检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘东鑫赵伟东方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌K1株(*** K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。*** K1的外膜蛋白IbeB参与了*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)、穿过血脑屏障。我们利用酵母双杂交技术从HBMEC的cDNA文库中筛选到与IbeB相互作用的P190膜蛋白,... 详细信息

大肠杆菌K1株(*** K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。*** K1的外膜蛋白IbeB参与了*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)、穿过血脑屏障。我们利用酵母双杂交技术从HBMEC的cDNA文库中筛选到与IbeB相互作用的P190膜蛋白,并确认了IbeB蛋白胞外段229-342aa能够与P190蛋白胞外段203-355aa发生相互作用。细菌基因敲除试验显示,*** K1的IbeB(229-342aa)与*** K1侵袭HBMEC相关。我们发现,在*** K1侵袭HBMEC时,HBMEC细胞膜上的P190蛋白明显增多并向细菌侵袭部位聚集。RNA干扰P190后,能明显减少*** K1对HBMEC的侵袭,且可以被表达全长P190所恢复(rescue);P190胞内段缺失突变后,明显减少了*** K1对HBMEC的侵袭。重组的P190(203-355aa)短肽与*** K1预先孵育后,能够显著降低*** K1侵袭进入HBMEC。进一步研究发现P190能够与粘着斑激酶(FAK)形成复合物,促使FAK发生磷酸化,参与P190介导的*** K1侵袭HBMEC的过程,而cPLA2、Src、Cdc42以及Rac1都不参与该过程。结论:HBMEC上的P190作为细菌IbeB蛋白的受体参与*** K1侵袭HRMEC。

关键词： HBMEC E.coli K1 P190 FAK

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pGEX-5X-1-hLMO4原核质粒构建及重组蛋白表达

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东南大学学报（医学版） 2012年第2期31卷 139-143页

作者：张红艳李彦姝姚远王春玉王迪李丰中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 辽宁省人民医院消化内科辽宁沈阳110016

目的:构建hLMO4的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法:hLMO4全长编码基因经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)在BL21大肠杆菌中诱导GST-hLMO4融合蛋白表达,利用Glutathione ... 详细信息

目的:构建hLMO4的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法:hLMO4全长编码基因经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)在BL21大肠杆菌中诱导GST-hLMO4融合蛋白表达,利用Glutathione Sepharose 4B纯化诱导的融合蛋白,并经Western blot鉴定结果。结果:hLMO4编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在*** BL21中IPTG诱导融合蛋白的表达,分子质量约为49 000 Da,成功纯化出GST及GST-hLMO4蛋白,Western blot检测到蛋白表达。结论:构建了hLMO4基因原核表达载体,鉴定了GST-hLMO4融合蛋白表达。

关键词： LMO4 蛋白纯化融合蛋白

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P190调控Na+-K+-ATP酶定位于细胞膜的机制研究

P190调控Na+-K+-ATP酶定位于细胞膜的机制研究

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中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：张淑红刘东鑫赵伟东张虎方文刚秦小雪陈誉华中国医科大学细胞生物学系发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110001

P190为我们前期研究中发现的定位于脑微血管内皮细胞(BMEC)血管腔侧的分子量为190KD的穿膜蛋白。为探讨BMEC表达P190的生理学意义,我们以P190胞内段结构域为诱饵蛋白,通过酵母双杂交技术从小鼠胎脑cDNA文库中筛选到与P190互作的Na+-K+-...

P190为我们前期研究中发现的定位于脑微血管内皮细胞(BMEC)血管腔侧的分子量为190KD的穿膜蛋白。为探讨BMEC表达P190的生理学意义,我们以P190胞内段结构域为诱饵蛋白,通过酵母双杂交技术从小鼠胎脑cDNA文库中筛选到与P190互作的Na+-K+-ATP酶β3亚基,CO-IP实验结果显示,人BMEC中,P190蛋白胞内段与未糖基化的β3亚基存在相互作用。在共转P190蛋白胞内段与β3亚基的293T细胞中,P190蛋白胞内段也能够与未糖基化的β3亚基发生相互作用;并且,P190蛋白胞内段能够增加β3亚基的糖基化修饰。在人BMEC中稳定干扰P190蛋白后,Na+-K+-ATP酶的β3亚基及催化亚基α1均发生蛋白表达下调及细胞膜定位的减少。

关键词：

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环境污染物PFOS引起血脑屏障通透性增高与脑内皮细胞PI3K活化相关

环境污染物PFOS引起血脑屏障通透性增高与脑内皮细胞PI3K活化相关

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：王昕尚德淑马怡然朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

全氟辛烷磺酰基化合物(perfluorooctanesulfonate,PFOS)是一种全氟有机化合物,广泛用于生产表面活性剂、化妆品、农药和药品等。不粘锅、食品包装袋内表面、部分洗涤用品中均含有 PFOS。作为新的持久性环境污染物,PFOS 对生态系统及人... 详细信息

全氟辛烷磺酰基化合物(perfluorooctanesulfonate,PFOS)是一种全氟有机化合物,广泛用于生产表面活性剂、化妆品、农药和药品等。不粘锅、食品包装袋内表面、部分洗涤用品中均含有 PFOS。作为新的持久性环境污染物,PFOS 对生态系统及人类健康将产生极大影响。已有文献表明,PFOS 能引起实

关键词： PFOS 血脑屏障人脑微血管内皮细胞 P13K

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CUEDC2通过活化PI3K/Akt信号通路促进乳腺癌细胞的生长

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现代肿瘤医学 2017年第2期25卷 183-185页

作者：李彦姝高云玲张红艳汤丽娜刘芙蓉李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白在人乳腺癌细胞中的生物学作用。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白检测磷酸化Akt和总Akt的表达变化。利用CCK-8检测过表达CUEDC2后... 详细信息

目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白在人乳腺癌细胞中的生物学作用。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白检测磷酸化Akt和总Akt的表达变化。利用CCK-8检测过表达CUEDC2后MCF-7细胞的生长。结果:CUEDC2能够活化Akt,使磷酸化Akt表达增加,能够促进人乳腺癌细胞生长。结论:当乳腺癌中CUEDC2表达增高时,能够引起PI3K/Akt信号通路活化,促进肿瘤细胞生长。

关键词：乳腺肿瘤 CUEDC2 细胞生长

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EphA2受体参与维持脑微血管内皮细胞的紧密连接结构

EphA2受体参与维持脑微血管内皮细胞的紧密连接结构

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：赵伟东周娜梁悦方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室

Eph受体与其配体ephrin参与调控多种生物学过程,如神经发育、血管发生和肿瘤生成等。目前,关于Eph受体与其配体ephrin在脑内皮细胞中的作用尚不清楚。我们利用分离培养的人脑微血管内皮细胞(HBMEC),检测了EphA受体和ephrin-A配体的表达... 详细信息

Eph受体与其配体ephrin参与调控多种生物学过程,如神经发育、血管发生和肿瘤生成等。目前,关于Eph受体与其配体ephrin在脑内皮细胞中的作用尚不清楚。我们利用分离培养的人脑微血管内皮细胞(HBMEC),检测了EphA受体和ephrin-A配体的表达谱,发现EphA1,2,3,4,6,7,10以及ephrin-A1,3,4,5在HBMEC中有表达。以重组ephrin-A1蛋白对HBMEC进行处理后,可以使HBMEC的EphA2受体发生明显的酪氨酸磷酸化,并使HBMEC单层的通透性升高,紧密连接蛋白ZO-1和occludin的分布发生改变(由连续、线状变为断续、紊乱)。RNA干扰HBMEC的EphA2后,可以改善HBMEC单层的通透性,并能促进紧密连接形成。将EphA2激酶缺失突变体转染至HBMEC后,也获得了与RNA干扰EphA2相似的结果。我们还发现,EphA2的功能失活后,可以削弱HBMEC的迁移能力,抑制HBMEC的血管生成能力。体内实验发现,EphA2特异性表达于脑微血管中。综上,我们认为EphA2受体是维持脑微血管内皮细胞紧密连接结构的重要分子。

关键词： EphA2受体脑微血管紧密连接血管生成

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血管内皮细胞生长因子受体1参与*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：赵伟东刘东鑫刘巍方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室

从细胞分子水平探讨病原体与宿主细胞相互作用的机理逐渐成为细胞生物学领域的新兴热点。研究表明,新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌是带有K1抗原的大肠杆菌(即***1),*** K1导致脑膜炎的前提条件是播散入血的*** K1能够穿过... 详细信息

从细胞分子水平探讨病原体与宿主细胞相互作用的机理逐渐成为细胞生物学领域的新兴热点。研究表明,新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌是带有K1抗原的大肠杆菌(即***1),*** K1导致脑膜炎的前提条件是播散入血的*** K1能够穿过血脑屏障进入脑内。我们利用分离培养的人脑微血管内皮细胞(HBMEC)构建了体外血脑屏障模型,在此基础上探讨*** K1侵袭血脑屏障的分子机制。我们首次发现,HBMEC上的血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR1)参与了***1侵袭HBMEC。VEGFR受体抑制剂和针对VEGFR1的siRNA可以明显阻断***1侵袭所导致的HBMEC肌动蛋白微丝的重排,并可抑制*** K1侵袭HBMEC。在*** K1侵袭HBMEC时,VEGFR1和*** K1有明显的共定位。VEGFR1能够与PI3K的p85亚单位形成复合物,导致PI3K下游的Akt的活化。此外,Src激酶作为PI3K/Akt上游的信号分子也参与了Ecoli K1侵袭HBMEC。这些结果进一步揭示了大肠杆菌侵袭血脑屏障的分子机制。

关键词：大肠杆菌K1株人脑微血管内皮细胞信号转导

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Aβ沉积上调人脑微血管内皮细胞CCR5表达的机制和意义

Aβ沉积上调人脑微血管内皮细胞CCR5表达的机制和意义

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：李曼尚德淑方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

阿尔兹海默病(AD)是与年龄相关的认知障碍性疾病。AD 病理机制仍不清楚,但大量的基因和生化证据表明β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集发挥着重要作用。研究发现 AD 病人脑内 T 淋巴细胞增多,但循环中的 T 淋巴细胞穿过血脑屏障的机制并不清楚... 详细信息

阿尔兹海默病(AD)是与年龄相关的认知障碍性疾病。AD 病理机制仍不清楚,但大量的基因和生化证据表明β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集发挥着重要作用。研究发现 AD 病人脑内 T 淋巴细胞增多,但循环中的 T 淋巴细胞穿过血脑屏障的机制并不清楚。我们前期工作发现 T 淋巴细胞高表达 MIP-1α,MIP-1α与人脑微

关键词： Aβ HBMEC CCR5 RAGE T 淋巴细胞

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大肠杆菌K1株毒力岛基因cgID导致脑膜炎脑脊液成分改变的机制

大肠杆菌K1株毒力岛基因cgID导致脑膜炎脑脊液成分改变的机制

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：张可赵伟东李强方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

脑脊液(CSF)在维持中枢神经系统内环境稳定中具有极为重要的作用。CSF 化学成分的改变,可以直接影响中枢神经系统的功能。在对大肠杆菌(***)K1株引起的新生儿脑膜炎患儿 CSF 进行生化检查中发现,其乳酸含量明显增高,患儿的预后与其在发... 详细信息

脑脊液(CSF)在维持中枢神经系统内环境稳定中具有极为重要的作用。CSF 化学成分的改变,可以直接影响中枢神经系统的功能。在对大肠杆菌(***)K1株引起的新生儿脑膜炎患儿 CSF 进行生化检查中发现,其乳酸含量明显增高,患儿的预后与其在发病期间 CSF 乳酸含量相关,但其机制不明。生物信息

关键词：大肠杆菌 cg1D 基因脑脊液甘油脱氢酶

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P21活化激酶6通过磷酸化雄激素受体与肿瘤E3连接酶Mdm2抑制前列腺癌的生长

P21活化激酶6通过磷酸化雄激素受体与肿瘤E3连接酶Mdm2抑制前列腺...

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细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉

作者：刘彤李洋顾卉朱戈李嘉滨曹流李丰教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院细胞生物教研室

The androgen receptor(AR) signaling pathway plays a crucial role in the development and growth of prostate *** of AR homeostasis in prostate tumorigenesis has not yet been fully *** the present study,we demonstrate that p21-activated kinase 6(PAK6) inhibits prostate tumorigenesis by regulating AR ***,we demonstrated that in normal prostate epithelium,

关键词： PAK6 AR Mdm2 phosphorylation ubiquitin degradation homeostasis

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