检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2004年第9期31卷 804-811页

作者：郭晨莹王恒蔺亚晖蔡启良中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病原生物学系分子寄生虫学实验室北京100005

StarburstTMPAMAMdendrimers分子是一类新型的高分枝、辐射状对称的树状高分子,在生理条件下其表面具有高密度的正电荷,可以通过静电相互作用与核酸形成复合物后,介导遗传物质进入细胞.研究了G3,G3 5,G5,G7,G7 5,G9各代dendrimers分子与... 详细信息

StarburstTMPAMAMdendrimers分子是一类新型的高分枝、辐射状对称的树状高分子,在生理条件下其表面具有高密度的正电荷,可以通过静电相互作用与核酸形成复合物后,介导遗传物质进入细胞.研究了G3,G3 5,G5,G7,G7 5,G9各代dendrimers分子与DNA结合后介导其转染细胞的能力,并初步评价这种复合物转染对细胞活力的影响.实验证实,全代的PAMAMdendrmers皆可与DNA结合,并可在体外培养的细胞中介导高效的DNA转染.PAMAMdendrimer/DNA复合物很稳定,在较大的pH值变化范围内(pH 2～ 10 )不解离.PAMAMdendrimers可保护与之复合的DNA分子免受限制性内切酶的降解.在一定的电荷比范围内,高代数的dendrimers分子与DNA形成的复合物对培养细胞的转染效率高于低代数dendrimer分子,复合物所介导的转染效率在不同的细胞系之间也有差异.在有效作用浓度范围内(≤ 1 3× 10 -1g/L),PAMAMdendrimers/DNA复合物对被转染细胞无毒性.但是,未与DNA复合的dendrimers分子在较低浓度时则表现出毒性,表明StarburstTM PAMAMdendrimers分子可作为新型的低毒非病毒DNA载体,用于介导DNA对体外培养细胞的转染.这些前期观察。

关键词： DNA转运 Starburst^TM PAMAM dendrimers 转染非病毒载体

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利用随机多肽文库研究ZO-1中PDZ3结构域的配体结合特点

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第3期20卷 341-346页

作者：郭佳岩宋婀莉黄海明马素参高友鹤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

建立一种研究PDZ结构域配体结合特点的简单方法 .利用酵母双杂交技术从随机多肽文库中寻找所有可能与ZO 1中PDZ3结构域结合的C末端序列 ,从现有蛋白质数据库中检索所有具有该C末端蛋白 .利用液体培养物 β 半乳糖苷酶检测实验 ,比较文... 详细信息

建立一种研究PDZ结构域配体结合特点的简单方法 .利用酵母双杂交技术从随机多肽文库中寻找所有可能与ZO 1中PDZ3结构域结合的C末端序列 ,从现有蛋白质数据库中检索所有具有该C末端蛋白 .利用液体培养物 β 半乳糖苷酶检测实验 ,比较文库中筛选的C末端序列和已知的PDZ3结构域结合配体———JAM的C末端 (SFLV)与PDZ3结构域结合的强弱 .共筛选到 3个阳性克隆 ,其C末端序列分别为 LGWV、 LVWV和 DEWV .前 2者属于第二类PDZ结构域 ,后者属于第三类 .蛋白质数据库检索结果表明 ,有多个蛋白质具有 LGWV、 LVWV末端 ,没有检索到任何具有 DEWV末端的蛋白质 .结合强度实验结果表明 ,它们与PDZ3结构域结合强度依次为 DEWV > LGWV > LVWV > SFLV ,说明筛选的 3个C末端除了反映ZO 1中PDZ3结构域可能的潜在结合配体外 ,也有可能成为JAM蛋白阻断性试剂甚至药物的重要组成部分之一 .利用随机多肽文库 ,可以尽可能寻找所有可能与PDZ结构域结合的C末端序列。

关键词： ZO-1 PDZ3结构域蛋白质相互作用随机多肽文库酵母双杂交

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MICA反应性Vδ1γδT细胞对上皮肿瘤细胞的细胞毒作用

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中国医学科学院学报 2004年第1期26卷 1-7页

作者：齐锦彭萍戴梦华李勇海崔莲仙何维中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫室北京100005

目的研究人类MHCⅠ类链相关基因A(MICA)是否可以在体外诱导Vδ1γδT细胞的扩增,并且对MICA反应性Vδ1γδT细胞的细胞毒作用进行初步研究。方法采用分子克隆技术原核表达并纯化MICA蛋白,使用重组MICA蛋白在体外诱导肿瘤组织中的Vδ1γ... 详细信息

目的研究人类MHCⅠ类链相关基因A(MICA)是否可以在体外诱导Vδ1γδT细胞的扩增,并且对MICA反应性Vδ1γδT细胞的细胞毒作用进行初步研究。方法采用分子克隆技术原核表达并纯化MICA蛋白,使用重组MICA蛋白在体外诱导肿瘤组织中的Vδ1γδ肿瘤浸润T淋巴细胞(TILs),3-(4,5-二甲基噻唑-乙-YL)-2,5-二甲基-四唑溴盐(MTT)法检测MICA反应性Vδ1γδTILs的细胞毒活性。结果原核表达系统pET30表达并纯化了MICA;固相化的MICA蛋白可以诱导肿瘤组织中的Vδ1γδTILs在体外扩增,同时Vδ1γδTILs对MICA+的肿瘤细胞具有明显杀伤活性。结论MICA反应性Vδ1γδT细胞可能是肿瘤过继免疫治疗的新的候选效应细胞。

关键词：人类MHC Ⅰ类链相关基因A Vδ1 γδT细胞肿瘤浸润淋巴细胞人卵巢上皮肿瘤

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人IgAFc受体的研究进展

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中国免疫学杂志 2004年第4期20卷 286-289页

作者：郭丽华张伟中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 中国协和医科大学基础医学院免疫室北京100005

人IgA Fc受体,即FcαRI(CD89),属于免疫球蛋白超家族,表达于单核巨噬细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等.FcαRI能特异性结合血清型和分泌型IgA1和IgA2,引起一系列生物学效应,因此它在机体免疫防御中起着非常重要的作用.

关键词：人 IgA Fc受体结构特点信号转导生物学功能免疫球蛋白

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北京市学龄儿童和青少年血清总蛋白、白蛋白参考值调查

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临床检验杂志 2004年第3期22卷 234-235页

作者：祖淑玉徐成丽胡文丰韩少梅朱广瑾中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

人血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)含量与地区、人群的生活习惯、饮食结构等因素有关,我们对北京城区、郊区的9所中、小学和1所地方大学的32 5 2名10～2 2岁男女健康学生进行TP、Alb、和A/G比值的测定,以求建立适合北京地区该年龄段的参考... 详细信息

人血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)含量与地区、人群的生活习惯、饮食结构等因素有关,我们对北京城区、郊区的9所中、小学和1所地方大学的32 5 2名10～2 2岁男女健康学生进行TP、Alb、和A/G比值的测定,以求建立适合北京地区该年龄段的参考值。1　材料与方法1.1　调查时间和对象　2 0 0 1年9～12月,通过抽样对北京城区和郊区9所中小学及一所地方大学学生,按地区、年龄、性别等进行分层、按比例、随机抽样法选择测试对象,每位被测对象经全身体检和有关化验检查,体质指数(bodymassindex ,BMI) 15～2 5之间,且无明显肝、肾疾病及影响血清总蛋白、白蛋白检测的疾病。1.2　标本收集、贮存　采集清晨空腹坐位的肘静脉血,分离血清,密封存于4℃冰箱,存放时间在4h内,标本无溶血和脂浊。1.3　检测仪器　奥林巴斯2 70 0全自动生化分析仪。1.4　测定方法　TP、Alb分别采用双缩脲法和溴甲酚绿法测定,均按试剂盒说明书操作。球蛋白浓度由总蛋白减去白蛋白求得,计算A/G比值。1.5　统计方法　正态分布用D检验法,同组男女用两样本均数t检验法,总体参考范围由 x±2s得出。2　结果与讨论2 .1　...

关键词：北京市学龄儿童青少年血清总蛋白白蛋白参考值调查

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菟箭合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶C活性作用的研究

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中国中药杂志 2004年第7期29卷 685-689页

作者：朴元林梁晓春杨楠尹德海左萍萍中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科北京100730 中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所药理教研室北京100005

目的 :观察菟箭合剂对实验性糖尿病肾病大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC)活性、肾功能及肾脏结构的影响。方法 :单肾切除加链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射制作糖尿病肾病动物模型。中药菟箭合剂 (2 0g·kg-1·d-1)和阳性对照药缬沙坦 (2 0mg... 详细信息

目的 :观察菟箭合剂对实验性糖尿病肾病大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC)活性、肾功能及肾脏结构的影响。方法 :单肾切除加链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射制作糖尿病肾病动物模型。中药菟箭合剂 (2 0g·kg-1·d-1)和阳性对照药缬沙坦 (2 0mg·kg-1·d-1)干预治疗 12周 ,用氚标记的二丁酸佛波醇酯 ([3 H]PDBu)结合法测定大鼠肾组织PKC活性 ,检测 2 4h尿蛋白排出量 (Upro) ,肾脏常规染色光镜观察病理变化。结果 :12周时单肾糖尿病大鼠肾组织出现肾小球硬化病理改变 ,Upro明显升高 ,细胞膜PKC活性 (mPKC)明显升高 ,细胞浆PKC活性 (cPKC)明显降低 ,mPKC和cPKC比值 (M/C)明显升高。菟箭合剂和缬沙坦干预治疗显著降低Upro ,降低mPKC和M/C ,升高cPKC(P <0 .0 1) ,改善肾组织病理改变。结论 :菟箭合剂对单肾切除STZ糖尿病大鼠具有肾保护作用 ,推测部分地通过抑制肾组织PKC激活途径来达到的。

关键词：菟箭合剂糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶C 酶活性缬沙坦

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约氏疟红内期细胞颗粒疫苗免疫保护性机制

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中国医学科学院学报 2004年第1期26卷 47-51页

作者：袁捷徐蓓刘宝丰中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病原学室北京100005

目的探讨约氏疟红内期细胞疫苗保护性免疫作用的特点。方法分别用Saponin和双蒸水溶血后的约氏疟原虫感染的鬼形红细胞作疫苗、腹腔免疫接种BALB/c小鼠,并设正常小鼠为空白对照,分别以致死性同源虫株攻击后比较各组小鼠的感染率和存活... 详细信息

目的探讨约氏疟红内期细胞疫苗保护性免疫作用的特点。方法分别用Saponin和双蒸水溶血后的约氏疟原虫感染的鬼形红细胞作疫苗、腹腔免疫接种BALB/c小鼠,并设正常小鼠为空白对照,分别以致死性同源虫株攻击后比较各组小鼠的感染率和存活率。采用间接免疫荧光检测法,ELISA法测定血清特异性抗体及其亚类。RT-PCR法比较各组小鼠脾细胞白细胞介素-4(IL-4),γ-干扰素(IFN-γ)表达的差异,用SDS-PAGE及直接免疫荧光染色法分析感染红细胞膜蛋白。结果用Saponin皂化构建的疟疾红内期细胞颗粒疫苗(SPRBC)与水化的红内期细胞颗粒疫苗(DPRBC)及对照组相比,可使免疫鼠获得对致死性攻击的非常显著的免疫保护,表现为低原虫血症、短病程和高存活率(P<0.01),并呈现有高滴度抗体,其亚类有先以IgG1,后以IgG2a为主的趋势;同时经SPRBC免疫鼠的脾细胞其IL-4,IFN-γ均有高表达;感染红细胞表面呈现有相对分子质量为47000的小鼠MHC-Ⅰα链分子表达。结论皂化处理的约氏疟红内期细胞颗粒疫苗对同源致死性攻击有显著的免疫保护,其作用与疫苗诱导、对攻击产生的IgG1、IgG2a类抗体以及免疫细胞分泌的IL-4,IFN-γ类细胞因子相关,呈现细胞免疫和体液免疫的共同作用。正常与感染小鼠红细胞表面的MHCclassⅠ类分子可能有重要的免疫学意义。

关键词：疟疾细胞疫苗免疫保护

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p38MAPK——控制阿尔采末病进程的新靶点

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中国药理学通报 2004年第5期20卷 595-598页

作者：王抒孙兰杜冠华中国医学科学院.中国协和医科大学基础医学院药理室北京100005 中国医学科学院.中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心北京100050

阿尔采末病 (AD)是严重威胁老龄人的一类神经退行性疾病 ,其病理学特征包括 :淀粉样斑块沉积、神经元纤维缠结形成、突触和神经元的丢失以及脑内炎症。促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)家族的成员之一 p38MAPK在AD发病和进展中有多重作用 ,... 详细信息

阿尔采末病 (AD)是严重威胁老龄人的一类神经退行性疾病 ,其病理学特征包括 :淀粉样斑块沉积、神经元纤维缠结形成、突触和神经元的丢失以及脑内炎症。促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)家族的成员之一 p38MAPK在AD发病和进展中有多重作用 ,包括p38在AD模型中激活的证据、p38与AD各项病理标志和炎症、神经元凋亡、tau过磷酸化等重要病理生理过程的联系 ,由此阐明了 p38作为AD治疗干预靶点的基础和根据。

关键词：阿尔采末病 MAPK p38MAPK 神经退行性变 tau 神经元纤维缠结

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常染色体显性遗传性先天性白内障一家系致病基因的初步定位

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中华眼科杂志 2004年第12期40卷 824-827页

作者：齐艳华贾红艳黄尚志林辉谷静芝苏虹张铁英高雅哈尔滨医科大学附属第二医院眼科 150086 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传学系

目的　初步定位常染色体显性遗传性先天性白内障 (ADCC)一家系的致病基因。方法　收集ADCC一家系资料 ,在已知先天性白内障致病基因和位点附近 ,选择合适的短串联重复序列多态性标记 (STRP) ,对ADCC一家系进行连锁分析 ,使用Mlink软件... 详细信息

目的　初步定位常染色体显性遗传性先天性白内障 (ADCC)一家系的致病基因。方法　收集ADCC一家系资料 ,在已知先天性白内障致病基因和位点附近 ,选择合适的短串联重复序列多态性标记 (STRP) ,对ADCC一家系进行连锁分析 ,使用Mlink软件采用对数优势记分法 (LOD)计算LOD值。结果　在STRP中 ,D17S80 5、D17S12 94及D17S12 93与致病基因位点连锁的最大LOD值分别为2 0 3、2 4 9及 2 2 2 (重组率θ =0 )。结论　该ADCC家系的致病基因初步定位在第 17对染色体上 ;CRYBA1基因为候选基因。

关键词：常染色体显性遗传性先天性白内障家系致病基因候选基因染色体定位

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阿尔采末病淀粉样前体蛋白(APP)和早老素-1(PS-1)双重基因稳定转染细胞系的建立

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中国药理学通报 2004年第5期20卷 508-511页

作者：梁平潘扬杏赵雪梅杜洪震张冀民中国医学科学院基础医学研究所病理室中国协和医科大学基础医学院北京100005 美国哈佛大学医学院神经疾病研究中心

目的　构建APP751和PS 1(M14 6L)双重基因稳定转染的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞系 ,以用于 β 分泌酶或γ 分泌酶抑制剂的研究和相关药物的筛选。方法　从人胎盘基因文库中用多聚酶链反应 (PCR)方法扩增野生型和突变型PS 1(M14 6L)基因 ,... 详细信息

目的　构建APP751和PS 1(M14 6L)双重基因稳定转染的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞系 ,以用于 β 分泌酶或γ 分泌酶抑制剂的研究和相关药物的筛选。方法　从人胎盘基因文库中用多聚酶链反应 (PCR)方法扩增野生型和突变型PS 1(M14 6L)基因 ,并重组克隆到PCI neo质粒 ,用脂质体 (Lipo fectAmine)法将野生型和突变型 (M14 6L)PS 1转染至含APP751表达基因的CHO细胞 ,选择培养液筛选能稳定表达目的基因的CHO细胞株。用免疫沉淀和ELISA测定分析细胞表达产物。结果　建立了数株能表达Aβ和PS 1的CHO细胞。在转染细胞株中高表达的SP 1为全长 4 5kd的PS 1蛋白 ;野生型PS 1和突变型PS 1(M14 6L)以及单纯APP751转染的CHO细胞株均可分泌Aβ多肽 ,且突变型PS 1(M14 6L)转染的细胞株分泌到条件培养液中的Aβ1～ 42 比其它细胞株增加了近两倍。结论　突变型PS 1(M14 6L)的高表达可促使Aβ1～ 42 的分泌增加。我们建立的PS 1和APP双重基因稳定转染的CHO细胞株模型 ,可用于 β 分泌酶或γ

关键词： β-淀粉样变多肽早老素-1 β-或γ-分泌酶基因转染

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