检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验外科杂志 2009年第8期26卷 964-966页

作者：刘长征蔡磊刘卫杨克恭何小东陈松森中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 100005 北京协和医院

目的探讨微RNA（miRNA）．21在肝细胞癌中的表达特征及其功能，筛选并鉴定miRNA-21可能调控的靶基因。方法用PAGE／Northern blot方法分析miRNA-21在10例肝细胞癌患者组织标本中的表达特征，并在3种肝癌细胞株中加以验证。用生物信息学... 详细信息

目的探讨微RNA（miRNA）．21在肝细胞癌中的表达特征及其功能，筛选并鉴定miRNA-21可能调控的靶基因。方法用PAGE／Northern blot方法分析miRNA-21在10例肝细胞癌患者组织标本中的表达特征，并在3种肝癌细胞株中加以验证。用生物信息学分析预测miRNA-21可能的靶基因，通过逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法克隆靶基因的调控区序列，利用荧光素酶双报告基因系统筛选，并通过Western blot、流式细胞仪在蛋白质水平进行分析验证。用体外细胞侵袭实验分析miRNA-21与肝癌细胞侵袭能力的关系。结果miRNA-21在10例肝细胞癌患者中均表达上调，与癌旁组织比较，表达量增加10倍以上。在3种肝癌细胞株中也得到相似的结果。筛选并确认了RECK为miRNA-21的调控靶基因之一。抑制miRNA-21的表达可明显降低肝癌细胞的侵袭。结论miRNA-21在肝细胞癌中表达失控，通过抑制RECK表达促进肿瘤细胞侵袭。

关键词：癌,肝细胞 miRNA RECK 侵袭

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人源DTD蛋白激活人神经母细胞瘤细胞非选择性阳离子通道

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基础医学与临床 2009年第2期29卷 139-143页

作者：朱镜羲阳洪波于晓霞郝维鲍光宏曹济民龚燕华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系北京100005

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜... 详细信息

目的探讨人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶(h-DTD)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的非选择性阳离子通道通透性的影响。方法利用毛细管电泳法检测原核表达纯化的h-DTD的体外脱酰酶活性;用W estern b lot法分析h-DTD在各组织和细胞中的表达谱;用膜片钳技术检测SH-SY5Y细胞全细胞电位。结果h-DTD具有体外脱酰酶活性,并在脑组织中高表达。在h-DTD蛋白存在的情况下,游离的D-氨基酸及L谷-氨酸能激活谷氨酸敏感的非选择性阳离子通道,导致细胞膜通透性增加。结论在神经系统,h-DTD蛋白可能通过维持游离D-氨基酸的浓度来影响非选择性阳离子通道的功能。

关键词：人源D-酪氨酰tRNA脱酰基酶表达谱非选择性阳离子通道

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Jumonji家族的无毛蛋白与毛发缺失

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生命的化学 2009年第5期29卷 669-672页

作者：米洋张业中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

Jumonji家族中的一个成员hairless基因(Hr)在小鼠和人体内的突变可以导致显著的毛发生长障碍。HR影响的生理过程是出生后的毛发周期(haircycle),而非胚胎期的毛囊形态发生(hairmorphgenesis)。HR与维生素D受体(vitaminDreceptor,VDR)在... 详细信息

Jumonji家族中的一个成员hairless基因(Hr)在小鼠和人体内的突变可以导致显著的毛发生长障碍。HR影响的生理过程是出生后的毛发周期(haircycle),而非胚胎期的毛囊形态发生(hairmorphgenesis)。HR与维生素D受体(vitaminDreceptor,VDR)在体外可以直接相互作用,并对基因转录有抑制作用,提示HR是核受体的转录辅抑制因子(corepressor),转录抑制机制可能是通过组蛋白去乙酰基酶(histonedeacetylase,HDAC)等实现。HR的蛋白质结构和亚细胞定位提示其可能通过其他机制改变染色质的状态从而实现对靶基因的表达调控。

关键词： hairless基因毛发周期 JmjC结构域

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单胺氧化酶A启动子可变数目重复序列多态性与中国北方汉族人群重性抑郁症的关联分析

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 728-734页

作者：张洁旭陈彦博张克让许琪沈岩中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 山西医科大学第一医院精神卫生科太原030001

目的探讨单胺氧化酶A(MAOA)基因启动子可变数目重复序列(VNTR)多态性与重性抑郁症易感性的关系。方法采用PCR技术检测512例重性抑郁症患者与566名对照VNTR重复序列分布频率是否具有差异,并使用汉密顿焦虑量表对重性抑郁症患者进行评估... 详细信息

目的探讨单胺氧化酶A(MAOA)基因启动子可变数目重复序列(VNTR)多态性与重性抑郁症易感性的关系。方法采用PCR技术检测512例重性抑郁症患者与566名对照VNTR重复序列分布频率是否具有差异,并使用汉密顿焦虑量表对重性抑郁症患者进行评估。结果男性及女性重性抑郁症患者MAOA VNTR等位基因频率与对照相比差异无显著性;基因型分析显示,女性重性抑郁症患者与对照相比,L等位基因携带者频率显著升高(P=0.002),男性患者与对照相比分布频率差异无显著性(P=0.17)。表型分析显示,女性患者携带L等位基因的基因型(P=0.0056)与汉密顿焦虑量表"害怕"表型的发生显著相关。结论MAOA VNTR多态性可能与女性中国北方汉族人群重性抑郁症发病相关,且可提高抑郁症表型的发生。

关键词：重性抑郁症单胺氧化酶A基因可变数目重复序列多态性汉密顿焦虑量表

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小鼠髓母细胞瘤细胞系的建立与鉴定

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基础医学与临床 2009年第7期29卷 737-741页

作者：王月圆高云周汪兆琦沈岩佟伟民中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室德国耶纳07745 Leibniz衰老研究所德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系德国耶纳07745 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院实验动物中心北京100005

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用... 详细信息

目的建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型。方法对小鼠髓母细胞瘤细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用Western blot法检测PARP-1蛋白的表达,用含有PARP-1蛋白功能区域的重组质粒pEGFP-C1-Hparp-1和绿色荧光蛋白空质粒pEGFP-C1转染细胞进行检测。结果新建立的小鼠髓母细胞瘤细胞系呈多角形、短梭形,免疫荧光分析可见未成熟神经元标志性蛋白Vimentin、Dcx、βⅢ-Tubulin等表达阳性,Western blot检测PARP-1蛋白阴性,导入外源PAPR-1基因后呈阳性。结论成功建立了DNA损伤修复蛋白功能缺陷的小脑神经源性髓母细胞瘤细胞系,有助于深入研究髓母细胞瘤的病因及发病机制。

关键词：基因敲除 PARP—I 髓母细胞瘤细胞神经标记物

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代谢型谷氨酸受体7基因的拷贝数变异与精神分裂症的相关性

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 664-668页

作者：赵亚丽张克让许琪沈岩中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 山西医科大学第一医院精神卫生科太原030001

目的探讨代谢型谷氨酸受体7(GRM7)基因的拷贝数变异(CNVs)与精神分裂症的相关性。方法收集180例中国山西汉族精神分裂症患者和33名正常对照的DNA样本及资料。应用实时定量PCR方法检测位于GRM7基因外显子2上游200 bp处和外显子8附近的CNV... 详细信息

目的探讨代谢型谷氨酸受体7(GRM7)基因的拷贝数变异(CNVs)与精神分裂症的相关性。方法收集180例中国山西汉族精神分裂症患者和33名正常对照的DNA样本及资料。应用实时定量PCR方法检测位于GRM7基因外显子2上游200 bp处和外显子8附近的CNVs。同时对实时定量PCR扩增区的基因序列进行测序。结果相对拷贝数分析显示,在GRM7基因外显子2上游200 bp处,1例精神分裂症患者具有双等位基因缺失,13例患者和1名正常对照具有单个等位基因缺失。测序显示GRM7基因外显子2上游200 bp处实时定量PCR反向引物(GRM7-SV-1R)的3末'端上游第5个碱基发生了C>G变异,实时定量PCR扩增中发现的等位基因缺失均由碱基变异导致。结论实时定量PCR结合测序可以避免PCR引物序列变异导致的假阳性缺失,是检测CNVs的有效方法。本研究GRM7基因的CNVs与精神分裂症无相关性,提示GRM7基因的CNVs可能不是中国汉族精神分裂症发病的主要原因,然而其潜在的罕见CNVs可能和部分精神分裂症有关,有待于进一步研究。

关键词：精神分裂症代谢型谷氨酸受体7基因拷贝数变异

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内质网应激与细胞死亡

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生命的化学 2009年第5期29卷 645-648页

作者：姜茜许彩民中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所生物化学与分子生物学国家重点实验室北京100005

内质网(ER)是一个膜的网络,分泌型蛋白质和膜蛋白质在其中折叠、加工、成熟、储存及转运。未折叠蛋白质的集聚、营养状况的变化等均可干扰内质网稳态,产生内质网应激(ERS),激活未折叠蛋白质应答(UPR)系统恢复ER功能的完整性。持续剧烈的... 详细信息

内质网(ER)是一个膜的网络,分泌型蛋白质和膜蛋白质在其中折叠、加工、成熟、储存及转运。未折叠蛋白质的集聚、营养状况的变化等均可干扰内质网稳态,产生内质网应激(ERS),激活未折叠蛋白质应答(UPR)系统恢复ER功能的完整性。持续剧烈的ERS无法恢复时,细胞死亡程序被激活,包括细胞凋亡与自噬,清除受损细胞,维持生命进程。ERS引起的凋亡与自噬之间形成了复杂的调控网络,本文就此展开综述。

关键词：内质网应激未折叠蛋白质应答细胞凋亡自噬

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应用Affymetrix全基因组芯片检测染色体7q36区域的DNA拷贝数突变

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中华医学遗传学杂志 2009年第3期26卷 336-339页

作者：马芬吴凤霞李宁柳青杨威张学孙森中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学遗传学系McKusick-张孝骞医学遗传中心医学分子生物学国家重点实验室北京100005 辽宁省锦州医学院第一附属医院中国医科大学

目的应用Affymetrix全基因组芯片结合荧光定量PCR（quantitative real-timePCR，qPCR）技术，进行致病性DNA拷贝数变异的精细定位研究。方法以一个定位于染色体7q36的中国人遗传性三节拇指多并指综合征伴随Ⅳ型并指家系中的一例患者为... 详细信息

目的应用Affymetrix全基因组芯片结合荧光定量PCR（quantitative real-timePCR，qPCR）技术，进行致病性DNA拷贝数变异的精细定位研究。方法以一个定位于染色体7q36的中国人遗传性三节拇指多并指综合征伴随Ⅳ型并指家系中的一例患者为研究对象。收集外周血标本，常规提取基因组DNA。应用Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array6．0芯片，将基因组DNA纯化，经过酶切、连接、扩增、标记、杂交、染色和扫描等步骤后得到原始数据，应用Affymetrix Genotyping Console3．0软件进行拷贝数分析。在经芯片分析所确定的重复范围内设计引物，采用qPCR方法进行验证，并进一步缩小断端范周、精确重复区域范围。结果将患者重复区域两断端范围由原来的113kb和33kb分别缩小到5．4kb和1．8kb，致病性DNA重复范围由原来的291～437kb精确至379～387kb。结论应用Affymetrix全基因组芯片联合qPCR技术可以实现对DNA拷贝数突变的精确、可靠的检测。

关键词： Affymetrix SNP芯片荧光定量PCR DNA重复

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载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白对内毒素血症小鼠的作用

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中华医学杂志 2009年第44期89卷 3147-3150页

作者：苗志敏卢恕来李长贵赵世华阎胜利王颜刚韩琳刘世国陈保生王云龙青岛大学医学院附属医院痛风病实验室 266003 青岛市市立医院口腔科中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨载脂蛋白A．I及其半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白（rHDL）的抗炎作用。方法选择了前期构建的4种载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体[A—I（N74C）、A—I（G129C）、A—I（K195C）、A．I（S228C）]及野生型A—I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱... 详细信息

目的探讨载脂蛋白A．I及其半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白（rHDL）的抗炎作用。方法选择了前期构建的4种载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体[A—I（N74C）、A—I（G129C）、A—I（K195C）、A．I（S228C）]及野生型A—I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）构建rHDL（rHDL74、rHDI．129、rHDLl95、rHDL228、rHDLwt）干预组，用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法验证5种rHDL干预后对肿瘤坏死因子（TNF）-α，自细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）的影响。并分别设脂多糖（LPS）组，生理盐水组对照。结果LPS注射24h后，rHDL74组比rHDLwt组血清中TNF—α和IL-1β水平更低[TNF—α：（24±3）pg／ml比（135±12）pg／ml、IL-1[3（45±5）pg／ml比（82±8）pg／ml，P〈0．05]的水平，与LPS组比较只有rHDL74组能降低IL-6水平[（1936±58）pg／ml比（2022±73）pg／ml，P〈0．05]。同时组织切片HE染色显示，rHDL74组能明显抑制炎症细胞的浸润，肺泡壁的增厚。结论rHDL74拥有更强的抗炎能力，它可能会成为临床上极具潜力的抗炎药物之一。

关键词：脂蛋白类 HDL 载脂蛋白A—I 肿瘤坏死因子α 白细胞介素类

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应用微阵列芯片分析人髓母细胞瘤及瘤旁组织miRNA表达谱差异

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首都医科大学学报 2009年第3期30卷 355-359页

作者：刘巍晁腾飞龚燕华袁建刚甲戈马振宇赵继宗首都医科大学附属北京天坛医院神经外科中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学与国家重点实验室

目的检测人髓母细胞瘤(medulloblastomas,MB)与非肿瘤脑组织中微小RNA(miRNA)的表达差异情况,探讨异常表达miRNA参与MB发生的可能分子机制。方法选取经手术切除的MB组织标本及瘤旁正常小脑组织,分别提取总RNA和小分子RNA,在miRNA微阵列... 详细信息

目的检测人髓母细胞瘤(medulloblastomas,MB)与非肿瘤脑组织中微小RNA(miRNA)的表达差异情况,探讨异常表达miRNA参与MB发生的可能分子机制。方法选取经手术切除的MB组织标本及瘤旁正常小脑组织,分别提取总RNA和小分子RNA,在miRNA微阵列芯片中杂交检测,通过芯片扫描和数据分析,并通过实时荧光定量RT-PCR验证,获得该病异常miRNAs表达谱。结果筛选出9个MB的相关miRNAs,其中表达上调4个,表达下调5个。其中miR-17、miR-100、miR-106b和miR-218的差异表达情况得到定量RT-PCR的证实。结论miRNA微阵列分析技术是一种快速、高效的研究生物信息的分子生物学技术;筛选出的差异表达miRNAs可能参与MB发病,为此病诊治提供了新的思路,值得进一步研究。

关键词：髓母细胞瘤微小RNA 微阵列靶基因肿瘤发生

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