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植物雌激素α-ZAL对oxLDL诱导的人内皮细胞分泌NO和ET-1的影响及其机制研究

中国药理学通报 2005年第6期21卷 692-697页

作者：徐海珊段金虹孙仁宇王小明许雪梅吴云清程锦轩戴顺龄中国医学科学院基础医学研究所.中国协和医科大学基础医学院病理生理室北京100005

目的探讨植物雌激素α-ZAL影响oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞分泌NO、ET-1的机制。方法采用RTPCR方法对eNOS、iNOS、ET-1mRNA的表达进行分析;采用WesternBlotting方法对eNOS、iNOS蛋白表达进行分析;同时测定内皮细胞上清液中NO、ET-1分... 详细信息

目的探讨植物雌激素α-ZAL影响oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞分泌NO、ET-1的机制。方法采用RTPCR方法对eNOS、iNOS、ET-1mRNA的表达进行分析;采用WesternBlotting方法对eNOS、iNOS蛋白表达进行分析;同时测定内皮细胞上清液中NO、ET-1分泌的变化。结果植物雌激素α-ZAL增加oxLDL诱导内皮细胞eNOSmRNA、蛋白的表达和NO的分泌,降低ET-1mRNA的表达和蛋白的分泌。结论植物雌激素α-ZAL通过上调oxLDL诱导内皮细胞eNOSmRNA、蛋白的表达和NO的分泌,下调ET1mRNA的表达和蛋白的分泌起着保护血管内皮的作用。

关键词：植物雌激素氧化低密度脂蛋白 NO ET-1

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凉山彝族血脂状况及其载脂蛋白AI基因启动子嘌呤置换突变限制片段长度多态性研究

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中华心血管病杂志 1999年第1期27卷 9-12页

作者：赵庆伟申萍张华周梦玲佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理室北京100005

为探讨凉山彝族农民血脂水平与心血管病发生率低的原因，通过流行病学调查采集６９１份（人）血样，确定彝族农民、彝族移民、当地城市汉族居民三组人群的各项血脂水平，并探讨载脂蛋白基因多态性在人群血脂水平变异中的作用。方法血脂... 详细信息

为探讨凉山彝族农民血脂水平与心血管病发生率低的原因，通过流行病学调查采集６９１份（人）血样，确定彝族农民、彝族移民、当地城市汉族居民三组人群的各项血脂水平，并探讨载脂蛋白基因多态性在人群血脂水平变异中的作用。方法血脂测定、从凝血块中分离ＤＮＡ、ＤＮＡ聚合酶链式反应一限制片段长度多态性分析。结果（１）彝族农民各项血脂（ＴＣ、ＴＧ、ＨＤＬ－Ｃ、ａｐｏＡＩ、ａｐｏＢ）水平显著低于彝族移民和汉族居民（Ｐ＜０．０１）。（２）彝族移民与当地汉族居民间，除ＨＤＬ－Ｃ外的各项血脂水平相当，彝族移民的ＨＤＬ－Ｃ水平明显低于汉族居民（Ｐ＜０．０５）。（３）ａｐｏＡＩ基因启动子Ｇ／Ａ置换多态性分析显示，彝族农民、彝族移民和汉族居民三组人群的Ａ等位基因相对频率分别为０．２３、０．２４、０．２３，差异无显著性，与新加坡华人的相对频率０．２７５相近，均显著高于高加索人。（４）各组人群内，ＧＧ基因型者与ＧＡ和ＡＡ基因型者的各项血脂水平差异均无显著性。结论结果提示，（１）在现阶段，彝族农民各项血脂处于低水平，可能主要归因于饮食等环境因素，生活水平提高脂肪摄入增加会导致群体血脂水平升高；（２）中国人的Ａ等位基因频率显著高于高加索人，各民族间?

关键词：血脂载脂蛋白彝族 AI基因心血管疾病

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人和猪源性红细胞降压因子作用的比较

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中国医学科学院学报 2002年第4期24卷 343-347页

作者：王玉堂文允镒庞焕符莹莹石磊马宁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理室北京100005

目的比较人和猪两种不同来源的内源性降压因子(erythrocyte-deriveddepressingfactor,EDDF)的降压作用及其作用机制。方法选用自发性高血压大鼠(SHR,n=5)和两肾一夹肾性高血压大鼠(2K-1C,n=7),分别观察猪和人源性EDDF的急性和慢性降压... 详细信息

目的比较人和猪两种不同来源的内源性降压因子(erythrocyte-deriveddepressingfactor,EDDF)的降压作用及其作用机制。方法选用自发性高血压大鼠(SHR,n=5)和两肾一夹肾性高血压大鼠(2K-1C,n=7),分别观察猪和人源性EDDF的急性和慢性降压作用。用尾动脉脉压法比较EDDF对2K-1C和SHR大鼠的口服降压作用;用离体大鼠动脉环灌流法观察EDDF对两种高血压模型大鼠胸主动脉的舒张作用;用MTT法和流式细胞仪分别测定两种EDDF对2K-1C高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及细胞周期的影响。结果两种来源的EDDF:(1)静脉给药均可显著降低大鼠的血压(P<0.05),口服后亦有明显降压效果;(2)对血管均有明显的呈内皮依赖性的舒张作用(P均<0.05);(3)均可明显抑制2K-1C大鼠VSMCs的增殖(P分别<0.01与0.05);并明显增加2K-1C大鼠VSMCsG1期的细胞数目(P<0.01),显著减少S期细胞数(P<0.01)。结论人和猪源性EDDF的降压效果、舒血管作用和抑制VSMCs增殖与调节细胞周期等方面的作用均无明显差异。

关键词：红细胞源性降压因子高血压大鼠血管平滑肌细胞作用机制

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腺相关病毒载体pAGX(+)的构建

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第5期21卷 547-551页

作者：史耕先刘音赵方萄朱立平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学系

目的　构建腺相关病毒 (AAV)载体并进行鉴定 ,以介导真核细胞的基因传递和表达。方法　以基因重组技术构建AAV载体 ,用Southern杂交、狭缝杂交以及激光共聚焦显微镜等鉴定构建的AAV载体。结果　成功地获得了重组AAV表达载体pAGX( + ) ,... 详细信息

目的　构建腺相关病毒 (AAV)载体并进行鉴定 ,以介导真核细胞的基因传递和表达。方法　以基因重组技术构建AAV载体 ,用Southern杂交、狭缝杂交以及激光共聚焦显微镜等鉴定构建的AAV载体。结果　成功地获得了重组AAV表达载体pAGX( + ) ,藉报告基因EYFP鉴定pAGX( + ) ,见pAEYFP经包装的重组AAV储存液的感染滴度达 1 .3 9× 1 0 7TU(transmissionunit) /ml、复制滴度达1 .94× 1 0 11颗粒 /ml。Southern杂交表明EYFP基因获得成功拯救。rAAV/EYFP颗粒成功转导COS 7细胞 ,EYFP获得表达 ,并整合入COS 7细胞基因组 ,而藉质粒载体pEYFPCMV介导的转移 ,EYFP未能整合。结论　成功地构建了一个AAV载体 ,并成功地介导了基因的转移、表达和整合。

关键词：腺相关病毒载体黄色荧光素蛋白EYFP 基因转移基因表达

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单抗5C5-G1识别的分化抗原表达于活化B细胞胞膜

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中华微生物学和免疫学杂志 1998年第3期18卷 202-206页

作者：马凤蓉朱立平张立新李波张淑珍王汛李国燕赵方萄崔莲仙中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学系

目的鉴于５Ｃ５ｃＤＮＡ（６１３ｂｐ）的２～４５０ｂｐ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ（１００８ｂｐ）的５６０～１００８ｂｐ的同源性高达９５％，且后者编码的蛋白质（ＭＲＰＬ１２）也在细胞活化后表达，本研究旨在探究两者是否属同一... 详细信息

目的鉴于５Ｃ５ｃＤＮＡ（６１３ｂｐ）的２～４５０ｂｐ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ（１００８ｂｐ）的５６０～１００８ｂｐ的同源性高达９５％，且后者编码的蛋白质（ＭＲＰＬ１２）也在细胞活化后表达，本研究旨在探究两者是否属同一物。方法多个人Ｂ细胞株用单抗５Ｃ５－Ｇ１作间接免疫荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜观察。结果５Ｃ５－Ｇ１单抗识别分子表达于膜下近膜胞浆处、也可能在膜表面，但非单纯在膜上，而ＭＥＰＬ１２只表达于线粒体。另外，前Ｂ细胞Ｎａｌｍ－６与单抗５Ｃ５－Ｇ１反应阴性，活化前期Ｂ细胞Ｄａｕｄｉ和３Ｄ５的反应强阳性，分化晚期Ｂ细胞ＳＫＷ６为弱阳性。结论５Ｃ５ｃＤＮＡ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ不属同一基因；

关键词：单克隆抗体 B细胞胞膜显微镜检

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人U937细胞吞噬IgA免疫复合物的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第6期23卷 464-467页

作者：郭彩云崔薇张伟中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院北京协和医院

目的　对IgAFc受体 (FcαRⅠ )介导的U937细胞吞噬IgA免疫复合物进行研究。方法以异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的 8.9NIP BSA为抗原 ,与抗NIP的IgA或IgG抗体结合 ,分别形成IgA免疫复合物 (IgAIC)和IgG免疫复合物 (IgGIC) ,再与经佛波醇乙... 详细信息

目的　对IgAFc受体 (FcαRⅠ )介导的U937细胞吞噬IgA免疫复合物进行研究。方法以异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的 8.9NIP BSA为抗原 ,与抗NIP的IgA或IgG抗体结合 ,分别形成IgA免疫复合物 (IgAIC)和IgG免疫复合物 (IgGIC) ,再与经佛波醇乙酯 (PMA)刺激分化为单核细胞样的U937细胞孵育 ,流式细胞仪分析U937细胞吞噬IgAIC和IgGIC的情况。结果U937细胞表面FcαRⅠ表达量高于 3种IgGFc受体 (FcγRⅠ、FcγRⅡ、FcγRⅢ )。PMA刺激后细胞表面FcαRⅠ上调明显 ,吞噬IgAIC能力增加。FcαRⅠ介导的U937细胞对IgAIC的吞噬作用高于FcγRⅠ和FcγRⅡ介导的对IgGIC的吞噬作用 ,且这种吞噬作用是特异性的。在补体受体CR1和CR3作用下 ,U937细胞对IgAIC的吞噬作用有所增强。结论　FcαRⅠ介导单核细胞非常强的吞噬IgAIC的作用。

关键词： U937细胞单核细胞 Fc受体免疫复合物免疫球蛋白A

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神经生长因子的药代动力学研究

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中国药学杂志 2000年第3期35卷 181-184页

作者：姜国辉唐刚华张云陈力真王世真王树惠中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物免疫研究室北京100730

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓... 详细信息

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓度。结果 :静注12 5I NGF 2 5 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β为 2 .2 2 3h ,酸沉法为 2 .2 6 4h。肌注12 5I NGF75 ,2 5 ,1 0 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .1 4 0 ,2 .331 ,3.1 73h ,酸沉法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .480 ,2 .5 5 2 ,2 .6 42h ,达峰时间tmax为 0 .5 83h。电泳法和酸沉法测得12 5I NGF平均血浆清除率 (Cl)分别为 0 .32 1和 0 .332L·h-1·kg-1,表观分布容积 (Vd)为 1 .2 5 9和 1 .31 5L·kg-1,体内平均滞留时间 (MRT)为 3.5 92和 3.5 39h。结论 :NGF在体内消除半衰期较短。本研究为今后的临床应用提供了必要的参考资料。

关键词：神经生长因子药代动力学小鼠 NGF

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人红细胞源性降压因子的舒血管机制

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中华医学杂志 2002年第3期82卷 194-197页

作者：万方文允镒中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理系100005

目的　研究一种新的红细胞源性降压因子 (EDDF)对正常大鼠及左旋硝基精氨酸 (L NNA)高血压大鼠主动脉一氧化氮 (NO) /cGMP通路的影响。方法　 30只雄性Wistar大鼠 ,分为对照组及高血压模型组 ,每组 15只。模型制备是通过腹腔注射L NNA(1... 详细信息

目的　研究一种新的红细胞源性降压因子 (EDDF)对正常大鼠及左旋硝基精氨酸 (L NNA)高血压大鼠主动脉一氧化氮 (NO) /cGMP通路的影响。方法　 30只雄性Wistar大鼠 ,分为对照组及高血压模型组 ,每组 15只。模型制备是通过腹腔注射L NNA(15mg/kg) ,每日 2次 ,连续 4周。应用放免法及3 H 左旋硝基精氨酸 (L arg)掺入等方法分别测定主动脉和血浆cGMP水平及主动脉L arg掺入率。应用免疫组化法对主动脉一氧化氮合酶 (NOS)染色。结果　L NNA组用药后次日血压即开始升高 (18 8kPavs16 4kPa ,P <0 0 5 ) ,以后持续升高并稳定于高水平 ;L NNA组L arg的转化率 (pmol·mg-1蛋白·min-1)明显低于正常组 (13 1± 0 9vs 16 8± 1 2 ,P <0 0 5 )。在L NNA组主动脉cGMP水平 (pmol/g)也明显低于正常组 (14 8± 16vs 186± 12 ,P <0 0 5 )。L NNA组主动脉NOS酶免疫组化染色比对照组明显变浅。EDDF(10 4mg/ml)可使正常大鼠主动脉L arg转化率及cGMP水平明显升高。孵育前后L arg转化率及cGMP水平分别为 16 8± 1 2vs 2 0 1± 0 9(P <0 0 5 )和 187pmol/g± 10pmol/gvs 2 33pmol/g± 14pmol/g(P <0 0 5 )。但EDDF对L NNA大鼠主动脉NOS底物转化率与cGMP水平无显著影响。

关键词：硝基精氨酸一氧化氮合酶红细胞源性降压因子血管舒张高血压

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阿片类药物对NG108-15细胞Ca^(2+)/钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的作用

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药学学报 2001年第9期36卷 652-656页

作者：郭庆民刘景生中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所药理室北京100005

目的　观察阿片类依赖时Ca2 + 钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的变化。方法　以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 32 P参入法测定cAMP水平、钙调蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖的蛋... 详细信息

目的　观察阿片类依赖时Ca2 + 钙调蛋白依赖的蛋白激酶II信息通路的变化。方法　以NG10 8 15细胞作为体外的细胞模型 ,分别用竞争性蛋白结合法及放射免疫法、PDE法、γ 32 P参入法测定cAMP水平、钙调蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖的蛋白激酶II(CaMKII)活性。结果　DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h可使细胞浆和细胞核CaM和CaMKII活性升高 ,该变化可被CaM特异性拮抗剂W 7所抑制 ;CaMKII特异性抑制剂KN 6 2可抑制CaMKII活性的增高 ,而对CaM活性无明显影响。DPDPE作用NG10 8 15细胞 48h后 ,加入纳洛酮 ,CaM活性、CaMKII活性进一步增高。结论　Ca2 + CaMKII信息通路参与了阿片依赖的机制。

关键词：阿片类药物钙调蛋白蛋白激酶Ⅱ NG108-15细胞 CaMKⅡ

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钙通道不同分型与亚基和抗高血压药物的关系

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中国药理学通报 2008年第5期24卷 569-572页

作者：薛全福王振纲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理学系北京100005

该文阐述电压依赖性钙通道不同分型与亚型和抗高血压药物的关系。(1)传统的L型电压依赖性钙通道阻断剂舒张肾入球小动脉,但对肾出球小动脉无作用。第3代新的双氢吡啶类钙通道阻断剂(manidipine,nilvadipine,benzin-damine和efonidipine... 详细信息

该文阐述电压依赖性钙通道不同分型与亚型和抗高血压药物的关系。(1)传统的L型电压依赖性钙通道阻断剂舒张肾入球小动脉,但对肾出球小动脉无作用。第3代新的双氢吡啶类钙通道阻断剂(manidipine,nilvadipine,benzin-damine和efonidipine)能同时作用L及T型钙通道,对肾出球小动脉也能舒张,故对肾性高血压有效,并起保护肾脏作用。(2)L型钙通道的主要组成α1c亚基,在高血压时表达增加,使钙通道数量增多,从而加速高血压的发展,故能使α1c亚基数目恢复正常的药物,有望用于临床治疗高血压。

关键词：电压依赖性钙通道分型亚基钙通道阻断剂高血压

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