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第十届中国实验动物科学年会

作者：苏爱华丛喆王卫陈霆魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的用抗人B淋巴细胞单克隆抗体（利妥昔单抗注射液,Rituximab）通过静脉滴注的方法敲除中国恒河猴体内B淋巴细胞,并观察其敲除效果,为建立B淋巴细胞缺失的恒河猴动物模型提供基础的实验数据。方法选取健康的中国恒河猴两只,静脉滴注抗... 详细信息

目的用抗人B淋巴细胞单克隆抗体（利妥昔单抗注射液,Rituximab）通过静脉滴注的方法敲除中国恒河猴体内B淋巴细胞,并观察其敲除效果,为建立B淋巴细胞缺失的恒河猴动物模型提供基础的实验数据。方法选取健康的中国恒河猴两只,静脉滴注抗人B淋巴细胞单克隆抗体,定期采集外周血、腹股沟淋巴结和十二指肠黏膜组织,制备淋巴细胞悬液,应用流式细胞术的方法系统性测定B淋巴细胞及T淋巴细胞亚群的变化。结果静脉滴注利妥昔单抗注射液（Rituximab）24小时后,中国恒河猴外周血中B淋巴细胞的缺失即能达到100%,持续约14天;腹股沟淋巴结中B淋巴细胞在静注7天时100%缺失;十二指肠黏膜组织中B淋巴细胞在静脉滴注7天后缺失达到90%,维持28天。并且在成功敲除B淋巴细胞的情况下,CD4T及CD8T淋巴细胞无明显波动,维持在一个稳定的水平。结论利妥昔单抗注射液（Rituximab）能有效去除中国恒河猴体内B淋巴细胞,为建立B淋巴细胞缺失动物模型奠定基础。

关键词：中国恒河猴 B淋巴细胞利妥昔单抗

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柚皮苷及其与吴茱萸碱联合用药对APPswe/PS△E9转基因痴呆模型小鼠学习记忆力的影响

柚皮苷及其与吴茱萸碱联合用药对APPswe/PS△E9转基因痴呆模型小...

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世界中联中药专业委员会第四届学术年会暨中药新药研发与中药资源可持续利用国际研讨会

作者：王冬梅马元武袁树民张旭马春梅张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京 100021 国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室，北京 100021 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京 100021 国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室，北京 100021国家中医药管理局人类疾病动物模型三级

目的：探讨柚皮苷及柚皮苷与吴茱萸碱联合用药对Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响，研究柚皮苷与吴茱萸碱联合使用是否具有协同或叠加作用。方法：Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠随机分组，每组12只，雌雄各半，... 详细信息

目的：探讨柚皮苷及柚皮苷与吴茱萸碱联合用药对Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响，研究柚皮苷与吴茱萸碱联合使用是否具有协同或叠加作用。方法：Appswe／PS△E9转基因痴呆模型小鼠随机分组，每组12只，雌雄各半，分别选择在3月龄和5月龄两个时间段开始进行治疗，各给药组按设定剂量分别单独或联合加入鼠粮中。3月龄给药16周，5月龄给药4周后进行水迷宫实验，以安理申作为阳性药对照，并与安慰剂组小鼠进行比较。Thioflavin-S染色检测单独使用柚皮苷治疗转基因小鼠脑组织老年斑的形成。结果：单独使用柚皮苷4周和16周，缩短寻找平台的潜伏期分别为22％，32％;单独使用吴茱萸碱4周和16周吴茱萸碱，缩短寻找平台的潜伏期分别为33％，10％。柚皮苷治疗16周减少海马老年斑26％。柚皮苷与吴茱萸碱联合应用能够显著缩短寻找平台的潜伏期47％。结论：单独使用柚皮苷或吴茱萸碱均能改善痴呆模型小鼠的学习记忆能力，柚皮苷长期的使用优于短期的治疗效果，但是吴茱萸碱短期有效，长期作用反而下降;柚皮苷与吴茱萸碱联合应用能够显著改善Appswe／PS△E9痴呆模型小鼠的学习记忆能力，但联合用药组并未表现出强于单独给药组的协同保护效应。

关键词：中药药理实验阿尔茨海默病病理机制学习记忆动物模型

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SIVmac251感染增强恒河猴巨噬细胞对galectin-3诱导凋亡的敏感性

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中国比较医学杂志 2013年第10期23卷 49-52,57页

作者：薛婧蒋虹傅春燕丛喆陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SIVmac251感染对galectin-3诱导恒河猴巨噬细胞凋亡的影响。方法从健康猴和SIVmac251感染猴外周血分离单核细胞,用GM-CSF与IL-6诱导单核细胞分化成巨噬细胞。巨噬细胞与galectin-3共孵育5.5 h后,细胞经PE-annexin V/PerCP-7AAD... 详细信息

目的研究SIVmac251感染对galectin-3诱导恒河猴巨噬细胞凋亡的影响。方法从健康猴和SIVmac251感染猴外周血分离单核细胞,用GM-CSF与IL-6诱导单核细胞分化成巨噬细胞。巨噬细胞与galectin-3共孵育5.5 h后,细胞经PE-annexin V/PerCP-7AAD染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果无galectin-3诱导条件下健康猴与SIVmac251感染猴巨噬细胞中annexin V阳性细胞的百分率分别为5.08%与4.87%。Galectin-3诱导条件下健康猴巨噬细胞中annexin V阳性细胞的百分率升至17.62%,SIVmac251感染猴巨噬细胞中annexin V阳性细胞的百分率升至45.56%,两者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 SIVmac251感染增强恒河猴巨噬细胞对galectin-3诱导凋亡的敏感性。

关键词：巨噬细胞中国恒河猴半乳糖凝集素-3 凋亡

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RT-SHIV rt基因单拷贝PCR扩增方法的建立及初步应用

RT-SHIV rt基因单拷贝PCR扩增方法的建立及初步应用

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第十届中国实验动物科学年会

作者：鞠斌王卫丛喆姚南陈霆杜文达苏爱华高锡强魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的建立RT-SHIV病毒全长rt基因单拷贝PCR扩增方法,用于HIV-1 rt基因体内遗传与变异研究。方法 Oligo软件设计RT-SHIV rt基因特异性扩增引物,梯度稀释方法进行特异性和灵敏度筛选,进而优化退火温度和PCR反应最佳循环数等条件,建立rt基因... 详细信息

目的建立RT-SHIV病毒全长rt基因单拷贝PCR扩增方法,用于HIV-1 rt基因体内遗传与变异研究。方法 Oligo软件设计RT-SHIV rt基因特异性扩增引物,梯度稀释方法进行特异性和灵敏度筛选,进而优化退火温度和PCR反应最佳循环数等条件,建立rt基因PCR扩增方法;在此基础上将模板进行有限稀释,摸索rt基因单拷贝PCR扩增条件;使用该方法扩增感染猴体内PT-SHIV病毒rt基因,BioEdit软件进行基因序列分析。结果筛选得到一组巢式PCR引物,成功建立了RT-SHIV rt基因PCR扩增方法;当模板浓度为100 copies/μL时,扩增产物为单拷贝序列;测序结果显示RT-SHIV感染猴d266和d294血浆样本分别存在1处和6处氨基酸突变。结论本研究建立的全长rt基因单拷贝PCR扩增方法特异性好、灵敏度高、重复性强,可以应用于各类RT-SHIV病毒的全长rt基因分析。

关键词： RT-SHIV 单拷贝PCR rt基因

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MK-801对小鼠学习记忆能力的影响

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阿尔茨海默病及相关病杂志 2018年第1期1卷 53-59页

作者：李祥磊张玲秦川孙秀萍北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室

目的:研究地卓西平(dizocilpine,MK-801)对小鼠学习记忆能力的影响。方法:将20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为MK-801组(n=10)和对照组(n=10),两组分别注射MK-801(0.1mg/kg)和等容量生理盐水30 min后,进行Morris水迷宫、Barnes迷宫和条件恐惧行为学实验,检测MK-801对小鼠学习记忆的影响。结果:Morris水迷宫实验定位航行期,MK-801组潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。MK-801组第二天至第四天游行距离长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);探索期MK-801组穿台次数和在平台象限停留时间少于对照组,潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。Barnes迷宫实验学习阶段MK-801组小鼠寻找目标洞的潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。测试阶段MK-801组进入目标区频次和停留时间少于对照组,潜伏期长于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.05);条件恐惧实验训练期MK-801组小鼠僵直时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);线索性条件恐惧实验中MK-801组僵直时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:MK-801可损伤小鼠空间参考记忆和条件性恐惧记忆。

关键词： MK-801 空间参考记忆条件性恐惧记忆小鼠行为学实验

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恒河猴糖尿病模型肾脏相关血液、尿液指标的动态观察与分析

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中国比较医学杂志 2012年第6期22卷 21-24页

作者：朱华刘颖邓巍徐艳峰秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的动态观察小剂量多次注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病恒河猴动物模型早期肾脏指标的变化。方法健康恒河猴5只,小剂量(30 mg/kg)多次静脉注射链脲佐菌素(STZ),血糖稳定大于7.0 mmol/L后每个月采集肾脏相关血清生化指标和尿常规。连续观... 详细信息

目的动态观察小剂量多次注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病恒河猴动物模型早期肾脏指标的变化。方法健康恒河猴5只,小剂量(30 mg/kg)多次静脉注射链脲佐菌素(STZ),血糖稳定大于7.0 mmol/L后每个月采集肾脏相关血清生化指标和尿常规。连续观察13个月。结果 5只动物的平均血糖在10w左右达到稳定,造模3个月后血糖值达到8.31±2.31 mmol/L,此后持续平稳上升。总蛋白、球蛋白、甘油三酯持续上升,分别在给药10个月、9个月出现显著性差异(P<0.05)。白球蛋白比值下降,在给药11个月开始出现显著性差异(P<0.05)。糖化血清蛋白(GSP)6个月出现显著性差异(P<0.05),9个月出现极显著性差异(P<0.01)。血糖与TP、GLOB、UREA、CR、Mg2+、GSP呈高度正相关关系,与A/G呈高度负相关关系。结论发现了与人类早期糖尿病肾病相似的血清学、尿液变化,可作为相关疾病发病机制、药效学等研究的可靠模型。

关键词：糖尿病肾病模型,动物恒河猴链脲佐菌素

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转基因表达KLK1抵抗压力负荷引起的心室重构

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中国分子心脏病学杂志 2013年第3期13卷 559-564页

作者：鲍丹吕丹董伟陈炜路迎冬张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京市100021

目的 KLK1基因对高血压具有保护作用,KLK1在心脏中也有所表达,但目前对KLK1基因在心肌中的作用所知甚少。本研究通过建立KLK1基因转基因小鼠,在压力负荷的条件下,研究KLK1对心室重构的作用。方法把人KLK1基因插入鸡β-肌动蛋白启动子下... 详细信息

目的 KLK1基因对高血压具有保护作用,KLK1在心脏中也有所表达,但目前对KLK1基因在心肌中的作用所知甚少。本研究通过建立KLK1基因转基因小鼠,在压力负荷的条件下,研究KLK1对心室重构的作用。方法把人KLK1基因插入鸡β-肌动蛋白启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6JKLK1转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型。采用Western Blot鉴定KLK1在心脏、大血管和肾脏中的表达筛选高表达转基因品系。用无创血压仪测量血压,利用超声影像分析技术和病理学观察转基因小鼠心脏结构与功能改变。结果建立了在心脏、肾脏和大血管壁高表达KLK1基因的转基因小鼠。在正常情况下,与同窝转基因阴性小鼠相比,转基因小鼠心脏结构和功能无显著变化。主动脉缩窄术后1个月,由于压力负荷的存在,同窝阴性小鼠左心室壁厚病理性肥厚,而转基因表达的KLK1可明显地抑制左心室壁肥厚的进程;主动脉缩窄术后2个月,同窝阴性小鼠心脏进入到病理性扩张阶段,KLK1也表现出对心肌病理性扩张的抑制,同时,组织学染色显示KLK1转基因小鼠心肌肥厚与纤维化程度减弱。结论转基因表达KLK1可抵抗压力负荷引起的心室重构。

关键词： KLK1 转基因压力负荷心室重构

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STZ诱导恒河猴糖尿病动物模型的建立

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中国比较医学杂志 2012年第6期22卷 53-56页

作者：朱华刘颖马春梅黄澜秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的复制稳定的链脲佐菌素诱导糖尿病恒河猴动物模型。方法健康恒河猴5只,小剂量(30mg/kg)多次静脉注射链脲佐菌素,分别在注射后2、3个月进行葡萄糖耐量实验并连续观察血糖、胰岛素、C肽的变化。连续观察12个月。结果随着时间推移,动物... 详细信息

目的复制稳定的链脲佐菌素诱导糖尿病恒河猴动物模型。方法健康恒河猴5只,小剂量(30mg/kg)多次静脉注射链脲佐菌素,分别在注射后2、3个月进行葡萄糖耐量实验并连续观察血糖、胰岛素、C肽的变化。连续观察12个月。结果随着时间推移,动物出现典型的糖尿病症状。3只动物的血糖静脉注射1次后持续10周稳定,另外2只分别进行了第2、3次注射。动物血糖在12个月内平稳上升、胰岛素、C肽分泌持续下降。2个月时葡萄糖耐量减低明显(P<0.01)。结论小剂量多次注射STZ后恒河猴可出现持续、稳定的糖尿病表现,可作为相关研究的动物模型。

关键词：糖尿病模型,动物恒河猴链脲佐菌素

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恒河猴糖尿病动物模型血清超氧化物歧化酶和丙二醛的检测及意义

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医学研究杂志 2012年第10期41卷 24-26页

作者：朱华刘颖秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心100021

目的对糖尿病恒河猴血清中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)进行动态检测,探讨其在在非人灵长类糖尿病并发肾病模型中的应用价值。方法健康恒河猴5只,小剂量30mg/kg多次静脉注射链脲佐菌素(STZ),血糖稳定后观察血清中SOD和MDA的含量... 详细信息

目的对糖尿病恒河猴血清中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)进行动态检测,探讨其在在非人灵长类糖尿病并发肾病模型中的应用价值。方法健康恒河猴5只,小剂量30mg/kg多次静脉注射链脲佐菌素(STZ),血糖稳定后观察血清中SOD和MDA的含量。连续观察13个月。结果造模后动物血清中的SOD值降低,在8个月出现显著性差异(P<0.05),11个月出现极显著性差异(P<0.01)。MDA含量持续上升,9个月出现显著性差异(P<0.05),13个月出现极显著性差异(P<0.01)。血糖与SOD呈负相关(F=-0.186,-0.323,P<0.05),血糖与MDA呈正相关(F=0.128,0.087,P<0.05),SOD与MDA无相关关系。结论测定血清SOD,MDA含量可以在一定程度上反应恒河猴糖尿病微血管病变的程度。

关键词：超氧化物歧化酶丙二醛糖尿病恒河猴

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Exonuclease-1缺失延缓端粒酶缺失小鼠造血微环境的衰老

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中国比较医学杂志 2012年第5期22卷 37-43页

作者：石桂英林培容白琳鞠振宇中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 北京华信医院北京100016

目的研究Exo-1对端粒酶缺失小鼠造血微环境衰老的影响。方法以端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-)和Exo-1基因敲除小鼠(Exo-1-/-)杂交,并进一步互交产生第三代端粒酶基因敲除小鼠(G3Terc-/-)以及第三代Terc和Exo-1双基因敲除小鼠(G3Terc-/-Exo... 详细信息

目的研究Exo-1对端粒酶缺失小鼠造血微环境衰老的影响。方法以端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-)和Exo-1基因敲除小鼠(Exo-1-/-)杂交,并进一步互交产生第三代端粒酶基因敲除小鼠(G3Terc-/-)以及第三代Terc和Exo-1双基因敲除小鼠(G3Terc-/-Exo-1-/-)。以CD45.1野生型小鼠的骨髓细胞为供体,以2月龄G3Terc-/-或G3Terc-/-Exo-1-/-小鼠为受体,进行骨髓移植。在受体小鼠9月龄时,取骨髓、脾脏、胸腺、外周血等组织器官的细胞进行流式分析,研究G3Terc-/-和G3Terc-/-Exo-1-/-受体小鼠中的野生型供体来源的造血干细胞的发育分化。结果同G3Terc-/-小鼠相比,G3Terc-/-Exo-1-/-双基因敲除受体小鼠骨髓中野生型供体来源的B220+细胞比例升高,前体B细胞的比例也明显升高;脾脏B220+细胞的比例明显升高;胸腺发育正常;外周血中B220+细胞比例升高。结论 Exo-1缺失延缓了端粒酶基因敲除小鼠造血系统微环境的衰老,从而逆转了端粒功能障碍引起的骨髓造血干细胞发育分化异常。

关键词：端粒功能障碍 Exo-1 造血干细胞造血微环境

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