检索结果-内蒙古大学图书馆

中华预防医学杂志 2005年第1期39卷 5-6页

作者：乌正赉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室北京100005

目前,心血管病,包括高血压、冠心病和脑卒中,已成为危害人民健康和生命的主要疾病.据世界卫生组织"2001年世界卫生报告"[1],2000年全球因心血管疾病死亡人数高达1 670万,其中一半以上发生在发展中国家,1/3以上为中年人.心血... 详细信息

目前,心血管病,包括高血压、冠心病和脑卒中,已成为危害人民健康和生命的主要疾病.据世界卫生组织"2001年世界卫生报告"[1],2000年全球因心血管疾病死亡人数高达1 670万,其中一半以上发生在发展中国家,1/3以上为中年人.心血管病是全球被忽略的三大"流行病"之一(其他两种为吸烟和道路交通伤害),越来越严重地威胁着人类的生命和健康.我国的情况也大致相似,据卫生部2003年中国卫生统计年鉴[2],2002年我国大城市居民心脏病死亡率达75.68/10万,仅次于恶性肿瘤、脑血管病(91.37/10万),居死因的第3位;农村居民心脏病死亡率为73.93/10万,仅次于恶性肿瘤、呼吸系统疾病、脑血管病(89.12/10万),居死因的第4位。

关键词：心血管疾病心血管病人群道路交通伤害吸烟冠心病高血压病死防治危害

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症状监测及其在应对突发公共卫生事件中的作用

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中华预防医学杂志 2005年第1期39卷 56-58页

作者：任赟静黄建始马少俊徐瑞中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室北京100005

及早地识别公共卫生事件的发生,并做出迅速而有效的反应以降低患病率和死亡率一直是公共卫生工作的首要目标之一[1].而在面临突发公共卫生事件时,无论从挽救生命或减少经济损失而言,对及时性的要求都变得更为突出和重要[2].研究结果表明... 详细信息

及早地识别公共卫生事件的发生,并做出迅速而有效的反应以降低患病率和死亡率一直是公共卫生工作的首要目标之一[1].而在面临突发公共卫生事件时,无论从挽救生命或减少经济损失而言,对及时性的要求都变得更为突出和重要[2].研究结果表明,在大规模炭疽杆菌微粒播散事件的初期,应答反应延迟1 h就会多损失2亿美元[1].因此,应对突发公共卫生事件要求分秒必争。

关键词：突发公共卫生事件监测播散应答反应应对患病率初期要求及时性目标

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人甲状旁腺素(1-34)衍生物在大肠杆菌中表达、纯化及其生物学活性

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第2期21卷 227-233页

作者：狄旭刘长征陈松森张艳丽邓艳春孙兰杨京医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

为研究Gly hPTH(1 34)衍生物的生物学活性 ,用重叠PCR方法合成编码hPTH(1 34)的DNA片段 ,克隆到融合表达载体pGEX 2T的缩短型谷胱甘肽转移酶基因GST6 9△的 3′末端 ,构建正确读码框架的融合基因 .在两个基因间引入蛋白质羟胺切割位点序... 详细信息

为研究Gly hPTH(1 34)衍生物的生物学活性 ,用重叠PCR方法合成编码hPTH(1 34)的DNA片段 ,克隆到融合表达载体pGEX 2T的缩短型谷胱甘肽转移酶基因GST6 9△的 3′末端 ,构建正确读码框架的融合基因 .在两个基因间引入蛋白质羟胺切割位点序列 ,转入E .coliJM10 9中 ,IPTG诱导表达 .该融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 2 0 %以上 ,主要以包涵体形式存在 ,盐酸羟胺切割表达产物 .分析表明 ,80 %左右的融合蛋白被裂解为GST6 9△和Gly hPTH(1 34) .经分子筛柱层析和反相层析分离纯化获得重组Gly hPTH(1 34)衍生物 ,纯度达 98%以上 ,回收率约为 10mg/升发酵液 ,分子量为 4 177,等电点 (pI)为 8 4 0 ,N端 16个氨基酸 ,除第一个为甘氨酸外 ,其余与天然hPTH(1 34)序列一致 .Western印迹结果表明 ,Gly hPTH(1 34)衍生物具有hPTH(1 34)的免疫学活性 .体外活性测定结果表明 ,Gly hPTH(1 34)衍生物能刺激人成骨细胞HOSTE85增殖、增加细胞内胶原合成、ALP活性增高和cAMP生成量增加 ,并呈量效关系 ,提示它具有与化学合成的hPTH(1 34)相同的生物学活性 ,N端多一个Gly对其活性无明显影响 .

关键词： Gly—hPTH(1—34)衍生物融合表达羟胺切割纯化生物学活性

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人载脂蛋白A-Ⅰ半胱氨酸突变体的二级结构和脂质结合能力的比较

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第5期21卷 603-609页

作者：祝学卫吴刚曾武威薛红陈保生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体... 详细信息

为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体,分别为apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),和apoA-Ⅰ(L195C).观察比较各种野生型及突变apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量和二级结构稳定性及其脂质结合能力.结果显示,野生型apoA-Ⅰ,apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),apoA-ⅠMilano和apoA-Ⅰ(L195C)的α螺旋含量分别为54±4%,49±4%,50±2%,51±6%,56±4%,52±3%,和54±1%,各种蛋白的α螺旋含量无显著性差异(P>0.05).野生型apoA-Ⅰ的变性标准自由能(ΔG0D)为10.5kJ/mol;apoA-Ⅰ(S52C)和apoA-ⅠMilano的ΔG0D比野生型低2.1kJ/mol;而apoA-Ⅰ(K129C)的ΔG0D比野生型apoA-Ⅰ高1.6kJ/mol.与野生型apoA-Ⅰ相比,apoA-Ⅰ(K129C)和apoA-Ⅰ(L195C)两个突变体与脂质结合能力明显下降(P<0.05),而其它半胱氨酸突变体(包括apoA-ⅠMilano)在脂质结合动力学方面与野生型apoA-Ⅰ无明显差异.以上结果提示,不同位点发生的半胱氨酸突变对apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量无明显影响,但对蛋白的二级结构稳定性和脂质结合能力影响不尽相同.

关键词：人载脂蛋白A—Ⅰ 半胱氨酸突变体 α螺旋含量二级结构稳定性脂质结合能力

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干扰素抗病毒机制及其抗病毒性肝炎中的作用

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中国公共卫生 2005年第7期21卷 890-891页

作者：李洪权刘英李辉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病教研室北京100005

干扰素(interferon,IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增长和免疫调节作用的细胞因子.目前IFN已经被广泛地应用到慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、白血病、淋巴瘤等疾病的治疗中.本文着重阐述IFN-α的抗病毒作用.

关键词：抗病毒性肝炎干扰素抗病毒机制免疫调节作用慢性乙型肝炎慢性丙型肝炎抗病毒作用 IFN-α 细胞因子细胞增长抗肿瘤白血病淋巴瘤

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动脉粥样硬化的基础研究

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中华医学杂志 2005年第6期85卷 428-431页

作者：张庆军刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

在中国,随着经济社会的发展,心血管疾病的发病率已经排在各种疾病之首.有人预测,到2020年全球范围内由于心血管疾病造成的死亡数有可能达到总死亡数的36%,从而在人类历史上心血管疾病将首次成为第1位的致死原因[1].所以,心血管疾病是现... 详细信息

在中国,随着经济社会的发展,心血管疾病的发病率已经排在各种疾病之首.有人预测,到2020年全球范围内由于心血管疾病造成的死亡数有可能达到总死亡数的36%,从而在人类历史上心血管疾病将首次成为第1位的致死原因[1].所以,心血管疾病是现在和将来很长一段时间内人类必须面对的最重大的公共卫生问题之一.在心血管疾病中,动脉粥样硬化(atherosclerosis)及其并发症占了相当大一部分.经过长期的研究,人类对于动脉粥样硬化有了很深入的认识,在预防、诊断和治疗方面取得了相当大的进步,但距离战胜它还有很长的路要走。

关键词：心血管疾病动脉粥样硬化并发症公共卫生问题首次致死原因基础研究死亡数发病率人类历史

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Bcl-2家族蛋白参与调节CD3ε和5-氟尿嘧啶介导的T淋巴细胞凋亡

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中国免疫学杂志 2005年第1期21卷 17-21页

作者：程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的 :研究Bcl 2家族成员在 5 氟尿嘧啶 (5 FU)和CD3ε介导的T淋巴细胞凋亡中的作用 ,阐述T淋巴细胞凋亡的分子机制 ,为相关肿瘤的治疗提供依据。方法 :用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 5 FU(2 5 μg/ml)单独或联合刺激JK... 详细信息

目的 :研究Bcl 2家族成员在 5 氟尿嘧啶 (5 FU)和CD3ε介导的T淋巴细胞凋亡中的作用 ,阐述T淋巴细胞凋亡的分子机制 ,为相关肿瘤的治疗提供依据。方法 :用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 5 FU(2 5 μg/ml)单独或联合刺激JK、TJK和T3JK细胞 ,诱导细胞凋亡 ,用MTS比色法检测细胞死亡率 ,用Westernblot检测Bid的表达和活化。用脂质体的方法转染细胞。结果 :CD3ε特异的单克隆抗体和 5 FU分别单独处理TJK细胞 ,都能诱导其凋亡并伴随Bid的活化 ,二者联合使用能显著增加TJK细胞凋亡和Bid的活化。Bcl 2过表达可明显降低TJK细胞对 5 FU的敏感性。结论 :Bcl 2家族成员参与CD3ε和 5 FU诱导的T淋巴细胞凋亡的调节 ,Bcl 2过表达能显著抑制T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。

关键词： CD3ε 5-FU Bid Bcl-2 细胞凋亡

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核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体诊断原发性胆汁性肝硬化的价值初探

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中华检验医学杂志 2005年第11期28卷 1120-1125页

作者：李永哲刘镭孙庆国曾常茜赵振国佟大伟张蜀澜高扬于孟学朱立平 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科北华大学医学院免疫学教研室北华大学医学院免疫学教研室吉林北方肝胆医院吉林北方肝胆医院中国医学科学院中国协和医大学基础医学研究所免疫学系 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科

目的克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,建立酶联免疫吸附法(ELISA),初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义。方法构建重组表达... 详细信息

目的克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,建立酶联免疫吸附法(ELISA),初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义。方法构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21、M15中表达;融合蛋白经NiNAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)及免疫印迹法(WB)进行免疫活性鉴定;应用表达蛋白建立间接ELISA,检测60名健康体检者、68例原发性胆汁性肝硬化(PBC)、60例病毒性肝炎、60例结缔组织病患者血清中抗gp210、p62和LBR抗体。结果经重组质粒测序和酶切结果证实,gp210、p62和LBR目的基因已正确插入原核表达载体中,基因序列正确,符合表达框架;SDSPAGE检测表达产物分别在69000、62000和27000处有一明显的蛋白表达条带,WB分析表明重组蛋白具有人gp210、p62和LBR抗原反应性。ELISA检测标本血清结果显示,PBC中,抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体阳性率分别为36.8%、30.9%和5.9%;而病毒性肝炎组、结缔组织病组和健康体检组中,除抗gp210抗体在结缔组织病患者中阳性率为1.7%外,3种自身抗体检测结果均为阴性。PBC组3种自身抗体阳性率与疾病对照组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。结论本研究成功克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,并将其在大肠杆菌中成功表达。应用纯化融合蛋白建立的ELISA检测抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体,对PBC具有较好特异性,为PBC的特异性临床诊断提供了有效的工具。

关键词：肝硬化,胆汁性自身抗原核包膜蛋白

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抗Aβ人源融合抗体在毕赤酵母中的高效表达纯化及性质研究

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中国生物工程杂志 2005年第6期25卷 40-44页

作者：刘立颖许士奇赵雪梅杜洪震张伟梁平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学研究院病理室北京100005 承德医学院微生物与免疫学教研室承德067000

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受... 详细信息

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受严格调控的醇氧化酶启动子的控制下由甲醇诱导表达,并利用α因子前导肽引导融合抗体分泌。载体线性化后整合入甲醇营养型酵母Pichia pastoris(Pp)GS115基因组中,经鉴定表达单位具有良好的遗传稳定性。对筛选得到的高分泌表达融合抗体的细胞株进行表达和培养条件的优化,使诱导上清液中融合抗体的产量选到100mg/L。利用Protein A层析柱分离、纯化,获得纯度较高的融合抗体。经鉴定分析其具有正确的分子量和N末端,且融合抗体可与Aβ抗原结合并能吸引巨噬细胞吞噬和清除抗原抗体复合物,具有抗体生物学活性。这是首次利用甲醇营养型酵母表达系统成功实现了抗Aβ融合抗体的高效分泌表达及产物纯化鉴定,为进一步研究AD及其治疗提供了新的途径。

关键词：抗β-淀粉样多肽人源融合抗体甲醇营养型酵母表达系统阿尔茨海默病免疫治疗纯化性质

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转人载脂蛋白Eε4和突变淀粉前体蛋白基因小鼠的建立

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基础医学与临床 2005年第1期25卷 79-81页

作者：杨鹏薛越强廖峥嵘屠亚军琦祖和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005 河北医科大学基础医学院细胞生物室石家庄050017

将人载脂蛋白 (ApoEε4 )转基因鼠和突变前体蛋白 (APP)转基因小鼠交配 ,以建立h ApoEε4 /突变APP双转基因小鼠。共产出仔鼠 2 3只 ,经PCR初步筛选 ,并用Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA作进一步鉴定 ,得到 3只双转基因小鼠。该双转... 详细信息

将人载脂蛋白 (ApoEε4 )转基因鼠和突变前体蛋白 (APP)转基因小鼠交配 ,以建立h ApoEε4 /突变APP双转基因小鼠。共产出仔鼠 2 3只 ,经PCR初步筛选 ,并用Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA作进一步鉴定 ,得到 3只双转基因小鼠。该双转基因鼠的建立为进一步阐明ApoEε4的致病作用以及对AD的研究提供了理想的研究模型。

关键词：突变转基因小鼠前体蛋白载脂蛋白Eε4 转基因鼠阳性仔鼠交配基因组DNA Southern杂交

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