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ATP敏感钾通道在预先应用左旋甲状腺素钠对抗未成年大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤中的作用

实用儿科临床杂志 2010年第11期25卷 804-807,834页

作者：杨泉涌薛富善许亚超张霖罗艺廖旭熊军李杉张雁鸣天津医科大学附属肿瘤医院麻醉科国家教育部乳腺癌防治重点实验室天津300060 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院麻醉科北京100144 天津医科大学附属肿瘤医院中心实验室天津300060

目的明确ATP敏感钾通道在预先应用左旋甲状腺素钠对抗未成年大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤中的作用。方法将日龄35d的未成年健康雌性Wistar大鼠32只随机分为4组(每组8只):空白对照组(BC组)、对照组(C组)、左旋甲状腺素钠100μg组(100μg... 详细信息

目的明确ATP敏感钾通道在预先应用左旋甲状腺素钠对抗未成年大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤中的作用。方法将日龄35d的未成年健康雌性Wistar大鼠32只随机分为4组(每组8只):空白对照组(BC组)、对照组(C组)、左旋甲状腺素钠100μg组(100μg组)和格列本脲+左旋甲状腺素钠组(G+L组)。BC组和C组大鼠实验前应用普通饲料喂养7d;除普通饲料喂养外,100μg组和G+L组大鼠每天通过灌胃方式应用左旋甲状腺素钠100μ***-1进行预处理。第8天麻醉后取出大鼠心脏,采用Langendorff装置建立离体心脏缺血-再灌注模型,BC组离体心脏持续灌注80min,中间不实施停灌注,余各组的离体心脏则均顺序经历平衡30min、常温停灌注20min和再灌注30min处理。G+L组采用含有格列本脲30μmol.L-1的Krebs-Henseleit缓冲液(KH液)灌注,而其他组采用KH液灌注。实验中连续监测心率、收缩压、左心室压力上升的最大速率(dp/dtmax)和左心室压力下降的最大速率(dp/dtmin)等血流动力学指标;测定平衡期和再灌注期的冠脉流量及再灌注期冠脉流出液中心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性;再灌注后取心室肌组织标本,采用Westernblot技术检测热休克蛋白70(HSP70)的表达,采用实时定量RT-PCR技术检测肌球蛋白重链(MHC)和甲状腺激素受体(TR)mRNA的表达。结果与C组比较,100μg组和G+L组再灌注期全部血流动力学指标及平衡期和再灌注期冠脉流量均显著增高,且100μg组和G+L组平衡期冠脉流量显著高于BC组。100μg组和G+L组再灌注期冠脉流出液CK-MB活性显著高于BC组,但显著低于C组。100μg组和G+L组心室肌组织HSP70和MHCαmRNA表达显著强于BC组和C组。100μg组和G+L组所有检测指标比较差异均无统计学意义。4组心室肌组织TRmRNA表达比较差异均无统计学意义。结论 ATP敏感钾通道可能与预先应用左旋甲状腺素钠对未成年大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的保护作用机制无关。

关键词：三磷酸腺苷敏感钾通道预先应用甲状腺激素心肌保护

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硫氧还蛋白-1对皮瓣缺血再灌注早期不同组织层次损伤的影响

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中华整形外科杂志 2019年第5期35卷 489-496页

作者：高斌任惠文尹健孙敬岩范金财殷竹鸣国家肿瘤临床医学研究中心(天津) 天津市肿瘤防治重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心乳腺癌防治教育部重点实验室300060 天津医科大学肿瘤医院病理科 300060 天津医科大学基础医学院药理学系 300070 天津医科大学肿瘤医院乳房再造科 300060 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院整形九科 100144

目的研究缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)皮瓣不同组织层次中硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)的含量和损伤程度的差异,探讨Trx-1对特定层次的保护作用和机制。方法(1)2013年6月至2014年12月,对中国医学科学院整形外科医院收治... 详细信息

目的研究缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)皮瓣不同组织层次中硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)的含量和损伤程度的差异,探讨Trx-1对特定层次的保护作用和机制。方法(1)2013年6月至2014年12月,对中国医学科学院整形外科医院收治的10例行腹壁下动脉穿支皮瓣乳房再造的女性患者进行组织标本采集,包括游离皮瓣组织(IR组,n=10)和正常皮肤组织(对照组,n=10),患者年龄(47.4±3.8)岁。(2)将20只雄性ICR小鼠采用随机数字表法分为IR皮瓣模型组和对照组,每组10只,采集2组皮瓣组织。对临床采集的组织和小鼠皮瓣组织,采用免疫组化染色和TUNEL染色检测和分析不同组织层次Trx-1表达水平以及细胞凋亡指数。(3)构建人永生化角质形成细胞(HaCaT)缺氧-复氧模型,采用蛋白质印迹法验证Trx-1对表皮细胞缺氧-复氧损伤的保护作用和机制。应用SPSS 20.0对实验结果进行分析,对定量资料2组间的比较采用配对t检验或t′检验;对蛋白表达量的组间比较进行方差分析和两两比较q检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果临床组织标本表皮基底层和真皮乳头层Trx-1阳性细胞率对照组为70.71%±6.38%,IR组为24.19%±2.23%(t=27.54,P<0.001);小鼠皮瓣组织对照组为76.59%±4.88%,IR组为19.83%±2.34%(t=34.71,P<0.001)。临床组织标本细胞凋亡指数对照组为1.32%±1.52%,IR组为43.71%±3.17%(t=38.23,P<0.001);小鼠皮瓣组织对照组为0.86%±1.15%,IR组为41.14%±4.21%(t=36.96,P<0.001)。其他组织层次Trx-1的表达和细胞凋亡水平的差异无统计学意义(P>0.05)。在HaCaT细胞缺氧-复氧损伤模型中,Trx-1含量较对照组明显下降(P<0.01),ASK-1、p-p38和c-PARP的表达量显著上调(P<0.01)。外源性Trx-1预处理能够显著提升缺氧-复氧细胞中的Trx-1含量(P<0.01),并显著降低p-p38和c-PARP的表达水平(P<0.01)。结论表皮基底层和真皮乳头层是皮瓣缺血再灌注早期损伤的主要组织层次,补充该层次Trx-1的含量能够通过抑制ASK-MAPK信号通路减轻皮瓣缺血再灌注损伤,有望改善游离皮瓣移植的存活率。

关键词：外科皮瓣游离皮瓣缺血再灌注损伤硫氧还蛋白细胞凋亡表皮基底层真皮乳头层

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反常性痤疮一家系nicastrin基因突变研究

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国际皮肤性病学杂志 2016年第4期42卷 201-204页

作者：肖学敏徐浩翔惠云张晓峰何艳艳李诚让王宝玺福建医科大学附属协和医院皮肤科福州350001 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室皮肤科南京总医院皮肤科中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院皮肤科

目的研究一家系2例汉族反常性痤疮患者γ分泌酶基因的突变。方法提取家系中5名成员（2例患者、先证者父亲、2例目前未发病者）的外周血DNA，扩增nicastrin蛋白（NCSTN）、早老素（PSEN） 1、早老素增强子（PSENEN）、前咽缺陷蛋白（A... 详细信息

目的研究一家系2例汉族反常性痤疮患者γ分泌酶基因的突变。方法提取家系中5名成员（2例患者、先证者父亲、2例目前未发病者）的外周血DNA，扩增nicastrin蛋白（NCSTN）、早老素（PSEN） 1、早老素增强子（PSENEN）、前咽缺陷蛋白（APH1）基因所有外显子和侧翼序列进行测序，并以100例无关系健康人作为对照。同时比较先证者皮损与4个健康对照NCSTN基因mRNA表达差异。结果检测到2例患者血样DNA存在NCSTN基因中第477位碱基发生C→A的杂合突变，即c.477C〉A，其余3名家系成员及健康对照未发现相应突变；查询美国国家生物技术信息中心网站单核苷酸多态性数据库也未发现此突变。另外，先证者皮损NCSTN mRNA水平较健康对照明显减少。结论 NCSTN基因新的无义突变c.477C〉A是该反常性痤疮家系的致病突变，并可能通过无义介导的mRNA降解途径导致该基因功能失活。

关键词：反常性痤疮基因突变系谱基因,nicastrin

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应用肉毒杆菌毒素建立阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征动物模型的研究

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2010年第9期17卷 485-487页

作者：王伊宁李森恺叶京英首都医科大学附属北京儿童医院外科北京100045 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院南二科北京100011 首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室(首都医科大学)北京100730

目的研究在兔颏舌肌内注射肉毒杆菌毒素(botulinum toxin,BTX)能否建立舌根后气道狭窄的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)动物模型。方法以24只新西兰大白兔为实验动物,建立实验组和两组对照组,实验组行颏舌肌内注射BTX,第一对照... 详细信息

目的研究在兔颏舌肌内注射肉毒杆菌毒素(botulinum toxin,BTX)能否建立舌根后气道狭窄的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)动物模型。方法以24只新西兰大白兔为实验动物,建立实验组和两组对照组,实验组行颏舌肌内注射BTX,第一对照组行颏舌肌注射生理盐水,第二对照组行股二头肌注射BTX。用药后均行动脉血氧饱和度(SaO2)监测,人工计算氧减饱和度指数(ODI4),采用配对样本t检验,以P<0.05作为动物模型成功建立的标准。结果实验组颏舌肌内注射BTX后动物出现明显缺氧症状,SaO2监测显示睡眠状态下出现间歇性低氧,其ODI4与对照组进行统计学分析具有显著性差异。结论运用颏舌肌注射BTX能够成功的建立兔舌根后气道阻塞的OSAHS动物模型,这一模型更符合OSAHS患者发病原因和自然病程。

关键词：睡眠呼吸暂停,阻塞性疾病模型,动物肉毒毒素类颏舌肌

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巨噬细胞及粒细胞巨噬细胞集落刺激因子促进大鼠腹壁动脉穿支皮瓣存活的作用及其机制

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中华实验外科杂志 2011年第5期28卷 684-687,F0003页

作者：赵洪猛张斌冯锐潘思虎曹文枫刘岩雪乔群曹旭晨天津医科大学附属肿瘤医院乳腺一科乳腺癌防治教育部重点实验室天津市“肿瘤防治”重点实验室 300060 中国医学科学院北京协和医院整形外科南开大学医学院天津医科大学附属肿瘤医院病理科

目的探讨巨噬细胞（macrophage）及粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（***）促进大鼠腹壁动脉穿支（DEP）皮瓣模型皮瓣存活的作用及分子机制。方法建立大鼠DEP皮瓣模型，分别给与大鼠GM—CSF（Ⅰ组）、腹腔巨噬细胞（Ⅱ组）、GM—CSF联合巨... 详细信息

目的探讨巨噬细胞（macrophage）及粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（***）促进大鼠腹壁动脉穿支（DEP）皮瓣模型皮瓣存活的作用及分子机制。方法建立大鼠DEP皮瓣模型，分别给与大鼠GM—CSF（Ⅰ组）、腹腔巨噬细胞（Ⅱ组）、GM—CSF联合巨噬细胞（Ⅲ组）及生理盐水（Ⅳ组）。术后第7天取皮瓣，测算皮瓣成活面积、微血管密度（MVD），天狼腥红染色检测胶原沉积，并利用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）法检测I型胶原（CollagenI）、Ⅲ型胶原（CollagenⅢ）、基质金属蛋白酶-2（MMP2）及基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）、血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR）的基因表达。结果皮瓣成活率I组（53．08±8．76）％和Ⅱ组（47．95±4．92）％均高于对照组（43．28±5．27）％而低于Ⅲ组（61．68±6．60）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。胶原含量I、Ⅲ组（16．34±2．47）％、（19．41±2．01）％均高于对照组（13．19±2．91）％，差异有统计学意义（P均〈0．01）；Ⅱ组（12．50±2．66）％稍低于对照组，差异无统计学意义（P〉0．05）。MVDⅠ-Ⅲ组（24．82±4．18、24．30±3．02、29．82±4．74）均高于Ⅳ组（21．37±2．65），差异有统计学意义，其中Ⅲ组MVD较其他两组MVD更高。I组皮瓣CollagenI、EMMPRIN、MMP2和VEGFR基因表达高于对照组（P〈0．05）；1I组皮瓣EMMPRIN基因表达高于对照组（P〈0．05）；nl组皮瓣CollagenⅠ、CollagenⅢ、EMMPRIN、MMP2和VEGFR基因表达均高于对照组（P〈0．05）。各实验组较对照组VEGF表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论重组大鼠GM—CSF和过继巨噬细胞通过促进皮瓣内胶原合成（CollagenⅠ、CollagenⅢ）及分解（EMMPRIN、MMP2）相关基因的表达，同时促进血管生成相关基因（VEGFR）的表达，促进了皮瓣胶原重塑和血管生成，最终促进了大鼠DEP皮瓣的成活。

关键词：巨噬细胞粒细胞巨噬细胞集落刺激因子腹壁下动脉穿支皮瓣

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无痛液压扩张法治疗小儿假性包茎的临床应用

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中国美容整形外科杂志 2020年第3期31卷 139-141页

作者：张寒林涛李森恺成都怡脂医疗美容门诊部四川成都610072 四川省人民医院疼痛科四川成都610072 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院北京100144

目的探讨无痛液压扩张法治疗小儿假性包茎的临床效果。方法自2009年7月至2019年1月应用无痛液压扩张法治疗小儿假性包茎489例。采用利多卡因凝胶充分麻醉包茎腔隙后,以注射器液压注射扩张包皮,于充分扩张后以手法翻开包皮。结果本组中32... 详细信息

目的探讨无痛液压扩张法治疗小儿假性包茎的临床效果。方法自2009年7月至2019年1月应用无痛液压扩张法治疗小儿假性包茎489例。采用利多卡因凝胶充分麻醉包茎腔隙后,以注射器液压注射扩张包皮,于充分扩张后以手法翻开包皮。结果本组中327例患儿通过1次扩张成功翻开包皮;48例通过2次扩张翻开包皮;29例通过3次扩张翻开包皮;总成功率83%。其余85例患者转为手术治疗。术后随访1个月,效果较满意。结论采用无痛液压扩张法治疗小儿假性包茎,效果较明显,疼痛反应小,且家长可陪同治疗,是一种较好的治疗方法,值得临床推广。

关键词：假性包茎无痛疗法液压扩张

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人胎儿皮肤裸鼠移植模型的构建

人胎儿皮肤裸鼠移植模型的构建

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2014感染伤口的防治与修复研讨会、中国金属学会冶金安全与健康分会烧伤外科学专业委员会年会、华北地区烧伤与整形外科学术年会、内蒙古自治区医学会烧伤整形外科专科分会年会、包头市医学会烧伤整形分会年会暨《中华损伤与修复杂志(电子版)》2014年全国编委会议

作者：李川姜笃银 100114 北京北京协和医学院中国医学科学院整形外科医院 250033 济南山东大学第二医院整形急诊科和烧伤科山东大学组织工程研究所

目的探索构建人胎儿皮肤裸鼠移植模型的试验方法,为进一步进行人胎儿皮肤发育和创面愈合机制的研究奠定基础。方法将胎龄(Embryonic age,E)14周(week,w)的人胎儿皮肤移植到裸鼠皮瓣下;温养4w后打开皮瓣,观察移植物存活情况及继续生长... 详细信息

目的探索构建人胎儿皮肤裸鼠移植模型的试验方法,为进一步进行人胎儿皮肤发育和创面愈合机制的研究奠定基础。方法将胎龄(Embryonic age,E)14周(week,w)的人胎儿皮肤移植到裸鼠皮瓣下;温养4w后打开皮瓣,观察移植物存活情况及继续生长发育的组织学特征;并检测K5、19在移植物发育过程中的表达规律。结果 E14w人胎儿皮肤移植后顺利成活并继续生长发育,形成包含皮肤附件的完整的皮肤三维结构;K5、19在移植物的表皮层和毛囊根鞘细胞中表达。结论通过皮瓣下埋植法可以成功构建人胎儿皮肤裸鼠移植模型,而且人胎儿皮肤移植后仍保持了稳定地生长发育的能力。

关键词：人胎儿皮肤移植动物模型创面愈合

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人胎儿皮肤裸鼠移植模型的构建

人胎儿皮肤裸鼠移植模型的构建

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第八届华东六省一市整形外科学学术会议暨山东省第十四次烧伤整形外科学学术会议

作者：李川姜笃银北京协和医学院中国医学科学院整形外科医院北京100114 山东大学第二医院整形急诊科和烧伤科山东大学组织工程研究所山东济南250033

目的：探索构建人胎儿皮肤裸鼠移植模型的试验方法 ,为进一步进行人胎儿皮肤发育和创面愈合机制的研究奠定基础。方法：将胎龄(Embryonicage,E)14周(week,w)的人胎儿皮肤移植到裸鼠皮瓣下;温养4w后打开皮瓣,观察移植物存活情况及继续生... 详细信息

目的：探索构建人胎儿皮肤裸鼠移植模型的试验方法 ,为进一步进行人胎儿皮肤发育和创面愈合机制的研究奠定基础。方法：将胎龄(Embryonicage,E)14周(week,w)的人胎儿皮肤移植到裸鼠皮瓣下;温养4w后打开皮瓣,观察移植物存活情况及继续生长发育的组织学特征;并检测K5、19在移植物发育过程中的表达规律。结果：E14w人胎儿皮肤移植后顺利成活并继续生长发育,形成包含皮肤附件的完整的皮肤三维结构;K5、19在移植物的表皮层和毛囊根鞘细胞中表达。结论：通过皮瓣下埋植法可以成功构建人胎儿皮肤裸鼠移植模型,而且人胎儿皮肤移植后仍保持了稳定地生长发育的能力。

关键词：人胎儿皮肤移植动物模型创面愈合

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人胎儿皮肤裸鼠移植模型的构建

人胎儿皮肤裸鼠移植模型的构建

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：李川姜笃银北京协和医学院中国医学科学院整形外科医院北京100114 山东大学第二医院整形急诊科和烧伤科山东大学组织工程研究所山东济南250033

目的：探索构建人胎儿皮肤裸鼠移植模型的试验方法,为进一步进行人胎儿皮肤发育和创面愈合机制的研究奠定基础。方法：将胎龄(Embryonic age,E)14周(week,w)的人胎儿皮肤移植到裸鼠皮瓣下;温养4w后打开皮瓣,观察移植物存活情况及继续生... 详细信息

关键词：人胎儿皮肤移植动物模型创面愈合

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合成角质细胞生长因子活性短肽促进表皮细胞增殖的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2016年第1期12卷 1-5页

作者：宗宪磊陆海滨祁佐良李国菊宋国栋都乐靳小雷姜笃银中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院北京市100144 山东大学口腔医学院放射科山东省济南市250014 山东大学第二医院美容整形烧伤外科、急诊科山东大学组织工程研究所山东省济南市250033

目的应用噬菌体随机7肽库筛选角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)的关键序列,进行KGF活性短肽的调整和合成,并研究其对表皮细胞增殖的作用。方法以KGF单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机7肽库,获得KGF的特异性序列,并进行序... 详细信息

目的应用噬菌体随机7肽库筛选角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)的关键序列,进行KGF活性短肽的调整和合成,并研究其对表皮细胞增殖的作用。方法以KGF单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机7肽库,获得KGF的特异性序列,并进行序列调整。用免疫荧光法检测KGF活性短肽的表皮细胞亲和力。用CCK-8法检测KGF活性短肽对表皮细胞增殖的影响。用RT-PCR法和Western-blot法检测表皮细胞上特异性受体KGFR的表达水平。结果筛选噬菌体随机7肽库,获得2个与KGF相似的特异性序列,合成获得2个KGF活性短肽,并纯化至98%纯度,短肽的C端进行氨基化封闭,N端进行罗丹明激光染料标记。免疫荧光检测结果显示,2个KGF活性短肽均能够与表皮细胞相结合。CCK-8检测结果显示,与阴性对照组相比,2个KGF活性短肽能够促进表皮细胞增殖,并呈浓度依赖性。RT-PCR和Western-blot检测结果显示,2个KGF活性短肽组中表皮细胞表达KGFR增强。结论从噬菌体随机7肽库中筛选到2个KGF的关键序列,合成的2个KGF活性短肽能够与KGFR相结合,并增强KGFR的表达,从而促进表皮细胞增殖,有望应用于促进创面愈合。

关键词：噬菌体随机7肽库角质细胞生长因子活性短肽表皮细胞创面愈合

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