检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 99-99页

作者：斯勤王小明邱劲李素敏李健郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

一氧化氮(NO)由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸生成.诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是NOS三种亚型中催化产生NO较多的一种,可被多种炎症因子诱导,而诱导环节多在基因转录水平.目的:观察肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)对内皮细胞系***92... 详细信息

一氧化氮(NO)由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸生成.诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是NOS三种亚型中催化产生NO较多的一种,可被多种炎症因子诱导,而诱导环节多在基因转录水平.目的:观察肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)对内皮细胞系***926细胞iNOS基因转录的影响,并探讨蛋白激酶C(PKC)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的作用. 方法:传代培养的***926细胞用TNFα,LPS处理18小时,并同时加入或不加蛋白激酶C抑制剂H-7、Calphostin和丝裂素原活化蛋白激酶抑制剂PD098059;人iNOS(hiNOS)基因表达以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测.结果:200 IU/mL TNFα、100 ng/mL LPS均明显诱导***926细胞hiNOS基因的表达;H-7、Calphostin和PD098059可抑制TNFα诱导的hiNOS基因的表达.但PKC和MAPK抑制剂对LPS诱导的抑制效应均不显著.结论:TNFα诱导hiNOS基因的表达需要PKC和MAPK的活化,而LPS诱导hiNOS基因的表达可能还涉及其它蛋白激酶的途径.

关键词：细胞基因转录 EA LPS TNF hy926

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PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合A-T丰富区的初步分离和鉴定

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 98-98页

作者：王小明邱劲李健沈传陆李素敏斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

一些动脉粥样硬化相关致病因素可诱导内皮细胞和单核细胞中血小板源生长因子-B链(PDGF-B)基因表达,这一过程涉及众多反式作用因子和基因上游调控序列之间的相互作用.染色体结合蛋白--高迁移率蛋白Ⅰ(HMGI)可通过与DNA上的A-T丰富区结合... 详细信息

一些动脉粥样硬化相关致病因素可诱导内皮细胞和单核细胞中血小板源生长因子-B链(PDGF-B)基因表达,这一过程涉及众多反式作用因子和基因上游调控序列之间的相互作用.染色体结合蛋白--高迁移率蛋白Ⅰ(HMGI)可通过与DNA上的A-T丰富区结合,影响多种基因的转录.目的:分离和鉴定PDGF-B链基因上游序列中与HMGI结合的A-T丰富区,并初步分析其功能.方法:DNA重组技术和凝胶迁移率改变法(EMSA).结果:重组人HMGI蛋白(rHMGI)可与PDGF-B链基因上游序列结合.在-1758/+43 bp片段内至少存在两个与HMGI结合的A-T丰富区,其中一个位于-190/+43 bp片段内,可能是涉及TATA盒在内的TTTATAAA,另一个位于-1304/-990 bp内,该区有两个TTTATAAA序列.被蛋白激酶C和CDC2激酶磷酸化的rHMGI与-1304/990 bp片段内A-T丰富区的结合活性明显减低,但未观察到PKC磷酸化明显减弱rHMGI与-190/+43 bp片段的结合.在肿瘤坏死因子α(TNFα),弱氧化低密度脂蛋白(mmLDL)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理的ECV304核抽提物中,加入低剂量的rHMGI显著增强核转录因子NF-κB与PDGF-B链基因上游切应力反应元件(SSRE)的结合,并呈一定的剂量依赖性.结论:高迁移率蛋白Ⅰ可与PDGF-B链基因上游一个或数个A-T丰富区结合,促进转录因子NF-κB与SSRE的相互作用,并可能受蛋白激酶C和CDC2激酶的磷酸化调节.这对深入阐明致动脉粥样硬化相关因素诱导PDGF-B链基因转录的机制具有重要意义.

关键词：上游序列基因 HMGI PDGF-B A-T

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AngⅡ、mm-LDL和TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因转录调控的影响

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 100-100页

作者：李健王小明斯勤郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室!北京100005

目的:从基因转录水平探讨AngⅡ、mm-LDL及TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因表达的影响.方法:(1)以GAPDH为内参照,用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测10-6 mol/L AngⅡ、100 μg/mL mm-LDL及200 U/mL TNFα作用于ECV304细胞18 h后各实... 详细信息

目的:从基因转录水平探讨AngⅡ、mm-LDL及TNFα对ECV304细胞PDGF-B链基因表达的影响.方法:(1)以GAPDH为内参照,用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测10-6 mol/L AngⅡ、100 μg/mL mm-LDL及200 U/mL TNFα作用于ECV304细胞18 h后各实验组PDGF-B链基因mRNA水平,分别为对照组的1.5倍、2.0倍和1.3倍,提示AngⅡ、mm-LDL及TNFα在转录水平对ECV304细胞PDGF-B链基因的表达有促进作用.

关键词：细胞荧光素酶表达量报告基因质粒 PDGF-B TNF mm-LDL Ang ECV304 基因转录

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TNF-α和mmLDL对人脐静脉内皮细胞PAI-1活性的作用及其机制

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中国医学科学院学报 2000年第4期22卷 311-311页

作者：李晓冬朱广瑾祖淑玉中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室!北京100005

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生长因子和雌激素对大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素基因表达的影响

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中国医学科学院学报 1999年第5期21卷 331-337页

作者：吴雪梅张荣狄安稞单惠敏黄曼影许荣焜中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目的观察外源性生长因子和雌激素对离体正常大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）基因表达的影响，并探讨生长因子与雌激素作用的关系。方法应用无血清原代培养的大鼠垂体前叶细胞，分别采用荧光染色细胞Ｄ... 详细信息

目的观察外源性生长因子和雌激素对离体正常大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）基因表达的影响，并探讨生长因子与雌激素作用的关系。方法应用无血清原代培养的大鼠垂体前叶细胞，分别采用荧光染色细胞ＤＮＡ的激光扫描共聚焦显微镜（ｌａｓｅｒｓｃａｎｎｉｎｇｃｏｎｆｏｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ＬＳＣＭ）扫描、以及原位杂交方法，观察１７－β－雌二醇（ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，Ｅ２）、表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃ－ｔｏｒ，ＥＧＦ）及转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦβ１）对大鼠垂体前叶细胞增殖活性和催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）基因表达的影响。结果生长因子或雌激素作用３６ｈ后，Ｅ２和ＥＧＦ单独作用组细胞ＤＮＡ含量和ＰＲＬｍＲＮＡ含量均较正常对照组明显升高（Ｐ＜０．００１）；两者共同作用上述效应更为显著，高于Ｅ２和ＥＧＦ单独作用组（Ｐ＜０．０１）。ＴＧＦβ１对细胞增殖与ＰＲＬ基因表达均有抑制作用（Ｐ＜０．００１）；而与Ｅ２共同作用时细胞内ＤＮＡ含量和ＰＲＬｍＲＮＡ水平显著高于ＴＧＦβ１单独作用组（Ｐ＜０．００１），但仍低于Ｅ２单独作?

关键词：垂体前叶细胞生长因子雌二醇增殖活性催乳素

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雌激素诱发大鼠原位与移植垂体催乳素瘤中催乳素基因与TGFα和TGFβ1基因的表达

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生理学报 1999年第6期51卷 75-80页

作者：吴雪梅许建萍张荣许荣焜中国医学科学院、中国协和医科大学肿瘤医院内科!北京100021 中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院生理研究室!北京100005

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体... 详细信息

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体PRL瘤中PRL基因和两种转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF)TGFα和TGFβ1基因表达水平的改变。结果表明:在E2长期作用后,原位垂体与异体移植于肾囊,从而远离下丘脑的垂体均可形成垂体PRL瘤;原位与移植垂体PRL瘤中均表现PRL基因的高表达,但移植瘤中的PRL基因表达水平低于原位垂体瘤;此外,仅在原位垂体PRL瘤中发现上述两种转化生长因子呈较高水平的表达,移植垂体PRL瘤与正常垂体中均检测不到这两种转化生长因子的表达。上述结果提示,TGFα和TGFβ1可能涉及E2诱发的原位垂体PRL瘤形成;E2诱发原位与移植垂体形成PRL瘤的机制可能不尽相同

关键词： PRL瘤移植转化生长因子 Northern印迹杂交

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人乳头瘤病毒16型E7C端亚基因片段的克隆与表达

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中国医学科学院学报 1999年第5期21卷 373-378页

作者：徐建青司静懿宋国兴刘世德李昆陈浩中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室北京100005

目的旨在获得无转化活性而保留抗原性的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）Ｅ７Ｃ端，为进一步研制抗ＨＰＶ１６疫苗打下基础。方法应用自行设计合成的引物进行ＰＣＲ扩增ＨＰＶ１６Ｅ７Ｃ端亚基因片段，并克隆入真核表达载体ｐＬＮＣＸ... 详细信息

目的旨在获得无转化活性而保留抗原性的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）Ｅ７Ｃ端，为进一步研制抗ＨＰＶ１６疫苗打下基础。方法应用自行设计合成的引物进行ＰＣＲ扩增ＨＰＶ１６Ｅ７Ｃ端亚基因片段，并克隆入真核表达载体ｐＬＮＣＸ。结果准确获得含有Ｅ７Ｃ亚基因片段的重组质粒ｐＬＮＣＥ７Ｃ，将ｐＬＮＣＥ７Ｃ转染Ｂ１６细胞。对Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交阳性克隆应用Ｅ７多抗进行免疫组织化学方法检测，检出Ｅ７Ｃ的表达。结论所构建的表达质粒适于ＤＮＡ疫苗的制备。

关键词：人乳头瘤病毒16 E7C亚基因 DNA疫苗

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瞬态诱发耳声发射的识别

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中国医学科学院学报 1999年第5期21卷 321-325页

作者：李丽明林金森张正国中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物医学工程研究室北京100005

目的为准确检测耳蜗功能，寻求在记录到的信号中正确识别瞬态诱发耳声发射（ＴＥＯＡＥ）信号的新方法。方法采用时－频域识别方法，根据ＴＥＯＡＥ与刺激伪迹不同的短时谱特征来有效识别两者。结果刺激伪迹的短时谱显示其在空气中以简... 详细信息

目的为准确检测耳蜗功能，寻求在记录到的信号中正确识别瞬态诱发耳声发射（ＴＥＯＡＥ）信号的新方法。方法采用时－频域识别方法，根据ＴＥＯＡＥ与刺激伪迹不同的短时谱特征来有效识别两者。结果刺激伪迹的短时谱显示其在空气中以简单的指数规律快速衰减的特征。ＴＥＯＡＥ的短时谱显示其频率分布与刺激声基本一致，但各频率成分在潜伏期和转化过程上表现出多种模式。刺激伪迹和ＴＥＯＡＥ的短时谱有明显的区别。结论短时谱识别方法能有效地将ＴＥＯＡＥ与刺激伪迹区分开，可提高ＴＥＯＡＥ识别的准确性。

关键词：瞬态诱发耳声发射识别相关系数 TEOAE

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西沙必利对大鼠胃肠消化间期移行性复合运动的作用

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基础医学与临床 1999年第2期19卷 47-52页

作者：王玲周吕侯晓菲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室

本研究在胃、十二指肠慢性埋植应力传感器的大鼠上，观察了大鼠胃肠移行性复合运动（ＭＭＣ）的特点及西沙必利对ＭＭＣ的作用及与胃动素释放的关系。结果表明：（１）空腹时。大鼠胃、十二指肠可以记录到典型的ＭＭＣ活动。（２）西沙... 详细信息

本研究在胃、十二指肠慢性埋植应力传感器的大鼠上，观察了大鼠胃肠移行性复合运动（ＭＭＣ）的特点及西沙必利对ＭＭＣ的作用及与胃动素释放的关系。结果表明：（１）空腹时。大鼠胃、十二指肠可以记录到典型的ＭＭＣ活动。（２）西沙必利可增强ＭＭＣ收缩活动，分别使胃、十二指肠ＭＭＣⅢ相延长９３％和３５％。（３）西沙必利使胃肠ＭＭＣⅢ相时的血浆胃动素浓度升高。（４）给予抗胃动素血清、５－ＨＴ４受体拮抗剂及阿托品可抑制西沙必利对ＭＭＣ的收缩作用。上述结果提示：西沙必利增强胃肠收缩活动的作用机制．除通过肠神经系统５－ＨＴ，受体引起ＡＣｈ释放外，还通过激发胃动素的释放，使ＭＭＣⅢ相收缩增加。

关键词：西沙必利移行性复合运动胃动素胃肠运动 MMC

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17-β-雌二醇影响人脐静脉内皮细胞的纤溶因子活性及其基因表达

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中国医学科学院学报 1999年第5期21卷 326-330页

作者：张莹朱广瑾段岩平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室北京100005

目的观察１７－β－雌二醇对人脐静脉内皮细胞纤溶因子活性、基因表达以及胞内钙离子渡度（［Ｃａ（２＋）］i）的影响。方法应用发色底物法、细胞原位杂交技术和激光共聚焦扫描显微镜。结果组织型纤溶酶原激活物活性及其基因表达随１... 详细信息

目的观察１７－β－雌二醇对人脐静脉内皮细胞纤溶因子活性、基因表达以及胞内钙离子渡度（［Ｃａ（２＋）］i）的影响。方法应用发色底物法、细胞原位杂交技术和激光共聚焦扫描显微镜。结果组织型纤溶酶原激活物活性及其基因表达随１７－β－雌二醇浓度的增加而呈剂量依赖性增加；单个内皮细胞胞内钙离子浓度在高浓度雌二醇作用下先上升后下降，生理浓度时降低。结论雌激素可以提高纤溶能力、拮抗胞内Ｃａ(２＋)浓度升高，为雌激素保护心血管作用机制研究提供了部分实验依据。

关键词：雌工醇脐静脉内皮细胞 t-PA 游离钙基因表达

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