检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2013年第4期19卷 351-353,357页

作者：毛琪朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室辽宁沈阳110001 中国医科大学心血管研究所辽宁沈阳110001

目的构建pEGFP-N1-TFF3融合蛋白表达载体,并检测其在非洲绿猴肾成纤维细胞(COS7细胞)内的表达和定位。方法提取HT29细胞的mRNA,反转录为cDNA;以此为模板PCR扩增hTFF3(286bp-462bp)基因;通过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点将hTFF3基因定向插入... 详细信息

目的构建pEGFP-N1-TFF3融合蛋白表达载体,并检测其在非洲绿猴肾成纤维细胞(COS7细胞)内的表达和定位。方法提取HT29细胞的mRNA,反转录为cDNA;以此为模板PCR扩增hTFF3(286bp-462bp)基因;通过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点将hTFF3基因定向插入真核表达载体pEGFP-N1中;将构建的重组质粒测序成功后,转染至人肾细胞(HEK293细胞)中,荧光显微镜观察GFP-TFF3融合蛋白的表达,并提取蛋白进行Western Blot检测;利用激光扫描共聚焦显微镜观察GFP-TFF3融合蛋白在COS7细胞内的定位情况。结果酶切及测序结果证明hTFF3基因成功克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,Western Blot检测结果显示其融合蛋白分子量约为34kDa,激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示GFP-TFF3融合蛋白在COS7细胞内定位以细胞核为主,在细胞质内少量表达。结论成功构建了pEGFP-N1-TFF3真核表达载体,GFP-TFF3蛋白定位于COS7的细胞核和细胞质中。

关键词： hTFF3 融合蛋白非洲绿猴肾成纤维细胞(COS 7细胞) HEK293细胞 Ht29细胞

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MiR-21下调SPRY2表达对多发性骨髓瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制研究

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现代肿瘤医学 2015年第2期23卷 157-162页

作者：王金行丁奇周雯雯刘柏新刘芙蓉宋鉴清中国医科大学附属第一医院检验科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:探讨miR-21下调SPRY2基因表达在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发生发展以及转移过程中的作用。方法:构建miR-21表达载体LV-anti-miR-21及脂质体转染法筛选稳定沉默SPRY2的MM细胞系。应用实时定量PCR和Western blot检测miR-21... 详细信息

目的:探讨miR-21下调SPRY2基因表达在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发生发展以及转移过程中的作用。方法:构建miR-21表达载体LV-anti-miR-21及脂质体转染法筛选稳定沉默SPRY2的MM细胞系。应用实时定量PCR和Western blot检测miR-21表达和SPRY2蛋白表达水平。四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞周期;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果:实时定量PCR及Western blot检测结果表明:转染U266细胞后,U266/LV-anti-miR-21慢病毒MOI 20组和MOI 40组miR-21表达量较U266/un组差异明显下降(P<0.05);转染miR-21 mimics组的U266细胞SPRY2的蛋白表达量较无转染组(untreated)和阴性对照组(siRNA)明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与无转染组、阴性对照组相比:MTT法显示转染组48、72、96h细胞的生长速度明显减慢,增殖率明显下降(P<0.01);流式细胞术表明miR-21 mimics转染U266细胞48、72h后,细胞凋亡率分别为U266组[(24.7±1.97)%、(38.6±1.56)%]、siRNA组[(27.3±1.72)%、(37.3±1.59)%]和U266/miR-21组[(12.7±1.27)%、(22.1±1.63)%],与两对照组比较,U266/miR-21组细胞凋亡率明显降低,G0/G1期细胞明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验显示转染组24、48h细胞迁移的能力明显减弱(P<0.05);Transwell实验证实转染组48、72h细胞穿过聚磷酸酯膜的U266细胞数明显减少,细胞穿膜能力明显降低(P<0.05)。结论:MiR-21下调SPRY2基因表达能够在体外条件下促进MM细胞的增殖和侵袭作用,揭示其在MM的发生、发展及转移过程中的作用及可能的机制,为确立新分子靶向治疗提供可靠的研究依据。

关键词：多发性骨髓瘤 miR-21 SPRY2 增殖侵袭

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小鼠胚胎干细胞中外源性ibeB基因靶蛋白的筛选及分析鉴定

小鼠胚胎干细胞中外源性ibeB基因靶蛋白的筛选及分析鉴定

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第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议

作者：尚德淑姜静宜方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌ibeB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞相关的基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用。前期研究发现ibeB基因稳定转染的鼠胚胎干细胞(ES)AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子-nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生... 详细信息

大肠杆菌ibeB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞相关的基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用。前期研究发现ibeB基因稳定转染的鼠胚胎干细胞(ES)AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子-nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生长端样结构。

关键词： ibeB ES细胞神经分化 Cathepsin A

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应用高通量测序技术检测一个Ⅰ型神经纤维瘤病家系基因突变

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解剖科学进展 2016年第6期22卷 579-582页

作者：陈晨曹丽华胡睿王宇王述森罗阳中国医科大学医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122

目的对1个I型神经纤维瘤病家系进行基因突变检测,为该家系成员提供遗传咨询并指导产前诊断。方法利用目标基因捕获和新一代高通量测序技术,对家系内1名症状典型患者N F 1基因编码区及其临近序列进行突变检测,对发现的可疑位点进行Sange... 详细信息

目的对1个I型神经纤维瘤病家系进行基因突变检测,为该家系成员提供遗传咨询并指导产前诊断。方法利用目标基因捕获和新一代高通量测序技术,对家系内1名症状典型患者N F 1基因编码区及其临近序列进行突变检测,对发现的可疑位点进行Sanger测序验证,并在家系内成员中验证所检测到的变异是否在家系内共分离。结果在该家系中,发现N F 1基因第18外显子存在一个微小插入突变c.2033dupC(***678Thrfs*22),进一步检测表明该突变在家系内与疾病表型共分离。结论 N F 1基因c.2033dupC突变是该家系的致病突变,针对致病基因编码外显子较多的遗传性疾病的检测,高通量测序技术具有显著优势。

关键词：神经纤维瘤病 NF1 基因突变高通量测序技术

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人大肠癌单克隆抗体的临床应用研究

人大肠癌单克隆抗体的临床应用研究

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：冯慧曾艳伊德林刘芙蓉方瑾宋今丹沈阳医学院生物化学教研室沈阳医学院生物化学教研室沈阳医学院生物化学教研室中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室

大肠癌是严重威胁人类健康的一种疾病。我国的大肠癌发病率已上升到第3位。一般认为,结肠腺瘤是一种癌前病变,自腺瘤演变成癌的时间约为10～15年。早期大肠癌是可以治愈的,预后较好,五年生存率为91％,而晚期仅为7％。然而早期大肠癌缺... 详细信息

大肠癌是严重威胁人类健康的一种疾病。我国的大肠癌发病率已上升到第3位。一般认为,结肠腺瘤是一种癌前病变,自腺瘤演变成癌的时间约为10～15年。早期大肠癌是可以治愈的,预后较好,五年生存率为91％,而晚期仅为7％。然而早期大肠癌缺乏特异性,临床表现往往无症状或症状不典型,易

关键词：大肠癌单克隆抗体诊断

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糖尿病肾病患者尿微量清蛋白与肌酐比值的相关因素研究

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中国全科医学 2011年第6期14卷 598-600,604页

作者：高阳陈思娇杨红艳李红燕朱贺郭英华宋今丹中国医科大学附属第一医院干部医疗工作部老年医学研究室辽宁省沈阳市110001 沈阳军区总医院心内科中国医科大学医学分子生物学研究所卫生部教育部医学细胞生物学重点实验室

目的分析糖尿病肾病（DN）患者尿微量清蛋白与肌酐的比值（album in to creatinine ratio,ACR）的相关因素,以早期预防和指导DN的临床治疗。方法选取在中国医科大学附属第一医院干部病房和体检中心收治的2型糖尿病患者238例,同步测定尿... 详细信息

目的分析糖尿病肾病（DN）患者尿微量清蛋白与肌酐的比值（album in to creatinine ratio,ACR）的相关因素,以早期预防和指导DN的临床治疗。方法选取在中国医科大学附属第一医院干部病房和体检中心收治的2型糖尿病患者238例,同步测定尿微量清蛋白和尿肌酐,按ACR分为3组：糖尿病无肾病组（正常清蛋白尿组）,男性41例ACR〈22 mg/g,女性49例ACR〈31 mg/g;早期糖尿病肾病组（微量清蛋白尿组）男性32例：ACR 22~220mg/g,女性41例：ACR 31~220 mg/g;临床糖尿病肾病组（大量清蛋白尿组）男性33例、女性42例,ACR〉220mg/g。所有受检者分别记录年龄、性别、糖尿病病程,检测身高、体质量、血压、血脂〔三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）〕、血糖〔空腹血糖（FBG）、餐后血糖（PBG）〕、糖化血红蛋白（HbA1c）、肾功能（血肌酐、尿素氮）、血尿酸、血浆纤维蛋白原（FIB）、尿微量清蛋白及尿肌酐,计算ACR并做比较。结果 3组患者的ACR、FBG、PBG、血尿酸、FIB、TG、HbA1c、糖尿病病程比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;而TC、HDL-C、LDL-C、血肌酐、尿素氮比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。Logis-tic回归分析显示,糖尿病病程、HbA1c、TG、FIB、血尿酸被纳入回归方程,与ACR呈正相关（P〈0.05）。结论 2型糖尿病患者的糖尿病病程、HbA1c、TG、FIB、血尿酸与ACR呈正相关。

关键词：糖尿病,2型糖尿病肾病尿微量清蛋白与肌酐比值相关因素

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环境污染物PFOS可致人脑微血管内皮细胞骨架蛋白改变

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辽宁大学学报（自然科学版） 2011年第3期38卷 225-228页

作者：王昕陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物教研室教育部卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:探讨全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)引起的人脑微血管内皮细胞(HBMEC)骨架蛋白(F-actin)排列变化.方法:培养正常的人脑毛细血管内皮细胞,不同浓度PFOS作用30分钟,利用免疫荧光染色的方法检测细胞骨架蛋白F-actin的变化.结果:PFOS可使... 详细信息

目的:探讨全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)引起的人脑微血管内皮细胞(HBMEC)骨架蛋白(F-actin)排列变化.方法:培养正常的人脑毛细血管内皮细胞,不同浓度PFOS作用30分钟,利用免疫荧光染色的方法检测细胞骨架蛋白F-actin的变化.结果:PFOS可使细胞骨架蛋白F-actin发生重排,这与PFOS的浓度有关.

关键词：全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS) 人脑微血管内皮细胞(HBMEC) 骨架蛋白(F-actin)

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聚乙烯亚胺包被的Fe3O4磁纳米颗粒对hADSCs生物学特性的影响

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基础医学与临床 2013年第11期33卷 1398-1403页

作者：王瑞刘晓玉庞希宁施萍中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室中国医科大学附属第一医院全科医学教研室

目的:探讨聚乙烯亚胺(PEI)包被的超顺磁性氧化铁(SPIO)对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)生物学特性的影响。方法:从人皮下脂肪组织中分离、培养hADSCs并鉴定,选取第3代hADSCs,分别用含铁浓度为6、8、10和12mg/L的DMEM/F12培养液共孵育。通... 详细信息

目的:探讨聚乙烯亚胺(PEI)包被的超顺磁性氧化铁(SPIO)对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)生物学特性的影响。方法:从人皮下脂肪组织中分离、培养hADSCs并鉴定,选取第3代hADSCs,分别用含铁浓度为6、8、10和12mg/L的DMEM/F12培养液共孵育。通过普鲁士蓝染色、MTT细胞增殖实验、锥虫蓝染色及多向分化诱导实验来探讨***标记后,hADSCs的标记能力、细胞增殖和分化能力。结果:1)当铁终浓度为8、10和12mg/L时,PEI-SPIO对hADSCs的标记率为99%,当铁终浓度<8mg/L时,PEI-SPIO对hADSCs的标记率为96%。2)当铁终浓度为6和8mg/L时,PEI-SPIO标记的hADSCs的活细胞比率为99%,而当铁终浓度为10和12mg/L时,活细胞比率为(79.03±2.25)%和(70.23±1.36)%,显著低于对照组(P<0.01)。3)当铁浓度为10和12mg/L时,在诱导hADSCs分化过程中,细胞绝大多数死亡。结论:铁浓度8mg/L为PEI-SPIO标记的最适宜浓度,既能高效的标记hADSCs,又不影响hADSCs的细胞增殖、多向分化能力等生物学特性。

关键词：聚乙烯亚胺染色与标记铁细胞增殖间充质基质细胞/细胞学脂肪组织/细胞学纳米粒子细胞培养的人类

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乳腺癌细胞系中雌激素下调E-钙粘蛋白表达水平

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解剖科学进展 2012年第1期18卷 15-17,21页

作者：张红艳李彦姝王春玉王迪柯强李丰中国医科大学细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室辽宁沈阳110001 杭州师范大学临床医学院附属医院检验科

目的观察雌激素(E2)对乳腺癌MCF7细胞中E-钙粘蛋白基因(CDH)的调控。方法使用Western blot、Real Time PCR分别在蛋白和RNA水平上观察雌激素如何影响E-钙粘蛋白。使用双荧光素酶报告系统检测雌激素如何影响E-钙粘蛋白启动子活性。结果... 详细信息

目的观察雌激素(E2)对乳腺癌MCF7细胞中E-钙粘蛋白基因(CDH)的调控。方法使用Western blot、Real Time PCR分别在蛋白和RNA水平上观察雌激素如何影响E-钙粘蛋白。使用双荧光素酶报告系统检测雌激素如何影响E-钙粘蛋白启动子活性。结果雌激素下调乳腺癌MCF7细胞中E-钙粘蛋白的蛋白和RNA水平,并且能够下调E-钙粘蛋白的启动子活性。结论雌激素下调乳腺癌细胞中E-钙粘蛋白基因,为进一步探讨乳腺癌发病机制提供有力证据。

关键词：雌激素 E-钙粘蛋白乳腺癌MCF7细胞

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环境污染物PFOS可引起大鼠海马干细胞的增殖

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辽宁大学学报（自然科学版） 2010年第4期37卷 294-297页

作者：王昕陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:观察全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)大鼠海马干细胞增殖情况.方法:利用大鼠腹腔内连续注射不同剂量的PFOS 14天,建立动物模型.以Brdu作标记物,利用免疫组织化学染色的方法检测不同剂量PFOS作用下大鼠海马干细胞增殖情况.结果:以Brdu... 详细信息

目的:观察全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)大鼠海马干细胞增殖情况.方法:利用大鼠腹腔内连续注射不同剂量的PFOS 14天,建立动物模型.以Brdu作标记物,利用免疫组织化学染色的方法检测不同剂量PFOS作用下大鼠海马干细胞增殖情况.结果:以Brdu作标记物,高剂量PFOS作用下大鼠海马内可检测到大量阳性细胞存在,对照组和低剂量PFOS作用下无此阳性结果产生.结论:推测PFOS可引起大鼠海马干细胞的增殖.

关键词：全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS) 大鼠海马干细胞增殖

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