检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2011年第8期40卷 684-687页

作者：代炜李彦姝李妍孙长伏中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室口腔颌面头颈外科沈阳110002 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室沈阳110001

目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌... 详细信息

目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌细胞系ACC-2中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用免疫荧光显微镜观察pEGFP-m3D3/LYRIC在腺样囊性癌ACC-2细胞内的定位。结果 m3D3/LYRIC全长基因序列克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小为1 740 bp。Western blot检测到融合蛋白GFP-m3D3/LYRIC表达,分子量约为91 kDa。pEGFP-C1-m3D3/LYRIC主要在细胞质内定位,在细胞核内未见表达。结论成功构建了m3D3/LYRIC全长基因真核表达载体,pEGFP-m3D3/LYRIC蛋白主要定位于细胞质内。

关键词： 3D3/LYRIC 腺样囊性癌 AEG-1

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核酸适配体W3介导靶向乳腺癌的量子点成像

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基础医学与临床 2023年第1期43卷 76-82页

作者：王群李鑫马俊李婉明中国医科大学、卫生部细胞生物学重点实验室、医学细胞生物学教育部重点实验室、分子细胞生物学教研室辽宁沈阳110122

目的利用核酸适配体W3对乳腺癌细胞的结合特异性,对乳腺癌细胞以及临床乳腺癌组织石蜡切片标本进行量子点(QDs)成像。方法利用流式细胞测量术检测核酸适配体W3对乳腺癌细胞系的结合特异性,基于生物素与链霉亲和素的结合反应原理,通过荧... 详细信息

目的利用核酸适配体W3对乳腺癌细胞的结合特异性,对乳腺癌细胞以及临床乳腺癌组织石蜡切片标本进行量子点(QDs)成像。方法利用流式细胞测量术检测核酸适配体W3对乳腺癌细胞系的结合特异性,基于生物素与链霉亲和素的结合反应原理,通过荧光显微镜观察核酸适配体W3对乳腺癌细胞系以及临床乳腺癌患者组织标本的量子点靶向成像,并进一步分析其临床意义。结果核酸适配体W3能特异性结合恶性程度较高的乳腺癌细胞,偶联量子点QD605形成量子点探针(W3-QDs),能够对恶性程度较高的乳腺癌细胞系以及乳腺癌组织实现靶向成像,并且具有高恶性程度的乳腺癌组织的荧光强度明显高于恶性程度低的乳腺癌组织。结论核酸适配体W3偶联量子点后能够实现乳腺癌的靶向成像,可用于乳腺癌的早期诊断。

关键词：适配体乳腺癌量子点靶向成像

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不同的G四链体结构对DNAzyme活性的影响

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中国生物化学与分子生物学报 2016年第7期32卷 823-829页

作者：卢宇关一夫中国医科大学转化医学研究院教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122 中国医科大学生物化学与分子生物学教研室沈阳110122

富含鸟嘌呤的DNA序列在金属离子(通常是钠、钾离子)存在的条件下,可以形成稳定的G-四链体(G-quadruplex)。该G-四链体能够结合hemin(氯高铁血红素)形成具有过氧化物酶的活性的G四链体-hemin复合物DNAzyme。将这一原理联合滚环扩增技术... 详细信息

富含鸟嘌呤的DNA序列在金属离子(通常是钠、钾离子)存在的条件下,可以形成稳定的G-四链体(G-quadruplex)。该G-四链体能够结合hemin(氯高铁血红素)形成具有过氧化物酶的活性的G四链体-hemin复合物DNAzyme。将这一原理联合滚环扩增技术可以对核酸进行可视化的检测。本研究旨在探索G-四链体-hemin复合物中,G-四链体结构以及两个G-四链体之间的链接长度与DNAzyme过氧化物酶活性之间的关系。实验分别选取了平行、反平行和混合结构的G-四链体,通过热差异光谱、紫外光谱、圆二色光谱对结构进行分析,不断加长链接序列并测定3种结构形成的DNAzyme活性,发现正平行结构的G-四链体具有更高的DNAzyme活性和更明显的可视化效果。综上所述,平行G-四链体结构可以用来满足裸眼可视化检测的需求,为无需复杂仪器的核酸检测奠定了方法基础。

关键词： G-四链体 DNAzyme 可视化检测

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核酸适配体分子信标探针在肿瘤研究中的应用进展

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癌症进展 2019年第4期17卷 373-375,414页

作者：黄晨李婉明中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室/医学细胞生物学教育部重点实验室/细胞生物学教研室沈阳110122

核酸适配体是从随机寡核苷酸文库中筛选出来,可以高特异性和高亲和力与靶点结合的寡核苷酸序列,具有靶点范围广、相对分子质量小、化学稳定性高、易于合成和修饰等优点。分子信标是一种具有特殊发夹结构的新型荧光探针,具有背景信号低... 详细信息

核酸适配体是从随机寡核苷酸文库中筛选出来,可以高特异性和高亲和力与靶点结合的寡核苷酸序列,具有靶点范围广、相对分子质量小、化学稳定性高、易于合成和修饰等优点。分子信标是一种具有特殊发夹结构的新型荧光探针,具有背景信号低、灵敏度高、特异性识别强、操作简单以及不必与未反应的探针分离即可实时检测等优点。将核酸适配体的分子识别特性和分子信标的光学检测性能相结合,在生命科学研究领域有着良好的应用前景。但核酸适配体的应用研究仍处于初级阶段,还有许多问题需要解决,为解决这些问题,进一步拓展核酸适配体分子信标在生命科学领域,特别是肿瘤领域的应用,需要科学工作者不断的努力和突破。同时随着核酸适配体的发展,越来越多与不同靶点特异性结合的核酸适配体将被筛选出来,并被应用于生命科学研究领域。本文主要对以核酸适配体为基础的分子信标探针在肿瘤研究中的应用进展进行综述。

关键词：核酸适配体 SELEX技术分子信标肿瘤研究肿瘤监测

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全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞的损伤作用

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中国现代医学杂志 2006年第11期16卷 1646-1648,1650页

作者：王昕陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的探讨全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞的损伤作用。方法以不同浓度的PFOS处理脑血管内皮细胞(HBMEC),30min后观察细胞形态;用免疫荧光染色的方法观察细胞骨架微管蛋白α-tubulin的表达;不同剂量PFOS连续腹腔内注射14d观... 详细信息

目的探讨全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞的损伤作用。方法以不同浓度的PFOS处理脑血管内皮细胞(HBMEC),30min后观察细胞形态;用免疫荧光染色的方法观察细胞骨架微管蛋白α-tubulin的表达;不同剂量PFOS连续腹腔内注射14d观察大鼠行为学改变。结果随着PFOS浓度的增高细胞形态发生变化,细胞变圆、部分细胞不再贴壁、细胞骨架微管解聚细胞形态变圆,微管逐渐向细胞核周围聚集;动物实验表明高浓度PFOS可导致大鼠脑损伤、出现偏瘫的体征。结论全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞有损伤作用。

关键词：人脑微血管内皮细胞(FIBMEC) PFOS 微管蛋白 α-tubulin

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联合应用高分辨率熔解曲线和多重连接依赖探针扩增技术对PAH基因突变筛查研究

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中华医学遗传学杂志 2011年第6期28卷 649-653页

作者：季春燕孙莉莉曹丽华胡煜黄宏王述森罗阳中国医科大学基础医学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳市妇女儿童保健中心

目的联合应用高分辨率熔解曲线（highresolutionmelting，HRM）和多重连接依赖探针扩增（multiplexligation—dependentprobeamplification，MLPA）技术检测苯丙酮尿症（phenylketonuria，PKU）患者基因突变，并探讨两种技术联合运用对于突变筛查的价值。方法采用HRM和MLPA技术对26例临床诊断为PKU的患者苯丙氨酸羟化酶基因（phenylalaninehydroxylase，PAH）进行检测，并通过测序验证；针对未报道的基因改变进行聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析。结果在52个等位基因中检测到44个突变等位基因（共21种不同突变），包括第4外显子拷贝数的增加，总检出率达84．62％（44／52），其中C．584—585insA和IVSl0＋1G〉T突变在国内外未见报道。此外，R243Q（25％）突变为中国最常见的突变种类。结论应用HRM和MLPA技术相对提高了PAH基因突变筛查的检出率，检测结果丰富了基因突变数据库，并为临床诊断与产前诊断提供实验室依据。

关键词：苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶基因突变高分辨率熔解曲线多重连接依赖探针扩增

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人类生殖相关新基因的定位和组织表达

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遗传 2003年第6期25卷 633-636页

作者：罗阳于秉治中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学基因组学研究室沈阳110001 中国医科大学生物化学教研室沈阳110001

基因定位对研究基因之间以及基因与疾病之间的相互关系具有重要意义。应用辐射杂种细胞系技术(RH)对我们克隆的人类新基因HBRP(HumanBSP RelatedProtein)进行了染色体定位,结果将该基因定位于19q13.2～13.3,同时应用生物信息学方法在人... 详细信息

基因定位对研究基因之间以及基因与疾病之间的相互关系具有重要意义。应用辐射杂种细胞系技术(RH)对我们克隆的人类新基因HBRP(HumanBSP RelatedProtein)进行了染色体定位,结果将该基因定位于19q13.2～13.3,同时应用生物信息学方法在人类基因组重叠片段数据库进行该基因的定位,结果相吻合。研究证明,RH技术具有快速、精确、简便等优点,是基因定位研究中一强有力的技术。同时通过RT PCR方法研究了HBRP基因在人体各组织中的表达分布,结果显示该基因在睾丸、肠、肾、肝、脾、胃、胰腺组织有较高的表达,而在检测的脑、肺、骨骼肌、心肌组织中表达较弱。

关键词：辐射杂种细胞系染色体定位 HBRP RT-PCR 生物信息学人类生殖基因组织表达

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一种新的精子结合蛋白HBRP在原核表达及其活性研究

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细胞生物学杂志 2003年第4期25卷 246-250页

作者：罗阳宗志宏于秉治中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学基因组学研究室沈阳110001 中国医科大学生物化学教研室沈阳110001

为了发现和研究牛精浆(bovine seminal plasma,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用,我们克隆了人类生殖相关新基因HBRP(Human BSP-Related Proteins),本文通过基因重组技术,构建了GST-HBRP融合蛋白表达质粒,在大肠杆... 详细信息

为了发现和研究牛精浆(bovine seminal plasma,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用,我们克隆了人类生殖相关新基因HBRP(Human BSP-Related Proteins),本文通过基因重组技术,构建了GST-HBRP融合蛋白表达质粒,在大肠杆菌中获得大量表达,并检测了该蛋白对PKC活性的影响。

关键词：精子结合蛋白 HBRP 原核表达活性

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N^(6)-甲基化腺苷修饰在乳腺癌中的研究进展

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生命科学 2024年第3期36卷 343-352页

作者：马唯吴宇丹张红艳李彦姝中国医科大学口腔医学院沈阳110122 中国医科大学护理学院沈阳110122 中国医科大学生命科学学院分子细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫健委细胞生物学重点实验室沈阳110122

表观遗传学在乳腺癌的恶性进展中起到重要作用,其中N^(6)-甲基化腺苷(m^(6)A)修饰是最丰富的RNA修饰,参与调节乳腺癌细胞恶性行为的通路及癌细胞所处的肿瘤微环境。同时,乳腺癌发病率居于我国女性恶性肿瘤首位,近年来首次发病年龄趋于... 详细信息

表观遗传学在乳腺癌的恶性进展中起到重要作用,其中N^(6)-甲基化腺苷(m^(6)A)修饰是最丰富的RNA修饰,参与调节乳腺癌细胞恶性行为的通路及癌细胞所处的肿瘤微环境。同时,乳腺癌发病率居于我国女性恶性肿瘤首位,近年来首次发病年龄趋于年轻化,是严重危及我国女性健康的疾病之一。然而,乳腺癌早期治疗预后较好。当晚期出现转移后,患者5年生存率差。m^(6)A作为一种可能用于乳腺癌早筛的生物标志物及新的药物治疗靶点,给乳腺癌的早期治疗提供了新的研究方向。本文系统地综述了m^(6)A修饰相关因子及其在乳腺癌恶性行为中发挥的调控作用,并列出现已知的一些靶向药物和潜在的早筛方法,为乳腺癌的诊断、治疗、监测提供新的思路。

关键词： N^(6)-甲基化腺苷乳腺癌信号通路药物

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GST/HIF-1α融合蛋白表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达

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中国医科大学学报 2009年第10期38卷 721-723,729页

作者：佟宇鑫李丹妮邵阳光李妍李丰中国医科大学第90期生物科学与生物技术系沈阳110001 中国医科大学第94期临床医学系沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEX-4T-2中,构建原... 详细信息

目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并转化*** DH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入*** BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST/HIF-1α全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了HIF-1α原核表达载体及其截短突变体,并证实了融合蛋白的表达,为进一步纯化HIF-1α蛋白和研究HIF-1α的生物学功能奠定了基础。

关键词：缺氧诱导因子1α 截短突变体质粒原核表达

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