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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：王春玉周婷婷孙洪邈邹仁龙孙士莹王胜利佟昌慈吴怡罗昊林琳高鹏焦娇赵越中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

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铅对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运体的影响

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环境与健康杂志 2014年第3期31卷 193-196,F0003页

作者：林琳廖英俊赵凤红王艳唐漫许亚婷王达金亚平中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室细胞生物学卫生部重点实验室中国医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室中国医科大学药学院临床药理学教研室

目的探讨铅暴露对星形胶质细胞（AS）中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1-3dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养，以胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色鉴定细胞纯度后，进行0（对照组）、50、100、200及400μmol... 详细信息

目的探讨铅暴露对星形胶质细胞（AS）中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1-3dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养，以胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色鉴定细胞纯度后，进行0（对照组）、50、100、200及400μmol／L乙酸铅染毒，染毒时间为72h。倒置显微镜下观察细胞形态并采集图像；以AlamarBlue法检测细胞活力；以Westernblot法检测GLAST和GLT-1蛋白的表达；以同位素标记法测定谷氨酸转运体功能。结果50和100μmol／L铅暴露组的细胞形态与对照组相比，未见明显改变；200μmol／L铅暴露72h后，少量细胞开始脱壁，细胞间隙增大；400μmol／L铅暴露组细胞变大，突起变短或消失，脱壁细胞数量明显增多。与对照组相比，各浓度铅暴露组的AS活力均降低（P〈0．05），100、200和400μmol／L铅暴露组的GLT-1蛋白含量下降（P〈0．05），但各浓度铅暴露组的GLAST蛋白含量无显著改变。100、200和400μmol／L铅暴露组的3FI—Glu放射性低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论铅暴露可明显抑制AS中GLT-1蛋白的表达，并导致AS的Glu转运体功能下降。

关键词：星形胶质细胞铅谷氨酸谷氨酸转运体-1

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E3泛素连接酶在妇科肿瘤中的研究进展

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解剖科学进展 2020年第4期26卷 471-474页

作者：苏英杰芦恩婷高晨曦李波张颐中国医科大学附属第一医院妇科沈阳110001 中国医科大学生命科学学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122

泛素-蛋白酶体系统异常与许多肿瘤的发生和发展有关。E3泛素连接酶是泛素-蛋白酶体降解过程中重要的组成成分,其种类繁多、功能强大并可受到广泛的调控。近年来研究显示,E3泛素连接酶与恶性肿瘤患者的预后密切相关,并且在不同肿瘤中发... 详细信息

泛素-蛋白酶体系统异常与许多肿瘤的发生和发展有关。E3泛素连接酶是泛素-蛋白酶体降解过程中重要的组成成分,其种类繁多、功能强大并可受到广泛的调控。近年来研究显示,E3泛素连接酶与恶性肿瘤患者的预后密切相关,并且在不同肿瘤中发挥不同的作用。本文总结了E3泛素连接酶在妇科肿瘤中的研究进展,为未来解析肿瘤的分子机制以及靶向药物的研制提供科学依据。

关键词：妇科肿瘤靶向药物恶性肿瘤患者分子机制泛素-蛋白酶体系统降解过程研究进展

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大鼠海马内注射β淀粉样蛋白促进神经细胞增殖

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解剖科学进展 2008年第2期14卷 119-122页

作者：郭大文马怡然方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,AB)沉积对神经细胞增殖的影响。方法将Aβ_(1-42)定位注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。腹腔注射Brdu标记增殖细胞。用免疫组化和免疫荧光检测溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,B... 详细信息

目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,AB)沉积对神经细胞增殖的影响。方法将Aβ_(1-42)定位注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。腹腔注射Brdu标记增殖细胞。用免疫组化和免疫荧光检测溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,Brdu)标记细胞和doublecortin(DCX)阳性细胞。结果海马内注射Aβ_(1- 42)后引起海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)和侧脑室下层(subventricular zone,SVZ)Brdu标记细胞及DCX阳性细胞显著增加(P<0.01)。双免疫荧光分析表明许多Brdu标记细胞表达DCX。结论Aβ沉积可以促进脑内的神经细胞增殖,提示这种现象可能为阿尔茨海默病的一种代偿性应答。促进神经细胞增殖的措施对于治疗阿尔茨海默病具有重要的价值。

关键词： β淀粉样蛋白神经细胞增殖阿尔茨海默病

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巨噬细胞炎症因子1α对人脑微血管内皮细胞通透性的影响

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解剖科学进展 2007年第4期13卷 330-333,337页

作者：尚德淑马怡然赵伟东方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋... 详细信息

目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋化因子受体5(CCR5)的表达,以及MIP-1α中和抗体和分泌MIP-1α的模式细胞(6T-CEM)与HBMEC单层共同温育时ZO-1的分布变化。结果MIP-1α作用下,HBMEC单层紧密连接结构被破坏,通透性增加,引起HBMEC细胞CCR5受体的表达,MIP-1α中和抗体阻断6T-CEM细胞对HBMEC单层ZO-1分布的改变。结论MIP-1α可能通过CCR5改变HBMEC单层通透性促进T淋巴细胞穿过血脑屏障。

关键词：巨噬细胞炎症因子1α 人脑微血管内皮细胞血脑屏障

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脂质激酶AGK对胃癌细胞SGC-7901迁移和侵袭的影响及其分子机制

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解剖科学进展 2023年第5期29卷 449-451页

作者：朱琳宁可李丰李妍中国医科大学生命科学学院分子细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的研究脂质激酶AGK对人胃癌细胞SGC-7901迁移和侵袭能力的影响及探索潜在的分子机制。方法培养胃癌细胞SGC-7901,用HiGene试剂转染AGK质粒,验证转染效率后,用划痕实验检测细胞迁移能力,应用Transwell小室检测侵袭迁移能力。Western b... 详细信息

目的研究脂质激酶AGK对人胃癌细胞SGC-7901迁移和侵袭能力的影响及探索潜在的分子机制。方法培养胃癌细胞SGC-7901,用HiGene试剂转染AGK质粒,验证转染效率后,用划痕实验检测细胞迁移能力,应用Transwell小室检测侵袭迁移能力。Western blot检测过表达AGK后,SGC-7901细胞系中基质金属蛋白酶(MMP2/9)表达含量的变化。结果过表达AGK能够促进人胃癌细胞SGC-7901的迁移和侵袭能力。Western blot结果显示AGK的过表达能够上调胃癌细胞SGC-7901中的MMP2/9的蛋白表达水平。结论AGK上调胃癌细胞SGC-7901中MMP2/9的表达水平,促进胃癌细胞SGC-7901迁移和侵袭。

关键词：胃癌 AGK 迁移侵袭

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小胶质细胞和外周血T细胞对大鼠海马内β-淀粉样蛋白沉积的应答反应

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解剖科学进展 2006年第3期12卷 196-198,201,i0001页

作者：郭大文马怡然方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的观察海马内β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障及脑内小胶质活化的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42合成肽注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后7天,用免疫荧光和免疫组织... 详细信息

目的观察海马内β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障及脑内小胶质活化的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42合成肽注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后7天,用免疫荧光和免疫组织化学法检测CD3、CD11b及MHCⅡ类分子的表达。结果海马内注射Aβ1-42后7天大脑皮质深部和海马区出现大量CD3阳性T细胞,比对照组明显增多(P<0.01);CD11b和MHCⅡ类分子阳性小胶质细胞数量也显著高于对照组(P<0.01),表现为明显激活状态。结论大鼠海马内Aβ沉积引起外周血T细胞穿过血脑屏障进入脑内增多,并影响了小胶质细胞增生、活化。

关键词：阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白小胶质细胞 T细胞血脑屏障

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CXCL1促进阿尔茨海默病人外周血单核细胞跨内皮迁移

CXCL1促进阿尔茨海默病人外周血单核细胞跨内皮迁移

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细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉

作者：张可田力刘丽冯昱董言斌李波尚德淑方文刚曹云鹏陈誉华中国医科大学细胞生物学系发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室中国医科大学附属第一医院神经内科

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种以进行性痴呆为主要特征的神经元退行性疾病。单核细胞来源的骨髓源性小胶质细胞在限制AD发病的进程有一定的作用。然而,单核细胞如何穿过主要由脑微血管内皮细胞组成的血脑屏障(BBB)进... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种以进行性痴呆为主要特征的神经元退行性疾病。单核细胞来源的骨髓源性小胶质细胞在限制AD发病的进程有一定的作用。然而,单核细胞如何穿过主要由脑微血管内皮细胞组成的血脑屏障(BBB)进入中枢神经系统,目前尚不清楚。我们的研究发现,AD病人外周血单核细胞高表达趋化因子CXCL1,Aβ诱导AD病人单核细胞和CXCL1过表达的THP-1细胞穿过BBB体外模型——人脑微血管内皮细胞(HBMEC)

关键词：阿尔茨海默病淀粉样蛋白-β 单核细胞 CXCL1 脑微血管内皮细胞

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DDX5通过上皮-间质转化促进人乳腺癌细胞侵袭

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解剖科学进展 2023年第5期29卷 459-461,466页

作者：韩馥伊邢瑶李洋李丰中国医科大学生命科学学院分子细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的探究DEAD box RNA解旋酶-5(DEAD-box helicase 5,DDX5)蛋白对乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移作用的影响及其机制。方法利用慢病毒感染法,构建过表达Flag-DDX5的人乳腺癌MCF-7稳转细胞系,划痕实验和Transwell实验检测DDX5蛋白过表达后对乳... 详细信息

目的探究DEAD box RNA解旋酶-5(DEAD-box helicase 5,DDX5)蛋白对乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移作用的影响及其机制。方法利用慢病毒感染法,构建过表达Flag-DDX5的人乳腺癌MCF-7稳转细胞系,划痕实验和Transwell实验检测DDX5蛋白过表达后对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响;Western blot实验检测上皮-间质转化(EMT)标志物上皮-钙黏蛋白(E-cadherin),纤维连接蛋白(Fibronectin),波形蛋白(Vimentin)的表达。结果成功构建了稳定过表达DDX5的乳腺癌MCF-7稳转细胞系;DDX5蛋白过表达后,乳腺癌细胞迁移和侵袭能力明显增强,乳腺癌细胞E-cadherin的表达明显下调,Fibronectin与Vimentin的表达明显上调。结论DDX5可能参与乳腺肿瘤细胞EMT过程,促进乳腺癌的恶性转移,进而影响乳腺癌的进程。

关键词：乳腺癌 DEAD box RNA解旋酶-5 上皮-间质转化侵袭转移

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骨髓、羊膜和脂肪来源的间充质干细胞治疗皮肤创伤效果的比较

骨髓、羊膜和脂肪来源的间充质干细胞治疗皮肤创伤效果的比较

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第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会

作者：刘晓玉庞希宁教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学干细胞与再生医学研究室辽宁沈阳110001

目的：比较入骨髓间充质干细胞(hBMSC)、羊膜间充质干细胞(hAMSC)和脂肪间充质干细胞(hADSC)皮下移植对小鼠皮肤损伤模型愈合的促进作用,为临床皮肤损伤后功能性修复提供更有效的治疗方法.方法：体外培养扩增hBMSC,hAMSC,hADSC,取36只... 详细信息

目的：比较入骨髓间充质干细胞(hBMSC)、羊膜间充质干细胞(hAMSC)和脂肪间充质干细胞(hADSC)皮下移植对小鼠皮肤损伤模型愈合的促进作用,为临床皮肤损伤后功能性修复提供更有效的治疗方法.方法：体外培养扩增hBMSC,hAMSC,hADSC,取36只小鼠制作皮肤损伤模型,并随机分为hBMSC移植组,hAMSC移植组,hADSC移植组,和盐水移植组.分别于伤后3,7,10,14天采用创面大体观察、组织学检查方法观察创面愈合情况.体外实验通过transwell小室将hBMSC,hAMSC,hADSC分别与人皮肤成纤维细胞(hFB)共培养,检测各组成纤维细胞的增殖,迁移,趋化,胶原合成,和生长因子VEGF,KGF,bFGF,TGF-β的分泌情况,探讨其促进创面愈合的机制.结果：创伤后3d开始,各组创面逐渐缩小,脂肪间充质干细胞治疗组最为明显,差异有显著性意义(P＜0.05),组织学检查显示,脂肪间充质干细胞治疗组重上皮化明显.体外实验,各组成纤维细胞增殖无显著性差异,脂肪间充质干细胞组迁移,趋化,胶原合成,生长因子分泌明显优于其它组,差异有显著性意义(P＜0.05).结论：脂肪间充质干细胞是治疗皮肤损伤更理想的种子细胞.

关键词：间充质干细胞表皮成纤维细胞皮肤损伤修复

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