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第八届海峡两岸心血管科学研讨会

作者：丁帆程秀丽闫莉谷婧丽郝维高雪曹济民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系

目的我们已发现生长素释放肽hexarelin可抑制动脉粥样硬化,但其机制不甚清楚。该工作探讨清道夫受体LOX-1在hexarelin抑制巨噬细胞向泡沫细胞转化中的可能作用。方法未经处理的RAW264.7巨噬细胞作为正常对照组。由于正常巨噬细胞LOX-1... 详细信息

目的我们已发现生长素释放肽hexarelin可抑制动脉粥样硬化,但其机制不甚清楚。该工作探讨清道夫受体LOX-1在hexarelin抑制巨噬细胞向泡沫细胞转化中的可能作用。方法未经处理的RAW264.7巨噬细胞作为正常对照组。由于正常巨噬细胞LOX-1的表达水平很低,因此将TNF-α（10ng·mL）诱导5h后的RAW264.7细胞作为LOX-1高表达组（10ng·mL TNF-α）。其它处理包括hexarelin组（TNF-α+10 M hexarelin）与hexarelin受体阻断剂组（TNF-α+Hexsrelin+10-6 M D+Lys-GHRP-6）。上述处理6h候后,加ox-LDL 10μg·mL-1（用于油红O染色）或Dil-ox-LDL（用于流式）过夜。用油红O染色测定巨噬细胞吞噬ox-LDL的量,用Western blot方法检测细胞LOX-1的表达量,用流式细胞术同时检测细胞LOX-1的表达量与细胞内ox-LDL的含量。结果 hexarelin明显抑制RAW264 7细胞吞噬ox-LDL,并降低LOX-1的表达水平;相反,阻断GHS-R后RAW264.7细胞吞噬ox-LDL的量以及LOX-1的表达量明显升高。双标（Dil-oxLDL和FITC-LOX-1）细胞的流式结果表明,细胞吞噬ox-LDL的量与LOX-1的表达水平有明显正相关性;阻断GHS-R后ox-LDL的吞噬量与LOX-1表达水平均升高。结论 hexarelin通过激动其受体GHS-R有效抑制RAW264 7巨噬细胞LOX-1的表达和吞噬ox-LDL,从而抑制泡沫细胞的形成。结果提示,LOX-1可能是GHS-R的下游信号,参与hexarelin抑制动脉粥样硬化的作用。

关键词：生长素释放肽hexarelin 动脉粥样硬化 LOX-1 抑制巨噬细胞

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促离子型谷氨酸受体介导RAW264.7巨噬细胞释放TNF-α

促离子型谷氨酸受体介导RAW264.7巨噬细胞释放TNF-α

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第八届海峡两岸心血管科学研讨会

作者：程秀丽丁帆闫莉谷婧丽郝维高雪曹济民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系

目的外周谷氨酸信号通路与炎症和动脉粥样硬化的关系尚不明确。该工作探讨促离子型谷氨酸受体与RAW264.7巨噬细胞释放促炎细胞因子TNF-α的关系。方法将RAW264.7细胞分成正常对照组、谷氨酸单钠组(10～4 ML-glutamic acidmonosodium)、N... 详细信息

目的外周谷氨酸信号通路与炎症和动脉粥样硬化的关系尚不明确。该工作探讨促离子型谷氨酸受体与RAW264.7巨噬细胞释放促炎细胞因子TNF-α的关系。方法将RAW264.7细胞分成正常对照组、谷氨酸单钠组(10～4 ML-glutamic acidmonosodium)、NMDA(10～4M)组、AMPA(10～4M)组、KA组(kinate acid,10～4M)、APV+NMDA组(APV为NMDA受体阻断剂,终浓度10～4M)及CNQX+AMPA组(CNQX为AMPA受体的阻断剂,终浓度10～4M),不同药物作用24 h后,MTS法检测细胞存活率,ELISA法检测细胞上清液中TNF-α的分泌情况,Western blot检测细胞表达TNF-α蛋白的变化。结果 10～4M AMPA明显抑制RAW264.7的活性,其他药物没有明显影响。ELISA结果表明,不同药物作用24 h后,细胞上清液中TNF-α含量均明显上升,其中AMPA激动剂的作用最强,加入AMPA受体阻断剂CNQX后,TNF-α的分泌被明显抑制。10～4M AMPA与其他组相比能够使RAW264.7细胞内TNF-α蛋白的表达量明显上调。结论激活促离子型谷氨酸受体能够促进RAW264.7细胞分泌TNF-α,其中AMPA受体激动后的作用最明显。结果提示,谷氨酸可通过激动促离子型谷氨酸受体促进巨噬细胞释放TNF-α,其中AMPA受体发挥的作用最大。研究提示,促离子型谷氨酸受体可能参与巨噬细胞激活、炎症启动和动脉粥样硬化的形成。

关键词：谷氨酸受体 RAW264.7 巨噬细胞 TNF-α

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GHRP-6对小鼠日节律的影响

GHRP-6对小鼠日节律的影响

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中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：周岚张鹏郝维曹济民中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理和病理生理学系

背景及目的:生长素释放肽-6(GHRP-6)是一种人工合成的生长素促秘素(GHS),可通过GHS受体(GHS-R)影响摄食、睡眠和发挥心血管保护作用。由于生物钟中枢视交叉上核(SCN)存在GHS-R,我们推测GHRP-6可能对生物节律(如运动节律)有明显影响。本... 详细信息

背景及目的:生长素释放肽-6(GHRP-6)是一种人工合成的生长素促秘素(GHS),可通过GHS受体(GHS-R)影响摄食、睡眠和发挥心血管保护作用。由于生物钟中枢视交叉上核(SCN)存在GHS-R,我们推测GHRP-6可能对生物节律(如运动节律)有明显影响。本研究的目的就是验证这一设想。方法:利用VitalView转轮运动行为节律监测、在体SCN放电记录、流式细胞技术、高压液相、real-time RT-PCR、免疫组化等技术,研究GHRP-6对C57BL/6小鼠转轮运动日节律的影响,并探讨GHRP-6影响日节律的分子机制。结果:(1)在昼夜交替时(CT12)给予GHRP-6(100μg/kg)皮下注射可使C57BL/6小鼠转轮运动日节律明显延长,运动日周期向后漂移,并降低运动活性;(2)用选择性GHS-R阻滞剂α-lys-(+)-GHRP-6阻断GHS-R后,GHRP-6不再引起转轮运动日节律延长,运动周期不再出现漂移;(3)在CT12给予GHRP-6后使C57BL/6小鼠SCN的胞内游离钙急剧增高,并使SCN放电频率明显增高,但SCN内谷氨酸的释放量却明显降低;(4)GHRP-6引起SCN磷酸化的cAMP效应元件结合蛋白(CREB)水平明显增高;(5)GHRP-6还引起per1基因转录水平明显升高,但并不引起per1蛋白表达的升高;(6)GHRP-6引起核心钟蛋白clock、bmal1表达降低及与运动功能密切相关的钟控蛋白prokineticin 2(PK2)表达增高。结论:GHRP-6使C57BL/6小鼠转轮运动日周期明显延长,且运动活性降低,其可能的分子机制是:GHRP-6通过激活GHS-R,使SCN内神经元细胞胞内钙释放增加,从而引起CREB蛋白的磷酸化增强和神经元细胞放电频率增高,进而使per1基因的表达急剧升高,引起钟基因和钟控基因震荡节律向后漂移。

关键词：生长素释放肽日节律钙 CREB

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生长素释放肽对心血管和胃肠保护作用的系列研究

生长素释放肽对心血管和胃肠保护作用的系列研究

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中国生理学会心血管生理学术研讨会

作者：曹济民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系

生长素释放肽(growth hormone releasing peptides,GHRP)是一类人工合成的、含有D型氨基酸残基的寡肽(一般为六肽),属于生长素促泌素受体(growth hormone secretagoguesreceptor,GHSR)的肽类激动剂。GHSR在全身绝大多数器官和细胞均有表... 详细信息

生长素释放肽(growth hormone releasing peptides,GHRP)是一类人工合成的、含有D型氨基酸残基的寡肽(一般为六肽),属于生长素促泌素受体(growth hormone secretagoguesreceptor,GHSR)的肽类激动剂。GHSR在全身绝大多数器官和细胞均有表达,提示其具有广泛的生物效应。GHRP与ghrelin的作用类似,但不完全相同。早期发现GHRP具有促进脑垂体生长素释放的作用,当时研究的初衷是开发促进生长素释放的药物,用于治疗生长素分泌低下的疾病。后来发现GHRP的作用在很大程度上不完全依赖生长素的分泌。我们近年来以大鼠为模型,对GHRP的器官保护(特别是心血管和胃肠道)作用开展了系列研究,主要发现如下:(1)GHRP具有强心作用,能促进心肌收缩和舒张,但对心率无明显影响;(2)GHRP可明显改善衰竭心脏的泵功能和病理性重塑,抑制衰竭心脏的心肌细胞凋亡,改善严重心衰时的恶液质状况;(3)GHRP对自发性高血压大鼠具有轻度降压作用,并明显抑制心肌纤维化;在细胞水平,GHRP可抑制心脏成纤维细胞的胶原合成;(4)GHRP明显抑制高脂食物诱导的动脉粥样硬化,减少粥样斑块的形成,并在一定程度上改善血脂的异常变化,明显减轻动脉中膜钙化;(5)GHRP可预防大鼠水浸应激所致的急性胃粘膜出血性损伤和溃疡形成,这种保护作用与抑制大鼠水浸应激时的迷走神经过度兴奋、胃酸分泌增加以及对胃粘膜细胞的保护作用密切相关。通过这些研究,我们认为GHRP具有广泛的细胞保护作用,推测其对其它器官损伤也有保护作用。由于GHRP分子量小,可化学合成,化学性质稳定,在体内降解速度较慢,毒性极低,成本较低,因而很有药物开发价值,值得关注。

关键词：生长素释放肽保护作用心血管系列研究

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维生素C对小鼠日节律的影响

维生素C对小鼠日节律的影响

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中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：张鹏周岚郝维曹济民中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理和病理生理学系

目的:研究维生素C对小鼠日节律的影响以及在改善时差综合症中的应用。方法:试验用18只6周龄C57BL/6J小鼠,在全黑暗(DD)条件下适应14天,待出现稳定的自主节律后进行实验。实验分为三部分。(1)维生素C对转轮日节律的影响:将动物随机分为2... 详细信息

目的:研究维生素C对小鼠日节律的影响以及在改善时差综合症中的应用。方法:试验用18只6周龄C57BL/6J小鼠,在全黑暗(DD)条件下适应14天,待出现稳定的自主节律后进行实验。实验分为三部分。(1)维生素C对转轮日节律的影响:将动物随机分为2组(每组n=9组)。维生素C注射组:选择circadiantime(CT)14和CT22时间点,肌注维生素C(20mg)后,使用VitalView动物行为节律记录系统观察肌注维生素C对小鼠转轮昼夜节律的影响;对照组:肌注等量生理盐水,其它处理相同。(2)维生素C对视交叉上核(SCN)兴奋性递质谷氨酸水平的影响:选取9只6周龄C57BL/6J小鼠,在肌注维生素C(20mg,n=6)后,处死动物,取SCN组织,匀浆后取上清,用高压液相色谱法(HPLC)检测谷氨酸含量。肌注生理盐水作为对照(n=3)。(3)维生素C对SCN神经元放电的影响:用玻璃微电极在体记录小鼠SCN神经元放电,观察注射维生素C对放电的影响(维生素C组和对照组均为n=6)。结果:一次性肌注维生素C后,当注射时间为CT14时,小鼠转轮日节律相位延长(后移)约15分钟左右;当注射时间为CT22时,转轮日节律没有相移。在CT14注射维生素C后,HPLC检测到SCN中的谷氨酸量与对照组相比明显增加,而在CT22时间点接受维生素C注射对SCN谷氨酸水平的影响明显低于CT14时。在CT14注射维生素C后,SCN神经元放电频率明显增高,而在CT22时间点接受维生素C注射对SCN放电的影响明显低于CT14时。结论:经外周途径(肌注)给予维生素C对小鼠日节律有明显影响,且这种影响主要表现在小鼠在CT14时间点接受维生素C注射时。维生素C的上述作用可能是通过促进SCN区神经递质谷氨酸的释放所致。结果提示,在适当时间给予维生素C可能有助于改善时差综合症。

关键词：维生素C 生物钟谷氨酸 SCN

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不同作息制度影响小鼠倒时差后的适应速度

不同作息制度影响小鼠倒时差后的适应速度

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中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：周岚张鹏郝维曹济民中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院生理和病理生理学系

目的:倒时差综合征是跨时区旅行或倒班的人们遇到的有害于健康的问题,至今仍没有一个十分有效的治疗方法。临床上常采用药物辅助治疗及光疗的方法。本实验旨在探索一种简单易行且行之有效的作息制度,帮助个体迅速适应新的时间环境。方法... 详细信息

目的:倒时差综合征是跨时区旅行或倒班的人们遇到的有害于健康的问题,至今仍没有一个十分有效的治疗方法。临床上常采用药物辅助治疗及光疗的方法。本实验旨在探索一种简单易行且行之有效的作息制度,帮助个体迅速适应新的时间环境。方法:利用VitalView转轮运动行为节律监测系统记录了小鼠在适应了短白天光制(8h light:8h dark)、长白天光制(16h light:8h dark)及正常光制(12h light:12h dark)一周后,将光照开始时间推迟8h,模拟倒时差效应,观察小鼠睡眠-觉醒节律的改变。利用real-time RT-PCR技术,检测小鼠视交叉上核(SCN)钟基因表达节律在倒时差前和倒时差后第三天的改变及其适应新环境的速度。结果:短白天光制的小鼠(n=6)用2.33天适应新光制,长白天光制的小鼠(n=6)用5.00天适应新光制,正常光制的小鼠(n=6)用4.33天适应新光制。倒时差后第三天,检测SCN钟基因bmal1、per1表达节律的改变,发现短白天光制组钟基因表达高峰已漂移了8h,完全适应了新环境,长白天光制组和正常光制组钟基因表达高峰分别漂移了4h和6h。结论:倒时差前一周采用短白天作息制度,能有效加快小鼠适应新环境的速度。这可能是一种简便易行且有效的减轻倒时差综合症的方法。

关键词：短白天光制倒时差日节律 SCN

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快速构建蛋白质结构域克隆库的方法

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第4期19卷 537-541页

作者：马素参黄海明彭隽敏俞强任瑞宝高友鹤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系美国Emory大学亚特兰大30322 美国Boston大学波士顿02215 美国Brandeis大学波士顿02454

对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法 .从研究的生物学意义和可行性考虑 ,提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究 .SH2 (Srchomology 2 )结构域是细胞信号转导中重要的元件之一 ,人SH2结构域共有约 12 0种 ,对其进行研究将深刻揭... 详细信息

对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法 .从研究的生物学意义和可行性考虑 ,提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究 .SH2 (Srchomology 2 )结构域是细胞信号转导中重要的元件之一 ,人SH2结构域共有约 12 0种 ,对其进行研究将深刻揭示细胞信号转导的规律 .为了得到人所有的SH2结构域序列及克隆 ,首先在公共数据库里检索出了人所有的SH2结构域序列 ,利用国际上现有的共享资源IMAGE(IntegratedMolecularAnalysisofGenomesandTheirExpression)克隆为PCR模板 ,解决了从cDNA文库中难以克隆低丰度结构域的问题 .利用有方向性的TOPO克隆技术提高克隆效率 ,从而快速高效地构建了包括 6 0个SH2结构域的克隆库 .克隆库可以方便地转换到GATEWAY系统具有各种用途的载体上。

关键词：蛋白质结构域克隆库结构域蛋白质组学 SH2结构域细胞信号转导

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内蒙古自治区2491名成年人血管阻力与血脂的关系

内蒙古自治区2491名成年人血管阻力与血脂的关系

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第八届海峡两岸心血管科学研讨会

作者：王丹阳齐保申潘阳杏徐成丽黄付敏韩少梅祖淑玉朱广瑾中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学与病理生理学系

目的研究成人血管阻力与血脂四项的关系,为相关疾病的预测预防提供参考数据。方法采用多阶段整群抽样方法,抽取内蒙古自治区部分地区19～86岁健康成年受试者2491名,测量和检测身高、体重、心功能和血脂四项。分析体循环血管阻力（system... 详细信息

目的研究成人血管阻力与血脂四项的关系,为相关疾病的预测预防提供参考数据。方法采用多阶段整群抽样方法,抽取内蒙古自治区部分地区19～86岁健康成年受试者2491名,测量和检测身高、体重、心功能和血脂四项。分析体循环血管阻力（systemic vascular resistance,SVR）与总胆固醇（totalcholesterol,TC）、三酰甘油（triacylglycerol,TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（low densitylipoprotein cholesterol,LDL-C）血脂四项的关系。结果受试者体重指数（body massindex,BMI）随年龄增长而增加（F=73 44,P<0.01）。SVR随年龄增长呈上升趋势（F=29.31,P<0.01）。SVR异常的发生率随年龄增长呈上升趋势（x=138.70,P<0.01）。SVR异常检出率随血脂四项的升高呈上升趋势（除LDL-C外）(TC:x=37.49,P<0.01;TG:x=14.84,P<0.01;HDL-C:x=17.97,P<0.01;LDL-C:x=14 58,P<0.01)。SVR正常组与异常组相比,后者血脂四项TC、TG、HDL-C和LDL-C均显著增高（两组比较F值分别为193.89、48.00、20.58、116.17,P均<0.01）。在校正性别、年龄、身高和体重指数（BMI）等影响因素后,SVR与TC、TG、HDL-C和LDL-C均呈正相关（r值分别为0.07、0.07、0.06、0.05,P均<0.01）。结论 BMI正常的人群中,同样存在SVR异常率。体循环血管阻力异常的发生率随血脂四项含量的升高而增加,体循环血管阻力与血脂四项存在相关性。与SVR正常者相比,SVR异常者可能更易发生血脂代谢紊乱。

关键词：体重指数体循环血管阻力总胆固醇三酰甘油高密度脂蛋白胆固醇低密度脂蛋白胆固醇

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高等医学教育教学模式的改革

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西北医学教育 2008年第6期16卷 1047-1050页

作者：冯逵北京协和医学院/清华大学医学部基础医学院/中国医学科学院基础医学研究所生理与病理生理学系

我国社会、经济、科学文化迅速发展，卫生服务需求日益增长，需要更多的高层次医学人才。高等医学教育承担着这项任务。但我国现行的高等医学教育教学模式难以很好地完成这一任务。主要存在培养目标不明确、特色不突出；课程设置以学科... 详细信息

我国社会、经济、科学文化迅速发展，卫生服务需求日益增长，需要更多的高层次医学人才。高等医学教育承担着这项任务。但我国现行的高等医学教育教学模式难以很好地完成这一任务。主要存在培养目标不明确、特色不突出；课程设置以学科为中心，教学内容偏离医学工作实际需要；教学方法以教师为中心，重知识灌输，轻技能培养和职业价值；学习评价方式重知识记忆，轻能力提高。为此，我国高等医学教育教学模式应进行改革。笔者认为应规定国家统一的高等医学教育核心教学内容，积极推进课程整合；教学方法以学生为中心，引导学生主动学习，强化实践环节；评价方式上强调能力培养，体现考试的“指挥棒”作用。

关键词：高等医学教育教学模式培养目标课程体系评价方式

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创新管理机制助推医学院校的课程思政建设

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基础医学与临床 2023年第2期43卷 360-362页

作者：黄付敏何舒雅王婧中国医学科学院、北京协和医学院教师发展中心北京100730 中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院生理学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院病理生理学系北京100005

课程思政是专业课教师在传授专业知识的同时润物细无声地将思想政治教育融入课堂教学和改革的各环节,是医学教育的应有之义,是医学院校落实立德树人根本任务的必然追求。如何真正把课程思政的教育功能融入医学专业知识的教学当中,需要... 详细信息

课程思政是专业课教师在传授专业知识的同时润物细无声地将思想政治教育融入课堂教学和改革的各环节,是医学教育的应有之义,是医学院校落实立德树人根本任务的必然追求。如何真正把课程思政的教育功能融入医学专业知识的教学当中,需要发挥教师的主导作用,创新医学院校教学管理机制。本文从教育管理主体教师的视角提出了创新完善管理机制助推医学院校课程思政建设的几点建议。

关键词：管理机制医学院校课程思政

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