检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2021年第4期27卷 385-388,392页

作者：苏英杰曾凯赵越张颐中国医科大学附属第一医院妇科辽宁沈阳110001 中国医科大学生命科学学院卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室辽宁沈阳110122

目的构建USP14全长及截短表达质粒并且初步探讨USP14在子宫内膜癌中的作用。方法设计USP14全长及截短的特异性引物,通过PCR合成相应cDNA片段,并用限制性内切酶EcoR I和Xho I进行双酶切,连接转化后将构建好的质粒进行测序,成功构建后将... 详细信息

目的构建USP14全长及截短表达质粒并且初步探讨USP14在子宫内膜癌中的作用。方法设计USP14全长及截短的特异性引物,通过PCR合成相应cDNA片段,并用限制性内切酶EcoR I和Xho I进行双酶切,连接转化后将构建好的质粒进行测序,成功构建后将其转染至COS7中,观察全长及截短在COS7中分布。通过划痕实验以及MTS实验探究其对子宫内膜癌细胞生物学功能的影响。结果成功构建USP14全长及截短表达质粒,在COS7细胞中,全长及C端截短定位于细胞浆中,N端截短主要定位于细胞核;USP14能够促进子宫内膜癌细胞的迁移并提高子宫内膜癌细胞的生存活力。结论在COS7细胞中,USP14全长及C端截短分布于细胞浆,N截短大部分分布于细胞核,USP14能够促进子宫内膜癌细胞的生长和迁移。

关键词： USP14 截短子宫内膜癌细胞活力迁移

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基于网络药理学与分子对接的丹皮酚治疗结直肠癌的分子机制研究

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中国医科大学学报 2023年第11期52卷 992-998页

作者：高吴陆怡王静艳舒岑皓尚德淑韩锁商宇佳木斯大学基础医学院微生态-免疫调节网络与相关疾病重点实验室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学附属第一医院康复医学科黑龙江佳木斯154003 中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122 哈尔滨医科大学附属第四医院中心导管室哈尔滨150001

目的基于网络药理学与分子对接探讨丹皮酚治疗结直肠癌的靶点与作用机制。方法通过PubChem、SwissTargetPrediction和TargetNet数据库检索丹皮酚的药物靶点,使用Genecards、OMIM和TTD数据库检索结直肠癌的疾病靶点,通过Venny在线工具获... 详细信息

目的基于网络药理学与分子对接探讨丹皮酚治疗结直肠癌的靶点与作用机制。方法通过PubChem、SwissTargetPrediction和TargetNet数据库检索丹皮酚的药物靶点,使用Genecards、OMIM和TTD数据库检索结直肠癌的疾病靶点,通过Venny在线工具获得交集靶点。利用Metascape数据库完成交集靶点的基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组数据库(KEGG)信号通路富集分析。交集靶点经STRING数据库与Cytoscape软件分析其相互作用关系并筛选枢纽节点。采用LeDock与CB-Dock2软件完成丹皮酚与枢纽节点的分子对接,以筛选丹皮酚的核心药物靶点。结果经筛选得到21个药物靶点。富集分析结果显示,丹皮酚发挥作用的分子机制涉及癌症通路、Ras信号和Rap1信号等通路,而其涉及的生物过程包括细胞对缺氧的反应以及调控激酶活性等。蛋白质-蛋白质相互作用分析发现9个靶点为蛋白质相互作用的枢纽。分子对接结果显示,丹皮酚和枢纽节点中的SRC、EP300、MMP9具有最高亲和力,提示SRC、EP300以及MMP9可能是丹皮酚治疗结直肠癌的核心靶点。结论丹皮酚可能通过靶向SRC、EP300与MMP9,调控Ras、Rap1等信号通路与激酶活性等生物过程,进而发挥治疗结直肠癌的作用。

关键词：结直肠癌丹皮酚网络药理学分子对接

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小分子化合物G-749抑制胃癌细胞增殖和迁移

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解剖科学进展 2024年第1期30卷 47-50页

作者：蔺炜然张健李丰北部战区总医院检验科辽宁沈阳110016 中国医科大学生命科学学院分子细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的研究小分子化合物G-749对人胃癌细胞MGC803和SGC7901的增殖和迁移的影响。方法分别用不同浓度的G-749处理MGC803和SGC7901两种人胃癌细胞,CCK8实验和克隆形成实验检测G-749对胃癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测化合物对细胞周期... 详细信息

目的研究小分子化合物G-749对人胃癌细胞MGC803和SGC7901的增殖和迁移的影响。方法分别用不同浓度的G-749处理MGC803和SGC7901两种人胃癌细胞,CCK8实验和克隆形成实验检测G-749对胃癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测化合物对细胞周期的影响,划痕实验检测G-749对胃癌细胞迁移的影响。结果化合物G-749能够抑制人胃癌细胞MGC803和SGC7901的增殖并存在剂量依赖关系,抑制细胞G_(0)/G_(1)期向S期的转变,并能明显抑制胃癌细胞的迁移。结论化合物G-749对胃癌细胞有抑制作用,有望应用于胃癌细胞的治疗。

关键词：胃癌 G-749 增殖细胞周期

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医学院校基因组生物学课程改革探索和体会

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基础医学教育 2024年第11期26卷 927-930页

作者：刘琦高锦兰邢雪莎陈晨王述森罗阳中国医科大学生命科学学院教育部医学细胞生物学重点实验室医学基因组学教研室沈阳110122

基因组生物学教学是医学和生物学相关专业重要教学内容之一,课程自身存在多学科交叉及知识更新快的特点。文章分析总结了中国医科大学基因组生物学课程改革的探索和体会,从教学内容的更新、教材选用、课程思政、教学形式及考核方式等方... 详细信息

基因组生物学教学是医学和生物学相关专业重要教学内容之一,课程自身存在多学科交叉及知识更新快的特点。文章分析总结了中国医科大学基因组生物学课程改革的探索和体会,从教学内容的更新、教材选用、课程思政、教学形式及考核方式等方面提出了探索性建议,加强了基础理论拓展及教学与科研、临床工作的结合,为基因组生物学教学提供借鉴和参考。

关键词：基因组生物学教学改革教材选择课程评价考核方式

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利用CRISPR/Cas9技术构建DOC-1R基因敲除的HEK-293稳转细胞系

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解剖科学进展 2020年第3期26卷 339-342页

作者：王世全郭莹莹沈飞高锦兰邢雪莎王述森罗阳刘琦中国医科大学医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室生命科学学院辽宁沈阳110122

目的利用CRISPR/Cas9技术敲除人胚肾(human embryonic kidney cell,HEK-293)细胞中DOC-1R,构建DOC-1R敲除的HEK-293稳转细胞系,用于进一步讨论DOC-1R的生物学功能。方法根据CRISPR/Cas9设计原则,设计向导RNA(single-guide RNA,sgRNA),构建表达载体,对sgRNA测序并转染包装HEK-293T收集上清液测定病毒滴度。前期用Cas9-puro慢病毒感染HEK-293,用已制备的DOC-1R慢病毒感染稳转Cas9的HEK-293,72 h后显微镜下观察HEK-293表达红色荧光蛋白,并用Western blot检测HEK-293中DOC-1R的表达以确定沉默效果。结果测序显示插入的sgRNA序列正确,表达载体成功构建,显微镜下观察到,90%以上HEK-293表达红色荧光蛋白,HEK-293中DOC-1R蛋白表达减少,确定了DOC-1R敲除效果最明显的序列为GCCTACCTATGCTGGCAGCA。结论利用CRISPR/Cas9技术成功构建DOC-1R基因敲除的细胞系,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词： DOC-1R 基因敲除 CRISPR/Cas9技术慢病毒

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表皮松解性掌跖角化病一家系的致病基因突变分析

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解剖科学进展 2020年第5期26卷 492-495,499页

作者：葛海军刘旭陈晨王述森王谦曹丽华罗阳张学中国医科大学生命科学学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122 中国医科大学附属第一医院神经内科辽宁沈阳110001

目的对一个表皮松解性掌跖角化症(EPPK)家系进行基因突变检测,为该家系成员提供临床遗传咨询,并初步探讨该家系患者特殊表型指节垫、指关节弯曲与KRT9基因突变的相关性。方法收集该家系中的先证者、先证者的父亲及舅舅三人的外周血并提... 详细信息

目的对一个表皮松解性掌跖角化症(EPPK)家系进行基因突变检测,为该家系成员提供临床遗传咨询,并初步探讨该家系患者特殊表型指节垫、指关节弯曲与KRT9基因突变的相关性。方法收集该家系中的先证者、先证者的父亲及舅舅三人的外周血并提取基因组DNA。对以上三位家系成员进行全外显子组测序(WES),通过突变位点频率、突变类型、是否改变剪接或编码氨基酸进行筛选,并按照常染色体显性遗传方式筛选杂合突变,然后在家系内进行共分离分析,针对候选基因表达及已知功能分析,得到候选基因突变位点,并进行Sanger测序验证。应用生物信息学软件对KRT9基因结构域和功能域进行分析,针对161位氨基酸位点改变,进行文献综述和基因型-表型相关性探讨。结果本研究报道了一个中国EPPK家系,伴有罕见的指关节屈曲表型;WES测序检测到KRT9基因第1外显子存在杂合突变c.482A>G(p.N161S),该突变在家系内与疾病表型共分离,Sanger测序验证与WES结果一致。利用生物信息学软件预测到N161突变成S161后,角蛋白9的无规则卷曲发生空间位置改变,α螺旋结构有明显缺少,突变位点附近氢键数量增加,键长变长。对角蛋白9的161位点突变所致EPPK进行文献综述,发现N161S突变与指节垫表型高度相关。结论本研究报道了国际上第三例伴有罕见指关节屈曲表型的EPPK家系,初步认为KRT9基因c.482A>G(p.N161S)为该EPPK家系致病突变,对患者明确诊断及遗传咨询有重要意义。

关键词： EPPK KRT9基因突变指节垫

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CRISPR-Cas9基因编辑技术在肿瘤治疗中的研究进展

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激光生物学报 2022年第6期31卷 488-497页

作者：丁弈丹陈晨中国医科大学中国医科大学-贝尔法斯特女王大学联合学院沈阳110122 中国医科大学生命科学学院医学基因组学教研室国家卫健委细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122

CRISPR-Cas9基因编辑技术具有简单、高效、针对性强的特点,可通过编辑DNA序列治疗一些难治的具有遗传基础的疾病,特别是癌症。近年来,此技术主要用于遗传修饰动物模型的制备与药物开发,现已进入癌症临床试验阶段,并获得喜人的成效,极具... 详细信息

CRISPR-Cas9基因编辑技术具有简单、高效、针对性强的特点,可通过编辑DNA序列治疗一些难治的具有遗传基础的疾病,特别是癌症。近年来,此技术主要用于遗传修饰动物模型的制备与药物开发,现已进入癌症临床试验阶段,并获得喜人的成效,极具临床价值。本文对CRISPR-Cas9系统在肿瘤治疗中的研究进展,包括功能基因筛选、递送系统和免疫疗法等方面进行概述,探讨了其在临床转化中所面临的问题,并展望了发展前景,旨在为今后应用该技术进行肿瘤精准治疗提供参考。

关键词： CRISPR-Cas9 肿瘤递送系统功能基因筛选免疫治疗

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ELF5在乳腺癌的表达及意义

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解剖科学进展 2019年第2期25卷 190-192页

作者：齐佳瑞肖琼杨坤张红艳中国医科大学七年制临床医学系辽宁沈阳110122 中国医科大学生命科学学院分子细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的研究E74-like factor 5 (ELF5)在乳腺癌的表达,探讨ELF5的表达与不同分型乳腺癌预后的关系。方法利用Oncomine数据库挖掘ELF5在乳腺癌组织中的表达;利用Kaplan-Meier Plotter分析ELF5表达水平与雌激素受体阳性/阴性表达乳腺癌生存... 详细信息

目的研究E74-like factor 5 (ELF5)在乳腺癌的表达,探讨ELF5的表达与不同分型乳腺癌预后的关系。方法利用Oncomine数据库挖掘ELF5在乳腺癌组织中的表达;利用Kaplan-Meier Plotter分析ELF5表达水平与雌激素受体阳性/阴性表达乳腺癌生存的关系。结果 Oncomine数据库分析ELF5在乳腺癌中表达降低(P=8.29e^(-10));KM plotter数据库分析结果显示ELF5表达量与雌激素受体阳性表达的乳腺癌无复发生存(RFS)呈正相关,即高表达ELF5的患者无复发生存较高(P=0.008)。结论 ELF5在乳腺癌组织中表达低于癌旁正常组织,其表达水平越高预后越好。

关键词：乳腺癌 ELF5 Oncomine数据库 KM plotter数据库预后

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信息化大背景下“3+2”高职生物化学教材改革体会

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中国继续医学教育 2020年第20期12卷 12-14页

作者：王谦中国医科大学生命科学学院医学基因组学教研室/教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110013

3+2"高职指的是中专院校与大专院校联合办学,在中专完成3年学习后,再到联合所办学校完成2年课程拿到大专毕业证。文章针对"3+2"高职没有合适的生物化学教材的现状,提出了目前存在的问题,并从准确定位"3+2"高... 详细信息

3+2"高职指的是中专院校与大专院校联合办学,在中专完成3年学习后,再到联合所办学校完成2年课程拿到大专毕业证。文章针对"3+2"高职没有合适的生物化学教材的现状,提出了目前存在的问题,并从准确定位"3+2"高职生培养目标;把握好新教材基本理论阐述的深度;缩短再版周期,加快内容更新;规划实验教学内容,增加实验教学学时数和录制微课视频等方面提出了改革设想。争取让学生在尽量短的时间内掌握基本理论知识和实用的生物化学技术。"3+2"高职生物化学教材改革项目应立足于实际,以先进的理念为根本,确定教材改革的目标,顺应高等教材发展趋势,增加微课等信息化教学方法,推动高职教材建设工作的顺利进行。

关键词： “3+2”高职生物化学教材改革教材建设信息化微课

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Cyclin G2与LDHA相互作用的鉴定分析

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解剖科学进展 2020年第4期26卷 466-470页

作者：庄新宾侯晓宇李森高锦兰刘琦罗阳中国医科大学生命科学学院教育部医学细胞生物学重点实验室医学基因组学教研室辽宁沈阳110122

目的分析细胞周期素G2(cyclin G2)与乳酸脱氢酶A(LDHA)之间的相互作用及其意义。方法将LDHA全长cDNA片段分别克隆到pGEX-5X-1和p3×FLAG-CMV-14载体上,构建pGEX-LDHA原核重组蛋白表达载体和p3×FLAG-CMV-LDHA真核重组蛋白表达载... 详细信息

目的分析细胞周期素G2(cyclin G2)与乳酸脱氢酶A(LDHA)之间的相互作用及其意义。方法将LDHA全长cDNA片段分别克隆到pGEX-5X-1和p3×FLAG-CMV-14载体上,构建pGEX-LDHA原核重组蛋白表达载体和p3×FLAG-CMV-LDHA真核重组蛋白表达载体,诱导表达并纯化GST-LDHA融合蛋白,通过GST pull-down及western blot技术分析cyclin G2与LDHA的相互作用。分别转染p3×FLAG-CMV-LDHA、pEGFP-FALGCCNG2质粒到HEK293细胞使其表达,利用带有抗FLAG蛋白标签抗体的免疫沉淀凝胶进行Co-IP实验,进一步验证cyclin G2与LDHA的相互作用。结果成功构建了pGEX-LDHA原核重组蛋白表达载体和p3×FLAG-CMVLDHA真核重组蛋白表达载体。GST pull-down实验证实了cyclin G2与LDHA在细胞外的相互作用。Co-IP实验证实了cyclin G2和LDHA在细胞内的相互作用。结论 cyclin G2与LDHA在细胞内和细胞外能发生相互作用,为研究cyclin G2生物学功能奠定实验基础。

关键词： cyclin G2 LDHA 免疫共沉淀 GST pull-down 相互作用

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