检索结果-内蒙古大学图书馆

本文探索了一种安全、有效地导入靶细胞,从而杀灭肿瘤靶细胞而又避免毒素蛋白对正常细胞的毒副作用与免疫原性的方法.文中设计了一套非病毒载体靶向杀伤肿瘤细胞的基因治疗方案.把原来以毒素蛋白质导入血循环的形式改为以编码毒素蛋白的基因重组体(DNA)导入血循环的形式,即利用非病毒载体将对细胞有强烈杀伤作用的PEⅢmut(绿脓毒素第三区段的突变基因片段)以表达型重组体的形式靶向导入肿瘤细胞,致使PEⅢmut仅在肿瘤细胞中表达,从而杀灭该细胞.同时,利用肿瘤细胞是缺氧细胞的特点,以缺氧条件作为基因可控表达的控制条件.

关键词：恶性肿瘤基因治疗靶向性促性腺激素释放肽编码毒素蛋白基因重组体

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藏族原发性高血压的遗传学研究

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中华医学杂志 2002年第15期82卷 1009-1012页

作者：卓玛次仁庄兰平崔超英仁丹边巴格桑罗布平措扎西次旦罗布陈勇岑维浚才旦邱长春许群刘英刘怡雯朱席琳方鸣武邬正赉西藏自治区人民医院心血管病研究所拉萨850000 西藏医学专科学校生理及生化教研室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的　探讨遗传因素在藏族原发性高血压 (EH)发病中的作用 ,以及血管紧张素Ⅱ的惟一前体物血管紧张素原 (AGT)基因变异是否参与EH发病。方法　以藏族 35 3例EH患者和 317名正常血压对照者为对象进行病例对照相关研究。根据相似家系结... 详细信息

目的　探讨遗传因素在藏族原发性高血压 (EH)发病中的作用 ,以及血管紧张素Ⅱ的惟一前体物血管紧张素原 (AGT)基因变异是否参与EH发病。方法　以藏族 35 3例EH患者和 317名正常血压对照者为对象进行病例对照相关研究。根据相似家系结构的指示对照和指示病例 1∶1配比分析 ,按Falconer公式计算藏族EH的遗传度。以聚合酶链反应 (PCR)和PCR产物的限制性片段长度多态性分析方法 ,分析AGT基因M2 35T多态性和 5′调控区 6A→G变异与藏族EH遗传易感的相关性。结果　 (1)藏族EH先证者 (指示病例 )一级亲属受累率为 43.3% ,EH遗传度为 77.2 %± 13 3%。(2 )EH患者血浆肾素活性 (μg·L-1·h-1)为 1.95± 0 .11,血管紧张素Ⅱ水平 (ng/L)为 72 .6± 4.6 ,均明显高于对照组 (分别为 1.5 9± 0 .11和 5 1.7± 4.6 ,P <0 .0 5 )。 (3)EH组AGT基因 5′调控区 6G等位基因频率 (0 .36 )明显高于对照组 (0 .2 7) (χ2 =9.35 ,P <0 .0 1) ,并与血管紧张素Ⅱ水平呈弱相关 ,而M2 35T多态性与EH易感无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论　遗传因素在藏族EH发病中起重要作用。

关键词：藏族原发性高血压遗传学病例对照研究血管紧张素原多态性限制性片段长度

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一种新型人源化鲑鱼降钙素突变体的构建与表达

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中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 351-355页

作者：刘深基陈松森狄旭熊安琪张友鸿中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室北京100005

目的降低鲑鱼降钙素（sCT）对人体的免疫原性。方法设计并合成人源化鲑鱼降钙素（11 ～ 17）hsCT基因，用基因重组方法构建表达载体，转入大肠杆菌G1724中，经色氨酸诱导表达；用渗透压法处理菌体纯化融合蛋白；以大鼠血清钙浓度降低... 详细信息

目的降低鲑鱼降钙素（sCT）对人体的免疫原性。方法设计并合成人源化鲑鱼降钙素（11 ～ 17）hsCT基因，用基因重组方法构建表达载体，转入大肠杆菌G1724中，经色氨酸诱导表达；用渗透压法处理菌体纯化融合蛋白；以大鼠血清钙浓度降低方法测定hsCT生物活性；用定量Western blot法测定hsCT免疫原性。结果重组pTrxFus-hsCT质粒在大肠杆菌中获得高效可溶性融合蛋白表达, 表达水平达46%以上, 并得到纯度约90%的融合蛋白,rhsCT保存了鲑鱼降钙素前体活性的一半以上, 免疫原性降低了55%。结论获得一种新型人源化降钙素（11 ～ 17）hsCT，其保存较高sCT前体的活性，免疫原性明显降低。

关键词：人源化降钙素重组免疫原性生物活性

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神经营养素-4(NT-4)在昆虫杆状病毒表达系统中的克隆与表达

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中国医学科学院学报 2001年第2期23卷 141-144页

作者：马晓骊黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生化室医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生... 详细信息

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生物学活性测定。结果获得 hNT-4蛋白的表达产物， SDS-PAGE电泳显示表达产物相对分子质量为 15 000。经 Western-blot验证，表达上清及细胞全蛋白均有一条能与抗人 NT-4抗体发生特异性免疫反应的条带。经 PC12细胞测定，表达上清中的 rNT-4蛋白具有明确的生物学活性。结论 hNT-4在昆虫杆状病毒表达系统中的表达为今后进一步深入研究 hNT-4的功能及其在临床中的应用提供了条件。

关键词：神经营养素-4 载体PacGP67B Sf 细胞昆虫杆状病毒表达系统克隆表达

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人表皮生长因子的基础和应用研究

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中国医学科学院学报 2001年第2期23卷 176-180页

作者：黄秉仁蔡良婉向绪传 Xiang-Xu-zhuan 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室北京100005 Middle-Scale Experimental Base of the Institute of Basic Medical Sciences CAMS PUMC and Jin Ke Company Guilin

本文报道了有关人表皮生长因子（ hEGF）及其受体（ EGFR）的基础研究结果，以及在此基础上进行新药开发的有关工作： hEGF的基因合成、表达载体的构建和转化宿主细胞、表达产物的纯化和中试规模三批样品的生产和检验等的有关研究结果、... 详细信息

本文报道了有关人表皮生长因子（ hEGF）及其受体（ EGFR）的基础研究结果，以及在此基础上进行新药开发的有关工作： hEGF的基因合成、表达载体的构建和转化宿主细胞、表达产物的纯化和中试规模三批样品的生产和检验等的有关研究结果、 hEGF滴眼液的动物实验和临床实验等新药研制过程。有关基础研究表明，编码 51个氨基酸的 hEGF可以在α因子前导肽的引导下在酵母体系中分泌性表达，表达产物可促进角膜缘上皮细胞的增殖，可促进角膜碱烧伤的愈合，可用于口腔溃疡和皮肤烧伤的治疗，可对大鼠十二指肠溃疡有预防作用等 ,并用之制备了抗血清以测定血尿中 EGF的浓度。研究表明 EGF在大于 10 ng/ml浓度下对神经胶质瘤细胞株 BT325和人阴道上皮癌细胞株 A431的生长具有抑制作用，并用差异显示方法对此现象进行了分子机制的探讨。研究肾癌 EGFR表达和 DNA含量检测具有临床意义。对 EGF的晶体进行了初步的结构分析。中试产品检测表明 hEGF相对分子质量为 6000、等电点为 4.6、氨基端 15个氨基酸顺序正确、具有 EGF的免疫原性和生物活性。产品中无酵母细胞的残余 DNA。动物实验表明 EFG在体内无蓄积，有明确的促进角膜上皮细胞增殖的作用，无急毒和长毒副作用，对眼无刺激和局部毒性作用。在四家医院进行的多中?

关键词：表皮生长因子受体重组蛋白滴眼液基因工程药

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降钙素/降钙素基因相关肽基因前体RNA的加工

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国外医学（分子生物学分册） 1999年第4期21卷 196-200页

作者：刘深基陈松森中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生化与分子生物学研究室北京100005

降钙素和降钙素基因相关肽是由一个基因表达出的两种功能完全不同的多肽激素,其基因的表达主要在RNA水平上受到调控。前体RNA在加工成为成熟RNA的过程中,在不同的组织中经过不同的剪接形成不同的RNA。其剪接的特异性受到顺式元件和反式... 详细信息

降钙素和降钙素基因相关肽是由一个基因表达出的两种功能完全不同的多肽激素,其基因的表达主要在RNA水平上受到调控。前体RNA在加工成为成熟RNA的过程中,在不同的组织中经过不同的剪接形成不同的RNA。其剪接的特异性受到顺式元件和反式因子的调控,基因的exon4上游剪接受点和下游polyA位点均存在弱的加工位点,通过增强子序列使之产生选择性剪接,另外,可能存在组织特异的反式剪接因子。

关键词：降钙素 CGRP RNA 基因表达

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脆性X智力低下基因:分子遗传学和生物化学研究

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遗传 1998年第6期20卷 36-37页

作者：沈岩中国医学科学院-中国协和医科大学基础医学研究所生化及分子生物学研究室

脆性Ｘ综合征是最常见的遗传性智力低下疾病。该病是由于脆性Ｘ智力低下基因（ＦＭＲ１）功能丧失所致。ＦＭＲ１基因位于Ｘ染色体长臂末端，由１７个外显子组成，覆盖约３８ｋｂ，转录方向从着丝粒到端粒（ＧｅｎＢａｎｋＬ２９０７４... 详细信息

脆性Ｘ综合征是最常见的遗传性智力低下疾病。该病是由于脆性Ｘ智力低下基因（ＦＭＲ１）功能丧失所致。ＦＭＲ１基因位于Ｘ染色体长臂末端，由１７个外显子组成，覆盖约３８ｋｂ，转录方向从着丝粒到端粒（ＧｅｎＢａｎｋＬ２９０７４）。分子遗传学研究和突变分析显示，...

关键词：脆性X综合征智力低下分子遗传学

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人载脂蛋白B基因3′端高可变区不同等位基因在真核细胞中对基因表达调控的作用

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中国动脉硬化杂志 1997年第1期5卷 5-9页

作者：何平吕新跃薛红陈保生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学及分子生物学研究室北京100005

为探讨人载脂蛋白B基因3'端高可变区（hypervariableregion，HVR）不同等位基因对真核细胞基因表达调控的作用．选取在正常人群中分本最广的HVE36小等位基因和在冠心病病人中分布占优势的大等位基因HVE44，分别克隆进含荧光素酶基因... 详细信息

为探讨人载脂蛋白B基因3'端高可变区（hypervariableregion，HVR）不同等位基因对真核细胞基因表达调控的作用．选取在正常人群中分本最广的HVE36小等位基因和在冠心病病人中分布占优势的大等位基因HVE44，分别克隆进含荧光素酶基因的pGL2－promoter及pGL2－control质粒中，转染Hela细胞和HepG2细胞．结果发现，在不同的细胞系中插入HVE44等位基因的重组质位表达均高于插入HVE36的重组质粒的表达。表明载脂蛋白B基因3'端高可变区不同等位基因具有调控基因表达的作用，HVE44大等位基因可上调细胞内的基因表达，这或许是以HVE44等大等位基因为主体的动脉粥样硬化患者体内载脂蛋白B升高的原因之一．

关键词：载脂蛋白B基因表达调控动脉粥样硬化

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β-珠蛋白基因簇表达调控的反式作用因子

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国外医学（分子生物学分册） 1996年第6期18卷 264-267页

作者：纪新军刘德培中国医学科学院基础医学研究所生化室中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

β-珠蛋白基因簇是研究真核基因表达调控的良好模型,其基因表达具有红系组织特异性和不同发育阶段特异性。这些特异性的产生依赖于组织特异性表达的和发育阶段特异性表达的反式作用因子与顺式作用元件间的相互作用。

关键词： β-珠蛋白基因反式作用因子基因调控

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