的老年性痴呆症,大约占典型的晚发型的痴呆症的50%以上,有资料显示全球65～85岁的人,平均有10%会发生AD,85岁以上的人,有一半会发生... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer's diseases, AD)于1907年由Alzheimer最先发现并因此得名.AD是一种最常见的老年性痴呆症,大约占典型的晚发型的痴呆症的50%以上,有资料显示全球65～85岁的人,平均有10%会发生AD,85岁以上的人,有一半会发生不同程度的AD[1]。

关键词：阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白发病免疫治疗痴呆症常见晚发型资料发现典型

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