检索结果-内蒙古大学图书馆

热带医学杂志 2023年第10期23卷 1341-1345,1357,1336页

作者：栾瑞娜王安琦郭兆刚赵越中国医科大学生命科学学院卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室辽宁沈阳110122 中国医科大学临床一系辽宁沈阳110122 武警辽宁省总队医院特色专业一科辽宁沈阳110034

目的构建去泛素化酶Myb样SWIRM和MPN结构域1(MYSM1)全长及各结构域缺失的截短表达质粒并验证其在乳腺癌细胞MCF7中的表达与定位,探讨MYSM1对MCF7细胞增殖能力的影响并初步评估相关机制。方法以人基因组DNA为模板扩增MYSM1基因片段,构建... 详细信息

目的构建去泛素化酶Myb样SWIRM和MPN结构域1(MYSM1)全长及各结构域缺失的截短表达质粒并验证其在乳腺癌细胞MCF7中的表达与定位,探讨MYSM1对MCF7细胞增殖能力的影响并初步评估相关机制。方法以人基因组DNA为模板扩增MYSM1基因片段,构建其全长及截短质粒。将测序结果正确的上述MYSM1质粒分别转染于MCF7细胞中,进行免疫荧光共聚焦实验探究外源MYSM1蛋白在乳腺癌细胞中的定位。MTS和平板克隆实验检测对照或MYSM1过表达后,MCF7细胞的增殖能力。STRING数据库预测及免疫共沉淀实验验证MYSM1与E2F1蛋白结合;Western blot检测转染MYSM1后的E2F1蛋白表达及H2A泛素化水平。结果构建出了FLAG-MYSM1全长及截短质粒;MYSM1全长及截短重组质粒均能在乳腺癌细胞中表达并定位于细胞核;过表达MYSM1后,细胞生长加快,且与对照组相比差异有统计学意义(t=6.389,P<0.01);MYSM1能够结合并上调E2F1表达;过表达MYSM1后,H2A泛素化水平显著降低。结论MYSM1蛋白的168-371 aa及471-576 aa在其核定位中发挥重要作用。MYSM1结合并增加E2F1表达,发挥促进MCF7细胞增殖的作用。

关键词：乳腺癌 MYSM1 质粒构建细胞定位增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠resistin基因表达载体的构建及在RAW264.7细胞的表达

引用

解剖科学进展 2020年第5期26卷 500-503页

作者：赵鑫月陈添娇于皓李孝琢尚德淑中国医科大学第二临床学院辽宁沈阳110004 中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122 中国医科大学生命科学学院辽宁沈阳110122

目的构建小鼠resistin基因表达载体,并将其导入小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中,从而建立能够高表达resistin的单核巨噬细胞系。方法从小鼠脂肪组织提取mRNA,PCR后连接到真核表达载体进行测序验证,同时构建慢病毒载体,感染至RAW264.7细胞... 详细信息

目的构建小鼠resistin基因表达载体,并将其导入小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中,从而建立能够高表达resistin的单核巨噬细胞系。方法从小鼠脂肪组织提取mRNA,PCR后连接到真核表达载体进行测序验证,同时构建慢病毒载体,感染至RAW264.7细胞中,通过荧光显微镜观察是否转染成功,ELISA方法检测蛋白分泌水平。结果双酶切结果显示构建的质粒中有大小为345bp的resistin插入条带;经过测序及BLAST比对,插入序列与Genebank中resistin的小鼠CDS序列相同,没有移码突变;荧光显微镜观察病毒感染后的RAW264.7细胞,红色荧光比率达到70%;ELISA检测培养的感染细胞上清中resistin分泌显著增加。结论成功获得了能够分泌resistin蛋白的单核/巨噬细胞。

关键词：阿尔茨海默病 resistin基因 Raw264.7细胞病毒感染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一例多种羧化酶缺乏症的基因变异分析

引用

中华医学遗传学杂志 2020年第4期 419-420-421-422页

作者：邢雪莎刘双罗萍黎芳吴雨虹王述森麻宏伟罗阳中国医科大学生命科学学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室中国医科大学附属盛京医院发育儿科

目的对1例临床诊断为多种羧化酶缺乏症(multiple carboxylase deficiency, MCD)的患儿及其父母进行相关致病基因的变异分析,为临床诊断及遗传咨询提供依据。方法应用PCR技术和DNA测序技术对患儿的MCD致病基因BT和HLCS编码区进行变异检... 详细信息

目的对1例临床诊断为多种羧化酶缺乏症(multiple carboxylase deficiency, MCD)的患儿及其父母进行相关致病基因的变异分析,为临床诊断及遗传咨询提供依据。方法应用PCR技术和DNA测序技术对患儿的MCD致病基因BT和HLCS编码区进行变异检测,并对患儿父母进行相应基因变异分析。在80名正常人中对未报道过的基因变异进行PCR-限制性片段长度多态性分析。结果患儿的BT基因编码区未发现碱基改变,HLCS基因存在c.286delG (***96Leufs*162)和c.1648G>A (***550Met)复合杂合变异,其中c.286delG (***96Leufs*162)经PCR-限制性片段长度多态性分析验证为新变异。结论 HLCS基因c.286delG (***96Leufs*162)和c.1648G>A (***550Met)变异可能为患儿的致病原因,致病基因的检出为临床诊断及遗传咨询提供了依据,同时丰富了HLCS基因变异谱。

关键词：多种羧化酶缺乏症 HLCS基因基因变异

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：