检索结果-内蒙古大学图书馆

医学研究杂志 2008年第2期37卷 47-49页

作者：李倩高扬倪安平于孟学朱立平刘音李永哲林嘉友甘晓丹中国医学科学院/中国协和医科大学北京协和医院检验科 100730 中国医学科学院/中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室北京100005

目的克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-52kD),为SSA抗原的表达和使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础。方法根据GenBank中检索到的人SSA-52kDcDNA序列,在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物,提取人源Hela细胞总RNA作为模板,... 详细信息

目的克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-52kD),为SSA抗原的表达和使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础。方法根据GenBank中检索到的人SSA-52kDcDNA序列,在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物,提取人源Hela细胞总RNA作为模板,反转录RT-PCR扩增人干燥综合征SSA-52kD抗原cDNA。PCR产物纯化后连接至载体PET-30a,导入大肠杆菌DH5α,构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD。对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序;对DNA测序结果进行鉴定分析。结果RT-PCR扩增产物为1447bp。重组质粒PET-30a-SSA-52kD经BglⅡ和HindⅢ双酶切证实含目的基因片段。序列分析提示与GenBank中检索到的一致。结论成功克隆人SSA-52kD基因,并构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD。

关键词：人干燥综合征A抗原 cDNA克隆重组体

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重组脂联素融合蛋白的表达及其生物学活性测定

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中国现代医药杂志 2008年第3期10卷 8-11页

作者：王胜芬韩佩珍穆传杰赵明辉卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所核医学室天津市分子核医学重点实验室天津300192 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

目的表达重组脂联素融合蛋白(adiponectin-Trx),并测定其生物学活性。方法从小鼠脂肪组织提取总RNA,应用序列特异性引物经RT-PCR方法扩增获得全长脂联素基因序列,克隆至pGEM-T载体,序列经DNA测序证实。将目的序列(18-247氨基酸)亚克隆至... 详细信息

目的表达重组脂联素融合蛋白(adiponectin-Trx),并测定其生物学活性。方法从小鼠脂肪组织提取总RNA,应用序列特异性引物经RT-PCR方法扩增获得全长脂联素基因序列,克隆至pGEM-T载体,序列经DNA测序证实。将目的序列(18-247氨基酸)亚克隆至pET-32(a)表达载体,重组质粒adiponectin/pET32(a)的序列经测序证实。将adiponectin/pET32(a)转化表达宿主菌OrigamiTM(DE3),在27℃以1mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE和氨基酸测序检测目的蛋白的表达,目的蛋白经组氨酸镍螯和树脂亲和纯化。以不同浓度的融合蛋白adiponectin-Trx和Trx蛋白处理体外培养的人脐静脉内皮细胞,细胞增殖法测定其生物学活性。结果小鼠脂肪组织脂联素基因的编码序列,337位点上的碱基A被G置换,导致在113位的蛋氨酸被缬氨酸取代。序列测定表明,构建的重组表达载体adiponectin/pET32a序列完全正确,诱导工程菌主要表达可溶性的融合蛋白adiponectin-Trx,部分以包含体形式表达。表达产物的相对分子量(Mr)同预期分子量相同,adiponectin-Trx Mr为43000,Trx Mr为19000。在低浓度时融合蛋白刺激人脐静脉内皮细胞增殖。结论小鼠脂肪组织脂联素基因编码序列与来自3T3-L1脂肪细胞的编码序列不同。成功地在***中表达了重组脂联素融合蛋白并具有生物学活性。

关键词：重组脂联素融合蛋白可溶性生物学活性

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反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡

反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡

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作者：韩张胡萍倪道凤中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所

目的:观察 P38激酶特异性抑制剂 SB203580及反义 P38激酶 cDNA 对胆红素诱导人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞凋亡的影响,探讨 P38激酶信号转导通路在胆红素诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听... 详细信息

目的:观察 P38激酶特异性抑制剂 SB203580及反义 P38激酶 cDNA 对胆红素诱导人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞凋亡的影响,探讨 P38激酶信号转导通路在胆红素诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法:分别经 SB203580和二甲基亚砜预处理的 SH-SY5Y 细胞在胆红素作用3h 和5h 后, 在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。采用脂质体法将含人反义 P38cDNA 的真核表达载体 pcDNA3.0-antiP38导入 SH-SY5Y 细胞,建立稳定低表达 P38蛋白的细胞株,经 Western blotting 鉴定后命名为 SH-SY5Y-antiP38,而转染空载体 pcD-NA3.0的 SH-SY5Y 细胞株则命名为 SH-SY5Y-pcDNA3.0;SH-SY5Y-antiP38细胞和 SH-SY5Y-pcD-NA3.0细胞分别经胆红素作用3h 和5h,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果:在0.02g/L 胆红素作用下,流式细胞仪显示与对照相比 SB203580预处理的 SH-SY5Y 细胞在胆红素作用 3h 后,其凋亡细胞由19.4%下降到12.1%,5h 后由66.2%降到39.3%;与 SH-SY5Y-pcDNA3.0细胞相比,SH-SY5Y-antiP38细胞在胆红素作用3h 后,其凋亡细胞由11.1%降到8.02%,5h 后67%降到23.4%。结论:P38激酶参与了胆红素诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡的信号转导。P38通路的激活可能在高胆红素血症导致的神经细胞损伤中(包括听神经细胞)发挥重要作用。

关键词：胆红素凋亡信号转导 P38激酶神经母细胞瘤听神经病

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DR5介导T淋巴瘤细胞死亡的分子机制研究

DR5介导T淋巴瘤细胞死亡的分子机制研究

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第六届全国免疫学学术大会

作者：陈采凤刁智娟郭雅彬刘彦信郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

研究背景:TRAIL(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand)是TNF(tumor necrosis factor)家族新成员,能够特异诱导多数肿瘤细胞凋亡,而对大多数正常细胞没有毒性。AD5-10是TRAIL的功能性受体DR5(death receptor 5)免... 详细信息

关键词：淋巴瘤细胞 DR5 Jurkat 分子机制

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三市、县控烟工作网络建设的过程评估

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中国公共卫生管理 2008年第3期24卷 302-305页

作者：梅翠竹王俊芳徐雪芳王春平马少俊杨功焕蚌埠医学院预防医学系蚌埠233030 中国协和医科大学基础医学院/中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学公共卫生学院中国疾病预防控制中心/中国协和医科大学基础医学院/中国医学科学院基础医学研究所

目的对绵竹市、安义县、新安县三市县的控烟工作网络建设进行过程评估,分析网络建设活动中取得的成绩和存在的问题。方法通过文件阅读和知情人访谈了解网络的建设和运转情况,包括使用网络成员的组成、网络成员的发展途径、网络的联系模... 详细信息

目的对绵竹市、安义县、新安县三市县的控烟工作网络建设进行过程评估,分析网络建设活动中取得的成绩和存在的问题。方法通过文件阅读和知情人访谈了解网络的建设和运转情况,包括使用网络成员的组成、网络成员的发展途径、网络的联系模式描述网络的运作情况,控烟活动的开展情况,评价三市县控烟工作的效果。结果三市县均以各地区项目组人员为中心形成了控烟工作网络框架,在全市(县)和各干预示范区开展了控烟政策的制定、执行和健康教育活动,但均未按计划完成设计的干预活动。与以下因素有关:(1)大部分网络成员均是被动加入的,在控烟工作中缺乏主动参与性,绵竹和新安还存在着挂名成员;(2)对决策层及各政府部门的领导开发不足;(3)联系松散,尚未在各网络成员间建立定期联系和协作机制。结论三市县的控烟工作网络尚处于建设的初级阶段,需要继续开发领导,巩固和发展成员,形成正式的、制度化的、主动参与的控烟工作网络,从而促使其可持续性发展,在烟草控制活动中发挥重要作用。

关键词：控烟网络过程评价

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慢性鼻-鼻窦炎细菌生物膜形态观察

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2008年第11期43卷 840-844页

作者：张孜李云川韩晔华戴威张盛忠周兵张罗王德云韩德民张永杰首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科北京市耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室 100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所电镜室新加坡国立大学医学院耳鼻咽喉科研究室

目的观察慢性鼻一鼻窦炎患者，鼻内镜所取钩突、筛泡或上颌窦黏膜样本是否存在细菌生物膜及其形态特征。方法本实验共取鼻内镜术中黏膜样本12份，实验组为慢性鼻．鼻窦炎鼻内镜手术患者6例，对照组为阻塞性睡眠呼吸暂停综合征鼻内镜手... 详细信息

目的观察慢性鼻一鼻窦炎患者，鼻内镜所取钩突、筛泡或上颌窦黏膜样本是否存在细菌生物膜及其形态特征。方法本实验共取鼻内镜术中黏膜样本12份，实验组为慢性鼻．鼻窦炎鼻内镜手术患者6例，对照组为阻塞性睡眠呼吸暂停综合征鼻内镜手术患者6例。样本用标准的扫描电镜方法处理。实验组详细记录患者的年龄、性别、症状、鼻窦cT、鼻内镜检查和变应原皮肤点刺试验结果。结果扫描电镜下见慢性鼻一鼻窦炎患者鼻腔鼻窦黏膜纤毛缺失、倒伏、排列紊乱，实验组中5例可见不同形成阶段、各种形态的细菌生物膜，1例可见丝状真菌样结构。实验组细菌生物膜出现率为83．3％。对照组6例均未观察到细菌生物膜。结论慢性鼻一鼻窦炎鼻腔鼻窦黏膜纤毛有不同程度的损伤，黏膜表面存在处于生命周期不同阶段的细菌生物膜。

关键词：鼻窦炎鼻黏膜生物膜显微镜检查电子扫描

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碳纳米管的跨膜转运、生物学效应及应用

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医学研究杂志 2008年第2期37卷 101-102页

作者：白娟曹济民中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础学院生理与病理生理系北京100005

纳米材料是指几何尺寸达到纳米级水平且具有特殊性能的材料。纳米微粒的小尺寸效应、表面与界面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应使其在声、光、电、磁、力学等物理特性方面呈现许多奇异的物理、化学性质。原子、分子水平上制造的... 详细信息

纳米材料是指几何尺寸达到纳米级水平且具有特殊性能的材料。纳米微粒的小尺寸效应、表面与界面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应使其在声、光、电、磁、力学等物理特性方面呈现许多奇异的物理、化学性质。原子、分子水平上制造的纳米材料和器件在化学、材料、生物、医学等领域有着广泛的应用前景,从而被称为“21世纪最有前途的材料”,引发了一场“新的工业革命”。[第一段]

关键词：生物学效应跨膜转运碳纳米管小尺寸效应纳米材料物理特性化学性质分子水平

来源：评论

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乳腺癌干细胞相关研究进展

乳腺癌干细胞相关研究进展

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第二届中国生物产业大会

作者：肖卫纯卢圣栋中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院北京 100005

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,全球每年新发病例超过400万,死亡病例可达100万,已是全球女性的第一号健康杀手.尽管医疗水平及诊疗技术在不断地提高,仍然不能满足乳腺癌诊断、治疗和预防的要求,一部分患者在就诊时已处于晚期,失去... 详细信息

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,全球每年新发病例超过400万,死亡病例可达100万,已是全球女性的第一号健康杀手.尽管医疗水平及诊疗技术在不断地提高,仍然不能满足乳腺癌诊断、治疗和预防的要求,一部分患者在就诊时已处于晚期,失去手术机会;即使能够进行化疗、放疗及手术切除的患者,也可能在术后一段时间内复发并伴随对化疗及放疗的不敏感.因此，理解乳腺癌的异质性及其对化疗放疗不敏感的相关机制是非常重要的。本文就乳腺癌干细胞相关研究进展进行论述。

关键词：乳腺癌诊断标准治疗方法干细胞

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临床医学重点学科评估指标体系构建

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解放军医院管理杂志 2008年第9期15卷 862-863页

作者：肖焕波吕一萍宋枚单广良中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 北京市卫生局北京100005

目的:建立科学、可行的临床医学重点学科评估指标体系。方法:Delphi法和专家会议法筛选评估指标以及确定评估指标的权重系数。结果:建立了包括5个一级指标,13个二级指标,43个三级指标的评估指标体系,并提出了综合评价的数学模型。结论:... 详细信息

目的:建立科学、可行的临床医学重点学科评估指标体系。方法:Delphi法和专家会议法筛选评估指标以及确定评估指标的权重系数。结果:建立了包括5个一级指标,13个二级指标,43个三级指标的评估指标体系,并提出了综合评价的数学模型。结论:评估指标的选择具有代表性、各级指标权重系数合理,评价方法科学、客观,为今后各层次的临床医学重点学科的遴选提供了参考模式。

关键词：临床医学重点学科指标体系综合评价

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人干燥综合征A抗原基因克隆表达及其重组蛋白临床应用研究

人干燥综合征A抗原基因克隆表达及其重组蛋白临床应用研究

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中华医学会第七次全国检验医学学术会议

作者：李倩高扬李永哲倪安平于孟学刘音朱立平林嘉友甘晓丹中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科

目的克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-60KD),旨在获得特异性重组抗原,探索使用重组抗原建立ELISA、免疫印迹、蛋白芯片等检测方法,用于自身抗体的临床。方法利用基因工程技术,首先从Hela细胞提取总RNA.应用逆转录RT- PCR方法扩增cDNA,再... 详细信息

目的克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-60KD),旨在获得特异性重组抗原,探索使用重组抗原建立ELISA、免疫印迹、蛋白芯片等检测方法,用于自身抗体的临床。方法利用基因工程技术,首先从Hela细胞提取总RNA.应用逆转录RT- PCR方法扩增cDNA,再以此为模板扩增目的基因.将PCR产物与表达载体PET-30a双酶切后进行连接反应,构建重组表达载体,转化大肠杆菌*** BL21,碱裂解法进行质粒小量制备,通过双酶切鉴定和PCR扩增鉴定,并经测序证实为SSA60KD目的基因。表达载体构建成功后。在大肠杆菌宿主菌*** DH5α中表达,产生了大量重组融合蛋白。利用金属螯合亲和层析法,对其进行纯化。得到了高纯度的具有Ro抗原活性的重组蛋白.达到ELISA检测要求。建立ELISA检测方法。对592例风湿病患者血清进行了检测分析。结果抗Ro60KD抗体对pSS诊断的敏感性为49.19%.特异性为60.46%;对SLE诊断的敏感性为57.69%,特异性为64.06%;该抗体在pSS、SLE、RA、SSc、MCTD中的阳性率分别为49.19%、57.69%、8.33%、15.00%、16.67%.抗体阳性率在pSS与SLE两组间无差异(P=0.200);在RA、SSc、MCTD三组间无差异(P=0.888);但在(pSS+SLE)组与(RA+SSc+MCTD)组间有显著性差异(P<0.001)。为SS、SLE等疾病的临床诊断、鉴别诊断、病程监控及改善预后提供有效工具:为探讨其与特定风湿性疾病的关系提供新的手段。结论本研究成功地构建了SSA 60KD重组表达载体,表达并纯化了60KD重组蛋白,以纯化的重组蛋白为抗原,建立了ELISA方法.检测了风湿病患者血清中抗60KD抗体.为进一步探讨自身抗体与疾病的相关性、了解抗原抗体相互作用及其在发病机制中的作用:为使用重组抗原用于临床检测;为进行抗原表位的定位研究、小肽的筛选及蛋白功能的研究奠定了基础。随着分子生物学和免疫学技术的进步,以重组蛋白或合成多肽为抗原用于自身抗体检测,具有广阔的临床应用前景。目前国内尚无使用重组抗原ELISA法检测SSA60KD抗体试剂盒问世。本研究正进一步扩大样本量进行临床检测。除SSA60KD外。用同样方法还完成了SSA52KD、SSB、rRNP基因的克隆表达。为建立ELISA、免疫印迹、蛋白芯片等满足不同临床需求多种检测方法继续探索。

关键词：干燥综合征 ELISA 重组抗原 SLE 重组蛋白临床应用研究基因克隆表达

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