检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验诊断学 2005年第4期9卷 502-505页

作者：秦海明赵雨杰候伟健吴广平刘建何群沈阳军区总医院检验科辽宁沈阳110016 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室生物芯片中心中国医科大学临床病理诊断中心沈阳医学院生物教研室

目的设计一种细胞芯片,只需简单步骤,可将不同膜抗原的细胞分离、固定在相应抗体区域.并进行急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫分型.方法将CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD11a、CD13、CD14、CD15、CD19、CD20、CD22、CD33、CD34... 详细信息

目的设计一种细胞芯片,只需简单步骤,可将不同膜抗原的细胞分离、固定在相应抗体区域.并进行急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫分型.方法将CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD11a、CD13、CD14、CD15、CD19、CD20、CD22、CD33、CD34、CD44、CD45、CD45RA和HLA-DR等21种单克隆抗体(每种抗体2个点)固定于醛基玻片上,以刀豆凝集素做阳性对照和指示点,形成9×7的微阵列.从20例健康志愿者和20例ALL患者0.5～1 ml全血中分离出的单个核细胞,其中半量用吖啶橙预染5 min,两部分细胞经PBS洗涤3次后与细胞芯片反应,轻洗去未结合细胞.未预染细胞的芯片经2.5%戊二醛固定后进行瑞氏染色,用光学显微镜直接观察.预染细胞的芯片用GeneTACⅣ扫描仪进行扫描.结果ALL患者与健康志愿者的淋巴细胞抗原表型有十分明显的差别,其中单一抗体强阳性的有15例,T-ALL中2例CD3强阳性、2例CD4强阳性、2例CD7强阳性和1例CD5强阳性,B-ALL中2例CD10强阳性、3例CD19强阳性、1例CD20强阳性和2例HLA-DR强阳性,双克隆抗体阳性的有5例,其中2例CD4、CD7强阳性,2例CD4、CD5强阳性,1例CD4、CD11a强阳性,与临床诊断相符.强阳性点上的幼稚淋巴细胞与非强阳性点上的细胞无论在细胞数量、细胞大小、形态规则性上都有明显的不同,用显微镜观察十分明显.结论选用玻片做为载体,操作简单易行,结果便于观察,从而实现免疫学与形态学相结合.ALL显示了恶性肿瘤的单克隆增生的性质.

关键词：细胞芯片白血病免疫分型 CD抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

诱导胚胎干细胞向神经细胞分化方法的研究与探讨

引用

细胞生物学杂志 2004年第2期26卷 145-148页

作者：顾文佳庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室发育生物学教研室沈阳110001

胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,... 详细信息

胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,分析了一些方法的原理并初步探讨其相关的分子机制,并提出一些可行性新方法。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化因其体外的可操作性、来源的广泛性及质量可控性将有可能成为临床上治疗神经系统疾病的有效方法。

关键词：诱导胚胎干细胞神经细胞分化 ES细胞神经系统疾病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种新的短链脱氢/还原酶家族新成员:NADP(H)-依赖的视黄醇脱氢酶基因的克隆和分析

引用

Acta Genetica Sinica 2004年第4期31卷 403-410页

作者：王桂玲黄东阳中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 汕头大学医学院分子生物学中心汕头515031

从牛的肝脏中快速抽提总RNA ,根据GenBank已发表NADP(H) 依赖的视黄醇脱氢酶基因 (NRDR)的cDNA序列 ,设计并合成特异引物 ,利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法和反转录聚合酶链式反应 (RT PCR) ,得到牛肝内的NRDRcDNA的全长序列。经测... 详细信息

从牛的肝脏中快速抽提总RNA ,根据GenBank已发表NADP(H) 依赖的视黄醇脱氢酶基因 (NRDR)的cDNA序列 ,设计并合成特异引物 ,利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法和反转录聚合酶链式反应 (RT PCR) ,得到牛肝内的NRDRcDNA的全长序列。经测序证实 ,牛肝NRDR的全长cDNA序列为 12 6 6bp ,其开放读码框架在 2 4～ 80 6bp ,编码 2 6 0个氨基酸 (GenBank登录号 :AF4 874 5 4 )。根据NRDR基因推导出的氨基酸序列与人、鼠、兔有高度同源性 ,并含有SDR超家族成员的两个高度保守的模序 ,在其C 端含有过氧化物酶体的靶向序列为SHL。结果表明 ,牛的NRDR应属于过氧化物酶体内SDR超家族成员并在维甲酸合成的限速步骤起作用的酶 ,也为维甲酸合成的传统通路提供一个补充。

关键词： NADP(H)-依赖的视黄醇脱氢酶基因(NRDR) 克隆 cDNA末端快速扩增(RACE) 序列分析短链脱氢/还原酶(SDR)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人肝脏辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的表达与细胞内定位

引用

细胞生物学杂志 2004年第4期26卷 433-438页

作者：刘戈飞黄东阳杜晶崔泽实宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室细胞生物学教研室沈阳110001 汕头大学医学院汕头515031 中国医科大学实验技术中心沈阳110001

应用杆状病毒蛋白表达系统在Sf9细胞中对人肝脏辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢／还原酶(NADP-dependent retinol dehydrogenase／reductase,NRDR)进行表达。以纯化的重组蛋白质为材料,分析NRDR的催化活性和酶促反应性质。结果证实,人肝脏NRDR... 详细信息

应用杆状病毒蛋白表达系统在Sf9细胞中对人肝脏辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢／还原酶(NADP-dependent retinol dehydrogenase／reductase,NRDR)进行表达。以纯化的重组蛋白质为材料,分析NRDR的催化活性和酶促反应性质。结果证实,人肝脏NRDR具有视黄醛还原酶活性,在辅酶Ⅱ存在条件下其催化视黄醛还原成视黄醇的Km值和Vmax值分别(2.8±0.24)μM和(0.468±0.036)μmol／(min·mg)。构建删除和不删除羧基端过氧化物酶体定位信号SRL序列的NRDR绿色荧光蛋白报告基因表达载体。转染HeLa细胞后,应用免疫荧光双染色的方法分析NRDR细胞内定位。结果表明NRDR定位在细胞内过氧化物酶体。羧基端SRL序列对NRDR定位到过氧化物酶体是必需的,删除SRL序列的NRDR分布在细胞质中。因此,人肝脏NRDR是存在于过氧化物酶体中的辅酶Ⅱ依赖性视黄醛还原酶。

关键词：辅酶II依赖性视黄醇脱氢/还原酶全反式视黄酸人肝脏表达细胞活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种从人血凝块中提取基因组DNA的方法

引用

细胞生物学杂志 2004年第5期26卷 548-549页

作者：陈立姜莉罗阳张学中国医科大学医学基因组学研究室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

介绍了一种新的从人血凝块中提取基因组DNA的方法,用该方法提取的DNA成功地应用于PCR和限制性酶切等后续实验中。基本过程为首先机械粉碎,然后高盐高EDTA溶液处理,含蛋白酶K和SDS的消化液变换温度消化,苯酚氯仿抽提。

关键词：血凝块人基因组DNA 聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

血管内皮生长因子及其受体在鼠成骨细胞分化中的作用

引用

中华实验外科杂志 2004年第7期21卷 852-854,F003页

作者：李长有宋今丹原银栋范广宇中国医科大学第一临床学院骨科沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部重点实验室

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼠成骨细胞分化过程中的作用。方法利用鼠原代FRC细胞培养系统(第0、5、9、14天)和取材新生鼠颅盖骨组织(5例),采用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组织化学染色方法,检测VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼠成骨细胞分化过程中的作用。方法利用鼠原代FRC细胞培养系统(第0、5、9、14天)和取材新生鼠颅盖骨组织(5例),采用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组织化学染色方法,检测VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在FRC细胞分化、矿化过程中mRNA和在新生鼠颅盖骨组织中蛋白质的表达。结果在控制培养条件下,FRC细胞出现明显的成骨特性。结合FRC细胞分化特性,RTPCR检测发现VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在FRC细胞中从分化到矿化过程中,mRNA表达逐渐增强。特别是在矿化后第9天和第14天表达水平明显增强。免疫组织化学染色证实了RTPCR结果,新生鼠颅盖骨中的成骨细胞同时表达VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1。结论VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在成骨细胞分化和矿化过程中表达逐渐增强。作为一种重要的血管性因子,VEGF的自分泌作用方式在成骨细胞的分化中起重要作用。

关键词：血管内皮生长因子受体鼠成骨细胞自分泌作用免疫组织化学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种原位示踪外源目的基因表达载体的构建

引用

中国生物工程杂志 2004年第9期24卷 89-92页

作者：刘琦罗阳姜莉张学中国医科大学医学基因组学研究室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

应用分子克隆技术 ,分别将增强型绿色荧光蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)、内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES)和编码H ras基因C端 2 0个氨基酸的DNA(rasc2 0 )片段插入真核表达载体pcDNA3,构建真核重组表达载体并将其命名为pZX。通过脂质体介导将该载体转染人宫颈癌细胞系HeLa ,培养过夜后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在细胞内的分布 ,并与pEGFP C3质粒DNA转染该细胞系进行比较。结果表明 ,转染pZX载体的实验组细胞膜发出绿色荧光 ,而对照组绿色荧光则均匀弥散于整个细胞中。

关键词：转染 EGFP IRES 脂质体介导 H-ras基因对照组分子克隆技术目的基因表达载体真核

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的编码产物为外膜蛋白前体

引用

中国生物化学与分子生物学报 2004年第4期20卷 497-501页

作者：赵伟东陈誉华黄胜和中国医科大学发育生物学研究室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 美国南加州大学医学院洛杉矶儿童医院洛杉矶ca90027

为进一步探讨大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的生物学特性 ,将ibeB基因克隆到pET2 8a(+)载体 ,以E .coliBL2 1 (DE3)为宿主菌 ,经IPTG诱导后 ,通过Ni2 + NTA树脂提纯IbeB蛋白 .SDS PAGE确定纯化蛋白的分子量 ;应用无蛋白酶的体... 详细信息

为进一步探讨大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的生物学特性 ,将ibeB基因克隆到pET2 8a(+)载体 ,以E .coliBL2 1 (DE3)为宿主菌 ,经IPTG诱导后 ,通过Ni2 + NTA树脂提纯IbeB蛋白 .SDS PAGE确定纯化蛋白的分子量 ;应用无蛋白酶的体外转录和翻译系统进一步鉴定ibeB基因表达蛋白的分子量 ;通过 [3 5S]Met标记的体内T7表达体系并结合膜蛋白分离技术定位IbeB蛋白在细菌中的亚细胞分布 ;利用细菌侵袭实验分析IbeB蛋白抗体对E .coliK1侵袭人脑微血管内皮细胞的封闭作用 .结果发现 ,ibeB基因的重组蛋白表达纯化产物呈现出 5 0kD和 34kD两种分子量大小 ,5 0kD存在于表达细菌的可溶性部分 ,而 34kD则存在于包涵体中 ;体外翻译实验也显示出较弱的 5 0kD和较浓的 34kD两个蛋白带 ;体内T7表达体系实验显示 34kD的IbeB成熟蛋白定位于E .coli的外膜 ;抗 34kDIbeB蛋白抗体能封闭E .coli对人脑微血管内皮细胞的侵袭 .这些结果提示 ,大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的编码产物为 5 0kD的外膜蛋白前体 ,该前体可通过分子内剪接形成成熟的

关键词：大肠杆菌 ibeB基因脑膜炎血脑屏障

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

铅对发育期小鼠脑一氧化氮合酶1表达的影响

引用

中国公共卫生 2004年第9期20卷 1077-1078页

作者：彭博侯伟健朱启文孙黎光中国医科大学门诊部沈阳110001 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室生物芯片中心沈阳医学院生理教研室中国医科大学生物化学与分子生物学教研室

目的　探讨不同浓度铅对发育期小鼠脑中一氧化氮合酶 (NOS)表达的影响及其与小鼠学习记忆功能的关系。方法　分别于P1生后 1d ,P8,P15 ,P2 2 ,P30等 5个时间段取不同浓度染铅的幼鼠脑海马组织进行蛋白免疫印迹实验。结果　对照组小鼠脑... 详细信息

目的　探讨不同浓度铅对发育期小鼠脑中一氧化氮合酶 (NOS)表达的影响及其与小鼠学习记忆功能的关系。方法　分别于P1生后 1d ,P8,P15 ,P2 2 ,P30等 5个时间段取不同浓度染铅的幼鼠脑海马组织进行蛋白免疫印迹实验。结果　对照组小鼠脑中一氧化氮合酶 1从P1至P30逐渐降低 ,低浓度染铅 ( 0 5mmol/L)组个别时段NOS1升高 ,较高浓度染铅 ( 2 4～ 7 2mmol/L)组有较多时段升高 ,但更高浓度的染铅 ( 9 6～ 14 4mmol/L)组NOS1表达逐渐降低。结论　染铅小鼠脑NOS1表达与未染铅组比较有明显变化。

关键词：铅一氧化氮合酶1(NOS1) 发育期小鼠学习记忆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

过氧化氢酶高表达抑制活性氧诱导的人晶状体上皮细胞凋亡

引用

中华眼科杂志 2004年第7期40卷 478-479页

作者：李立梅刘戈飞吴恩梅张劲松中国医科大学附属第一医院眼科沈阳110001 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室沈阳市皇姑区医院五官科

晶状体上皮细胞 (lens epithelial cell, LEC) 凋亡是除先天性白内障外各种类型白内障发生的共同分子机制[1],活性氧损伤是LEC凋亡的主要原因[2].

关键词：过氧化氢酶活性氧晶状体上皮细胞细胞凋亡白内障

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：