检索结果-内蒙古大学图书馆

实验生物学报 1999年第4期32卷 335-347页

作者：臧梦维汪青沈琦刘景生彭学贤中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国科学院微生物研究所北京100080

本文用重组iNOS基因真核表达载体转染NG108-15神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞株,获得G418抗性克隆。在稳定表达iNOS基因2~#克隆中,胞浆相酶活性增加,伴有NO_2^-含量和胞内cGMP水平增高,提示iNOS基因表达参与NO-cGMP信号转导通路,且可... 详细信息

本文用重组iNOS基因真核表达载体转染NG108-15神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞株,获得G418抗性克隆。在稳定表达iNOS基因2~#克隆中,胞浆相酶活性增加,伴有NO_2^-含量和胞内cGMP水平增高,提示iNOS基因表达参与NO-cGMP信号转导通路,且可被L-NNA和MB所阻断。蛋白表达产物的亚细胞定位分析显示功能性iNOS主要位于细胞胞浆中。对转染细胞做外源基因整合、转录和翻译水平鉴定,证实均有较高水平iNOS mR-NA转录和特异性蛋白表达,成功地建立了稳定表达iNOS基因的工程细胞。

关键词： iNOS NG108-15 基因表达基因转移抑制剂

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rhM-CSFsR在大肠杆菌中的表达及其配基结合活性分析

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第5期15卷 709-713页

作者：罗寿青郑德先饶青刘彦信马正宇吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外具有结合活性区域的cDNA,经平端连接将其克隆到原核表达载体pET-28a的His-Tag下游,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,重组的人可溶型M-CSFR(rhM-CSFsR... 详细信息

从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外具有结合活性区域的cDNA,经平端连接将其克隆到原核表达载体pET-28a的His-Tag下游,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,重组的人可溶型M-CSFR(rhM-CSFsR)在宿主菌中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的38%.重组蛋白经Ni2+组氨酸结合树脂螯合层析柱纯化,获得了纯化的rhM-CSFsR,经SDS-PAGE显示为单一区带,其表观分子量为34kD.用酶联免疫吸附分析(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)证明rhM-CSFsR有明显的M-CSF专一结合活性,Kd值为7.8nmol/L,只有一个M-CSF结合位点.本实验结果显示原核表达的rhM-CSFsR具有明显的配基结合活性,提示M-CSFR的糖基化程度对于其配基结合活性不是必不可少的。

关键词：基因表达重组巨噬细胞集落刺激因子受体

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神经营养因子受体Trk和p75NTR的信号传递途径

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医学研究杂志 1999年第12期33卷 1-5,8页

作者：明洪黄秉仁医学分子生物学国家重点实验室中国协和医科大学基础医学院/中国医学科学院基础医学研究所北京100005

神经营养因子是一类对特定类型的中枢和外周神经系统神经元的生存和发展至关重要的生长因子家族。

关键词：神经营养因子受体信号传递途径相互作用死亡结构域神经元存活受体酪氨酸激酶胞内区亲和力磷酸化外周神经系统

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酵母双杂交体系的新发展

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国外医学（遗传学分册） 1999年第5期22卷 225-227页

作者：张树民陈英碚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

酵母双杂交系统是研究蛋白质间相互作用的一种有效方法。本文简要介绍了双杂交体系的原理、应用和自身存在的问题，并对其是新发展做了重声、阐述。

关键词：酵母双杂交系统蛋白质间相互作用

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成簇基因的时空表达调控

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生命科学 1999年第3期11卷 97-101页

作者：徐海明刘德培中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京１００００５

成簇基因具有不同于单个基因的特性，同一簇内基因大多有类似的结构、功能以及表达模式，基因之间时空表达模式及表达量高度协调，提示同一簇基因是作为统一整体进行调节的，具有共同的调节机制。基因成簇排列是实现基因时空协调表达的... 详细信息

成簇基因具有不同于单个基因的特性，同一簇内基因大多有类似的结构、功能以及表达模式，基因之间时空表达模式及表达量高度协调，提示同一簇基因是作为统一整体进行调节的，具有共同的调节机制。基因成簇排列是实现基因时空协调表达的基础，是遗传信息的一种高级组织形式，具有强大的进化优势。要揭示成簇基因表达调控的基本规律，应从顺式作用元件、反式作用因子、染色质结构等层次，进行整体的以及多基因相互作用的研究，这些机制的阐明，对细胞分化、个体发育程序的研究具有重大的理论价值，是生命科学极为重要的基础研究领域。

关键词：基因簇基因表达调控珠蛋白基因 Hox基因

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神经营养素-3(NT-3)的结构与功能

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医学研究杂志 1999年第3期33卷 27-29页

作者：来东兵黄秉仁医学分子生物学国家重点实验室中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所北京100005

由于分子生物学技术在神经科学中的应用,有关神经营养素(NGF)家族的研究取得了一些令人瞩目的进展。NGF家族包括NGF、BD-NF、NT—3、NT4/5、NT—6,它们不仅在神经系统的分化和发育过程中起重要作用,而且还可调节靶组织的神经活动。

关键词：神经系统神经营养素重要作用信号传递途径神经营养因子神经活动发育过程分子生物学技术颗粒细胞运动神经元

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反显性突变Tat蛋白抑制人免疫缺陷病毒1型的复制

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1999年第7期9卷 602-605页

作者：白龙川胡松年赵全壁邵一鸣强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述... 详细信息

Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述反显性Tat蛋白的逆转录病毒载体,随后导入双向性包装细胞PA317细胞中,用产生出的复制缺陷病毒感染MT4 T淋巴细胞.用HIV-1病毒攻击稳定表达有M5和M6 Tat蛋白的MT4细胞;结果显示,M5和M6 Tat蛋白均能抑制低剂量的HIV-1病毒的复制。

关键词：人免疫缺陷病毒 1型反显性 Tat蛋白

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体外转运红细胞囊泡的GPI锚定蛋白CD59保护阵发性睡眠性血红蛋白尿症红细胞<英文>

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中国实验血液学杂志 1999年第2期7卷 123-127页

作者：许彩民杨洋吕照江潘华珍张之南中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院北京100730

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种后天获得性克隆溶血疾病,由于血细胞膜上缺乏具有调节蛋白补体的GPI-锚定蛋白如CD59和CD55等,所以对补体敏感,易产生溶血。红细胞存储或ATP耗空时有囊泡释放,经免疫印迹试验证明囊泡中富含CD59。应... 详细信息

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种后天获得性克隆溶血疾病,由于血细胞膜上缺乏具有调节蛋白补体的GPI-锚定蛋白如CD59和CD55等,所以对补体敏感,易产生溶血。红细胞存储或ATP耗空时有囊泡释放,经免疫印迹试验证明囊泡中富含CD59。应用免疫亲和层析柱分离PNH CD59^-红细胞,然后与红细胞囊泡保温,保温后分别测定PNH CD59^-细胞表面CD59含量和溶血度。用流式细胞仪测定CD59,结果发现保温后CD59含量增加;用蛇毒因子溶血试验测得溶血度有显著下降。体外实验证明囊泡上的CD59可以转运到PNH CD59^-红细胞上,并具有抑制补体溶血的功能,使PNH CD59^-红细胞在受补体攻击时不易溶血。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿症 GPI-描定蛋白红细胞囊泡 CD59

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凉山彝族男性血管紧张素转换酶基因多态性与高血压的关系

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中华预防医学杂志 1999年第6期33卷 346-347页

作者：单广良王学超邱长春任崇文李辉王平乌正赉廖苏苏李雄伟童仕明张孔来中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室北京市100005 四川省凉山彝族自治州卫生防疫站医学分子生物学国家重点实验室四川省凉山彝族自治州昭觉县卫生防疫站四川省凉山彝族自治州布拖县卫生防疫站

目的　探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与高血压的关系。方法　应用横断面调查方法和ＰＣＲ技术。结果　正常血压人群ＡＣＥ基因ＤＤ、ＩＤ和ＩＩ基因型分别占１３．０％、５０．９％和３６．１％。Ｉ和Ｄ等位... 详细信息

目的　探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与高血压的关系。方法　应用横断面调查方法和ＰＣＲ技术。结果　正常血压人群ＡＣＥ基因ＤＤ、ＩＤ和ＩＩ基因型分别占１３．０％、５０．９％和３６．１％。Ｉ和Ｄ等位基因频率分别是为６１．６％和３８．４％。高血压人群ＡＣＥ基因ＤＤ、ＩＤ和ＩＩ基因型分别占９．７％、４８．４％和４１．９％。Ｉ和Ｄ等位基因频率分别是６６．１％和３３．９％。彝族男性高血压和正常血压人群的ＡＣＥ基因型分布及Ｉ／Ｄ等位基因频率差异无显著性。结论　彝族男性ＡＣＥ基因多态性与高血压的关联尚不能确定。

关键词：高血压 ACE 基因多态性彝族

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经EB病毒转染建立阵发性睡眠性血红蛋白尿症永生细胞系的方法改进

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中国实验血液学杂志 1999年第4期7卷 282-285页

作者：杜涛许彩民朱苏玲徐文瑾潘华珍张之南中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院血液科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所分子生物学国家重点实验室中国科学院遗传学研究所

为提高EB病毒(Epstein-Barr virus)转染阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)异常细胞建立永生性细胞株的成功率及加快建株时间,在改进培养方法方面进行了一些初步探索性研究。根据PNH异常细胞易受氧化损伤的原理,在培养体系中加入一种抗氧化... 详细信息

为提高EB病毒(Epstein-Barr virus)转染阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)异常细胞建立永生性细胞株的成功率及加快建株时间,在改进培养方法方面进行了一些初步探索性研究。根据PNH异常细胞易受氧化损伤的原理,在培养体系中加入一种抗氧化剂AA_2保护PNH异常细胞的生存。研究结果表明:2例PNH患者细胞均建株成功,不加药对照组有1例失败;建株时间明显缩短,并且建株后CD59^-细胞百分率无明显下降。实验结果提示,氧化损伤是PNH细胞建株困难的重要原因;在培养初期加抗氧化剂可提高建株的成功率及缩短建株时间,这是一个重要的改进;因观察例数尚少,有待进一步证实。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿症 EB病毒永生性细胞系 CD59^-细胞抗氧化剂

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