检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2020年第5期26卷 500-503页

作者：赵鑫月陈添娇于皓李孝琢尚德淑中国医科大学第二临床学院辽宁沈阳110004 中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122 中国医科大学生命科学学院辽宁沈阳110122

目的构建小鼠resistin基因表达载体,并将其导入小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中,从而建立能够高表达resistin的单核巨噬细胞系。方法从小鼠脂肪组织提取mRNA,PCR后连接到真核表达载体进行测序验证,同时构建慢病毒载体,感染至RAW264.7细胞... 详细信息

目的构建小鼠resistin基因表达载体,并将其导入小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞中,从而建立能够高表达resistin的单核巨噬细胞系。方法从小鼠脂肪组织提取mRNA,PCR后连接到真核表达载体进行测序验证,同时构建慢病毒载体,感染至RAW264.7细胞中,通过荧光显微镜观察是否转染成功,ELISA方法检测蛋白分泌水平。结果双酶切结果显示构建的质粒中有大小为345bp的resistin插入条带;经过测序及BLAST比对,插入序列与Genebank中resistin的小鼠CDS序列相同,没有移码突变;荧光显微镜观察病毒感染后的RAW264.7细胞,红色荧光比率达到70%;ELISA检测培养的感染细胞上清中resistin分泌显著增加。结论成功获得了能够分泌resistin蛋白的单核/巨噬细胞。

关键词：阿尔茨海默病 resistin基因 Raw264.7细胞病毒感染

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小鼠肝癌与肝正常细胞系ST3Gal和ST6Gal家族mRNA表达差异研究

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生命科学研究 2011年第4期15卷 323-327页

作者：马汝海王冬青潘忠诚王天骄何群赵雨杰中国医科大学基础医学院化学教研室中国辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院教育部细胞生物学重点实验室生物芯片中心中国辽宁沈阳110001

探讨肝癌细胞系Hepa1-6与肝正常细胞系BNL CL.2唾液酸糖基转移酶ST3Gal和ST6Gal家族mRNA表达的差异以及与细胞膜唾液酸含量的关系,采用RT-PCR方法检测ST3Gal唾液酸转移酶家族6个成员以及ST6Gal唾液酸转移酶家族2个成员mRNA表达差异,用... 详细信息

探讨肝癌细胞系Hepa1-6与肝正常细胞系BNL CL.2唾液酸糖基转移酶ST3Gal和ST6Gal家族mRNA表达的差异以及与细胞膜唾液酸含量的关系,采用RT-PCR方法检测ST3Gal唾液酸转移酶家族6个成员以及ST6Gal唾液酸转移酶家族2个成员mRNA表达差异,用凝集素芯片检测细胞膜表面唾液酸表达情况,结果显示:与正常细胞系BNL CL.2相比,hepa1-6细胞内唾液酸转移酶ST3GalⅠ、ST3GalⅣ、ST3GalⅥ呈现高表达,ST3GalⅤ低表达,ST3GalⅡ、ST3GalⅢ表达无显著性差异,两细胞系内均为检测出ST6GalⅠ表达,ST6GalⅡ表达无显著差异;hepa1-6细胞膜α2-3和α2-6连接唾液酸含量均显著增加;提示ST3GalⅠ、ST3GalⅣ、ST3GalⅤ、ST3GalⅥ可能与肝癌发生过程相关,ST3GalⅠ、ST3GalⅣ、ST3GalⅥ可能与肝癌细胞膜α2-3唾液酸含量增加相关,ST6Gal家族对细胞膜α2-6连接唾液酸含量增加无贡献.

关键词：唾液酸糖基转移酶肝癌细胞膜糖基化

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一个家族性慢性良性天疱疮家系的遗传学分析

一个家族性慢性良性天疱疮家系的遗传学分析

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2014全球华人遗传学大会全国第十三次医学遗传学学术会议

作者：邢雪莎张世发刘双王述森罗阳中国医科大学医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳市陆军总医院皮肤科

目的:家族性慢性良性天疱疮(Harley-Harley Disease,HHD)是一种少见的大疱性皮肤病,皮肤皱褶部位反复出现瘙痒性水疱、糜烂,常染色体显性遗传,70%的患者有家族史,多于青春期以后发病。该病是由ATP2C1基因突变所致,且突变遍布于整个基因... 详细信息

目的:家族性慢性良性天疱疮(Harley-Harley Disease,HHD)是一种少见的大疱性皮肤病,皮肤皱褶部位反复出现瘙痒性水疱、糜烂,常染色体显性遗传,70%的患者有家族史,多于青春期以后发病。该病是由ATP2C1基因突变所致,且突变遍布于整个基因,没有热点区域,以错义突变和无义突变为主。本实验室收集到1个HHD家系,旨在对致病

关键词：家族性慢性良性天疱疮基因突变

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一成骨不全家系的基因突变分析

一成骨不全家系的基因突变分析

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：陈晨曹丽华马旭罗阳中国医科大学医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳市骨科医院骨科研究所病房

目的成骨发育不全(osteogenesis imperfecta,OI)是一种最常见的遗传性骨骼脆性增加的疾病,以骨脆性增加或畸形,蓝色巩膜,身材矮小,牙本质发育不全及听力损害为主要特征。大多数病例是编码Ⅰ型胶原Ⅱ链的COLlA1或COLlA2基因突变所致,一... 详细信息

目的成骨发育不全(osteogenesis imperfecta,OI)是一种最常见的遗传性骨骼脆性增加的疾病,以骨脆性增加或畸形,蓝色巩膜,身材矮小,牙本质发育不全及听力损害为主要特征。大多数病例是编码Ⅰ型胶原Ⅱ链的COLlA1或COLlA2基因突变所致,一般呈常染色体显性遗传方式。本研究针对一中国成骨不全家系进行基因突变分析,以明确其致病突变。方法在签署知情同意后,采集该家系中患者和表型正常个体外周静脉血3ml,使用UniversalGenomic DNA Extraction Kit Ver.3.0(TaKaRa)试剂盒提取基因组DNA,对COL1A1和COL1A2基因外显子进行PCR扩增,对扩增产物进行测序分析;同时采用PCR-RFLP方法通过聚丙烯酰胺凝胶电泳验证所发现的变异在人群中存在的频率;在COL1A1基因及其上下游区域选取两个微卫星标记WI-6632,D7S657和一个短串联重复AC*21,在COL1A2基因及其上下游区域选取5个微卫星标记D17S1293,D17S1868,D17S1180,D17S1319和D17S788,PCR扩增以上遗传标记并进行单体型分析;针对可能的致病突变,进行RNA水平的分析,Trizol法提取新鲜外周静脉血中总RNA,使用PrimeScript(?)RT reagent Kit(TaKaRa)反转录并用基因特异性引物扩增突变位点所在区域,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物大小,同时进行克隆测序分析。结果在先证者COL1A2基因发现杂合突变c.3313G>A(***1105Ser),但在家系中该突变不与患者共分离;在先证者COL1A1基因发现杂合突变c.1299+5G>C,该突变在家系中与患者共分离。在146个无关正常个体中均未发现存在以上两个突变。单体型分析结果支持该家系中COL1A1基因致病,不支持COL1A2基因致病。针对c.1299+5G>C突变,进行RNA剪切分析,琼脂糖凝胶电泳显示患者COL1A1基因的扩增子与家系中正常个体大小一致。对扩增产物进行克隆测序分析显示存在剪接改变,在原始剪接位点前缺失8个碱基,即c.1292 1299del(***432*)。结论以上结果在DNA水平和RNA水平初步证实该成骨不全家系为COL1A1基因致病,其致病突变c.1292 1299del为国际首报;COLlA2基因突变c.3313G>A在国际上已经报道过2次,其在成骨不全致病机制中的作用有待进一步研究,推测其也可能为罕见的SNP位点。

关键词：成骨发育不全 COL1A1 COL1A2 基因突变

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北方城市体检大样本人群代谢综合征NAFLD和ED的危险因素探讨(英文)

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心血管康复医学杂志 2012年第2期21卷 112-117页

作者：徐锦春陈思娇王巍张浩陈婕王统彩吴鹏丽赵一婷程新贺谦宋今丹中国医科大学附属第一医院干部医疗工作部老年病教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院体检中心中国医科大学医学分子生物学研究所卫生部细胞生物学重点实验室

目的:探讨代谢综合征(MS)的非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)和血管性勃起功能障碍(Erectile dysfunction,ED)的危险因素。方法:从2008～2009年北方城市健康体检人群中随机整群抽样资料完整者18 096例为研究... 详细信息

目的:探讨代谢综合征(MS)的非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)和血管性勃起功能障碍(Erectile dysfunction,ED)的危险因素。方法:从2008～2009年北方城市健康体检人群中随机整群抽样资料完整者18 096例为研究对象,并分析探讨NAFLD和ED的危险因素。结果:本次研究对象为18 096例,年龄18～76岁,平均(46.8±10.1)岁。男10 096例(55.79%),女8 000例(44.21%)。MS知晓率为8.33%;成年健康体检者MS的患病率为21.18%。MS最常见的成分依次是高尿酸血症(27%,4838/18096)、肥胖和超重(21%)、高血压(20%)和血脂异常(17%)。MS各亚组的人体质量指数(BMI,kg/m2)和腰臀比(WHR)从高到低分别依次为ED[(28.9±1.1)、(1.26±0.03)]、超重或肥胖[(27.5±2.3)、(1.31±0.03)]、糖尿病前期[(26.8±2.6)、(1.03±0.03)]和高血压[(26.1±1.3)、(0.90±0.04)]。MS伴发NAFLD 3721例,患病率为20.56%;以MS伴发的NAFLD为因变量,Logistic回归分析显示:ALT升高、腰围、年龄、DM家族史、LDL-C、BMI(依次β=1.004～0.479,P=0.000～0.016)等为NAFLD的危险因素,体育锻炼和职业性体力劳动为其保护因素。ED106例,患病率为1.04%;Logistic回归分析显示:年龄、腰围、LDL-C、DM家族史、BMI(依次β=0.681～0.238,P=0.000～0.018)等为ED的危险因素,文化程度、体育锻炼和职业性体力劳动为其保护因素。结论:MS合并的NAFLD和ED的危险因素与MS关系密切,针对MS危险因素的矫正是预防和治疗NAFLD,ED的新途径。

关键词：代谢综合征脂肪肝阳痿

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TGF-β/TβR1通路通过上调MMP2表达促进头颈鳞状细胞癌侵袭

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东南大学学报（医学版） 2012年第5期31卷 555-558页

作者：代炜姚远李彦姝张红艳李妍秦兴军中国医科大学口腔医学院口腔颌面外科口腔颌面-头颈肿瘤外科辽宁沈阳110002 辽宁省人民医院消化内科辽宁沈阳110016 中国医科大学细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室辽宁沈阳110001

目的:研究转化生长因子受体1(TβR1)与基质金属蛋白酶-2(MMP2)在头颈鳞状细胞癌中的关系及其对肿瘤细胞侵袭转移机制的调控。方法:构建稳定过表达TβR1的UM-SCC-23细胞系,SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法鉴定细胞系构建。利用Real-time PCR... 详细信息

目的:研究转化生长因子受体1(TβR1)与基质金属蛋白酶-2(MMP2)在头颈鳞状细胞癌中的关系及其对肿瘤细胞侵袭转移机制的调控。方法:构建稳定过表达TβR1的UM-SCC-23细胞系,SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法鉴定细胞系构建。利用Real-time PCR和蛋白质印迹法检测MMP2在稳转细胞系中的表达。细胞侵袭试验检测稳转TβR1的UM-SCC-23细胞系侵袭能力。结果:成功构建了稳定表达TβR1的UM-SCC-23,MMP2在TβR1过表达的UM-SCC-23细胞中基因和蛋白水平表达均增高,稳定表达了TβR1的UM-SCC-23细胞侵袭能力增强。结论:TGF-β/TβR1通路能够上调MMP2表达,促进头颈鳞状细胞癌侵袭能力增强。

关键词：转化生长因子受体1 基质金属蛋白酶-2 稳转细胞系侵袭转移

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遗传性弥漫性胃癌相关基因表达及突变分析

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解剖科学进展 2010年第3期16卷 193-196页

作者：陈红曹丽华王述森胡煜罗阳中国医科大学医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 沈阳工业大学电气工程学院辽宁沈阳110870

目的研究遗传性弥漫性胃癌相关基因表达及突变,探讨遗传性弥漫性胃癌家系发病的分子遗传学机制。方法免疫组织化学S-P法检测该家系先证者胃癌组织中E-cadherin、β-catenin、SMAD4、TP53和ANXA10蛋白的表达情况,PCR扩增结合DNA测序筛查E... 详细信息

目的研究遗传性弥漫性胃癌相关基因表达及突变,探讨遗传性弥漫性胃癌家系发病的分子遗传学机制。方法免疫组织化学S-P法检测该家系先证者胃癌组织中E-cadherin、β-catenin、SMAD4、TP53和ANXA10蛋白的表达情况,PCR扩增结合DNA测序筛查E-cadherin、SMAD4、P53和ANXA10基因的所有编码序列以及外显子-内含子交界处序列的种系突变情况。结果与先证者癌旁组织相比,癌组织中E-cadherin、SMAD4、TP53和ANXA10蛋白表达缺失,β-catenin表达降低。检测到SMAD4基因一个新的多态性位点即第1内含子24位碱基出现杂合性A>G的改变,E-cadherin基因和ANXA10基因只检测到一些已知多态,未发现种系突变,P53基因未发现任何突变。结论 E-cadherin、β-catenin、SMAD4和ANXA10蛋白异常表达,提示它们可能参与遗传性弥漫性胃癌家系的发病机制,但排除了E-cadherin、SMAD4和ANXA10基因外显子突变导致该病发病的可能性。

关键词：胃癌遗传性疾病种系突变 E-cadherin SMAD4

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细胞芯片在急性淋巴细胞白血病免疫分型中的应用

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中国实验诊断学 2005年第4期9卷 502-505页

作者：秦海明赵雨杰候伟健吴广平刘建何群沈阳军区总医院检验科辽宁沈阳110016 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室生物芯片中心中国医科大学临床病理诊断中心沈阳医学院生物教研室

目的设计一种细胞芯片,只需简单步骤,可将不同膜抗原的细胞分离、固定在相应抗体区域.并进行急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫分型.方法将CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD11a、CD13、CD14、CD15、CD19、CD20、CD22、CD33、CD34... 详细信息

目的设计一种细胞芯片,只需简单步骤,可将不同膜抗原的细胞分离、固定在相应抗体区域.并进行急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫分型.方法将CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD11a、CD13、CD14、CD15、CD19、CD20、CD22、CD33、CD34、CD44、CD45、CD45RA和HLA-DR等21种单克隆抗体(每种抗体2个点)固定于醛基玻片上,以刀豆凝集素做阳性对照和指示点,形成9×7的微阵列.从20例健康志愿者和20例ALL患者0.5～1 ml全血中分离出的单个核细胞,其中半量用吖啶橙预染5 min,两部分细胞经PBS洗涤3次后与细胞芯片反应,轻洗去未结合细胞.未预染细胞的芯片经2.5%戊二醛固定后进行瑞氏染色,用光学显微镜直接观察.预染细胞的芯片用GeneTACⅣ扫描仪进行扫描.结果ALL患者与健康志愿者的淋巴细胞抗原表型有十分明显的差别,其中单一抗体强阳性的有15例,T-ALL中2例CD3强阳性、2例CD4强阳性、2例CD7强阳性和1例CD5强阳性,B-ALL中2例CD10强阳性、3例CD19强阳性、1例CD20强阳性和2例HLA-DR强阳性,双克隆抗体阳性的有5例,其中2例CD4、CD7强阳性,2例CD4、CD5强阳性,1例CD4、CD11a强阳性,与临床诊断相符.强阳性点上的幼稚淋巴细胞与非强阳性点上的细胞无论在细胞数量、细胞大小、形态规则性上都有明显的不同,用显微镜观察十分明显.结论选用玻片做为载体,操作简单易行,结果便于观察,从而实现免疫学与形态学相结合.ALL显示了恶性肿瘤的单克隆增生的性质.

关键词：细胞芯片白血病免疫分型 CD抗体

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小分子化合物G-052抑制胃癌细胞侵袭及其分子机制

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解剖科学进展 2016年第3期22卷 279-281页

作者：张健刘奇王健由良浩李丹妮李丰中国医科大学基础医学院细胞生物教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122 沈阳药科大学制药工程学院沈阳110016 中国医科大学附属第一医院肿瘤内科沈阳110001

目的研究小分子化合物G-052对于人胃癌细胞增殖和侵袭的影响及可能分子机制。方法用MTT检测不同浓度小分子化合物G-052对胃癌细胞BGC823和MKN-45增殖能力的影响。分别用0、20、40、60μmol/L浓度的G-052处理BGC823和MKN-45两种胃癌细胞... 详细信息

目的研究小分子化合物G-052对于人胃癌细胞增殖和侵袭的影响及可能分子机制。方法用MTT检测不同浓度小分子化合物G-052对胃癌细胞BGC823和MKN-45增殖能力的影响。分别用0、20、40、60μmol/L浓度的G-052处理BGC823和MKN-45两种胃癌细胞,应用Transwell小室检测其对上述胃癌细胞侵袭能力的抑制作用,Western Blot检测化合物对金属基质蛋白酶2(MMP2)表达及丝切蛋白(Cofilin)磷酸化水平的影响。结果化合物G-052以剂量依赖的方式抑制BGC823和MKN-45细胞的侵袭能力,但对增殖能力无明显影响。Western Blot结果显示G-052下调胃癌细胞BGC823中MMP2的表达及Cofilin的磷酸化水平。结论 G-052抑制胃癌细胞BGC823、MKN-45的侵袭可能与下调MMP2的表达及Cofilin磷酸化水平相关。

关键词： G-052 胃癌侵袭 MMP2 Cofilin

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不同胎龄人脐带血间充质干细胞研究

不同胎龄人脐带血间充质干细胞研究

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：马兰兰施萍庞希宁中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室干细胞与再生医学研究室中国医科大学基础医学院生理教研室中国医科大学附属第一医院全科医学教研室

目的:比较不同胎龄脐带血中MSCs数量和生长特性的差别,分析脐带血成功培养山MSCs的影响因素,探讨脐带血MSCs生物学特性。方法:应用单管多色荧光技术分析了不同胎龄脐带血中CD44、CD105阳性而CD34、CD45阴性细胞的数量,并提取脐带血中单... 详细信息

目的:比较不同胎龄脐带血中MSCs数量和生长特性的差别,分析脐带血成功培养山MSCs的影响因素,探讨脐带血MSCs生物学特性。方法:应用单管多色荧光技术分析了不同胎龄脐带血中CD44、CD105阳性而CD34、CD45阴性细胞的数量,并提取脐带血中单个核细胞进行培养和培养后免疫荧光染色。结果:52例脐带血中CD44(+)、CD105(+)/CD34(-)、CD45(-)细胞在10例28周～30周脐带血中的数量为15±0.2个/百万有核细胞;在12例31周～33周脐带血中为11±0.3个/百万有核细胞;在10例34周～36周脐带血中为10±0.1个/百万有核细胞;在10例37周～39周脐带血中为6±0.5个/百万有核细胞;在10例40周～42周脐带血中,为2±0.3个/百万有核细胞。37周～40周脐带血12份,28周～36周脐带血12例培养分别有1份和3份出现旋涡状排列的间充质样的细胞且免疫荧光染色呈CD45(-)和CD90(+)。结论:脐血中含有MSCs,随胎龄增加数量减少:胎龄小脐带血MSCs接种成功率高于胎龄大脐带血的接种成功率。

关键词：脐带血间充质干细胞流式细胞术

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