检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2000年第5期27卷 553-555页

作者：殷文璇刘德培李竹红梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了灵敏、方便地检测出细胞群体中含量极低的点突变 ,利用一 β珠蛋白基因簇Gγ 2 0 2C→G突变的杂合细胞株 ,优化传统的等位基因特异PCR的反应条件 ,以定量的PCR产物为模板 ,在含 5 %甲酰胺的体系中用半巢式的等位基因特异引物进行扩... 详细信息

为了灵敏、方便地检测出细胞群体中含量极低的点突变 ,利用一 β珠蛋白基因簇Gγ 2 0 2C→G突变的杂合细胞株 ,优化传统的等位基因特异PCR的反应条件 ,以定量的PCR产物为模板 ,在含 5 %甲酰胺的体系中用半巢式的等位基因特异引物进行扩增 .结果表明 ,该方法灵敏可靠 ,可快速检测到细胞群体中低于 0 0 2 5

关键词：等位基因特异PCR 细胞群体微量点突变检测

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嗜水气单胞菌hec毒素溶血试验诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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中华血液学杂志 2000年第10期21卷 517-520页

作者：刘海丽许彩民吕照江陆承平潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院南京农业大学

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素... 详细信息

目的　研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法　从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素。粗提毒素作用于PNH和其他贫血患者及正常人的红细胞 ,采用 96孔板在波长 6 30nm酶标仪比色 ;同时用CD59单抗和FITC标记的羊抗鼠IgG标记红细胞 ,以流式细胞仪分析毒素作用前后CD59标记率。结果　对 15例PNH患者、15名正常人、15例非PNH贫血患者的红细胞 ,进行hec毒素试验 ,发现毒素在 0 .12 5g/L、37℃作用 2 0min后 ,正常人和非PNH贫血患者的红细胞完全溶解 ,而PNH患者存留红细胞的百分率与CD59标记率成反比。毒素作用前后流式细胞仪检测结果表明 ,毒素可以特异地作用于CD59阳性细胞。结论　PNH患者的红细胞比其他非PNH贫血患者及正常人的红细胞有明显的抗毒素溶破作用 ,且毒素作用后存留细胞的百分数反映CD59标记率 ,故可作为PNH诊断的敏感、特异、简便可行的新诊断方法。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿嗜水气单胞菌 hec毒素

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野生型p53对热休克蛋白90β基因表达的调控作用

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 76-79页

作者：张业崔玉坤吴宁华沈珝琲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了阐明野生型p53分热休克蛋白90β（hsp90β）基因表达调控中的作用，我们利用野生型p53的表达质粒转染Jurkat细胞，发现野生型p53可以剂量依赖方式抑制hsp90β基因的启动子活性，并且证实hsp90β基因的表达在mRNA和蛋白水平均明显减少。

关键词： hsp90β基因基因表达调控 p53 热休克蛋白

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硫氧化还原蛋白与细胞内的氧化还原调控

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生物工程进展 2000年第6期20卷 22-25页

作者：周彦袁建刚范凤朝强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

细胞内氧化还原状态直接影响细胞的生存、活化和增殖。硫氧化还原蛋白是一个具有氧化还原活性的小分子蛋白质 ,它和NADPH以及硫氧化还原蛋白还原酶一起协同作用 ,组成蛋白质的一个重要的还原体系。这个还原体系还与谷胱甘肽等共同控制... 详细信息

细胞内氧化还原状态直接影响细胞的生存、活化和增殖。硫氧化还原蛋白是一个具有氧化还原活性的小分子蛋白质 ,它和NADPH以及硫氧化还原蛋白还原酶一起协同作用 ,组成蛋白质的一个重要的还原体系。这个还原体系还与谷胱甘肽等共同控制细胞的氧化还原状态 ,对维持和调节细胞的氧化还原内环境有着重要的作用。而另一方面 ,细胞的氧化还原状态又可以通过对多种信号分子的作用直接影响细胞的多种生理功能。

关键词：硫氧化还原蛋白细胞内氧化还原调控

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CRE和AP-1元件参与人hsp90β基因的表达

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 28-31页

作者：刘秉胜吴宁华沈珝琲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了进一步阐明人热休克蛋白90β（hsp90β）基因的表达调控机制，本文对hsp90β基因调控序列中的CRE和AP－1元件进行了研究。构建了含有这两个元件的系列删切报告基因质粒，通过转染Jurkat细胞，检测并分析报告基因的活性。结果表明，... 详细信息

为了进一步阐明人热休克蛋白90β（hsp90β）基因的表达调控机制，本文对hsp90β基因调控序列中的CRE和AP－1元件进行了研究。构建了含有这两个元件的系列删切报告基因质粒，通过转染Jurkat细胞，检测并分析报告基因的活性。结果表明，CRE和AP-1元件均不同程度地参与了hsp90β基因的组成性、PHA激活和热诱导表达。

关键词： CRE元件 AP-1元件 hsp90β基因基因表达

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人HCUTA全长cDNA的克隆与原核表达

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科学通报 2000年第5期45卷 505-509页

作者：罗文琴陈建和周海军黄晓伟周严袁建刚强伯勤医学分子生物学国家重点实验室国家人类基因组北方研究中心中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所北京100005

人ＨＣＵＴＡ是最近克隆的一个新的全长ｃＤＮＡ，编码蛋白可能参与人铜离子容受系统．ＨＣＵＴＡ的全编码区用ＰＣＲ扩增后，克隆到ｐＥＴ２８α＋表达载体中，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得了高效表达，表达的ＨＣＵＴＡ重组蛋白占细菌... 详细信息

人ＨＣＵＴＡ是最近克隆的一个新的全长ｃＤＮＡ，编码蛋白可能参与人铜离子容受系统．ＨＣＵＴＡ的全编码区用ＰＣＲ扩增后，克隆到ｐＥＴ２８α＋表达载体中，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得了高效表达，表达的ＨＣＵＴＡ重组蛋白占细菌总蛋白的２８．３％．ＨＣＵＴＡｃＤＮＡ的ＧｅｎＢａｎｋ接收号为ＡＦ１０６９４３，

关键词：铜离子容受系统 HCUTA cDNA 原核表达克隆代谢

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人脑胶质细胞瘤分化相关基因GDR1全长cDNA的克隆和鉴定

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科学通报 2000年第1期45卷 64-68页

作者：李光涛金虎林胡松年金鉴涂纯袁建刚强伯勤医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院国家人类基因组北方研究中心北京100005

人脑胶质细胞瘤是严重危害人类健康的一类恶性肿瘤．选用在ＤＤＲＴ－ＰＣＲ研究中获得的１９个代表新基因的ＥＳＴ之一设计筛库引物，在人ｃＤＮＡ文库中筛出一长度为１５３５ｂｐ的ｃＤＮＡ克隆，其开放读码框编码３３４个氨基酸，... 详细信息

人脑胶质细胞瘤是严重危害人类健康的一类恶性肿瘤．选用在ＤＤＲＴ－ＰＣＲ研究中获得的１９个代表新基因的ＥＳＴ之一设计筛库引物，在人ｃＤＮＡ文库中筛出一长度为１５３５ｂｐ的ｃＤＮＡ克隆，其开放读码框编码３３４个氨基酸，与已知蛋白无明显同源性，属一新发现的基因，ＧｅｎＢａｎｋ接受号为ＡＦ０６８１９５．ＲＴ－ＰＣＲ显示该基因产物在分化后的ＢＴ－３２５中的表达量明显高于分化前的细胞，暗示该蛋白可能与脑胶质细胞瘤分化有关，命名为ＧＤＲ１（Ｇｌｉｏｍａｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｌ）。

关键词：脑胶质细胞瘤鉴定分化基因 cDNA 克隆

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应用mRNA差异显示技术研究精子发生中阶段特异性基因表达

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基础医学与临床 2000年第3期20卷 38-42页

作者：赵明刘辉贤刘德瑜缪时英王琳芳中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 国家计划生育委员会科研所

为进行精子发生过程中具有阶段特异性表达特征的基因研究，本文应用mRNA差异显示与曲细精管透光分期技术相结合的方法，对大鼠IX～XII期和XIII～Ⅰ期曲细精管的基因表达指纹图谱进行了比较。通过27组不同引物组合的差异PCR反应，共得到5... 详细信息

为进行精子发生过程中具有阶段特异性表达特征的基因研究，本文应用mRNA差异显示与曲细精管透光分期技术相结合的方法，对大鼠IX～XII期和XIII～Ⅰ期曲细精管的基因表达指纹图谱进行了比较。通过27组不同引物组合的差异PCR反应，共得到56个具有阶段特异性表达特征的cDNA片段。通过对它们中的12个进行序列测定和序列同源性分析，其中8个为代表未知基因的新的EST，另有一个与小鼠quaking基因具有高度的同源性，提示这一基因同样存在于大鼠曲轴精管中并呈阶段特异性表达。将所得序列送至GenBank，均获得新的序列编号。

关键词：差异显示精子发生阶段特异性基因 mRNA

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合成的GPI-Pr基因及其与PNH的关系

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国外医学（分子生物学分册） 2000年第2期22卷 109-111页

作者：刘海丽中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最... 详细信息

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最新研究进展。

关键词： GPI-锚 GPI-Pr PNH 血红蛋白系统

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重组可溶性TRAIL在大肠杆菌中的表达、分离纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：刘彦信史娟郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的... 详细信息

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达产量可达到菌体总蛋白的30%左右,亲和层析纯化后,重组融合蛋白的纯度可达95%以上.其表现分子量约为22 kD,等电点为6.29,N-末端的氨基酸顺序与理论值相同.该融合蛋白在浓度为0.1～1 μg/mL时,能显著诱导所试全部7种肿瘤细胞株细胞凋亡,不能诱导正常鼠成纤维细胞细胞凋亡;对贲门癌、乳腺癌、恶性胸腺瘤等原代细胞也具有很强的杀伤作用,但不杀伤正常人外周血淋巴细胞;动物实验研究表明,能显著抑制人肝癌细胞在裸鼠体内生长,而对正常小鼠无任何毒性.结论:该重组融合蛋白能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡,具有重要临床应用前景.

关键词：肿瘤细胞凋亡分离纯化 TRAIL 大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属

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