检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2001年第6期21卷 594-599页

作者：史耕先刘音李琳朱立平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室北京100005

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包... 详细信息

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包装后转导淋巴细胞 ,经G418筛选 ,用有限稀释法克隆转导成功的淋巴细胞。Northern杂交和RT PCR检测转导基因的mRNA表达水平。ConA结合试验检测细胞在转导基因后 6A8α 甘露糖苷酶活性的改变。结果　pAGX 反义6A8DNA及pAGX 正义 6A8DNA经包装获得了高复制滴度的重组AAV(rAAV)颗粒 ,藉助rAAV成功地把 6A8基因转导入EB病毒转化的B细胞株SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB。Northern杂交结果显示 ,转导的正义或反义 6A8DNA获得表达。经 1年余传代培养 ,RT PCR检测见BJAB和SKW6细胞中转导的正义或反义 6A8DNA的mRNA表达增加 ,新霉素抗性基因 (neoR)也获得表达 ,表明转导基因获得了长期表达。ConA结合强度在转导反义 6A8DNA的细胞升高 ,提示转导反义 6A8DNA可影响 6A8α 甘露糖苷酶的表达。结论　用AAV载体成功地把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB ,转导的基因获得长期表达 ,并干扰 6A8α 甘露糖苷酶的表达。

关键词：重组腺相关病病毒 EB病毒转化 B淋巴细胞外源基因转导

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茶儿茶素抗大鼠脑缺血再灌注损伤与对脑细胞内Ca^(2+)的作用

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中国药学杂志 2003年第12期38卷 917-919页

作者：方芳崔志清韩永晶中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050 天津医科大学基础医学院药理教研室天津300070

目的　本研究观察茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑细胞内钙离子浓度和海马组织细胞的作用 ,进一步阐明其对缺血再灌注损伤的保护机制。方法　采用钳夹双侧颈总动脉和迷走神经缺血 6 0min再灌注 30min的动物模型 ,荧光分光光度法测定脑细... 详细信息

目的　本研究观察茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑细胞内钙离子浓度和海马组织细胞的作用 ,进一步阐明其对缺血再灌注损伤的保护机制。方法　采用钳夹双侧颈总动脉和迷走神经缺血 6 0min再灌注 30min的动物模型 ,荧光分光光度法测定脑细胞内钙离子浓度并观察神经细胞损伤程度。结果　模型组脑细胞内钙离子浓度显著高于正常组 (P <0 .0 1) ,海马组织呈明显的损伤 ,茶儿茶素 (5 0mg·kg-1,ip ,qd× 7)组显著降低脑缺血再灌注后脑细胞内钙离子浓度 ,损伤程度也较模型组轻。结论　茶儿茶素可能通过降低脑细胞内钙离子浓度 ,保护脑组织对抗缺血再灌注损伤。

关键词：茶儿茶素脑缺血再灌注损伤脑细胞 Ca^2+ 海马组织

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疟疾网络资源在疟原虫分子生物学研究中的应用

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第6期18卷 366-371页

作者：林澄涛王恒中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学病原学教研室北京100005

疾是世界性传染病,每年有数百万人死于疟疾.互联网上有非常丰富的与疟疾研究有关的信息资源,如能充分利用,对促进疟疾研究有着重要的意义.本文收集了互联网络上与疟疾有关的主要网站资源,并以我实验室利用网络资源筛选恶性疟原虫膜蛋白... 详细信息

疾是世界性传染病,每年有数百万人死于疟疾.互联网上有非常丰富的与疟疾研究有关的信息资源,如能充分利用,对促进疟疾研究有着重要的意义.本文收集了互联网络上与疟疾有关的主要网站资源,并以我实验室利用网络资源筛选恶性疟原虫膜蛋白新基因序列为例,介绍网络资源在疟原虫分子生物学研究中的具体应用.

关键词：疟疾网络资源疟原虫分子生物学研究

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编码人分化抗原5C5全长cDNA的克隆及功能初探

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中华微生物学和免疫学杂志 2000年第3期20卷 248-252页

作者：马凤蓉阎民孟晓燕赵方萄汪燚史耕先刘音王讯朱立平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学免疫学教研室

目的　编码 5C5分化抗原全长cDNA的克隆及功能探索。方法　构建人活化B细胞株3D5细胞的λgt11cDNA文库 ,以核苷酸杂交法从cDNA文库中筛选阳性克隆 ,作核苷酸序列分析 ,编码蛋白质氨基酸序列的亲疏水分析 ,Northernblot测 5C5mRNA转录本... 详细信息

目的　编码 5C5分化抗原全长cDNA的克隆及功能探索。方法　构建人活化B细胞株3D5细胞的λgt11cDNA文库 ,以核苷酸杂交法从cDNA文库中筛选阳性克隆 ,作核苷酸序列分析 ,编码蛋白质氨基酸序列的亲疏水分析 ,Northernblot测 5C5mRNA转录本长度 ,用RT PCR检测 5C5mRNA在不同细胞株的表达 ,观察单抗 5C5 G1对 3D5细胞增殖的影响。结果　从人活化B细胞株 3D5的λgt11cDNA文库筛选到长 90 5bp的 5C5 1cDNA及 75 4bp的 5C5 2cDNA。 5C5 1cDNA序列内有 1个开放阅读框架 (19～ 5 37bp) ,编码 179个aa的蛋白质。此蛋白质内有一穿膜螺旋结构 (94～ 114aa) ,其N端在胞内。 5C5 2cDNA从 16 3到 45 9为开放阅读框架 ,编码 99个aa的蛋白质。从Northernblot见0 9kb左右和 0 7kb左右 2条杂交带。由RT PCR见 5C5mRNA在 3D5细胞强表达 ,在Daudi细胞表达次之 ,在Jurkat细胞表达最弱。单抗 5C5 G1有增强cpBCGF诱导 3D5细胞增殖的作用。结论　长90 5bp的 5C5 1cDNA为 1个全长cDNA。编码 1个膜蛋白 ,可能参与 3D5细胞的增殖反应。

关键词： 5C5 cDNA 亮氨酸拉链蛋白 B细胞分化抗原

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合并应用甾体激素与低剂量棉酚对雄性大鼠的抗生育效果及其作用机制

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中国医学科学院学报 2000年第3期22卷 214-219页

作者：王岚叶惟三刘霄郭燕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织胚胎教研室北京100005

目的　论证甾体激素与低剂量棉酚组合用药的雄性抗生育作用的可行性及其作用机制。方法　用低剂量棉酚 12 mg/ (kg· d) ,甲基睾丸素 2 0 mg/ (kg· d)、炔雌醇 10 0 μg/ (kg· d)喂服 Wistar大鼠 6周 ,部分取材 ,开始... 详细信息

目的　论证甾体激素与低剂量棉酚组合用药的雄性抗生育作用的可行性及其作用机制。方法　用低剂量棉酚 12 mg/ (kg· d) ,甲基睾丸素 2 0 mg/ (kg· d)、炔雌醇 10 0 μg/ (kg· d)喂服 Wistar大鼠 6周 ,部分取材 ,开始合笼 ;继续用棉酚 12 m g/ (kg· d)维持 12周 ,部分取材 ;余下大鼠停药 ,观察恢复情况。取材做大鼠睾丸精子计数、精子活动度 ,睾丸切片的形态学观察等。结果　用药 6周大鼠的生精过程受到不完全抑制 ,附睾精子全部失去活力。用药 6 + 12周大鼠的曲细精管 - 期数量比例为 (9.3± 3.4) % ,比对照组 (2 6 .8± 1.7) %显著下降 ; - 期数量比例为 (36 .7± 5 .0 ) % ,比对照组 (2 4.5± 2 .7) %显著上升 ; - 期数量比例为 (3.6± 0 .6 ) % ,比对照组 (6 .0±0 .4) %显著下降。附睾精子全部失去活力。结论　甾体激素与低剂量棉酚从不同的作用位点共同作用于生精过程 ,在短时间内完全可以达到抗生育效果 ;低剂量棉酚长时期作用 ,不仅在附睾行使其抗生育功能 ,还影响生精过程产生精子的质量。此雄性抗生育作用具有可逆性。

关键词：甾体激素低剂量棉酚避孕药男性

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6A8α-甘露糖苷酶酶解p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside

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中国医学科学院学报 2001年第5期23卷 423-427页

作者：王壮志李琳史耕先刘音赵方萄朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后... 详细信息

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后的cDNA片段经测序完全符合6A8cDNA碱基顺序。转染重组表达载体pCDI-6A8的COS-7细胞的匀浆对p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用为转染空载体pCDI的细胞及野生型细胞的3～4倍,且这种酶解作用不能被swainsonine所抑制。Westernblot检测显示在相对分子质量(Mr)120000处有一明显蛋白带,此带的显影于转染pCDI-6A8cDNA的细胞明显深于转染空载pCDI及野生型细胞。结论6A8cDNA编码的蛋白质确为一种α-甘露糖苷酶,属于Ⅱ类α-甘露糖苷酶。

关键词： 6A8 α-甘露糖苷酶 COS-7细胞瞬时表达

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大鼠再生肝对二乙基亚硝胺启动作用的敏感性

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中华病理学杂志 1998年第1期27卷 23-26页

作者：韩广洲陈晋彦丁濂张连惠杨志刚徐蓓北京中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理室山东潍坊医学院病理学教研室

目的比较再生肝和正常肝对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）启动作用的敏感性。方法以２／３肝叶切除后８周末的大鼠为实验组，正常大鼠为对照组，作如下比较：肝重、常规组织学检查及３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验；用修改的Ｓｏｌｔ－Ｆａｒｂｅｒ模型... 详细信息

目的比较再生肝和正常肝对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）启动作用的敏感性。方法以２／３肝叶切除后８周末的大鼠为实验组，正常大鼠为对照组，作如下比较：肝重、常规组织学检查及３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验；用修改的Ｓｏｌｔ－Ｆａｒｂｅｒ模型，通过对ＧＧＴ阳性癌前病灶的体视学测量，观察肝脏对ＤＥＮ的启动效应；在体内和体外（无血清原代培养肝细胞）经ＤＥＮ攻击后，以核酸原位缺口标记方法观察肝细胞ＤＮＡ的损伤程度。结果２／３肝叶切除后８周末的实验组肝脏的修复过程已完成，未见肝细胞继续增生的表现；经ＤＥＮ攻击后，实验组肝癌前病灶在数密度和体积密度上都显著高于对照组；无论在体内或体外接受ＤＥＮ攻击后，实验组肝细胞ＤＮＡ的损伤程度都显著大于对照组。结论即使再生过程已经完成，再生肝仍比正常肝具有较高的致癌敏感性，这与再生肝肝细胞在ＤＥＮ攻击后其ＤＮＡ损伤较重相关。

关键词：肝再生致癌性二乙基亚硝胺肝肿瘤

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阿司匹林对内皮细胞与中性粒细胞及单核细胞粘附的影响

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药学学报 2000年第5期35卷 312-325页

作者：林勇高存记孙颂三汪钟首都医科大学药理教研室北京100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的　研究阿司匹林对TNFα 诱导的内皮细胞与中性粒细胞及单核细胞粘附的抑制作用及作用机制。方法　用髓过氧化酶法测定白细胞与内皮细胞的粘附 ,ELISA法测定内皮细胞粘附分子的表达。结果　阿司匹林(6 0 0～ 90 0mg·L-1)可抑制... 详细信息

目的　研究阿司匹林对TNFα 诱导的内皮细胞与中性粒细胞及单核细胞粘附的抑制作用及作用机制。方法　用髓过氧化酶法测定白细胞与内皮细胞的粘附 ,ELISA法测定内皮细胞粘附分子的表达。结果　阿司匹林(6 0 0～ 90 0mg·L-1)可抑制中性粒细胞及单核细胞与TNFα激活 6h的内皮细胞粘附 ;而TNFα 激活内皮细胞后 2 4h ,阿司匹林对单核细胞与其粘附的抑制作用增强但却不抑制中性粒细胞与其粘附。结论　阿司匹林通过抑制E selectin的表达而降低TNFα诱导的内皮细胞与中性粒细胞的粘附 ,并通过抑制VCAM 1的表达降低TNFα诱导的内皮细胞与单核细胞的粘附。

关键词：阿司匹林内皮细胞中性粒细胞单核细胞

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mm-LDL对內皮细胞转录因子NF-kB活性的影响

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中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 312-316页

作者：尹鸿操刘欣岩刘佩毛张华梁平王宗立佘铭鹏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理学教研室北京100005

目的研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白... 详细信息

目的研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白，用凝胶阻滞实验检测转录因子NF-kB核转位及结合活性的变化。观察自由基清除剂probucol及PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB的影响。通过检测报告基因探讨核因子诱导激酶（NIK）和核因子-kB抑制亚基激酶(IKK)在激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径中的作用以及mm-LDL激活的NF-kB对PDGFb基因启动子的作用。结果 mm-LDL能激活培养内皮细胞转录因子NF-kB, 自由基清除剂probucol和PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB无明显抑制作用。变异型NIK及IKK能显著降低报告基因荧光素酶的活性，mm-LDL激活的NF-kB还能增加带有PDGFb基因上游调控序列（-189/＋43）的报告基因荧光素酶的活性。Slot blot结果显示变异型NIK能显著减少受mm-LDL刺激的内皮细胞 PDGFb mRNA含量。结论 mm-LDL可通过NIK-IKK途径激活内皮细胞转录因子NF-kB并促进PDGFb基因表达。

关键词：轻微修饰低密度脂蛋白动脉粥样硬化内皮细胞 NF-kB 核因子诱导激酶

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人参二醇组皂甙对佛波酯诱导心肌细胞蛋白激酶C活力的影响

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药学学报 1994年第6期29卷 464-467页

作者：徐学萍肖殿模周文华王小鲁张俊宝邵春杰赵雪俭陈华粹中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所扬州医学院生化教研室白求恩医科大学

人参二醇组皂甙对佛波酯诱导心肌细胞蛋白激酶Ｃ活力的影响徐学萍，肖殿模，周文华，王小鲁，张俊宝，邵春杰，赵雪俭，陈华粹（中国医学科学院，中国协和医科大学基础医学研究所北京１００００５）人参皂甙为人参主要活性成分之一，有... 详细信息

人参二醇组皂甙对佛波酯诱导心肌细胞蛋白激酶Ｃ活力的影响徐学萍，肖殿模，周文华，王小鲁，张俊宝，邵春杰，赵雪俭，陈华粹（中国医学科学院，中国协和医科大学基础医学研究所北京１００００５）人参皂甙为人参主要活性成分之一，有多种药理活性和防治心血管疾病的作用...

关键词：人参皂甙蛋白激酶C 佛波酯

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