检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2011年第12期42卷 2529-2534页

作者：郝俊江陈向东兰进中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的以飞船搭载的灵芝Ganoderma lucidum菌株为材料,研究不同光质对灵芝生长形态及抗氧化酶活性的效应,找出适于灵芝生长的最佳光质,为光质选择提供理论依据。方法栽培灵芝时进行不同光质处理,在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化,并... 详细信息

目的以飞船搭载的灵芝Ganoderma lucidum菌株为材料,研究不同光质对灵芝生长形态及抗氧化酶活性的效应,找出适于灵芝生长的最佳光质,为光质选择提供理论依据。方法栽培灵芝时进行不同光质处理,在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化,并测定抗氧化酶体系中主要酶活性。结果不同光质处理的弹孢前期灵芝菌盖厚度与菌盖表面环纹数与对照差异显著。不同光质处理对灵芝子实体产量和灵芝孢子粉产量均有影响。红色、蓝色光质处理提高了过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性。蓝色光质处理提高了可溶性蛋白量,并且使丙二醛(MDA)在生长末期保持相对较低水平,从而延缓了灵芝子实体衰老。绿色、黄色光质抑制了抗氧化酶活性,导致灵芝子实体可溶性蛋白量下降及MDA量上升,加速了灵芝子实体的衰老过程。结论蓝色光质可以使灵芝子实体维持较高的抗氧化酶水平,促进可溶性蛋白合成,从而增强灵芝代谢,延缓灵芝衰老。

关键词：灵芝光质抗氧化酶可溶性蛋白丙二醛

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药用真菌猪苓2种氧化应激相关基因的克隆和序列分析

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微生物学报 2015年第10期55卷 1284-1290页

作者：刘蒙蒙宋超邢咏梅郭顺星北京协和医学院中国医学科学院药用植物研究所北京100193

【目的】克隆药用真菌猪苓NADPH氧化酶及乙二醛氧化酶基因并进行生物信息学分析。【方法】利用RACE技术取得基因c DNA全长;利用生物信息学在线工具预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征;用Bioeditor和MEGA 5.0分别对氨基酸进行多序列... 详细信息

【目的】克隆药用真菌猪苓NADPH氧化酶及乙二醛氧化酶基因并进行生物信息学分析。【方法】利用RACE技术取得基因c DNA全长;利用生物信息学在线工具预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征;用Bioeditor和MEGA 5.0分别对氨基酸进行多序列比对和进化关系分析。【结果】克隆到Pu NOX(JX035912)及Pu GLOX(JX035913)。它们c DNA全长分别为1674 bp、1723 bp;分别编码557、515个氨基酸,相对分子质量分别为63.845 k Da、55.891 k Da,等电点分别为5.58、4.82。Pu NOX与真菌NADH蛋白的一致性为74%-80%,系统进化树分析结果显示猪苓Pu NOX与糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)亲缘关系较近;Pu GLOX与真菌乙二醛氧化酶同源性较高,均大于50%;其系统进化树分析表明猪苓Pu GLOX与黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)进化上最保守。【结论】药用真菌猪苓NADPH基因Pu NOX以及乙二醛氧化酶基因Pu GLOX的分子特征为进一步研究其在猪苓菌核生长发育过程中的作用奠定理论基础。

关键词：猪苓氧化应激基因克隆序列分析

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雷酚萜甲醚抑制人胃癌细胞AGS增殖及诱导凋亡作用研究

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中国药理学通报 2014年第8期30卷 1066-1072页

作者：张丽静张蕾蕾黄文华高丽霍小位刘冬羽李立勇曹丽中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的研究雷酚萜甲醚(TME)在体外对人胃癌AGS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察TME对人胃癌AGS细胞、正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的增殖抑制作用;克隆形成实验观察细胞克隆的形成;光镜下及AO/EB染色观察细胞形态;流式细胞... 详细信息

目的研究雷酚萜甲醚(TME)在体外对人胃癌AGS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察TME对人胃癌AGS细胞、正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的增殖抑制作用;克隆形成实验观察细胞克隆的形成;光镜下及AO/EB染色观察细胞形态;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;JC-1染色和DCFH-DA荧光探针分别检测TME对AGS细胞线粒体膜电位的改变和活性氧产生的影响;Western blot检测凋亡蛋白caspase-3、caspase-8和Bcl-2、Bax表达情况,以及caspase广谱抑制剂z-VAD-fmk对caspase-3、caspase-8蛋白表达的影响。结果 TME可明显抑制人胃癌AGS细胞的增殖,并诱导其凋亡,作用48 h时IC50为23.85μmol·L-1,而对正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的抑制作用明显低于AGS。TME能够抑制AGS细胞克隆形成,并使细胞出现明显的凋亡形态改变。Annexin V-FITC/PI双染实验表明,随TME剂量的增加,细胞凋亡百分数也增加。JC-1和DCFH-DA结果显示,TME使细胞内线粒体膜电位降低、细胞内活性氧水平增加。Western blot结果显示,TME增加了Bax/Bcl-2的比例,激活caspase-8和caspase-3,并且加入z-VAD-fmk后,caspase-3、caspase-8蛋白的表达降低。TME可使AGS细胞周期阻滞于G0/G1期。结论 TME能抑制人胃癌AGS细胞增殖和诱导凋亡,抗肿瘤作用机制与激活凋亡通路、影响细胞周期及Bcl-2蛋白家族相关。

关键词：胃癌细胞凋亡雷酚萜甲醚 AGS细胞 caspase激活 Bcl-2家族蛋白细胞周期

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营养元素缺乏对西洋参生长及皂苷积累的影响

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中国中药杂志 2020年第8期45卷 1866-1872页

作者：李俊飞邵慧慧毕艳孟焦晓林张西梅高微微中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

矿质营养元素是维持西洋参正常生长和保证其品质的关键因素,为了解不同营养元素缺乏对西洋参的综合影响,以二年生西洋参为材料,采用温室砂培试验,设置Hoagland全营养对照和10种营养元素缺乏处理,观察缺素症状,测定株高、叶面积、生物量... 详细信息

矿质营养元素是维持西洋参正常生长和保证其品质的关键因素,为了解不同营养元素缺乏对西洋参的综合影响,以二年生西洋参为材料,采用温室砂培试验,设置Hoagland全营养对照和10种营养元素缺乏处理,观察缺素症状,测定株高、叶面积、生物量、光合指标、根系活力、人参皂苷含量。结果表明,缺氮、钾、铁可导致西洋参叶片明显失绿黄化;缺氮、钾、钙、镁和硼是导致株高和叶面积下降的主要因子;所有缺素处理西洋参的生物量均显著下降(P<0.05),其中缺氮、钾、钙、铁下降最多,全株生物量低于全营养对照的50%以上。氮、钾、铁缺乏是导致西洋参净光合速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度、蒸腾速率、叶绿素含量下降的主要因子;氮、钾、钙缺乏是降低根系活力的前3位因子;不同营养元素缺乏对西洋参6种单体皂苷的影响有差异,综合来看,氮、磷、硼、锌、铜缺乏对皂苷的合成影响最大。以上研究结果有助于明确西洋参对不同营养元素的需求特性,对栽培生产中缺素诊断、肥料合理使用、提高产量和质量具有重要意义。

关键词：西洋参营养缺乏症状生长生理特性皂苷

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菌根真菌与兰科植物互作的组学研究进展

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菌物学报 2021年第3期40卷 423-435页

作者：赵泽宇刘娜邢晓科中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

兰科植物因其具有丰富的物种多样性和重要的社会经济价值,多年来一直是植物学及生态学界的重点研究对象。菌根真菌对兰科植物的种子萌发、营养吸收和种群动态等多个方面都具有十分重要的作用,因而近年来受到越来越多的关注。探究菌根真... 详细信息

兰科植物因其具有丰富的物种多样性和重要的社会经济价值,多年来一直是植物学及生态学界的重点研究对象。菌根真菌对兰科植物的种子萌发、营养吸收和种群动态等多个方面都具有十分重要的作用,因而近年来受到越来越多的关注。探究菌根真菌与兰科植物互作的内在机制是目前兰科菌根研究的一大热点领域,同时也为兰科植物野生资源保护和种群恢复提供了许多新方法与新思路。随着新一代测序技术以及多种组学数据库的发展与建立,菌根真菌与兰科植物互作机制研究已然进入了一个全新的时代。纵观近年来的研究,通过基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学等相关技术,人们对兰科菌根共生过程中的种子萌发、营养物质转运、信号转导、宿主免疫和逆境抗性等方面的内在机制有了一定的了解。本文对近十年来国内外采用组学技术研究菌根真菌与兰科植物互作机制方面的研究成果进行了总结和梳理,并对未来该领域的研究进行了展望。

关键词：兰科菌根互作机制基因组学转录组学蛋白质组学代谢组学

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金钗石斛HMGR基因克隆及菌根真菌诱导表达分析

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中国药学杂志 2017年第22期52卷 1976-1982页

作者：李清李标郭顺星中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的克隆金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)基因,并进行生物信息学及接菌前后差异表达分析。方法采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得DnHMGR2基因cDNA全长;生物信息学分析编码蛋白的理化特性、结构域等特征;用DNASTAR、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建分析;借助实时定量PCR技术检测基因接菌前后表达模式。结果从金钗石斛中分离得到一个HMGR基因,命名为DnHMGR2(Gen Bank注册号KX825920)。DnHMGR2基因cDNA全长2 095 bp,编码一条由562个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为59.68×10~3,等电点6.18。DnHMGR2蛋白具有植物HMGR酶的典型结构域和结合基序。DnHMGR2与多种植物HMGR基因高度同源,与铁皮石斛的亲缘关系最近。DnHMGR2基因具有组织表达特异性,在金钗石斛叶、茎中的表达量较高,为根中的2.59和1.60倍;但接菌后各器官的表达量表现为茎>叶>根。结论首次克隆得到金钗石斛中HMGR基因的全长cDNA,为进一步解析该基因在金钗石斛萜类物质合成代谢途径中的分子调控作用,及菌根真菌对石斛碱生物合成调控机制奠定了基础。

关键词：金钗石斛 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶基因克隆实时荧光定量PCR

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西洋参PqGA2ox基因的克隆与序列分析

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中草药 2014年第24期45卷 3599-3606页

作者：孙同玉祝娟孙鹏廖登群李先恩祁建军中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的克隆、分析西洋参Panax quinquefolium种子萌发过程的赤霉素2-氧化酶(gibberellin 2-oxidase,GA2ox)基因。方法从前期由高通量测序得到78207条unigenes基因的注释信息中挖掘出与赤霉素合成和分解代谢相关的基因序列,得到11条GA2ox... 详细信息

目的克隆、分析西洋参Panax quinquefolium种子萌发过程的赤霉素2-氧化酶(gibberellin 2-oxidase,GA2ox)基因。方法从前期由高通量测序得到78207条unigenes基因的注释信息中挖掘出与赤霉素合成和分解代谢相关的基因序列,得到11条GA2ox基因相关序列,通过序列比对分析确定GA2ox的转录本。根据选定的unigene序列设计引物,采用PCR方法扩增西洋参GA2ox的cDNA全长;利用生物信息学方法分析所得基因,并用实时荧光定量PCR技术进行表达分析。结果得到一条长度为987bp,编码328个氨基酸残基的西洋参GA2ox基因,命名为PqGA2ox。生物信息学预测PqGA2ox蛋白不含跨膜区,不含信号肽,具有依赖于2-酮戊二酸和Fe2+的双加氧酶超家族的保守结构域。实时荧光定量PCR结果显示在形态休眠中期和生理休眠中期的表达量低于其休眠起始期和解除休眠期。结论首次获得西洋参种子PqGA2ox基因的编码区序列,为进一步研究西洋参种子解除休眠的分子机制奠定基础。

关键词：西洋参种子休眠萌发赤霉素2-氧化酶克隆实时荧光定量PCR

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同位素内标-超高效液相色谱串联质谱法检测麦芽中11种真菌毒素

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药学学报 2016年第1期51卷 110-115页

作者：王莎孔维军杨美华中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

采用同位素内标法定量,建立了同时测定麦芽药材中11种真菌毒素污染水平的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)。采用乙腈-水-乙酸(80∶19∶1)溶剂系统超声提取药材中真菌毒素,离心、过滤后,加入[^(13)C_(17)]-AFB_1及[^(13)C_(18)]-ZE... 详细信息

采用同位素内标法定量,建立了同时测定麦芽药材中11种真菌毒素污染水平的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)。采用乙腈-水-乙酸(80∶19∶1)溶剂系统超声提取药材中真菌毒素,离心、过滤后,加入[^(13)C_(17)]-AFB_1及[^(13)C_(18)]-ZEN标记的真菌毒素混合同位素标准溶液,以含0.1%甲酸的甲醇溶液-2 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液为流动相于Phenomenex Kinetex C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)上梯度洗脱分离,以电喷雾离子源正负离子切换模式多反应监测方式检测(MRM)。结果表明,11种真菌毒素在采用基质添加内标稳定同位素法定量时于各自的浓度范围内线性关系良好,r>0.999 1,加标回收率为75.0%~117.0%,RSDs<5.1%,检测限(LODs)和定量限(LOQs)分别为0.05~30μg·kg^(-1)和0.15~87.5μg·kg^(-1),远低于欧盟规定的真菌毒素最大允许残留量(MRLs)。所测的20批麦芽样品中,9批检测到真菌毒素残留,通过相同保留时间处的特征离子二级碎片排除了假阳性结果。该方法的样品前处理过程简便快捷、检测方法重现性好、灵敏度高,适用于复杂麦芽基质中多种真菌毒素的同时定性定量测定。

关键词：麦芽真菌毒素同位素内标超高效液相色谱串联质谱

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菌根真菌诱导的铁皮石斛根差减cDNA文库构建

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中国药学杂志 2012年第22期47卷 1790-1796页

作者：李标唐坤张岗郭顺星中国医学科学院-北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的构建菌根真菌共生诱导的铁皮石斛根的差减cDNA文库,从中筛选出差异表达基因。方法采用SMARTer PCRcDNA合成方法直接以总RNA为模板合成并富集稀少cDNA,再利用抑制消减杂交(SSH)方法构建受菌根真菌共生诱导铁皮石斛根的差减cDNA文库... 详细信息

目的构建菌根真菌共生诱导的铁皮石斛根的差减cDNA文库,从中筛选出差异表达基因。方法采用SMARTer PCRcDNA合成方法直接以总RNA为模板合成并富集稀少cDNA,再利用抑制消减杂交(SSH)方法构建受菌根真菌共生诱导铁皮石斛根的差减cDNA文库。结果成功构建了受菌根真菌诱导铁皮石斛根的差减cDNA文库,共获得1 975个阳性克隆。经检测,90%以上克隆能扩增出有效产物,其插入片段大小在150～1 000 bp之间。随机挑取了20个克隆菌液测序并进行了比对分析,大部分为植物应对环境胁迫防御性基因。结论该技术体系所构建的差减cDNA文库质量较好,操作方便,尤其适用于珍稀濒危的植物材料。

关键词：铁皮石斛菌根真菌抑制消减杂交 cDNA文库共生

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延胡索活性部位入血成分的LC-MS/MS研究

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药学学报 2009年第2期44卷 167-174页

作者：程星烨石钺孙虹金文郑顺亮李开通杨帅中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所北京100193

为深入研究延胡索活性部位体内作用的物质基础,本文利用LC-MS/MS提供的色谱及离子碎片信息,对口服延胡索活性部位后大鼠血浆中的移行成分进行分析鉴定,通过保留时间比对、离子碎片解析等综合分析,鉴定了9个入血成分均为原形成分,同时也... 详细信息

为深入研究延胡索活性部位体内作用的物质基础,本文利用LC-MS/MS提供的色谱及离子碎片信息,对口服延胡索活性部位后大鼠血浆中的移行成分进行分析鉴定,通过保留时间比对、离子碎片解析等综合分析,鉴定了9个入血成分均为原形成分,同时也发现部分生物碱是以葡糖醛酸结合物的形式存在。入血成分及代谢产物可能为延胡索体内直接作用的药效成分,延胡索活性部位血清药物化学表征为阐明延胡索的药理作用及其机制提供了依据。

关键词：延胡索活性部位血清药物化学液相色谱-质谱

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