检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2013年第28期17卷 5191-5197页

作者：张殿宝王哲施萍庞希宁中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室干细胞与再生医学研究室辽宁省沈阳市110001 中国医科大学附属盛京医院输血科辽宁省沈阳市110004 中国医科大学附属第一医院全科医学教研室辽宁省沈阳市110001

背景:细胞密度是影响细胞分化状态的因素之一,对于细胞密度在转化生长因子β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化中的作用尚缺乏深入研究。目的:观察细胞密度对转化生长因子β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化的影响。方法:将HaCaT细胞分别以低密... 详细信息

背景:细胞密度是影响细胞分化状态的因素之一,对于细胞密度在转化生长因子β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化中的作用尚缺乏深入研究。目的:观察细胞密度对转化生长因子β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化的影响。方法:将HaCaT细胞分别以低密度103/cm2和高密度105/cm2接种于六孔板,使用2μg/L的转化生长因子β1作用48h,观察细胞形态变化,应用Realtime PCR检测上皮型钙黏蛋白、紧密连接蛋白1和波形蛋白、神经型钙黏蛋白的转录水平,Western blot检测上皮型钙黏蛋白和波形蛋白表达水平。结果与结论:低密度组的HaCaT细胞在转化生长因子β1处理48h后细胞间隙变大,细胞形态由多角形变为长梭形,高密度组的细胞间隙变大,但形态变化不明显;Realtime PCR结果显示两组上皮细胞标志物上皮型钙黏蛋白和紧密连接蛋白1的转录均较对照组明显下调(P<0.05),但高密度组没有低密度组下调明显(P<0.05),间充质细胞标志物神经型钙黏蛋白和波形蛋白的转录均较对照组明显上调(P<0.05),而高密度组与低密度组间差异无显著性意义;Western blot进一步验证了上述上皮型钙黏蛋白和波形蛋白的变化。说明高接种密度抑制转化生长因子β1诱导HaCaT细胞上皮间充质转化。

关键词：组织构建组织构建与生物活性因子转化生长因子β1 HaCaT细胞生物活性因子细胞密度上皮间充质转化 973项目

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体外激酶实验筛选p21活化激酶6对雄激素受体的磷酸化位点

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解剖学研究 2013年第3期35卷 161-164页

作者：刘彤李洋耿楠希李丰中国医科大学基础医学院细胞生物教研室//教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的构建雄激素受体(AR)的点突变原核表达质粒,以体外激酶实验分析筛选p21活化激酶6(PAK6)对雄激素受体的磷酸化位点,更好的研究PAK6对AR的磷酸化所发挥的生物学功能。方法利用体外激酶实验分析PAK6对AR的较小磷酸化区域,并利用重叠延伸... 详细信息

目的构建雄激素受体(AR)的点突变原核表达质粒,以体外激酶实验分析筛选p21活化激酶6(PAK6)对雄激素受体的磷酸化位点,更好的研究PAK6对AR的磷酸化所发挥的生物学功能。方法利用体外激酶实验分析PAK6对AR的较小磷酸化区域,并利用重叠延伸PCR的方法构建可能的磷酸化定点突变体;然后,体外纯化带有GST标签的突变体蛋白,及体外激酶实验筛选PAK6对AR的磷酸化位点。结果证明质粒构建成功,构建雄激素受体定点突变体,确定PAK6磷酸化雄激素受体位点。结论成功筛选PAK6对AR的磷酸化位点是578位丝氨酸。

关键词：体外激酶实验 p21活化激酶6 雄激素变体定点突变体磷酸化

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人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定

人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定

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第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议

作者：陈航方瑾中国医科大学基础医学院细胞生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室

为获得大肠癌的特异性抗原基因,构建人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库。从2株人大肠癌细胞CCL=187和CX=1中提取总RNA,分离纯化mRNA,并以此为模板合成第1链cDNA,用置换法合成第2链cDNA。双链cDNA经末端削平、EcoRⅠ接头连接、XhoⅠ... 详细信息

为获得大肠癌的特异性抗原基因,构建人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库。从2株人大肠癌细胞CCL=187和CX=1中提取总RNA,分离纯化mRNA,并以此为模板合成第1链cDNA,用置换法合成第2链cDNA。双链cDNA经末端削平、EcoRⅠ接头连接、XhoⅠ酶切、过柱分

关键词：人大肠癌噬菌体 cDNA 表达文库

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毒力岛基因ibeT在大肠杆菌逃逸宿主细胞溶酶体中的作用

毒力岛基因ibeT在大肠杆菌逃逸宿主细胞溶酶体中的作用

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第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议

作者：张可赵伟东李强方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

新生儿细菌性脑膜炎是儿科严重感染性疾病之一,临床上尽管可以选用相应的抗生素治疗,但是病死率仍然得不到显著的改善。大肠杆菌是导致新生儿脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌。我们在先前的研究中,从致新生儿脑膜炎大肠杆菌K1株RS218(O1... 详细信息

新生儿细菌性脑膜炎是儿科严重感染性疾病之一,临床上尽管可以选用相应的抗生素治疗,但是病死率仍然得不到显著的改善。大肠杆菌是导致新生儿脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌。我们在先前的研究中,从致新生儿脑膜炎大肠杆菌K1株RS218(O18:K1:H7)中克隆鉴定了

关键词： ibeT大肠杆菌K1株宿主细胞溶酶体逃逸

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小细胞肺癌细胞诱发人脑微血管内皮细胞紧密连接的开放

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解剖科学进展 2009年第2期15卷 183-187,191页

作者：赵晓云李波曹立业方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院微生物和细胞生物学教研室沈阳110016

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌... 详细信息

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌细胞与微血管内皮细胞单层共培养时紧密连接蛋白occludin的可溶性片段和不可溶性片段在内皮细胞紧密连接处的分布情况;应用跨内皮迁移实验及辣根过氧化物酶渗漏实验分析小细胞肺癌细胞与内皮细胞单层共培养后其跨内皮细胞单层的迁移能力和内皮单层渗透性的改变;利用ROCK特异性抑制剂Y27632,分析Rho/ROCK信号通路是否参与小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结果小细胞肺癌细胞能够通过人脑微血管内皮细胞单层迁移,在0h到12h之间随培养时间的延长小细胞肺癌细胞的迁移率逐渐增加;共培养8h时人脑微血管内皮细胞紧密连接处紧密连接结构蛋白(ZO-1和occludin)表达减少,通透性明显增加;ROCK特异性抑制剂Y27632能够阻断小细胞肺癌细胞引起的内皮细胞间紧密连接处紧密连接结构蛋白ZO-1和occludin表达减少、内皮单层通透性的增加及小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结论小细胞肺癌细胞与人脑微血管内皮细胞单层共培养诱发人脑微血管内皮细胞间紧密连接的开放,利于小细胞肺癌细胞的跨内皮单层迁移。

关键词：小细胞肺癌细胞人脑微血管内皮细胞共培养紧密连接

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小鼠胚胎肺Smad1互作蛋白p72的筛选鉴定及其功能的初步分析

小鼠胚胎肺Smad1互作蛋白p72的筛选鉴定及其功能的初步分析

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第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议

作者：宋春阳潘逼然陈誉华陈澄中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

肺是重要的呼吸器官,新生儿只有具有发育成熟的肺才能健康存活。在肺发育的过程中先形成构筑复杂的气道系统,随后末梢肺组织分化形成具有完善功能的气体交换面。BMP4-Smad1信号通路在这两个过程中都发挥重要的调控作用。此前的研究发现... 详细信息

肺是重要的呼吸器官,新生儿只有具有发育成熟的肺才能健康存活。在肺发育的过程中先形成构筑复杂的气道系统,随后末梢肺组织分化形成具有完善功能的气体交换面。BMP4-Smad1信号通路在这两个过程中都发挥重要的调控作用。此前的研究发现,敲除发

关键词：肺发育 Smad1 BMP4

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P190蛋白在*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞中的作用

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第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议

作者：刘东鑫赵伟东方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌K1株(Escherichia coli K1,*** K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMECs)是其跨越血脑屏障播散入脑的关键步骤。*** K1的IbeB基因是与*** K1侵袭HBMECs、穿过血脑屏障相关的

关键词：大肠杆菌 P190 信号转导人脑微血管内皮细胞

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坂崎肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞的机制研究

坂崎肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞的机制研究

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第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议

作者：李强赵伟东陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)为肠杆菌科、肠杆菌属的革兰阴性杆菌。报告表明婴儿配方奶粉是坂崎肠杆菌的主要传播媒介,感染后可导致新生儿出现脑膜炎、败血病等,但是目前对于坂崎肠杆菌导致新生儿脑膜炎的机制尚不清楚。我们以... 详细信息

坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)为肠杆菌科、肠杆菌属的革兰阴性杆菌。报告表明婴儿配方奶粉是坂崎肠杆菌的主要传播媒介,感染后可导致新生儿出现脑膜炎、败血病等,但是目前对于坂崎肠杆菌导致新生儿脑膜炎的机制尚不清楚。我们以人脑微血管内皮细胞(Human

关键词：坂崎肠杆菌人脑微血管内皮细胞微丝

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Flt-1受体在*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞过程中的作用

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第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议

作者：刘巍赵伟东方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌K1株(Escherichia coli K1,*** K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)是其跨越血脑屏障播散入脑致病的关键步骤。我们前期工作发现PI3K是参与*** K1侵袭HBMEC的重要信号分子并... 详细信息

大肠杆菌K1株(Escherichia coli K1,*** K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)是其跨越血脑屏障播散入脑致病的关键步骤。我们前期工作发现PI3K是参与*** K1侵袭HBMEC的重要信号分子并证明Src激酶是*** K1侵袭HBMEC过程中PI3K的上游分子。最近发现在*** K1

关键词： Flt-1 Src 大肠杆菌K1株人脑微血管内皮细胞

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末梢肺组织分化调控中p22功能的初步分析

末梢肺组织分化调控中p22功能的初步分析

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：陈澄宋春阳潘逼然陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

肺是重要的呼吸器官,新生儿只有具有发育成熟的肺才能健康存活。Ⅱ型肺泡上皮细胞是维持末梢肺组织功能的重要细胞,其分化状态受到严格调控。其中p22是一种染色质结合蛋白,人类同一蛋白家族的成员为核基质蛋白,分裂期为染色体支架蛋白,... 详细信息

肺是重要的呼吸器官,新生儿只有具有发育成熟的肺才能健康存活。Ⅱ型肺泡上皮细胞是维持末梢肺组织功能的重要细胞,其分化状态受到严格调控。其中p22是一种染色质结合蛋白,人类同一蛋白家族的成员为核基质蛋白,分裂期为染色体支架蛋白,但也存在于细胞质中,具有参与多泡体形成调控等多种功能,其在末梢肺组织分化成熟中的作用尚未见报道。我们的研究发现p22可能与末梢肺组织分化成熟相关,在末梢肺组织分化成熟的高峰时期p22表达水平明显升高,MLE12细胞过表达p22能促进SPC基因的表达升高。我们还发现p22的C末端93AA-199AA与TGFβ/BMP信号通路的细胞内信号分子Smad1互作,免疫荧光实验显示二者可在胞质与胞核中共定位,免疫共沉淀试验和Pull-down试验均证实了二者的互作。Smad1作为TGFβ/BMP信号通路的细胞内信号分子在肺分枝化形态发生及末梢肺组织分化两个过程中都发挥重要的调控作用,敲除发育过程中小鼠胚胎肺上皮组织中的Smad1导致末梢肺组织中Ⅱ型肺泡上皮细胞分化不良,末梢肺组织结构发生改变,新生鼠死于呼吸障碍。p22与smad1互作可能在Ⅱ型肺泡上皮细胞分化状态调控中起重要作用。

关键词：肺发育 Ⅱ型肺泡上皮细胞 BMP4

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