检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学检验杂志 1998年第2期21卷 92-95页

作者：许琪韩富天范钰林秉承沈岩吴冠芸中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国科学院化学物理研究所

目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增混合样品中微量男性ＤＮＡ的ＳＲＹ序列，分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测ＰＣＲ扩增产物，比较二者的检测灵敏度。结... 详细信息

目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增混合样品中微量男性ＤＮＡ的ＳＲＹ序列，分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测ＰＣＲ扩增产物，比较二者的检测灵敏度。结果毛细管电泳可检测到２０ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于３～４个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／６００，琼脂糖凝胶电泳可检测到７４ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于１３个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／３。毛细管电泳检测微量目的基因扩增产物的综合灵敏度是琼脂糖凝胶电泳的７５０倍。结论毛细管电泳灵敏度高、重现性好，与ＰＣＲ技术结合可广泛用于各种混合样品中微量核酸分子的检测。

关键词：聚合酶链反庆 SRY基因毛细管电泳基因诊断

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人β^(41/42)地中海贫血基因的转基因小鼠研究

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1998年第3期8卷 371-376页

作者：李政刘德培刘庆辉郭志晨章秋珩李志杰贾佩臣梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

人β珠蛋白基因簇位于第11号染色体短臂,由5个功能基因组成:5′-ε-G_γ-A_γ-δ-β-3′,其表达具有红系特异性和发育阶段特异性,并且β类珠蛋白基因与α类珠蛋白基因表达的终产物始终维持平衡。这些基因的适宜表达依赖于ε珠蛋白基因... 详细信息

人β珠蛋白基因簇位于第11号染色体短臂,由5个功能基因组成:5′-ε-G_γ-A_γ-δ-β-3′,其表达具有红系特异性和发育阶段特异性,并且β类珠蛋白基因与α类珠蛋白基因表达的终产物始终维持平衡。这些基因的适宜表达依赖于ε珠蛋白基因上游由4个DNaseⅠ高敏感位点(HS)组成的位点控制区(LCR),其中HS2具有主要的增强子活性。

关键词：异常珠蛋白基因贫血基因治疗地中海贫血

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用转基因动物研究珠蛋白基因红系增强子

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蚌埠医学院学报 1998年第5期23卷 291-293页

作者：刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

珠蛋白基因分为α与β两个基因簇，α基因簇位于１６号染色体，以５′ζ２ψζ１ψα２ψα１α２α１θ１３′的顺序排列；β珠蛋白基因簇位于１１号染色体，以５′εＧγＡγψβδβ３′的顺序排列。... 详细信息

珠蛋白基因分为α与β两个基因簇，α基因簇位于１６号染色体，以５′ζ２ψζ１ψα２ψα１α２α１θ１３′的顺序排列；β珠蛋白基因簇位于１１号染色体，以５′εＧγＡγψβδβ３′的顺序排列。两个珠蛋白基因簇的序列均已测定。珠...

关键词：珠蛋白类基因重组转基因动物动物模型

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T细胞活化的辅助刺激因子:CD28和B7

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国外医学（分子生物学分册） 1998年第2期20卷 71-75页

作者：王孟昭崔莲仙中国协和医科大学北京100730 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院分子生物学国家重点实验室北京100005

近年来研究发现,T细胞受体与抗原-主要组织相容性抗原复合物的结合并不能有效地激活T细胞,T细胞的活化尚需要一种辅助刺激因子。T细胞表面的CD28与抗原呈递细胞表面的B7间的作用是T细胞活化最主要的辅助刺激途径。

关键词：辅助刺激因子 CD28 B7 T细胞活化

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血细胞生成中的信号传递通路及其调控

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中国实验血液学杂志 1998年第3期6卷 161-167页

作者：张燕萍陈嘉林潘华珍中国医学科学院，中国协和医科大学北京协和医院内科，北京100730 中国医学科学院，中国协和医科大学北京协和医院血液科，北京100730 中国医学科学院，中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京100730

造血生长因子通过与其受体的相互作用调节血细胞的增殖与分化。造血生长因子与受体结合后激活JAK,JAK发生自我磷酸化的同时也使受体磷酸化,继而通过SH2 蛋白激活ras通路。JAK还可以使STAT磷酸化。STAT磷酸化后移到细胞核内,启动有关基... 详细信息

造血生长因子通过与其受体的相互作用调节血细胞的增殖与分化。造血生长因子与受体结合后激活JAK,JAK发生自我磷酸化的同时也使受体磷酸化,继而通过SH2 蛋白激活ras通路。JAK还可以使STAT磷酸化。STAT磷酸化后移到细胞核内,启动有关基因的转录。

关键词：血细胞生成信号传递造血调控造血生长因子

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利用一种新的DNA操作系统克隆人神经生长因子

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中国医学科学院学报 1998年第2期20卷 126-126页

作者：王欣黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京 100005

神经生长因子(NGF)是最早发现的神经趋化因子。它对神经细胞具有营养与保护作用,对损伤神经具有调节与修复功能。为大量获得重组人NGF,本研究采用构建杂合克隆因子(hybrid clonemid)进行DNA操作,使NGF基因与pET-16 b载体重组。根据人NG... 详细信息

神经生长因子(NGF)是最早发现的神经趋化因子。它对神经细胞具有营养与保护作用,对损伤神经具有调节与修复功能。为大量获得重组人NGF,本研究采用构建杂合克隆因子(hybrid clonemid)进行DNA操作,使NGF基因与pET-16 b载体重组。根据人NGF基因序列合成一对PCR引物,并在引物的5’端加上与载体互补的一小段序列(21bp)。用此引物进行PCR扩增,获得NGF基因扩增产物。将载体pET-16b用Nde I酶切使其成为线性载体(为避免克隆过程中载体自身转化的本底,此步酶切要完全)。为使NGF基因位于正确的阅读框架上并与因子Xa特异酶切位点相接,在得到酶切完全的线性载体后,应用T4DNA聚合酶的3’→5’外切酶活性,将3’端AC去除

关键词： DNA 基因神经 NGF 酶切操作系统计算机系统

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Construction of an inducible nitric-oxide synthase gene transferring vector mediated by retrovirus

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Acta Pharmacologica Sinica 1998年第2期 26-32页

作者：刘景生臧梦维彭学贤胡萍中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室中国科学院微生物研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的：构建逆转录病毒介导的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转移载体．方法：应用ＤＮＡ重组和ＰＣＲ扩增技术．结果：通过二步克隆，从质粒ｐＫＳｉＮＯＳ分离编码巨噬细胞ｉＮＯＳ的全长ｃＤＮＡ，亚克隆于中间载体ｐＳＰ７２，... 详细信息

目的：构建逆转录病毒介导的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因转移载体．方法：应用ＤＮＡ重组和ＰＣＲ扩增技术．结果：通过二步克隆，从质粒ｐＫＳｉＮＯＳ分离编码巨噬细胞ｉＮＯＳ的全长ｃＤＮＡ，亚克隆于中间载体ｐＳＰ７２，调整插入片段二端酶切位点；进而构建含ｉＮＯＳ基因、巨细胞病毒启动子和ｎｅｏ抗性基因的逆转录病毒载体ｐＬＮＣＸｉＮＯＳ．限制性酶切分析和ＰＣＲ鉴定证实，重组体ｉＮＯＳ插入片段的大小和方向正确．结论：获得含ｉＮＯＳ基因逆转录病毒表达载体，为建立ｉＮＯＳ基因修饰的神经细胞模型，研究ＮＯ／ＮＯＳ在阿片耐受依赖中的作用奠定基础．

关键词：一氧化氮合酶互补DNA 基因表达调控真核细胞重组DNA 逆转录病毒遗传载体限制性酶切图谱聚合酶链式反应

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连接介导PCR及其在体内足迹研究中的应用

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生物化学与生物物理进展 1997年第3期24卷 224-227页

作者：纪新军刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接... 详细信息

连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接介导聚合酶链反应的敏感性 .

关键词：连接介导PCR 连接子体内足迹法聚合酶链反应

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中国汉族人HLA-DQA1启动子区核酸序列分析

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中国医学科学院学报 1997年第5期19卷 347-352页

作者：邱长春方明式朱席琳杜志荣周文郁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

本文报告汉族人HLA－DQAI启动子区（QAP）基因多态性。汉族人HLA－DQA1Xbox第-111位是腺苷酸（A）而不是鸟苷酸（G），-98位可是A或G；Ybox-71位为A；Sbox-131位为G；IDDM患者在Sbox5’上游和X、Ybox之间易发生单个核苷酸取代。并发现1... 详细信息

本文报告汉族人HLA－DQAI启动子区（QAP）基因多态性。汉族人HLA－DQA1Xbox第-111位是腺苷酸（A）而不是鸟苷酸（G），-98位可是A或G；Ybox-71位为A；Sbox-131位为G；IDDM患者在Sbox5’上游和X、Ybox之间易发生单个核苷酸取代。并发现1例携带DR2－IDDM患者AAP的-157和-158位间发生CCA核苷酸插入突变。提示HLA－DQA1启动子区多态性可能在ID－DM的遗传易感性中起着重要作用。

关键词：胰岛素依赖型糖尿病启动子插入突变

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红细胞生成素基因克隆及其在酵母细胞中的表达

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中国医学科学院学报 1997年第5期19卷 389-394页

作者：张旭黄秉仁蔡良琬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

用PCR方法从人红细胞生成素CDNA中扩增出咸熟肽基因片段，与含酵母系统启动子的中间载体pSK43SB融合后重组于酵母游离型表达载体YEpHc8中，转化宿主菌后获得表达，并对表达蛋白的活性及糖基化情况初步进行分析。

关键词：酵母表达红细胞生成素基因克隆糖基化 PCR

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