检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验外科杂志 2004年第7期21卷 852-854,F003页

作者：李长有宋今丹原银栋范广宇中国医科大学第一临床学院骨科沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部重点实验室

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼠成骨细胞分化过程中的作用。方法利用鼠原代FRC细胞培养系统(第0、5、9、14天)和取材新生鼠颅盖骨组织(5例),采用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组织化学染色方法,检测VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼠成骨细胞分化过程中的作用。方法利用鼠原代FRC细胞培养系统(第0、5、9、14天)和取材新生鼠颅盖骨组织(5例),采用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组织化学染色方法,检测VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在FRC细胞分化、矿化过程中mRNA和在新生鼠颅盖骨组织中蛋白质的表达。结果在控制培养条件下,FRC细胞出现明显的成骨特性。结合FRC细胞分化特性,RTPCR检测发现VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在FRC细胞中从分化到矿化过程中,mRNA表达逐渐增强。特别是在矿化后第9天和第14天表达水平明显增强。免疫组织化学染色证实了RTPCR结果,新生鼠颅盖骨中的成骨细胞同时表达VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1。结论VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在成骨细胞分化和矿化过程中表达逐渐增强。作为一种重要的血管性因子,VEGF的自分泌作用方式在成骨细胞的分化中起重要作用。

关键词：血管内皮生长因子受体鼠成骨细胞自分泌作用免疫组织化学

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miRNA-210-3p在大肠癌细胞迁移侵袭中的促进作用及其靶基因的生物信息学分析

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医学研究杂志 2020年第9期49卷 51-56页

作者：潘鑫李婉明于敏方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室、医学细胞生物学教育部重点实验室、生命科学院细胞生物学教研室沈阳110122

目的探讨miR-210-3p在大肠癌细胞迁移、侵袭中的作用,并利用生物信息学方法预测其靶基因及信号通路。方法采用dbDEMC和OncomiR数据库分析miR-210-3p在大肠癌中的表达情况,通过荧光定量PCR法验证miR-210-3p在大肠癌细胞系中的表达;通过转... 详细信息

目的探讨miR-210-3p在大肠癌细胞迁移、侵袭中的作用,并利用生物信息学方法预测其靶基因及信号通路。方法采用dbDEMC和OncomiR数据库分析miR-210-3p在大肠癌中的表达情况,通过荧光定量PCR法验证miR-210-3p在大肠癌细胞系中的表达;通过转染miRNA模拟物、抑制剂上调和下调大肠癌细胞内miR-210-3p的表达量,Transwell法检测转染后大肠癌细胞的迁移和侵袭能力变化;通过miRDB、TargetScan7.2、starBase和miRPathDB数据库预测miR-210-3p靶基因,利用DAVID数据库进行GO分析及信号通路的富集分析,利用GEPIA数据库分析关键基因在大肠癌组织中的表达。结果dbDEMC和OncomiR数据库显示miR-210-3p在大肠癌组织中高表达,并与肿瘤转移和患者预后相关。荧光定量PCR验证miR-210-3p在高转移性结肠癌细胞系HCT-116、LoVo中的表达量高于中转移性细胞系SW480和低转移性细胞系CL187、HCT-8。过表达miR-210-3p能明显增强SW480细胞迁移和侵袭能力;下调miR-210-3p的表达后,LoVo细胞迁移和侵袭能力则明显减弱。共预测出3035个靶基因,其功能主要富集在细胞迁移、黏附、蛋白质代谢等生物学过程以及癌症通路、HIF、Rap1等信号转导通路,GEPIA数据库验证显示RGMA在临床大肠癌组织中呈显著低表达,可能是miR-210-3p的靶基因。结论miR-210-3p可促进大肠癌细胞迁移和侵袭能力,有望成为大肠癌治疗的新型生物靶点。

关键词： miR-210-3p 大肠癌侵袭生物信息学靶基因

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血管内皮生长因子在人类和鼠成骨细胞中的选择性剪接表达

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中华实验外科杂志 2005年第7期22卷 835-836页

作者：李长有宋今丹原银栋范广宇中国医科大学附属第一医院骨科沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部重点实验室

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)各种转录本亚型在成骨细胞分化中的作用。方法应用特殊设计的引物,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测VEGFmRNA在人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63和胎鼠颅盖骨细胞(FRC)在第0、5、9、14天不同分化阶段中的选... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)各种转录本亚型在成骨细胞分化中的作用。方法应用特殊设计的引物,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测VEGFmRNA在人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63和胎鼠颅盖骨细胞(FRC)在第0、5、9、14天不同分化阶段中的选择性剪接表达。结果人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63表达所有的VEGFmRNA亚型,其中以VEGF121和VEGF165表达最强。鼠FRC细胞表达3种VEGFmRNA亚型(即VEGF120,VEGF144和VEGF164),其中以VEGF120和VEGF164表达最强。伴随着FRC细胞的增殖、分化和矿化,这些亚型的表达逐渐增强,并且在结节矿化后达到最高水平。结论小分子的VEGF121/120和VEGF165/164在成骨细胞的分化过程中表达增强,可能起重要的血管源性调节作用。

关键词：选择性剪接血管内皮生长因子(VEGF) 人类成骨细胞样细胞 SaOS-2 VEGF165 成骨细胞分化聚合酶链反应颅盖骨细胞方法应用 mRNA 细胞表达表达增强分化过程调节作用血管源性 A亚型转录本逆转录 FRC C细胞高水平

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肌动蛋白亚型在巨噬细胞吞噬脑膜炎大肠杆菌中的作用

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中国细胞生物学学报 2020年第4期42卷 620-628页

作者：赵文心马岚杨雪婷李晶莹杜书嵩张雪薇赵伟东中国医科大学临床一系沈阳110122 中国医科大学生物科学与生物技术系沈阳110122 中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫健委细胞生物学重点实验室沈阳110122

该研究利用诱导后的THP-1单核细胞系作为巨噬细胞的模式细胞,鉴定了在巨噬细胞中表达的肌动蛋白亚型,发现β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白在巨噬细胞中表达;接着利用共聚焦显微成像发现,β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白在巨噬细胞受到脑膜炎大肠杆... 详细信息

该研究利用诱导后的THP-1单核细胞系作为巨噬细胞的模式细胞,鉴定了在巨噬细胞中表达的肌动蛋白亚型,发现β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白在巨噬细胞中表达;接着利用共聚焦显微成像发现,β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白在巨噬细胞受到脑膜炎大肠杆菌感染时均出现了不同程度的聚集;进一步利用RNA干扰技术实现了对巨噬细胞中的β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白的特异性下调,并发现单独下调β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白以及联合下调β-和γ-肌动蛋白都使得巨噬细胞吞噬脑膜炎大肠杆菌的能力呈明显下降。这些结果表明,不同亚型的肌动蛋白在巨噬细胞吞噬脑膜炎大肠杆菌过程中发挥着重要作用。

关键词：肌动蛋白亚型巨噬细胞 β-肌动蛋白 γ-肌动蛋白细菌吞噬作用

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肝癌HepG2和Hep3B细胞系SNF5表达及定位

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中华肿瘤防治杂志 2018年第14期25卷 985-989页

作者：尹中波霍云龙王春玉赵越江苏省南通市第六人民医院病理科江苏南通226011 中国医科大学盛京医院病理科辽宁沈阳110011 中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室.教育部医学细胞生物学重点实验室.卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的染色质重塑因子SNF5在肝细胞肝癌中的生物学功能仍有待深入研究,本研究检测SNF5在HepG2和Hep3B肝癌细胞系中的表达及亚细胞定位,并构建Flag-SNF5真核表达质粒。方法提取HepG2和Hep3B两种肝癌细胞系的总蛋白,蛋白质印迹法检测SNF5内... 详细信息

目的染色质重塑因子SNF5在肝细胞肝癌中的生物学功能仍有待深入研究,本研究检测SNF5在HepG2和Hep3B肝癌细胞系中的表达及亚细胞定位,并构建Flag-SNF5真核表达质粒。方法提取HepG2和Hep3B两种肝癌细胞系的总蛋白,蛋白质印迹法检测SNF5内源性表达;应用共聚焦激光扫描显微镜观察Hep3B细胞SNF5蛋白定位;提取HepG2总RNA,反转录为cDNA,PCR扩增SNF5全长编码序列,亚克隆至含有Flag标签的真核表达载体中;将构建的重组质粒测序并转染到Hep3B细胞中,提取细胞蛋白进行蛋白质印迹检测,验证其表达情况;使用免疫沉淀的方法纯化Flag-SNF5融合蛋白。结果在HepG2及Hep3B两种肝癌细胞系中,均检测到了SNF5蛋白的内源性表达。在Hep3B细胞中,SNF5主要定位于细胞核。将SNF5蛋白全长编码区成功克隆到pcDNA3-Flag载体中。重组质粒转染入Hep3B细胞后,检测到融合蛋白Flag-SNF5的表达,相对分子质量约为39×103,并对Flag-SNF5融合蛋白进行了纯化。结论 SNF5蛋白在HepG2及Hep3B两种肝癌细胞系中均有表达,且在Hep3B细胞中主要定位于细胞核。成功地构建了Flag-SNF5的真核表达质粒,验证了重组质粒的表达,并纯化了该融合蛋白。

关键词：肝细胞癌重组质粒蛋白质印迹法 SNF5

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多重置换扩增结合激光捕获显微切割技术在胃癌基因组学研究中的应用

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中华实验外科杂志 2007年第11期24卷 1350-1352页

作者：吕志徐岩满晓辉王振宁罗阳曹磊徐惠绵中国医科大学医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 中国医科大学附属第一医院肿瘤外科

目的探讨多重置换扩增(MDA)与激光捕获显微切割(LCM)技术相结合,并应用到胃癌细胞杂合性丢失(LOH)分析等研究的可行性.方法利用LCM技术从胃癌组织冰冻切片中分别获取正常胃黏膜细胞和胃癌细胞,提取基因组DNA后,进行全基因组多重置换扩... 详细信息

目的探讨多重置换扩增(MDA)与激光捕获显微切割(LCM)技术相结合,并应用到胃癌细胞杂合性丢失(LOH)分析等研究的可行性.方法利用LCM技术从胃癌组织冰冻切片中分别获取正常胃黏膜细胞和胃癌细胞,提取基因组DNA后,进行全基因组多重置换扩增.进而,将MDA产物用于聚合酶链反应(PCR)扩增ACE2、TP53和ACTB基因片段,以及微卫星位点的LOH分析.结果位于不同染色体的3个基因片段均得到较好的扩增,而且MDA产物的扩增效率明显高于未经MDA的基因组DNA.另外,MDA产物的LOH分析结果与未经MDA的基因组DNA结果一致.结论 MDA与LCM技术相结合,是一种可行的全基因组扩增技术路线,可用于后续的基因组学研究.

关键词：胃癌杂合性丢失基因

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细胞特异性核酸适配体筛选新策略的研究进展

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生命科学研究 2019年第4期23卷 305-309,323页

作者：邹梦蝶鲁妍兵李婉明中国医科大学生命科学学院卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室

核酸适配体(aptamer)是在体外采用指数富集的配基系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponentialenrichment,SELEX)从人工合成的随机寡核苷酸文库中筛选得到的一段寡核苷酸序列(RNA 或DNA),能折叠成特定的三维空间结构... 详细信息

核酸适配体(aptamer)是在体外采用指数富集的配基系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponentialenrichment,SELEX)从人工合成的随机寡核苷酸文库中筛选得到的一段寡核苷酸序列(RNA 或DNA),能折叠成特定的三维空间结构同靶物质进行高特异性与高亲和性的结合。近年来,以全细胞为靶标筛选(cell-SELEX)获得的核酸适配体在疾病相关的领域有很大的应用潜力,尤其在细胞分子的识别、生物标志物的发现等方面,但cell-SELEX 的过程复杂、难度大及获得的核酸适配体性能不佳等问题仍然制约着细胞特异性核酸适配体的进一步发展,如何高效地筛选获得核酸适配体是其应用的关键。本文总结了目前在cell-SELEX技术基础上发展起来的新方法、新策略及核酸适配体在肿瘤研究中的应用,望为相关科研人员的研究提供参考。

关键词：核酸适配体指数富集的配基系统进化技术(SELEX) 细胞筛选策略

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磁性纳米颗粒与脂质体介导REST-siRNA转染hADSCs的比较

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基础医学与临床 2013年第12期33卷 1549-1553页

作者：王瑞庞希宁施萍中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院全科医学教研室辽宁沈阳110001

目的对聚乙烯亚胺包被的磁纳米颗粒(PEI-SPIO)与脂质体(lipofectamineTM2000)作为基因载体转染人脂肪间充质干细胞(hADSCs)的可行性及转染后细胞的增殖、转染效率及基因瞬时干扰效率进行比较分析。方法分别将PEI-SPIO和lipofectamineTM2... 详细信息

目的对聚乙烯亚胺包被的磁纳米颗粒(PEI-SPIO)与脂质体(lipofectamineTM2000)作为基因载体转染人脂肪间充质干细胞(hADSCs)的可行性及转染后细胞的增殖、转染效率及基因瞬时干扰效率进行比较分析。方法分别将PEI-SPIO和lipofectamineTM2000作为基因载体连接REST-siRNA体外转染hADSCs,用MTT法检测hADSCs增殖和功能;用荧光显微镜观察转染效率;分别用Real-time PCR和Western blot检测REST的表达。结果用磁性纳米颗粒和脂质体作为基因载体转染细胞后,细胞成活率分别为99%和79%(P<0.05);磁纳米颗粒和脂质体的转染效率无差异,分别为75%和71%;磁纳米颗粒和脂质体作为基因载体时RNA表达量分别为(0.46±0.04)和(0.53±0.05),蛋白水平表达量分别为(0.501±0.006)和(0.523±0.004)。结论磁性纳米颗粒因其具有低细胞毒性可代替脂质体作为转染干细胞的基因载体。

关键词：磁性纳米颗粒聚乙烯亚胺脂质体脂肪间充质干细胞转染

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TGF-β/Smads信号传导通路与microRNA相互作用的研究进展

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基础医学与临床 2013年第11期33卷 1426-1429页

作者：赵峰庞希宁施萍中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院全科医学教研室辽宁沈阳110001

TGF-β/Smads信号传导通路与微小RNA之间具有广泛的相互作用。TGF-β/Smads信号传导通路在microRNA基因的表观遗传学、转录及转录后加工等过程都具有调控作用;而microRNA也从转录后水平抑制TGF-β/Smads信号传导通路的相关基因表达。二... 详细信息

TGF-β/Smads信号传导通路与微小RNA之间具有广泛的相互作用。TGF-β/Smads信号传导通路在microRNA基因的表观遗传学、转录及转录后加工等过程都具有调控作用;而microRNA也从转录后水平抑制TGF-β/Smads信号传导通路的相关基因表达。二者的相互关系与人类多种疾病包括组织纤维化、瘢痕愈合和肿瘤的发生发展密切相关。

关键词：转化生长因子β Smads 微小RNA 调控

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miR-194-5p在微流控芯片筛选的肺癌间质表型亚系的作用

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解剖科学进展 2019年第4期25卷 442-445,449页

作者：王洁于敏方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室生命科学学院细胞生物学教研室

目的分析肺癌间质表型亚系A3细胞中上皮间质转化(EMT)相关的miR-194-5p鉴定、分析及其靶基因功能富集的生物学过程和信号通路。方法使用微流控芯片筛选母系肺癌A549细胞获得间质表型亚系A3细胞,利用miRCURYTM芯片筛选差异性表达的miRNA... 详细信息

目的分析肺癌间质表型亚系A3细胞中上皮间质转化(EMT)相关的miR-194-5p鉴定、分析及其靶基因功能富集的生物学过程和信号通路。方法使用微流控芯片筛选母系肺癌A549细胞获得间质表型亚系A3细胞,利用miRCURYTM芯片筛选差异性表达的miRNA。利用MTT、Transwell实验检测miR-194-5p对亚系细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。应用Miranda、MiRBase、TargetScan数据库和DAVID在线软件对miR-194-5p进行靶基因预测及相关信号通路、生物学功能富集分析。结果成功筛选获得具有间质表型亚系A3细胞,与母系A549细胞相比,在A3亚系中miR-194-5p的表达水平显著下调,转染miR-194-5pmimics后细胞迁移和侵袭能力发生显著降低但增殖未受影响;转染miR-194-5pinhibitor后细胞的迁移和侵袭能力增强。miR-194-5p的48个靶基因主要在蛋白质结合等生物学过程中起作用,信号通路显著富集于TGF-β等EMT相关信号转导通路。结论从微流控芯片获得的间质表型细胞亚系成功筛选EMT相关miRNA,其中miR-194-5p抑制肺癌EMT进程,是潜在的治疗靶点。

关键词：上皮间质转化肺癌间质表型亚系生物信息学 miR-194 微流控芯片

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