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人大肠癌细胞中内质网分子伴侣Grp94与c-myc癌基因在表达上的相关性

中华肿瘤杂志 1997年第2期19卷 81-84页

作者：陈誉华宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

探讨人大肠癌细胞中表达缺失性内质网分子伴侣Ｇｒｐ９４产物（Ｇｒｐ９４β）的生物学意义。方法应用地高辛标记ｃ－ｍｙｃｃＤＮＡ探针的斑点杂交，和以Ｇｒｐ９４基因近３′端一对寡核苷酸为引物的ＲＴ－ＰＣＲ技术，比较了人大肠癌... 详细信息

探讨人大肠癌细胞中表达缺失性内质网分子伴侣Ｇｒｐ９４产物（Ｇｒｐ９４β）的生物学意义。方法应用地高辛标记ｃ－ｍｙｃｃＤＮＡ探针的斑点杂交，和以Ｇｒｐ９４基因近３′端一对寡核苷酸为引物的ＲＴ－ＰＣＲ技术，比较了人大肠癌细胞系ＣＣＬ２２９、ＣＸ－１以及经维甲酸诱导的ＣＣＬ２２９细胞中Ｇｒｐ９４和ｃ－ｍｙｃ癌基因在表达上的关系。结果Ｇｒｐ９４和ｃ－ｍｙｃ癌基因在ＣＣＬ２２９细胞中的表达水平明显高于ＣＸ－１细胞，且随维甲酸诱导ＣＣＬ２２９细胞时间的延长，二者呈一致性地下降，并于诱导后第６天降至最低水平；而原来于ＣＣＬ２２９细胞中检测到的Ｇｒｐ９４基因的正常表达产物（Ｇｒｐ９４α），随维甲酸诱导时间的延长逐渐增加。结论提示Ｇｒｐ９４和ｃ－ｍｙｃ癌基因产物之间可能存在一定联系。

关键词：大肠肿瘤癌细胞内质网基因表达癌基因

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增殖细胞核抗原在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其临床病理意义

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中国实用妇科与产科杂志 1997年第3期13卷 149-150页

作者：潘伯臣宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

应用免疫组织化学方法检测了５９例上皮性卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，以探讨卵巢肿瘤中ＰＣＮＡ蛋白表达的临床病理意义。结果：ＰＣＮＡ在良、恶性上皮性卵巢瘤中均有表达，但卵巢癌中ＰＣＮＡ的阳性率（８０．９％... 详细信息

应用免疫组织化学方法检测了５９例上皮性卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，以探讨卵巢肿瘤中ＰＣＮＡ蛋白表达的临床病理意义。结果：ＰＣＮＡ在良、恶性上皮性卵巢瘤中均有表达，但卵巢癌中ＰＣＮＡ的阳性率（８０．９％）明显高于良性卵巢瘤中的阳性率（２５％，Ｐ＜０．０１）。卵巢癌中，高分化卵巢癌ＰＣＮＡ的阳性指数评分低于中、低分化卵巢癌（Ｐ＜０．００１），ＰＣＮＡ阳性指数评分与分化程度之间呈负相关，ｒｓ＝－０．５０（Ｐ＜０．０１）。Ⅰ／Ⅱ期卵巢癌ＰＣＮＡ指数阳性指数评分低于Ⅲ／Ⅳ期卵巢癌（Ｐ＜０．０５），ＰＣＮＡ阳性指数评分与临床期别之间呈正相关，ｒｓ＝０．４３（Ｐ＜０．０１）。结果提示，分化程度低、临床期别高的卵巢癌细胞增殖快，ＰＣＮＡ的检测有助于鉴别上皮性卵巢肿瘤的良、恶性，并有可能作为上皮性卵巢癌的预后指标。

关键词：卵巢肿瘤免疫组织化学增殖细胞核抗原病理

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正交试验考查MTT方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素

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癌症 1997年第6期16卷 459-460页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室

正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报... 详细信息

正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报道的具体做法各不相同，且实验结果受...

关键词：大肠肿瘤正交试验 MTT法药敏实验

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肿瘤导向治疗中免疫脂质体的研究现状

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癌症 1997年第3期16卷 238-240页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室

肿瘤导向治疗中免疫脂质体的研究现状方瑾宋今丹关键词肿瘤导向治疗免疫脂质体中图号Ｒ７３０．５单克隆抗体技术的应用使肿瘤化疗取得重大进展。由于单克隆抗体具有高纯度、高特异性的特点，在与抗癌药物偶联后可选择性地作用于肿瘤细... 详细信息

肿瘤导向治疗中免疫脂质体的研究现状方瑾宋今丹关键词肿瘤导向治疗免疫脂质体中图号Ｒ７３０．５单克隆抗体技术的应用使肿瘤化疗取得重大进展。由于单克隆抗体具有高纯度、高特异性的特点，在与抗癌药物偶联后可选择性地作用于肿瘤细胞，克服化疗药物对正常组织的损害，...

关键词：肿瘤导向治疗免疫脂质体

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一种简便实用的RNA制备方法

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中国医科大学学报 1997年第5期26卷 547-549页

作者：陈誉华宋今丹沈阳中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室110001

一种简便实用的ＲＮＡ制备方法陈誉华宋今丹（细胞生物学卫生部重点实验室，沈阳１１０００１）关键词核糖核酸；核酸杂交；反转录—多聚酶链反应ｃＤＮＡ克隆或从ｍＲＮＡ来分析细胞内某蛋白表达的首要步骤是提纯细胞的总ＲＮＡ。迄今... 详细信息

一种简便实用的ＲＮＡ制备方法陈誉华宋今丹（细胞生物学卫生部重点实验室，沈阳１１０００１）关键词核糖核酸；核酸杂交；反转录—多聚酶链反应ｃＤＮＡ克隆或从ｍＲＮＡ来分析细胞内某蛋白表达的首要步骤是提纯细胞的总ＲＮＡ。迄今有关细胞总ＲＮＡ的制备方法虽已常规...

关键词： RNA 制备核酸杂交聚合酶链反应反转录

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人大肠癌与早幼粒白血病细胞中内质网分子伴侣Grp94的差异表达

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科学通报 1997年第16期42卷 1773-1776页

作者：陈誉华宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室沈阳110001

内质网分子伴侣Grp（Glucose regulated protein）94属HSP（Heat shock protein）90家族,是正常细胞内质网腔中含量较丰富的蛋白质,在多种应激条件下其表达水平可明显升高。Grp94的主要功能是参与由内质网合成的蛋白质的折叠装配和跨膜... 详细信息

内质网分子伴侣Grp（Glucose regulated protein）94属HSP（Heat shock protein）90家族,是正常细胞内质网腔中含量较丰富的蛋白质,在多种应激条件下其表达水平可明显升高。Grp94的主要功能是参与由内质网合成的蛋白质的折叠装配和跨膜转运。人Grp94编码基因的cDNA长度为2780bp,与编码基因相比,它的两个假基因均有不同程度的插入、缺失与点突变。这些结果均是从非癌细胞研究中获得的。在癌细胞研究中了解到。

关键词：内质网分子伴铝 Grp94 大肠癌白血病癌细胞

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抗人结肠癌杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体特性研究

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细胞与分子免疫学杂志 1997年第2期13卷 25-28页

作者：张京航贺武中国医科大学微生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

本研究利用手术中取得的新鲜结肠癌组织免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制得５株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中ＨＣ６株杂交瘤细胞经过１８０ｄ连续培养，单克隆抗体ＭＣ６分泌稳定、选择性强、效价高。免疫组化检测发现，ＭＣ６相... 详细信息

本研究利用手术中取得的新鲜结肠癌组织免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制得５株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中ＨＣ６株杂交瘤细胞经过１８０ｄ连续培养，单克隆抗体ＭＣ６分泌稳定、选择性强、效价高。免疫组化检测发现，ＭＣ６相应抗原在结肠癌组织及结肠癌细胞系呈高度表达（９０～１００％），显著高于其它癌组织、癌旁组织、正常粘膜及癌细胞系（０～４４．４％）；中度以上染色者占阳性总数的８０％以上；主要分布于细胞膜上。除癌细胞膜和胞浆呈阳性反应外，腺腔内粘液亦可见不同程度的着色，表明ＭＣ６相应抗原是一种在结肠癌细胞膜上占优势的抗原，并可脱落至腺腔。此单克隆抗体的成功研制为发现新的结肠癌生化标志，结肠癌的早期诊断及术后病情的监测提供了可能性。

关键词：细胞融合杂交瘤单克隆抗体结肠肿瘤免疫组化

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HSP 70系统分析与ER的起源

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细胞生物学杂志 1997年第2期19卷 63-66页

作者：王秋雨宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

HSP 70是迄今研究过的进化上最保守的蛋白质之一,是分子伴侣的主要成分,对蛋白的跨膜转运及特定构象的维持等起着重要作用。对其序列进行系统分析表明,古细菌,真细菌和真核细胞内的HSP 70虽具有很强的相似性,但各具特点。真核细胞各区室... 详细信息

HSP 70是迄今研究过的进化上最保守的蛋白质之一,是分子伴侣的主要成分,对蛋白的跨膜转运及特定构象的维持等起着重要作用。对其序列进行系统分析表明,古细菌,真细菌和真核细胞内的HSP 70虽具有很强的相似性,但各具特点。真核细胞各区室(细胞器)的HSP 70顺序也既有共性,又有特性。根据ER HSP 70的特点,可推测出ER起源于真核细胞诞生的早期阶段,并由此引起细胞内的区室化,这是真核细胞区别于原核细胞的本质特征之一。

关键词：热休克蛋白 HSP70 分析内质网起源

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人癌细胞内质网分子伴侣Grp94基因近3′端的初步分析

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生物化学杂志 1997年第1期13卷 29-33页

作者：陈澄陈誉华宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室沈阳110001

采用PCR及RT－PCR方法结合核酸分子杂交技术，首次确定了与Grp94cDNA2231～2500碱基片段对应的Grp94基因序列上有内含子．含有内含子的扩增片段长约708bP．对三种癌细胞系进行了PCR和RT－PCR反应，电泳结果显示存在差异．研究结果为进... 详细信息

采用PCR及RT－PCR方法结合核酸分子杂交技术，首次确定了与Grp94cDNA2231～2500碱基片段对应的Grp94基因序列上有内含子．含有内含子的扩增片段长约708bP．对三种癌细胞系进行了PCR和RT－PCR反应，电泳结果显示存在差异．研究结果为进一步探讨Grp94基因3'端精细结构及其在正常细胞和肿瘤细胞中表达的改变打下了基础．

关键词：肿瘤癌细胞内质网分子伴侣 Grp94

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肝细胞与肝癌细胞内β-葡萄糖醛酸酶免疫电镜比较研究

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生物物理学报 1997年第2期13卷 191-194页

作者：张弘于安民孙爱静杨波宋今丹中国医科大学病理解剖学教研室沈阳军区沈阳总医院中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

β－葡萄糖醛酸酶（β－Ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ，简称β－Ｇ）在正常人体组织匀浆和体液中含量很低，在人体细胞中β－Ｇ超微结构定位尚未见报道。采用低温包埋，胶体金标记、免疫电镜技术，进行了人体肝细胞和肝癌细胞内β－Ｇ的... 详细信息

β－葡萄糖醛酸酶（β－Ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ，简称β－Ｇ）在正常人体组织匀浆和体液中含量很低，在人体细胞中β－Ｇ超微结构定位尚未见报道。采用低温包埋，胶体金标记、免疫电镜技术，进行了人体肝细胞和肝癌细胞内β－Ｇ的定位。实验结果表明，β－Ｇ定位于内质网，同时观察到肝癌细胞中标记β－Ｇ的金颗粒数目明显多于肝细胞中金颗粒数目。这一结果可能对肝癌的期发现。

关键词：肝癌癌细胞 β葡萄糖醛酸酶肝细胞免疫电镜

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