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第十六届中国实验动物科学年会

作者：卢天宇高虹杨博超于佳楠徐亚新王若琳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的利用微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用TaqMan探针双重ddPCR方法 ,分别以GAPDH和TFR... 详细信息

目的利用微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用TaqMan探针双重ddPCR方法 ,分别以GAPDH和TFRC为内参基因,确定对PERV拷贝数检测反应最适合退火温度和反应循环数。另外,通过对浓度梯度稀释的标准品质粒和猪细胞基因组进行检测,以确定最适模板浓度。采用ddPCR和qPCR两种方法测定来自猪源细胞系和巴马小型猪组织中PERV的拷贝数,比较两种检测方法的稳定性。结果基于ddPCR技术检测PERV拷贝数的最适退火温度为59.9℃,最佳反应循环数为50;模板基因组的最适浓度在1.25-7.5ng;检测同一样品来源基因组中PERV的拷贝数的变异系数在0.44%至8.29%之间。结论本研究建立了基于ddPCR技术的PERV拷贝数的检测方法并系统的探索了最佳实验条件,与传统的qPCR相比,该方法具有更高的准确性和可重复性,为异种移植研究中供体动物基因组PERV拷贝数的测定提供了灵敏的方法和可靠依据。

关键词：微滴式数字PCR 猪内源逆转录病毒拷贝数绝对定量

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AT-2灭活HIV-1病毒及纯化回收鉴定

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中国比较医学杂志 2011年第4期21卷 21-23,61页

作者：鲍琳琳邓巍孙丽华高虹卢葳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 法国巴黎第五大学肿瘤免疫治疗研究中心

目的制备具备完整空间构型且纯度在90%以上的灭活HIV-1病毒,用于HIV疫苗研究。方法应用化学制剂2,2’-dithiodipyridine(aldrithiol-2;AT-2)灭活HIV-1病毒,对灭活的病毒超速离心浓缩并洗涤去除灭活用的化学制剂AT-2。采用分子筛技术去... 详细信息

目的制备具备完整空间构型且纯度在90%以上的灭活HIV-1病毒,用于HIV疫苗研究。方法应用化学制剂2,2’-dithiodipyridine(aldrithiol-2;AT-2)灭活HIV-1病毒,对灭活的病毒超速离心浓缩并洗涤去除灭活用的化学制剂AT-2。采用分子筛技术去除灭活病毒中残存的杂质蛋白质。结果 250μmol/L AT-2与HIV-137℃作用1 h可以彻底灭活病毒的感染性,同时保留病毒的免疫原性。灭活的病毒纯化后检测不到AT-2的残留,检测牛血清蛋白残余量低于50 ng/mL。结论灭活的HIV-1病毒经过纯化后纯度达到95.6%,可以满足作为HIV疫苗研究的免疫刺激剂的使用要求。

关键词： AT-2 灭活病毒纯化

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SHIV1157ipd3N4小量多次阴道粘膜感染中国猕猴的初步研究

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实验动物与比较医学 2011年第1期31卷 38-42页

作者：丛喆蒋虹金光王卫高虹姚南陶真陈霆杨志伟 Sylvain.Fleury Anick Chalifour Ruth. M. Ruprecht 魏强秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 Dana-Farber Cancer Institute Boston Massachusetts 021151 Harvard Medical School Boston Massachusetts 021152 Mymetics Corporation CH 1066 Epalinges Switzerland

目的建立R5-SHIV1157ipd3N4病毒中国猕猴阴道粘膜小剂量多次感染模型，为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建、应用策略。方法选用10—20TCID50剂量的SHIV1157ipd3N4病毒阴道黏膜途径感染6只雌性中国猕猴，共感染11次，每次攻毒... 详细信息

目的建立R5-SHIV1157ipd3N4病毒中国猕猴阴道粘膜小剂量多次感染模型，为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建、应用策略。方法选用10—20TCID50剂量的SHIV1157ipd3N4病毒阴道黏膜途径感染6只雌性中国猕猴，共感染11次，每次攻毒间隔4～7d。定期测定血浆病毒载量和外周血CD4＋：CD8＋。结果6只中国猕猴经11次病毒攻击后，均建立系统性感染，血浆病毒载量呈阳性；CD4＋：CD8＋均有下降。结论初步建立了R5-SHIV1157ipd3N4中国猕猴阴道黏膜小剂量多次感染模型，为艾滋病研究提供了更接近于自然感染状态的模型建立模式。

关键词： SHIV1157ipd3N4 黏膜感染中国猕猴

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中药Ⅰ号方对阿尔兹海默病的多靶位治疗作用

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中国比较医学杂志 2013年第5期23卷 26-29页

作者：梁良刘羽曹子青杨亚军朱华黄澜盛树力秦川邓巍北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所病理室卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 山西省曲沃县西街本草中药研究所山西曲沃043400

目的应用高通量抗体芯片技术(KinexTM Antibody Microarray)来研究中药I号方(PN-1)对阿尔兹海默病的治疗作用。方法将阿尔兹海默病模型小鼠分为两组,其中对照组4只,每天给予双蒸水灌胃,给药组8只每天给予中药提取物灌胃,给药3个月后,利... 详细信息

目的应用高通量抗体芯片技术(KinexTM Antibody Microarray)来研究中药I号方(PN-1)对阿尔兹海默病的治疗作用。方法将阿尔兹海默病模型小鼠分为两组,其中对照组4只,每天给予双蒸水灌胃,给药组8只每天给予中药提取物灌胃,给药3个月后,利用KinexTMAntibody Microarray筛选出两组的差异表达蛋白,然后用Ingenuity Pathway Analysis(IPA)及查阅文献找到其中与阿尔兹海默病相关的蛋白分子。结果给予中药I号方(PN-1)的阿尔兹海默病小鼠与空白对照小鼠比较,差异表达蛋白其中与阿尔兹海默病相关,且存在变化的为:p-tau(T522)、COX2,caspase6和caspase9下降;bcl-xl和CaMK4升高。结论中药Ⅰ号方(PN-1)能从抗tau蛋白高磷酸化、抗炎、抑制凋亡和提高记忆力等多靶位改善阿尔兹海默病模型小鼠的病理生理表现,可能成为治疗阿尔兹海默病的有效药物。

关键词：阿尔兹海默病模型小鼠中药Ⅰ号方多靶位

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一种改进的非人灵长类神经功能缺损评价方法

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中国比较医学杂志 2011年第9期21卷 58-62页

作者：朱华卢珊冯铭李秦刘颖代小伟安沂华赵春华王任直秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国医学科学院实验动物研究所motac合作实验室北京100050 中国医学科学院北京协和医院北京100073 中国医学科学院基础医学研究所北京100005 北京神经外科研究所北京100050

目的对文献中的量表进行修改和细化后用于实验猴的神经功能动态量化观察,使其更适于灵长类脑卒中神经功能缺损的评价。方法成年食蟹猴12只,用自体股动脉抗凝血脑内立体注射的方法建立脑出血模型,造模后1周将动物随机分为对照组、干细胞... 详细信息

目的对文献中的量表进行修改和细化后用于实验猴的神经功能动态量化观察,使其更适于灵长类脑卒中神经功能缺损的评价。方法成年食蟹猴12只,用自体股动脉抗凝血脑内立体注射的方法建立脑出血模型,造模后1周将动物随机分为对照组、干细胞治疗高剂量组和低剂量组,分别在出血灶周围注射生理盐水、脊髓间充质干细胞5×106/只和1×106/只,造模6h,1d,3 d,1w后及干细胞注射后1d,3d,1w,2w,3w,4w在每天的固定时间使用文献中的表格和/或改进的表格进行评分,比较造模前后和干细胞注射前后动物受损伤侧上肢神经功能缺损情况评价造模和干细胞治疗效果。结果造模手术前,所有动物的行为表现均正常,神经功能评分为0。造模手术后6h,用修改前后的表格评分均为31分左右。但从术后3d开始出现评分上的差异。用修改后的表格对动物的神经功能进行评分结果显示干细胞注射后1周开始到动物被安乐时,剂量组与对照组之间的神经功能评分出现显著性差异(P<0.05)。高、低剂量组间未见显著性差异。结论改进的表格克服了旧表格中分差大,评价标准模糊的缺点,提高了量表评价的敏感性,具有良好的临床相似性和可操作性。为建立标准化神经功能评价量表进行了有益尝试。

关键词：脑出血神经功能评分食蟹猴干细胞

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SHIV-XJ02170感染恒河猴后期的传代特点和env基因变异

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中国比较医学杂志 2011年第2期21卷 36-43页

作者：陶真丛喆刘强李悦刘浩王卫金光陈霆姚南蒋虹杨贵波李喆魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国疾病预防控制中心性艾中心北京102211 南开大学艾滋病研究中心天津300071

目的研究SHIV-XJ02170在中国恒河猴感染后期传代过程中病毒和宿主的变化特点,并分析env基因的序列变异。方法将感染中国恒河猴G0401V后期(5年)的SHIV-XJ02170病毒垂直传代2只猴(G0401V→G0402V→0403V),同时,剔除G0401V猴CD8+T细胞使潜... 详细信息

目的研究SHIV-XJ02170在中国恒河猴感染后期传代过程中病毒和宿主的变化特点,并分析env基因的序列变异。方法将感染中国恒河猴G0401V后期(5年)的SHIV-XJ02170病毒垂直传代2只猴(G0401V→G0402V→0403V),同时,剔除G0401V猴CD8+T细胞使潜伏的病毒大量复制后传代1只猴(G0401V→G0404V),应用流式细胞术、病毒载量测定、序列分析等方法研究该病毒在猴体内长期适应后的病毒和免疫学指标及序列变异特点。结果 G0401V在感染后期仍能稳定传代,且表现出毒力增强的特点。其传代猴G0402V在传代后41 d死亡,外周血CD4+T淋巴细胞衰竭,仅为43个/mL,符合艾滋病感染猴快速进展型的特征。剔除体内CD8+T细胞之后的传代猴G0404V的表现类似G0401V,即长期低水平的病毒血症水平。env基因序列分析发现SHIV-XJ02170在G0401V体内长期适应后发生了可遗传的序列变异,并引起糖基化位点的改变。结论 SHIV-XJ02170在猴体长期适应后的传代过程中表现出向强毒株过渡的特征,为进行SHIV-XJ02170感染性克隆的构建奠定了良好的实验基础。

关键词： SHIV-XJ02170 CD8+T细胞体内剔除传代 env 变异

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实验动物源人兽共患病防控战略研究

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中国动物检疫 2017年第2期34卷 38-41页

作者：孔琪夏霞宇高虹魏强马继红池丽娟秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生计生委人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京市人类重大疾病动物模型工程技术研究中心北京100021 中国动物疫病预防控制中心北京100125

本文通过实地调研、会议研讨、问卷调查和资料查阅等方法,阐明了实验动物源人兽共患病的防控现状,分析了其中存在的问题,总结了相关疫病的防控经验。在此基础上,形成了我国实验动物源人兽共患病防控的战略目标和措施,提出了相应建议。

关键词：实验动物人兽共患病动物病原质量控制战略研究

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二型糖尿病模型小鼠与健康小鼠骨髓细胞表型差异分析

二型糖尿病模型小鼠与健康小鼠骨髓细胞表型差异分析

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第十四届中国实验动物科学年会

作者：党女李程程管博文卢延华刘率男申竹芳孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院北京协和医学院药物研究所

目的:分析db/db小鼠以及KKAy小鼠两种二型糖尿病模型与健康对照小鼠的骨髓造血及免疫系统功能的差异。方法:选用db/db小鼠,同窝健康对照db/m小鼠,KKAy小鼠以及健康对照C57小鼠,取骨髓细胞悬液,测定骨髓淋巴细胞分型以及骨髓造血细胞分... 详细信息

目的:分析db/db小鼠以及KKAy小鼠两种二型糖尿病模型与健康对照小鼠的骨髓造血及免疫系统功能的差异。方法:选用db/db小鼠,同窝健康对照db/m小鼠,KKAy小鼠以及健康对照C57小鼠,取骨髓细胞悬液,测定骨髓淋巴细胞分型以及骨髓造血细胞分型。结果:与健康对照db/m小鼠相比,db/db小鼠的造血祖细胞(HPC,Lin-scal-1-ckit+);B淋巴细胞(B220+)的比例低于db/m小鼠,而造血干细胞(HSC,Lin-scal+1-ckit+)以及红系细胞(Ter119+)的比例却明显高于db/m小鼠(P<0.05),长期造血干细胞(LT-HSC,CD34-Lin-scal+1-ckit+)、髓系来源抑制性细胞(MDSC,CD11b+Gr-1+)的比例略高于db/m小鼠;与健康对照C57小鼠相比,KKAy小鼠的HPC、B淋巴细胞的比例低于db/m小鼠,而MDSC的比例却明显高于C57小鼠(P<0.05),HSC、LT-HSC以及红系细胞的比例高于C57小鼠。结论:与健康对照小鼠相比,二型糖尿病模型db/db小鼠和KKAy小鼠的造血免疫系统存在差异,两种小鼠的HPC、HSC、LT-HSC、B细胞、红系细胞以及MDSC的改变具有一致性,为进一步研究代谢异常对造血免疫系统功能的维持及应激反应性的影响提供了初步的数据。

关键词： db/db 小鼠 KKAy 小鼠造血免疫系统

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人SCARB2蛋白提高人肠道病毒71型对转基因小鼠的感染力

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中国比较医学杂志 2013年第7期23卷 16-20,I0002页

作者：修晶辉刘江宁杨亚军夏咸柱张连峰医学实验动物研究所中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 军事医学科学学院军事兽医研究所吉林省人畜共患病防治重点实验室吉林省长春市130122

目的细胞实验证实人清道夫受体B2(hSCARB2)是人类EV71的受体,本研究拟通过建立人SCARB2转基因小鼠,建立感染能力更高的小鼠模型。方法构建CMV启动子的SCARB2转基因表达载体,通过显微注射法建立C57BL/6J背景的人SCARB2转基因小鼠,PCR筛... 详细信息

目的细胞实验证实人清道夫受体B2(hSCARB2)是人类EV71的受体,本研究拟通过建立人SCARB2转基因小鼠,建立感染能力更高的小鼠模型。方法构建CMV启动子的SCARB2转基因表达载体,通过显微注射法建立C57BL/6J背景的人SCARB2转基因小鼠,PCR筛选阳性首建鼠。通过Western Blot和免疫组化检测目的蛋白在各组织中的表达。EV71感染转基因小鼠后,通过实时荧光定量PCR和免疫组化检测目的蛋白表达对病毒感染的促进效果。结果人SCARB2蛋白主要在转基因小鼠的骨骼肌和脑组织中表达,与野生型小鼠相比,转基因小鼠组织中的病毒载量显著提高4到5倍。结论人SCARB2的体内表达可促进EV71对转基因小鼠的感染,该蛋白在体内具有EV71受体功能。

关键词：人肠道病毒71型人SCARB2蛋白转基因小鼠病毒受体

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北京市某医学实验动物研究所科技论文产出及学术影响力分析

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医学与社会 2016年第2期29卷 20-23页

作者：孔琪夏霞宇赵永坤秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国人民解放军62041部队长春130122

目的:了解北京市某医学实验动物研究所自1980年成立以来科技论文的产出情况及国际学术影响力。方法:于2015年4-5月检索数据库Web of Science^(TM)核心合集。结果:自1980年至2015年3月,该研究所共有213篇科研论文被Web of Science^(TM)... 详细信息

目的:了解北京市某医学实验动物研究所自1980年成立以来科技论文的产出情况及国际学术影响力。方法:于2015年4-5月检索数据库Web of Science^(TM)核心合集。结果:自1980年至2015年3月,该研究所共有213篇科研论文被Web of Science^(TM)核心合集收录。根据检索结果,分析该研究所科研论文产出情况及其发展趋势、学术影响力、学科分布与学术带头人、发文期刊统计、资助情况和合作单位等信息。讨论:自2003年以来,北京市某研究所科研活动总体呈现逐年活跃的发展态势。有18个国家或地区的225所科研机构与该研究所开展科研合作。该研究所学术影响力呈现出较强的上升趋势。

关键词：医学实验动物 SCI 学术影响力论文统计

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