检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2019年第2期50卷 201-210页

作者：卞晓翠刘玉琴杨振丽冯海凉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心北京100005

目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱... 详细信息

目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱作为细胞系的DNA指纹,然后与原始组织或国际数据库中已有细胞的STR谱进行比对,通过匹配度的高低判断该细胞是否被其他细胞交叉污染。对怀疑He La细胞污染的肿瘤细胞,检测其基因组中是否有人乳头瘤病毒18型(HPV-18)病毒插入片段。对怀疑T细胞白血病细胞污染的,则检测T细胞的各种特性(表面标志),根据表面标志表达情况判断是否为错误细胞。结果本研究共收集了37种国内建立的肿瘤细胞系46个样品。本中心建立的6株细胞系均STR正确。其他单位建立的细胞系中有8株系正确,有23(62. 2%)株系认定为错误细胞,人宫颈癌细胞He La是主要污染源;另外发现有些国内自建的细胞系被人结直肠癌细胞HCT-8、宫颈鳞癌细胞Si Ha、T细胞白血病细胞CCRF-CEM及大鼠细胞污染。结论国内建立的肿瘤细胞很高比例地发生了细胞间的交叉污染,科研人员在实验前一定要首先进行细胞身份认定,或者从国家实验细胞资源共享服务平台选择细胞。另外,建立细胞系时保留原始组织用于后续细胞系的身份认证。

关键词：短串联重复序列分型交叉污染特性鉴定聚合酶链反应肿瘤细胞细胞培养人

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抗β-淀粉样多肽抗体治疗阿尔茨海默病研究进展

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中华病理学杂志 2007年第9期36卷 633-635页

作者：张建华梁平中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学研究院病理学系北京100005

阿尔茨海默病（Alzheimerdisease，AD）是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病，也是痴呆的常见类型，以记忆障碍和认知功能损害为突出临床表现。AD三大特征性病理改变为：老年斑（senile plague，SP）、神经纤维缠结（neurofib... 详细信息

阿尔茨海默病（Alzheimerdisease，AD）是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病，也是痴呆的常见类型，以记忆障碍和认知功能损害为突出临床表现。AD三大特征性病理改变为：老年斑（senile plague，SP）、神经纤维缠结（neurofibrillary tangles，NFT）和神经元（尤其是胆碱能神经元）缺失。其中老年斑的主要成分是B-淀粉样多肽（beta-amyloid peptide，A母）聚集形成的纤维，

关键词： β-淀粉样多肽阿尔茨海默病抗体治疗神经纤维缠结胆碱能神经元神经退行性疾病 peptide 中枢神经系统

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羧胺三唑在BV2细胞模型中的抗炎作用

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 621-624页

作者：张朋飞郭磊李娟朱蕾于晓丽张德昌叶菜英中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院药理学系北京100005

目的探讨羧胺三唑(CAI)对BV2细胞模型中多种炎性细胞因子的调节作用。方法将不同浓度的CAI加入BV2细胞中培养18 h后,用CCK-8法测定其细胞数。分别用ELISA试剂盒和硝酸盐还原法测定细胞培养基上清中的TNF-α、IL-1β、IL-6、NO的含量,用... 详细信息

目的探讨羧胺三唑(CAI)对BV2细胞模型中多种炎性细胞因子的调节作用。方法将不同浓度的CAI加入BV2细胞中培养18 h后,用CCK-8法测定其细胞数。分别用ELISA试剂盒和硝酸盐还原法测定细胞培养基上清中的TNF-α、IL-1β、IL-6、NO的含量,用荧光定量PCR法测定BV2细胞中TNF-α、IL-1β、COX-2和iNOS的mRNA的含量。结果与对照组相比,CAI浓度在20、30、40μmol/L能够剂量依赖性抑制BV2细胞TNF-α的分泌[(359.4±12.9)vs(241.6±16.1),(135.7±6.4),(5.3±1.9)pg/mL,P<0.01],也可显著抑制IL-1β、NO、IL-6的分泌(P<0.01),同时也能够降低TNF-α、IL-1β、COX-2和iNOS的mRNA的表达(P<0.01)。结论 CAI能够明显降低在ALS的BV2细胞模型中炎性介质TNF-α、IL-1β、NO、IL-6的分泌以及TNF-α、IL-1β、COX-2和iNOS的mRNA的表达,对小胶质细胞的活化及其炎性反应有明显的抑制作用。

关键词：羧胺三唑小胶质细胞肌萎缩侧索硬化症肿瘤坏死因子

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线粒体内膜蛋白Mic60半量缺失与小鼠心脏衰老的相关性

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中华病理学杂志 2017年第6期46卷 406-410页

作者：王春楼孙立红岳永松牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005 中国医学科学院基础医学研究所实验动物中心中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院感染科

目的初步探索线粒体内膜蛋白Mic60与小鼠心脏衰老的关系.方法将野生型及Mic60杂合缺失雄性小鼠分为青年组（4~6个月龄,6对）及老年组（18~20个月龄,9对）,取心脏,制作石蜡、冷冻切片,提取组织蛋白.应用苏木精-伊红、Masson染色法鉴定... 详细信息

目的初步探索线粒体内膜蛋白Mic60与小鼠心脏衰老的关系.方法将野生型及Mic60杂合缺失雄性小鼠分为青年组（4~6个月龄,6对）及老年组（18~20个月龄,9对）,取心脏,制作石蜡、冷冻切片,提取组织蛋白.应用苏木精-伊红、Masson染色法鉴定小鼠心脏组织形态学变化;衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测小鼠心肌组织中β-半乳糖苷酶活性;应用免疫印迹法检测野生型小鼠心肌组织中Mic60的表达及各组小鼠心肌组织中衰老相关蛋白p21的表达.结果野生小鼠心肌组织中Mic60蛋白表达呈现年龄依赖性增高.Mic60杂合缺失导致老年小鼠左心室壁肥厚[（1.32±0.09）mm比（1.12±0.09）mm,P〈0.05]、心肌细胞肥大[（474.9±27.6）μm2比（358.8±48.7）μm2,P〈0.05]及心肌间质纤维化面积增多[（38.24±7.58）×10^3μm2比（25.81±4.12）×10^3μm2,P〈0.05],但对年轻小鼠无显著影响.同时,Mic60杂合缺失导致老年小鼠心脏衰老相关β-半乳糖苷酶活性上调（2.26±0.24比0.25±0.05,P〈0.01）,对年轻小鼠无明显影响.另外,Mic60杂合缺失老年小鼠心肌组织中衰老相关蛋白p21表达显著增加（P〈0.01）.结论通过对青年及老年组小鼠心脏衰老相关指标的检测,发现Mic60半量缺失可导致老年小鼠心肌肥厚、心肌间质纤维化及衰老相关β-半乳糖苷酶活性上调和衰老相关蛋白p21表达增加,提示线粒体内膜蛋白Mic60可能与小鼠心脏衰老有关.

关键词：肌细胞,心脏线粒体蛋白质类年龄因素动物实验

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囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用

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中国肿瘤临床 2012年第12期29卷 817-821页

作者：赵文晶杨振丽顾蓓冯海凉张敏刘艳艳李占稳刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院病理学系北京市100005

目的：探讨囊泡膜蛋白相关蛋白（VAP33）过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移的影响。方法：反转录获得VAP33cDNA，利用基因重组技术构建VAP33-GFP融合基因慢病毒表达载体（pWPXL-VAP33），在脂质体Lipofectamine2000介导下与... 详细信息

目的：探讨囊泡膜蛋白相关蛋白（VAP33）过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移的影响。方法：反转录获得VAP33cDNA，利用基因重组技术构建VAP33-GFP融合基因慢病毒表达载体（pWPXL-VAP33），在脂质体Lipofectamine2000介导下与辅助质粒（PsPAx2、MD2G）共转染293T细胞包装生产重组慢病毒。取病毒上清感染内源性低表达VAP33的DG6细胞，通过荧光显微镜挑选、Western-blot鉴定获得VAP33稳定过表达的阳性单克隆细胞株（DG6-VAP33）。M1vr法检测细胞增殖情况，Transwell和集落形成检测肿瘤细胞体外侵袭、成瘤能力。同时建立小鼠皮下移植瘤模型，连续6周观察VAP33过表达对活体内肿瘤细胞生长、成瘤、转移能力的影响。结果：重组慢病毒表达载体pWPXL-VAP33构建成功，包装滴度达6×10^3IU／mL，感染DG6细胞后筛选到VAP33稳定过表达细胞株（DG6-VAP33）。与DG6细胞相比，DG6-VAP33细胞体外增殖减慢，每孔集落数分别为（52±8）个和（36±5）个（P〈0．05）；Transwell方法观察到，DG6-VAP33细胞体外侵袭能力显著下降，穿膜细胞数（14＋11）个少于DG6（36±17）个（P〈0．01）。通过6周的连续观察，DG6-VAP33组肿瘤生长速度显著慢于DG6组，成瘤率50％（5／10）、肺转移率（0）也明显降低（DG6组成瘤率100％、肺转移率80％）。结论：VAP33过表达可抑制肿瘤细胞的增殖、成瘤及侵袭转移能力。

关键词：树突状肉瘤细胞株囊泡膜蛋白相关蛋白增殖侵袭转移

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川芎嗪对大鼠肾小管细胞钙转运的影响

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中国药理学与毒理学杂志 1995年第4期9卷 274-276页

作者：梁翠茵程锦轩段金虹王砺王振纲中国医学科学院基础医学研究所北京高等医学专科学校药理学教研室

用Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心法分离大鼠肾皮质远曲小管细胞（ＤＴＣ）和近曲小管细胞（ＰＴＣ）．应用放射性同位素￣（４５）Ｃａ示踪技术观察川芎嗪对Ｃａ￣（２＋）跨膜转运的影响，并且采用蛋白质竞争结合法检测了胞膜腺苷酸环化... 详细信息

用Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心法分离大鼠肾皮质远曲小管细胞（ＤＴＣ）和近曲小管细胞（ＰＴＣ）．应用放射性同位素￣（４５）Ｃａ示踪技术观察川芎嗪对Ｃａ￣（２＋）跨膜转运的影响，并且采用蛋白质竞争结合法检测了胞膜腺苷酸环化酶活性及细胞内环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）含量。结果表明川芎嗪明显抑制ＰＴＣ和ＤＴＣ细胞￣（４５）Ｃａ的摄取，但对￣（４５）Ｃａ的外排无明显影响。川芎嗪对ＰＴＣ和ＯＴＣ胞膜腺苷酸环化酶活性无影响，但使细胞内ｃＡＭＰ含量显著降低。结果提示川芎嗪影响肾小管细胞钙的摄取，其机理可能与其诱导其它物质使细胞内ＣＡＭＰ水平降低有关。

关键词：川芎嗪钙45 肾小管细胞腺苷酸环化酶

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家兔右心室异位激动对短时程心脏记忆的影响大于左心室

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基础医学与临床 2014年第8期34卷 1049-1053页

作者：郭镜飞武祯夏迪郭俊生徐天铭曹济民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学系北京100005

目的研究家兔左、右心室异位激动对短时程心脏记忆的影响是否存在差异.方法记录12只正常成年家兔Ⅱ导联体表心电图;将双极刺激电极分别置于左、右心室前壁游离壁心外膜下,以实现左、右心室分别起搏,模拟左、右心室异位激动;分析异位... 详细信息

目的研究家兔左、右心室异位激动对短时程心脏记忆的影响是否存在差异.方法记录12只正常成年家兔Ⅱ导联体表心电图;将双极刺激电极分别置于左、右心室前壁游离壁心外膜下,以实现左、右心室分别起搏,模拟左、右心室异位激动;分析异位激动停止后20 min内窦性节律T波的形态和电轴偏转情况,并与起搏前的正常窦性心电图比较,以判断异位激动位置对短时程心脏记忆的影响.结果左心室异位激动停止后,窦性T波形态基本正常,T波电轴偏转在正常范围内（14°～ 22°）.而右心室异位激动停止后,出现T波倒置,与同部位起搏前相比（P＜0.05）,这种T波倒置在所观察的20 min内持续存在.此外,右心室异位激动停止后,出现T波电轴明显右偏,与同部位起搏前相比（P＜0.05）,最大右偏角度达127.9°.结论右心室异位激动后对短时程心脏记忆的影响较大,表现为显著T波倒置和T波电轴右偏,而左心室异位激动对短时程心脏记忆（包括T波形态和T波电轴）的影响不明显.

关键词：心脏记忆 T波心脏起搏异位激动心电轴

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褪黑素通过减弱催乳素基因增强子的突变抑制大鼠垂体催乳素瘤的增生

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生理学报 2005年第3期57卷 319-327页

作者：高列杨全会许荣中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理学系北京100005

本工作旨在探讨褪黑素(melatonin,MLT)抑制17-β-雌二醇(17-β-estradiol,E2)诱发的Sprague-Dawley大鼠垂体催乳素(prolactin,PRL)瘤增生的分子机制。结果表明,每只大鼠每日定时皮下注射一定剂量的MLT(0.25、0.50mg)能显著抑制E2诱发的大鼠垂体PRL瘤的增生;偏低(0.05mg)或过高剂量(1.00、2.00mg)的MLT也抑制PRL瘤的增生,但无统计学意义。采用PCR和DNA直接测序显示,与正常垂体对照组比较,PRL瘤中PRL基因增强子出现五处突变,-1885bp位点由C突变为G,-1857^-1855由ACA替换为G,-1792^-1791插入G,-1383^-1382插入GGTGTGTG片段,-1265^-1250缺失GTGTGTGTGTGTGTGT片段。0.25mg/dMLT处理组,PRL瘤中的PRL基因增强子上述个别突变部位仍然存在(-1885由C突变为G),突变消失(-1792^-1791无插入G),大部分表现为突变减弱(-1856^-1855缺失AC,-1385^-1384缺失TG,-1250^-1253缺失GTGT)。采用荧光素酶报告基因检测PRL基因增强子活性显示,正常垂体、PRL瘤和0.25mg/dMLT处理的PRL瘤三组中,PRL基因增强子的活性分别为(13448.17±3012.74)、(161831.67±60996.01)和(10212.17±2634.71)OD单位。PRL瘤组增强子活性较正常垂体升高11倍(P<0.001),MLT处理组增强子活性较PRL瘤组降低93.69%(P<0.001)。上述三组PRL基因增强子空间结构的分析表明,PRL基因增强子DNA的曲折程度为PRL瘤组>MLT处理组>正常垂体。以上结果证实,MLT抑制大鼠垂体PRL瘤增生的重要分子机制之一可能是减弱PRL基因增强子的突变,也提示MLT可减弱PRL基因增强子的突变,从而下调PRL基因的高表达,可能与降低DNA的曲折程度有关。

关键词：褪黑素催乳素瘤增强子突变

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高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞NF-κB的激活和血小板源生长因子B链的表达

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中华病理学杂志 2003年第4期32卷 354-359页

作者：周礼董继红于淼尹洪超佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导... 详细信息

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导通路的影响。方法　胃饲高胆固醇乳剂建立高胆固醇血症大鼠模型 ,免疫组织化学染色法 [链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶 (SP)法 ]明确主动脉内皮细胞NF κB激活后发生核转位的情况 ;应用原位杂交技术观察内皮细胞PDGF BmRNA的表达 ,同时应用免疫组织化学染色法 (SP法 )观察内皮细胞合成PDGF B链的情况。结果　与对照组相比 ,胃饲高胆固醇乳剂 6周后 ,2个月龄大鼠出现高胆固醇血症 ,主动脉内皮细胞NF κB核转位的比例明显增加 ,PDGF BmRNA的表达也增多。 10个月龄对照组Wistar大鼠的主动脉内皮细胞几乎不表达PDGF BmRNA ,摄入高胆固醇乳剂 16周后 ,内皮细胞表达PDGF BmRNA明显增多。较之摄入胆固醇同时期的 2个月龄大鼠 ,NF κB的核转位及内皮细胞PDGF B链的合成均增多(0 4 6 1± 0 0 75比 0 35 0± 0 0 94 ;0 2 30± 0 0 4 0比 0 185± 0 0 37) ,其差异有显著性意义 (P <0 0 5 ;P <0 0 0 1)。结论　高胆固醇血症能激活大鼠主动脉内皮细胞的NF κB 。

关键词：高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞血小板源生长因子B链基因表达细胞核因子KB

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胃动素对Cajal间质细胞引起的大鼠胃平滑肌收缩的作用

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中华医学杂志 2003年第16期83卷 1422-1427页

作者：周吕王礼建袁勃王玲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理学系北京100005

目的　观察Cajal间质细胞 (ICC)在胃平滑肌收缩的关键作用 ,以及胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩的影响。方法　 (1)采用大鼠胃体上 1/3起搏区及胃窦环行肌条在恒温灌流Kreb液中 ,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动。 ... 详细信息

目的　观察Cajal间质细胞 (ICC)在胃平滑肌收缩的关键作用 ,以及胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩的影响。方法　 (1)采用大鼠胃体上 1/3起搏区及胃窦环行肌条在恒温灌流Kreb液中 ,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动。 (2 )用美蓝 +光照选择性损伤ICC对胃平滑肌收缩的影响。 (3)损伤ICC后胃动素对胃肌收缩的影响。结果　 (1)带有ICC的胃体起搏区和胃窦肌条记录到稳定的收缩活动 ,胃窦收缩频率和振幅较胃体起搏区高。 (2 )损伤胃环肌层ICC后 ,导致胃体起搏区和胃窦平滑肌收缩频率与振幅下降 80 %～ 90 % ,运动几乎消失。 (3)胃动素 0 0 3～ 0 2 5 μg/ml明显增加胃体起搏区和胃窦的收缩频率和振幅 ,呈剂量依赖性增加。损伤ICC后几乎完全取消胃动素对胃肌的收缩作用。抗胃动素血清和阿托品可阻断胃动素的作用。结论　ICC是胃平滑肌运动的起搏细胞。胃动素通过ICC对胃肌收缩进行调节。

关键词：胃动素 Cajal间质细胞大鼠胃平滑肌收缩作用

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