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第166场中国工程科技论坛——人兽共患病防控

作者：许黎黎鲍琳琳邓巍朱华陈霆吕琦李枫棣袁静向志光高凯徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳丰于品雍伟东魏强张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京

建立H7N9禽流感的小鼠和雪貂模型,以及标准化的模型评价技术,是对相关药物或疫苗进行效用评价,以及对病毒的致病机制展开研究的前提保证.鼻腔接种A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒后,动物均表现出典型的临床症状,包括体重下降(小鼠、雪貂)、体... 详细信息

建立H7N9禽流感的小鼠和雪貂模型,以及标准化的模型评价技术,是对相关药物或疫苗进行效用评价,以及对病毒的致病机制展开研究的前提保证.鼻腔接种A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒后,动物均表现出典型的临床症状,包括体重下降(小鼠、雪貂)、体温升高(雪貂)、竖毛(小鼠)、流涕或打喷嚏(雪貂)、死亡(小鼠).小鼠和雪貂的呼吸道排毒高峰分别出现在感染后第2天和第3～5天.除呼吸道外,H7N9病毒还可从感染小鼠的脑、肝、脾、肾、小肠,以及雪貂的心脏、肝、嗅球中分离得到.小鼠和雪貂模型的病理表现为中度至重度肺炎.感染14天时,小鼠和雪貂对H7N9病毒特异性的抗血清滴度分别可达160和1280.动物模型同时还表现出显著的白细胞减少、淋巴细胞减少,中性粒细胞增多.综合以上比较医学、病原学、分子生物学、病理学方面的评价指标,证实H7N9禽流感的小鼠和雪貂模型构建成功,可为进一步的基础或应用研究奠定坚实的动物实验基础.

关键词：实验动物模型 H7N9禽流感致病机制临床病理

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Wistar大鼠的自发性非肿瘤病变及其发生率

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中国比较医学杂志 2013年第8期23卷 44-47页

作者：徐艳峰侯粉霞杨慧芳中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所北京100050

目的了解Wistar大鼠的各种自发性非肿瘤病变及其发生率。方法慢性毒性与致癌合并试验中的对照组,采用4周龄SPF级Wistar大鼠,雌、雄性大鼠各60只,试验前观察1周,常规饲料喂饲104周后处死,进行组织病理学检查。结果分析和报告了Wistar大... 详细信息

目的了解Wistar大鼠的各种自发性非肿瘤病变及其发生率。方法慢性毒性与致癌合并试验中的对照组,采用4周龄SPF级Wistar大鼠,雌、雄性大鼠各60只,试验前观察1周,常规饲料喂饲104周后处死,进行组织病理学检查。结果分析和报告了Wistar大鼠的各种自发性非肿瘤病变及其发生率。雄性大鼠发生率高的病变主要为肾脏、心脏、肝脏和睾丸等脏器病变;雌性大鼠发生率高的病变主要为肝脏、肾上腺和肾脏等脏器病变。结论本文报告的Wistar大鼠的各种自发性非肿瘤病变及其发生率可为相关技术人员提供一些参考。

关键词： Wistar大鼠慢性毒性自发性非肿瘤病变

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人SCARB2蛋白提高人肠道病毒71型对转基因小鼠的感染力

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中国比较医学杂志 2013年第7期23卷 16-20,I0002页

作者：修晶辉刘江宁杨亚军夏咸柱张连峰医学实验动物研究所中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 军事医学科学学院军事兽医研究所吉林省人畜共患病防治重点实验室吉林省长春市130122

目的细胞实验证实人清道夫受体B2(hSCARB2)是人类EV71的受体,本研究拟通过建立人SCARB2转基因小鼠,建立感染能力更高的小鼠模型。方法构建CMV启动子的SCARB2转基因表达载体,通过显微注射法建立C57BL/6J背景的人SCARB2转基因小鼠,PCR筛... 详细信息

目的细胞实验证实人清道夫受体B2(hSCARB2)是人类EV71的受体,本研究拟通过建立人SCARB2转基因小鼠,建立感染能力更高的小鼠模型。方法构建CMV启动子的SCARB2转基因表达载体,通过显微注射法建立C57BL/6J背景的人SCARB2转基因小鼠,PCR筛选阳性首建鼠。通过Western Blot和免疫组化检测目的蛋白在各组织中的表达。EV71感染转基因小鼠后,通过实时荧光定量PCR和免疫组化检测目的蛋白表达对病毒感染的促进效果。结果人SCARB2蛋白主要在转基因小鼠的骨骼肌和脑组织中表达,与野生型小鼠相比,转基因小鼠组织中的病毒载量显著提高4到5倍。结论人SCARB2的体内表达可促进EV71对转基因小鼠的感染,该蛋白在体内具有EV71受体功能。

关键词：人肠道病毒71型人SCARB2蛋白转基因小鼠病毒受体

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中药Ⅰ号方对阿尔兹海默病的多靶位治疗作用

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中国比较医学杂志 2013年第5期23卷 26-29页

作者：梁良刘羽曹子青杨亚军朱华黄澜盛树力秦川邓巍北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所病理室卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 山西省曲沃县西街本草中药研究所山西曲沃043400

目的应用高通量抗体芯片技术(KinexTM Antibody Microarray)来研究中药I号方(PN-1)对阿尔兹海默病的治疗作用。方法将阿尔兹海默病模型小鼠分为两组,其中对照组4只,每天给予双蒸水灌胃,给药组8只每天给予中药提取物灌胃,给药3个月后,利... 详细信息

目的应用高通量抗体芯片技术(KinexTM Antibody Microarray)来研究中药I号方(PN-1)对阿尔兹海默病的治疗作用。方法将阿尔兹海默病模型小鼠分为两组,其中对照组4只,每天给予双蒸水灌胃,给药组8只每天给予中药提取物灌胃,给药3个月后,利用KinexTMAntibody Microarray筛选出两组的差异表达蛋白,然后用Ingenuity Pathway Analysis(IPA)及查阅文献找到其中与阿尔兹海默病相关的蛋白分子。结果给予中药I号方(PN-1)的阿尔兹海默病小鼠与空白对照小鼠比较,差异表达蛋白其中与阿尔兹海默病相关,且存在变化的为:p-tau(T522)、COX2,caspase6和caspase9下降;bcl-xl和CaMK4升高。结论中药Ⅰ号方(PN-1)能从抗tau蛋白高磷酸化、抗炎、抑制凋亡和提高记忆力等多靶位改善阿尔兹海默病模型小鼠的病理生理表现,可能成为治疗阿尔兹海默病的有效药物。

关键词：阿尔兹海默病模型小鼠中药Ⅰ号方多靶位

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H7N9禽流感病毒可在雪貂间通过气溶胶传播

H7N9禽流感病毒可在雪貂间通过气溶胶传播

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第166场中国工程科技论坛——人兽共患病防控

作者：许黎黎鲍琳琳邓巍董丽波朱华陈霆吕琦李枫棣袁静向志光高凯徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳丰于品雍伟东魏强张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家流感中心传染病预防控制国家重点实验室北京

人感染H7N9禽流感患者数量至今仍在继续攀升,尽早了解H7N9病毒对哺乳动物的致病性及通过气溶胶传播的可能性,对于应对2013年秋冬可能再次来袭的疫情、制定正确的防控策略,具有举足轻重的意义.利用已建立的各亚型流感雪貂模型,通过系统... 详细信息

人感染H7N9禽流感患者数量至今仍在继续攀升,尽早了解H7N9病毒对哺乳动物的致病性及通过气溶胶传播的可能性,对于应对2013年秋冬可能再次来袭的疫情、制定正确的防控策略,具有举足轻重的意义.利用已建立的各亚型流感雪貂模型,通过系统观察动物感染后的临床症状、死亡率、病毒组织分布,以及组织病理学分析,H7N9病毒对雪貂的致病性被证实低于高致病性禽流感H5N1,而与2009年pdmA(H1N1)相当.H7N9病毒可在感染雪貂的上下呼吸道、心脏、肝及嗅球中复制.值得注意的是,H7N9病毒在雪貂间可通过气溶胶进行低效率传播.对被传染上的雪貂携带的病毒进行分离并测序,相较于攻毒毒株,病毒出现了4处突变:PB2的D678Y、HA的R157K、NP的I109T,以及NA的T10I.H7N9病毒已具备在哺乳动物间通过气溶胶传播的能力,在秋冬季来临时应进一步提高监测力度,防止可能出现的人际传播事件.

关键词：雪貂禽流感病毒气溶胶传播致病性

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健康中国恒河猴各淋巴组织中T淋巴细胞表型及分布

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中国畜牧兽医 2012年第2期39卷 86-91页

作者：熊竞刘克剑吴芳新丛喆王卫陈霆魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

试验旨在明确T淋巴细胞在中国恒河猴各组织中的表型与分布,为疾病模型研究提供基础数据。取外周血、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结及肠道组织,从中分离出淋巴细胞。使用流式细胞术检测分析各种表型的淋巴细胞在组织间的分布。结果表明,淋... 详细信息

试验旨在明确T淋巴细胞在中国恒河猴各组织中的表型与分布,为疾病模型研究提供基础数据。取外周血、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结及肠道组织,从中分离出淋巴细胞。使用流式细胞术检测分析各种表型的淋巴细胞在组织间的分布。结果表明,淋巴结中CD4+/CD8+T细胞比值高于外周血,肠道固有层中最低,三者差异显著。记忆性T细胞在外周血和肠道固有层T细胞中比重较大,而淋巴结中主要为幼稚T细胞。CD4+T细胞中中心记忆T细胞Tcm为主要亚群,而CD8+T细胞主要为效应记忆细胞Tem。外周血与肠道固有层中增殖T细胞比例相当,而淋巴结中T细胞增殖水平相对较低。各组织中CXCR4受体表达量普遍高于CCR5受体,其中肠道固有层CCR5受体表达水平最高。值得注意的是,有一小群表型CD3+CD4+CD8low的细胞仅在肠道固有层中存在,经分析其功能活性应高于肠道CD4单阳性T细胞。因此,测定了健康中国恒河猴各表型T淋巴细胞在多种淋巴组织中的基础数值,为相关模型研究奠定基础。

关键词：中国恒河猴肠道固有层多色流氏细胞术记忆T细胞 Ki67 CCR5 CXCR4

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不同雄雌配比对SPF级布氏田鼠繁殖性能的影响

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四川动物 2012年第6期31卷 884-886页

作者：潘思丹施海霞宋铭晶中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的探讨不同雄雌配比对SPF级布氏田鼠产仔数、成活率等繁殖性能的影响。方法设置4种配对繁殖方式:1♂:1♀、1♂:2♀、2♂:2♀和3♂:2♀,经过2年的试验,期间记录各组SPF级布氏田鼠的产仔数和成活率等繁殖性能指标。结果 4种配比方式雌... 详细信息

目的探讨不同雄雌配比对SPF级布氏田鼠产仔数、成活率等繁殖性能的影响。方法设置4种配对繁殖方式:1♂:1♀、1♂:2♀、2♂:2♀和3♂:2♀,经过2年的试验,期间记录各组SPF级布氏田鼠的产仔数和成活率等繁殖性能指标。结果 4种配比方式雌鼠产仔率分别为97.69%、62.47%、59.24%和28.3%,成活率为96.98%、96.14%、94.57%和91.22%,平均产仔数为6.48、7.87、6.16和6.14。结论在屏障环境中饲养的布氏田鼠封闭群采用1♂:2♀的配比方式,其繁殖性能和经济效益最理想。

关键词：布氏田鼠 SPF级繁殖性能序位

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表现神经症状的SIVmac251感染猴大脑基底节病毒gp120序列变异分析

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中国实验动物学报 2012年第2期20卷 37-42,I0002页

作者：刘克剑丛喆金光王卫陈霆蒋虹魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究猴免疫缺陷病毒SIVmac251在中国恒河猴感染传代过程中产生的可能的神经侵袭性和神经嗜性及其分子机制。方法从静脉感染SIVmac251-155p6N的8只实验猴中出现严重神经症状的1只猴中,监测病毒及免疫指标变化,观察临床症状、猴脑组... 详细信息

目的研究猴免疫缺陷病毒SIVmac251在中国恒河猴感染传代过程中产生的可能的神经侵袭性和神经嗜性及其分子机制。方法从静脉感染SIVmac251-155p6N的8只实验猴中出现严重神经症状的1只猴中,监测病毒及免疫指标变化,观察临床症状、猴脑组织病变,单拷贝PCR扩增病毒gp120序列并分析变异及糖基化位点变化情况。结果感染猴晚期出现明显艾滋病脑病症状,病理切片显示脑组织出现多核巨细胞及神经元变性、坏死。脑基底节分离出单一序列病毒,其氨基酸序列与血浆病毒及感染毒株SIVmac251-155p6序列差异主要位于Gp120的V1和V4区,并且在C1区66位出现一个糖基化位点缺失。结论 SIVmac251在猴体长期传代过程中表现出神经嗜性毒株的特征,对AIDS脑病研究具有重要意义。

关键词：艾滋病脑病 SIVmac251 gp120 变异神经嗜性神经侵袭性糖基化位点

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艾滋病猴特异性细胞免疫的胞内细胞因子检测方法优化与应用

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中国实验动物学报 2012年第1期20卷 18-23页

作者：吴芳新王卫丛喆刘克剑熊竞魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的为准确检测艾滋病猴模型特异性细胞免疫,优化、确定胞内细胞因子染色(ICS)影响因素和条件。方法使用三种多克隆激活剂分别刺激SIV感染猴外周血单个核细胞(PBMC),确定最佳阳性刺激物和刺激时间;然后使用五种浓度SIVmac239混合肽库分... 详细信息

目的为准确检测艾滋病猴模型特异性细胞免疫,优化、确定胞内细胞因子染色(ICS)影响因素和条件。方法使用三种多克隆激活剂分别刺激SIV感染猴外周血单个核细胞(PBMC),确定最佳阳性刺激物和刺激时间;然后使用五种浓度SIVmac239混合肽库分别刺激SIV感染猴PBMC,体外培养,不同时间点进行细胞染色和流式检测,确定肽库的最适刺激浓度和最佳刺激时间。最后,初步应用该方法检测SIV感染猴细胞免疫水平。结果 PMA+离子霉素组合可用作本实验的阳性刺激物;2μg/mL肽库,37℃5%CO2培养16 h,能更有效的刺激T细胞分泌TNF-α、IL-2、IFN-γ。结论该方法的优化对艾滋病药物的临床前评价和疫苗研发等研究具有重要意义。

关键词： SIV 特异性细胞免疫胞内细胞因子染色优化

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SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株的制备

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中国畜牧兽医 2012年第3期39卷 23-27页

作者：丛喆陶真王卫陈霆金光姚南苏爱华魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

试验旨在研究体外制备SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。试验将SHIV-KB9半长质粒连接后转染CEMx174细胞,转染上清与正常恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P27抗原水平。当病毒复制... 详细信息

试验旨在研究体外制备SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。试验将SHIV-KB9半长质粒连接后转染CEMx174细胞,转染上清与正常恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P27抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存,测定病毒RNA载量和TCID50。静脉感染中国恒河猴,研究该批次SHIV-KB9在体内的病毒学、免疫学指标变化及变异情况,分析其基本的生物学特性。结果表明,本研究共制备了95mLSHIV-KB9病毒原液,病毒载量为2.678×105拷贝/mL,TZM-bl细胞测定病毒的TCID50为3.16×103/mL,gp120序列分析表明病毒未发生变异。10倍稀释的3个不同浓度的SHIV-KB9均静脉成功感染中国恒河猴,引起外周血CD4+/CD8+大幅下降。因此,此次制备的SHIV-KB9细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库建立SHIV-KB9/中国恒河猴模型。

关键词： SHIV-KB9 中国恒河猴外周血单核淋巴细胞半数感染量

来源：评论

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