检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2005年第6期25卷 561-563页

作者：董敏王小竹李继红王恒中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原学研究室北京100005 河北北方学院细胞生物系河北075000

目的为提高质粒大量提取纯化柱的使用率,降低实验成本。方法用0.5molLHCl和0.5molLNaOH溶液处理已使用过的一次性纯化柱,使之再生,继而被重复利用。结果再生纯化柱所提纯的质粒DNA经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析证实DNA纯度高,无不同质... 详细信息

目的为提高质粒大量提取纯化柱的使用率,降低实验成本。方法用0.5molLHCl和0.5molLNaOH溶液处理已使用过的一次性纯化柱,使之再生,继而被重复利用。结果再生纯化柱所提纯的质粒DNA经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析证实DNA纯度高,无不同质粒间污染。结论此方法操作简便、快捷,具有较高的实用价值。

关键词：再生方法离子交换 mol/L NaOH溶液凝胶电泳分析 PCR扩增质粒DNA 提取纯化实验成本重复利用实用价值使用率 HCl 一次性琼脂糖

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SARS冠状病毒核壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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解剖学报 2005年第2期36卷 221-223页

作者：蒋毅陈实平董红燕冯长访王保君中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005 北京科卫临床诊断试剂有限公司北京100039

目的　制备严重急性呼吸道综合征(SARS)冠状病毒(CoV)核壳(N)蛋白单克隆抗体,为寻求SARS早期诊断的方法及深入研究SARS疾病提供有力的工具。　方法　以重组SARS CoVN蛋白免疫小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法制备单克隆抗体。... 详细信息

目的　制备严重急性呼吸道综合征(SARS)冠状病毒(CoV)核壳(N)蛋白单克隆抗体,为寻求SARS早期诊断的方法及深入研究SARS疾病提供有力的工具。　方法　以重组SARS CoVN蛋白免疫小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法制备单克隆抗体。通过间接酶联免疫分析、间接免疫荧光、免疫双向扩散等方法鉴定抗体的特异性、亲和力、类型及亚类、配对效果等。　结果　共获得15个阳性克隆,其中10个与天然SARS CoV呈阳性反应。 10株单抗的相对亲和常数在108～109mol L-1之间;10株中有1株为IgG2b、1株为IgG3,其余均为IgG1;10株单抗中有8株与12种肺炎相关的病原体无交叉反应,1株与流感病毒A、B,副流感病毒有交叉反应,1株与流感病毒A、B 有交叉反应;10株单抗中的5株可形成5种配对,其中两种配对用于检测重组SARS病毒N蛋白,灵敏度可达1μg L。　结论　获得了特异性针对SARS冠状病毒N蛋白的单克隆抗体,并初步建立了检测SARS CoVN蛋白的酶联双抗体夹心法,为SARS的早期诊断、蛋白质组学的研究奠定了基础。

关键词： SARS冠状病毒核壳蛋白单克隆抗体双抗体夹心

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Sirtuin:依赖NAD^+的去乙酰化酶

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生命的化学 2005年第3期25卷 181-184页

作者：霍晓芳张俊武中国医学科学院/中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

组蛋白的乙酰化-去乙酰化修饰在基因表达调控中起重要作用。参与去乙酰化的酶除了经典的Ⅰ类和Ⅱ类组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase,HDAC),还有比较特殊的III类HDAC———Sirtuin,其活性依赖于NAD+。酵母的Sirtuin———Sir2在交... 详细信息

组蛋白的乙酰化-去乙酰化修饰在基因表达调控中起重要作用。参与去乙酰化的酶除了经典的Ⅰ类和Ⅱ类组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase,HDAC),还有比较特殊的III类HDAC———Sirtuin,其活性依赖于NAD+。酵母的Sirtuin———Sir2在交配型基因沉默、端粒区基因沉默、rDNA沉默中起重要作用,还可能参与长寿与衰老的调节。在人类,Sirtuin的底物是组蛋白、各种转录因子如p53、FOXO、NF-κB、乙酰化酶如p300和其他的各种功能蛋白质。根据底物特点推测,人类Sirtuin蛋白的生理功能可能一方面是参与调节细胞在应激条件下的存活与死亡的平衡,另一方面是参与代谢的调节。

关键词：组蛋白去乙酰化酶(HDAC) 沉默信息调节因子2(Sir2) SIRTl 去乙酰化

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治疗性抗体的现状及发展趋势

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国外医学（免疫学分册） 2005年第5期28卷 308-312页

作者：唐碧霞马驰何维（审校）崔莲仙（审校）中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院（博士研究生）北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

到2005年2月底,通过美国食品药物管理局(*** and Durug Administration,FDA)认证的治疗性抗体已达18种。从上世纪80年代至今,治疗性抗体的研究经历了高潮和低谷,现在又迎来了第二个春天。了解各类治疗性抗体的作用机制,把握住当前该类... 详细信息

到2005年2月底,通过美国食品药物管理局(*** and Durug Administration,FDA)认证的治疗性抗体已达18种。从上世纪80年代至今,治疗性抗体的研究经历了高潮和低谷,现在又迎来了第二个春天。了解各类治疗性抗体的作用机制,把握住当前该类生药制品的发展趋势,才能把基础研究和制药产业紧密联系起来,开发出新药品。

关键词：治疗性抗体 FDA

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成人心房肌细胞的急性分离和电生理学鉴定

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中国病理生理杂志 2005年第11期21卷 2286-2288页

作者：黄兵曹济民陈雷刘振伟左明章李立环卫生部北京医院麻醉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院麻醉科北京100037 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的介绍一种适用于成人的心房肌细胞膜片钳研究的急性分离方法,并对所分离的细胞进行电生理学鉴定。方法采用两步酶解与机械分离相结合的方法制备成年人心房肌细胞标本,应用倒置显微镜初步观察细胞形态、数目后,用全细胞膜片钳技术鉴... 详细信息

目的介绍一种适用于成人的心房肌细胞膜片钳研究的急性分离方法,并对所分离的细胞进行电生理学鉴定。方法采用两步酶解与机械分离相结合的方法制备成年人心房肌细胞标本,应用倒置显微镜初步观察细胞形态、数目后,用全细胞膜片钳技术鉴定细胞的电生理学特性。结果分离的细胞呈多种形态,其中有良好折光性、细胞膜完整、有清晰横纹的杆状细胞约占50%-60%,计算出11例独立实验分离出的此类细胞获得率为(57.2±3.1)%;具有正常的电生理学特性,能够诱发出人心房肌细胞上主要的Na+、K+通道混合电流以及心房肌细胞特有的超快速激活钾通道电流(IKur)。结论实验数据表明该方法分离的细胞保持有其典型的通道特性,并证明其具有实用、快速和高效的特点,适用于人心房肌细胞的电生理学和电药理学研究,有良好的可行性。

关键词：心肌分离膜片钳术电生理学

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植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响与补充外源性17β-雌二醇的比较(英文)

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中国临床康复 2005年第27期9卷 195-197页

作者：王雯朱广瑾首都医科大学病理生理学教研室北京市100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京市100005

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用... 详细信息

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用进行比较分析。设计:观察对比实验。单位:首都医科大学病理生理学教研室和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系。材料:实验于2003-07/09在首都医科大学实验动物科学部完成。选择36只12周龄健康雌性Wistar大鼠,体质量(250±10)g,清洁级,随机分为4组,假手术对照组、去卵巢组、去卵巢+17β-雌二醇组及去卵巢+α-玉米赤霉醇组各9只。方法:假手术对照组开腹而不摘除卵巢。去卵巢组在无菌条件下摘除双侧卵巢复制去卵巢动物模型。去卵巢+17β-雌二醇组和去卵巢+α-玉米赤霉醇组分别在去卵巢14d后肌注17β-雌二醇(1mg/kg)和α-玉米赤霉醇(1mg/kg),3d注射1次,共35d。实验结束后大鼠经颈总动脉采血,分离血浆备用。用凝固法测定血浆凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。用全自动生化分析仪测定血浆纤维蛋白原水平。用酶联免疫吸附法测定血浆组织因子水平。组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活剂抑制物活性测定均采用发色底物法。同时分离子宫,计算子宫质量与体质量的比值。主要观察指标:①血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、血浆纤维蛋白原水平、血浆组织因子水平、组织型纤溶酶原激活剂活性及纤溶酶原激活剂抑制物活性。②子宫质量/体质量的比值。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①凝血酶原时间变化:去卵巢组显著短于假手术对照组(P<0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后长于去卵巢组(P<0.05～0.01)。②纤维蛋白原和组织因子水平变化:去卵巢组显著高于假手术对照组(P<0.05～0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后低于去卵巢组(P<0.05～0.01)。③组织型纤溶酶原激活剂活性变化:去卵巢组显著低于假手术对照组犤(0.33±0.33)μkat/L,(4.00±1.50)μkat/L,(q=9.43,P<0.01)犦。补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后犤(1.83±0.67)μkat/L,(1.17±0.83)μkat/L犦显著高于去卵巢组(q=13.50,P<0.01;q=5.00,P<0.05)。④纤溶酶原激活剂抑制物活性变化:去卵巢组显著高于假手术对照组犤(2.33±0.67)μkat/L,(1.17±0.33)μkat/L,(q=10.5,P<0.01)犦。⑤子宫质量/体质量比值:去卵巢+α-玉米赤霉醇组明显低于去卵巢+17β-雌二醇组犤0.66,1.96,(q=14.67,P<0.01)犦。结论:补充外源性17β-雌二醇或α-玉米赤霉醇后,均可使去卵巢大鼠重新建立起凝血-纤溶的动态平衡,表明α-玉米赤霉醇具有同17β-雌二醇相似的心血管保护作用,且其致子宫增生的副作用明显小于17β-雌二醇,是一种有一定应用前景的雌激素替代药物。

关键词：卵巢切除术雌二醇凝血酶原纤维蛋白溶酶原

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血液系统肿瘤细胞系中CD34+干细胞特性研究

血液系统肿瘤细胞系中CD34+干细胞特性研究

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中华医学会病理学分会2005年学术年会

作者：任乐荣刘玉琴顾蓓董继红中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

目的探讨造血系统多种肿瘤细胞系中CD34+干细胞是否存在,并对其性质进行研究。方法利用流式细胞检测技术检测了急性单核细胞白血病细胞THP-1、红白血病细胞MEL、慢性粒细胞白血病细胞K562急性淋巴细胞白血病细胞MOKT-4,恶性淋巴瘤细胞RA... 详细信息

目的探讨造血系统多种肿瘤细胞系中CD34+干细胞是否存在,并对其性质进行研究。方法利用流式细胞检测技术检测了急性单核细胞白血病细胞THP-1、红白血病细胞MEL、慢性粒细胞白血病细胞K562急性淋巴细胞白血病细胞MOKT-4,恶性淋巴瘤细胞RAJI,多发性骨髓瘤细胞RPM18226、SP2/0和树突状细胞肉瘤DCS肿瘤细胞中CD34+的肿瘤细胞所占的比例。选取了MOIJT-4和K562细胞系,分选出CD34+细胞,继续培养,观察CD34+细胞比例变化;比较CD34+与CD34-肿瘤细胞在功能状态、细胞周期、分化状态、耐药性的差异。结果8种不同类型造血系统肿瘤细胞中CD34阳性率依次为2.5%、5.2%、3.1%、2.1%、1.4%、0、0和6.2%。从K562细胞中分选出CD34+细胞,继续培养后恢复为原来比例。MOLT-4和K562细胞系中分离出的CD34+细胞RNA含量低、细胞处于G0/G1期的比率较高(81.5%和77.9%)、分化抑制蛋白Id-1表达强阳性/阳性(分化程度低)、多耐药蛋白p-gp高表达(耐药性强)。结论血液系统肿瘤细胞系中有一小部分肿瘤细胞带正常的造血干细胞的标记,并且带有这种标记的细胞表现出更为原始的细胞的特性,其中包括血液肿瘤细胞干细胞。

关键词：肿瘤细胞系干细胞特性

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植物雌激素α-玉米赤霉醇对HUVEC组织因子基因表达的转录调控作用

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 539-542页

作者：王雯刘伟祖淑玉朱广瑾张立克首都医科大学病理生理学教研室北京100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4... 详细信息

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4个含人TF基因5′上游不同长度序列的荧光素酶报告基因质粒,用脂质体转染法分别转入以下6组细胞:①正常对照组;②10-7molLE2刺激组;③10-7molLZAL刺激组;④10-6molLAngⅡ刺激组;⑤10-7molLE2+10-6molLAngⅡ刺激组;⑥10-7molLZAL+10-6molLAngⅡ刺激组;测定细胞裂解液中荧光素酶比活性(relativeluciferaseactivity,RLA)的变化。结果转染pGL3TF171+71的各组细胞RLA均较低,不同刺激组之间无显著差异;AngⅡ可使质粒pGL3TF593+71,pGL3TF316+71,pGL3TF236+71荧光素酶表达大量增加,E2、ZAL均可不同程度地抑制AngⅡ的上述效应,2者间无显著差异。结论含有1个NFκB位点和2个AP1位点的-236bp～-171bp区域在E2或ZAL影响TF基因转录中有重要作用。

关键词： α-玉米赤霉醇植物雌激素基因表达 HUVEC 调控作用血管内皮细胞组织因子 estradiol mol/L 人脐静脉内皮细胞 activity 转录调控机制报告基因质粒基因重组技术脂质体转染法荧光素酶表达抑制AngⅡ 正常对照组细胞裂解液

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新疆维吾尔族人自然长寿与HLADRB、ACE基因的关联分析

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 492-497页

作者：玛依拉.吾甫尔周文郁顾明亮方鸣武程祖亨邱长春新疆医科大学第一医院心内科新疆乌鲁木齐830054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB基因及血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与新疆维吾尔族人自然长寿的关系。方法研究样本分为4组:第1组年龄≥100岁;第2组年龄为90～99岁;第3组年龄为70～90岁;第4组为65～70岁自然死亡者。分别应用聚合... 详细信息

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB基因及血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与新疆维吾尔族人自然长寿的关系。方法研究样本分为4组:第1组年龄≥100岁;第2组年龄为90～99岁;第3组年龄为70～90岁;第4组为65～70岁自然死亡者。分别应用聚合酶链反应序列特异引物法(PCRSSP)、单链构象多态性(SSCP)分析和直接测序技术对各组进行基因分型。结果百岁组HLADR1的频率明显高于对照组(分别为9.5%和1.9%,P<0.05);HLADR6(14)的频率也明显高于对照组(分别为9.5%和0.9%,P<0.05);HLADR6的频率明显高于其余3组;HLADR4的频率明显低于对照组(分别为9.5%和23.6%,P<0.05);HLADR9的频率明显低于对照组(分别为1.2%和9.4%,P<0.05)。相关分析显示:HLADR1及ACE基因的D等位基因与长寿呈正相关,而HLADR9呈负相关。结论HLADRB基因的DR1等位基因和ACE基因的等位基因D对长寿可能有保护作用;HLADRB基因的DR9等位基因可能是不利于长寿的危险因素,HLADRB基因多态性和ACE基因多态性相互作用对长寿有协同作用。

关键词：新疆维吾尔族人长寿关联分析 HLA-DR6 HLA-DRB基因血管紧张素转换酶 ACE基因多态性人类白细胞抗原单链构象多态性 HLA-DR4 HLA-DR9 序列特异引物聚合酶链反应 D等位基因对照组研究样本基因分型测序技术相关分析

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从几组数据看高血压的危害及高血压的新定义

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生理通讯 2005年第4期24卷 89-90页

作者：文允镒中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

高血压病严重危害人类健康。在我国其患病率已从1959：5．11％-1979：7．73％-1991：11．9％、2001年：12．38％。据2004年统计，我国18岁及18岁以上的高血压患病率已高达18．8％。与1991年相比，患病率上升了31％。即，当今我国每百个... 详细信息

高血压病严重危害人类健康。在我国其患病率已从1959：5．11％-1979：7．73％-1991：11．9％、2001年：12．38％。据2004年统计，我国18岁及18岁以上的高血压患病率已高达18．8％。与1991年相比，患病率上升了31％。即，当今我国每百个成年人中就有19人患有不同程度的高血压。而目前，每年还以300万的新增病例俱增。在我国至少有1亿6千万高血压患者，比1991年增加7000多万。而在世界范围内，大约有10亿人患高血压。数目惊人!

关键词：高血压患者危害定义组数患病率人类健康 7000 世界范围成年人

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