检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2011年第6期40卷 491-493页

作者：刘芙蓉李彦姝张红艳苏楠李家滨李丰中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用... 详细信息

目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用GST-beads纯化诱导的融合蛋白,经Western blot印迹鉴定。结果 SCG10全长编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在BL21大肠杆菌中IPTG诱导融合蛋白的表达分子量为47 kDa,成功纯化出GST及GST-SCG10蛋白,Wstern blot检测到蛋白表达。结论构建了SCG10基因原核表达载体,鉴定了GST-SCG10融合蛋白表达。

关键词： SCG10蛋白纯化融合蛋白 Western blot

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抗人大肠癌单链抗体的构建、表达及其体内外生物学活性的检测

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第6期18卷 611-613页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的　将抗人大肠癌单克隆抗体ND 1(mAb)的VH和VL 基因进行重组 ,构建和表达ND 1scFv ,并对其在体内外的生物学活性进行检测。方法　采用RT PCR技术 ,从能够分泌mAbND 1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH 和VL 基因 ,通过重叠延伸拼接PCR在VH 和VL... 详细信息

目的　将抗人大肠癌单克隆抗体ND 1(mAb)的VH和VL 基因进行重组 ,构建和表达ND 1scFv ,并对其在体内外的生物学活性进行检测。方法　采用RT PCR技术 ,从能够分泌mAbND 1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH 和VL 基因 ,通过重叠延伸拼接PCR在VH 和VL 基因间引入连接短肽 ,体外构建ND 1scFv基因 ,并在大肠杆菌中表达。采用间接免疫荧光 (IFA)及ELISA法测定ND 1scFv的免疫学活性。用99Tcm 标记ND 1scFv后 ,将偶联物给予荷瘤裸鼠 ,观察其在动物体内的显像及生物学分布。结果　SDS PAGE显示 ,重组蛋白Mr 为 30 0 0 0 ,同预期结果一致。IFA及ELISA检测表明 ,ND 1scFv保留了与亲本抗体相近的免疫学活性 ,对表达相应抗原的靶细胞具有特异结合活性。体内放射免疫实验显示 ,99Tcm ND 1scFv在荷瘤小鼠体内的生物学分布 ,呈明显的肿瘤积聚趋向 ,注入体内 1h血中T/NT即达2 .6 1。结论　获得免疫学活性良好的ND 1scFv ,对荷瘤动物体内肿瘤的定位快速、准确。

关键词：大肠癌单链抗体生物学活性肿瘤诊断 ^99Tc^m

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全反式维甲酸诱导人卵巢癌细胞凋亡的实验研究

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中国肿瘤临床 2003年第2期30卷 99-103页

作者：蔡威宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室沈阳市110001

目的:观察全反式维甲酸(All-transretinoicacid,ATRA)诱导人卵巢癌细胞CAOV3产生凋亡。方法:应用扫描电镜、透射电镜、DNA断裂分析及流式细胞术观察ATRA诱导人卵巢癌细胞CAOV3凋亡。结果:ATRA作用后电镜下细胞逐渐变圆,细胞表面微绒毛消... 详细信息

目的:观察全反式维甲酸(All-transretinoicacid,ATRA)诱导人卵巢癌细胞CAOV3产生凋亡。方法:应用扫描电镜、透射电镜、DNA断裂分析及流式细胞术观察ATRA诱导人卵巢癌细胞CAOV3凋亡。结果:ATRA作用后电镜下细胞逐渐变圆,细胞表面微绒毛消失,核染色质更加致密,浓缩分块,胞质中有空泡形成,细胞表面出泡,脱落形成膜包裹的凋亡小体。流式细胞术不同浓度ATRA对CAOV3细胞凋亡作用的结果显示在DNA直方图上均出现低于G1期二倍体DNA含量的亚二倍体峰,随药物浓度增加,亚二倍体细胞从10-8mol/LATRA时的18.7%增加到10-6mol/L的37.4%;10-6mol/LATRA作用24h即诱导CAOV3细胞产生典型的梯形DNA条带(DNAladder),大小约180bp的整数倍递增,随ATRA作用时间延长而逐渐加强。结论:ATRA可以诱导卵巢癌细胞产生细胞凋亡,呈时间和浓度依赖性。

关键词：卵巢癌全反式维甲酸 CAOV3细胞细胞凋亡扫描电镜透射电镜 DNA断裂分析法流式细胞术

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人羊膜负载人羊膜间充质干细胞对SD大鼠皮肤创面愈合的影响

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 611-614,I0005-I0009页

作者：霍双枝施萍庞希宁中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室干细胞与再生医学研究室沈阳110001 中国医科大学附属第一医院全科医学教研室沈阳110001

目的观察人羊膜(HAM)负载人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响。方法采用胰酶消化HAM的上皮细胞,将hAMSCs接种于HAM上培养,然后贴覆于大鼠创面,观察创面大体变化,采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况,并... 详细信息

目的观察人羊膜(HAM)负载人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响。方法采用胰酶消化HAM的上皮细胞,将hAMSCs接种于HAM上培养,然后贴覆于大鼠创面,观察创面大体变化,采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况,并与单纯羊膜组和对照组进行比较。结果 HAM负载hAMSCs组大鼠创面的平均愈合时间为(18.3±0.9)d,明显快于对照组的(26.4±0.7)d(P<0.01)和单纯羊膜组的(21.5±1.2)d(P<0.05);术后11 d和14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠的创面愈合率分别为(81.5±7.2)%和(94.3±3.6)%,明显高于对照组的(48.5±3.2)%和(74.3±4.3)%及单纯羊膜组的(68.5±4.5)%和(86.8±4.8)%(P均<0.01)。皮肤切片HE染色结果证实,HAM负载hAMSCs组大鼠的伤口愈合质量明显优于单纯羊膜组和对照组。免疫组织化学染色结果显示,术后14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠皮肤CK19阳性表皮干细胞数为48.2±3.2,明显高于单纯羊膜组的37.7±3.1(P<0.05)和对照组的29.6±2.4(P<0.01);血管内皮生长因子阳性颗粒表达数为64.5±4.5,也明显高于单纯羊膜组的52.6±3.8(P<0.05)和对照组的40.7±3.1(P<0.01)。结论 HAM负载hAMSCs可能是通过促进表皮干细胞和毛细血管再生,促进皮肤损伤修复。

关键词：人羊膜人羊膜间充质干细胞创伤修复角蛋白19 血管内皮生长因子

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增殖细胞核抗原在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其临床病理意义

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中国实用妇科与产科杂志 1997年第3期13卷 149-150页

作者：潘伯臣宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

应用免疫组织化学方法检测了５９例上皮性卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，以探讨卵巢肿瘤中ＰＣＮＡ蛋白表达的临床病理意义。结果：ＰＣＮＡ在良、恶性上皮性卵巢瘤中均有表达，但卵巢癌中ＰＣＮＡ的阳性率（８０．９％... 详细信息

应用免疫组织化学方法检测了５９例上皮性卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，以探讨卵巢肿瘤中ＰＣＮＡ蛋白表达的临床病理意义。结果：ＰＣＮＡ在良、恶性上皮性卵巢瘤中均有表达，但卵巢癌中ＰＣＮＡ的阳性率（８０．９％）明显高于良性卵巢瘤中的阳性率（２５％，Ｐ＜０．０１）。卵巢癌中，高分化卵巢癌ＰＣＮＡ的阳性指数评分低于中、低分化卵巢癌（Ｐ＜０．００１），ＰＣＮＡ阳性指数评分与分化程度之间呈负相关，ｒｓ＝－０．５０（Ｐ＜０．０１）。Ⅰ／Ⅱ期卵巢癌ＰＣＮＡ指数阳性指数评分低于Ⅲ／Ⅳ期卵巢癌（Ｐ＜０．０５），ＰＣＮＡ阳性指数评分与临床期别之间呈正相关，ｒｓ＝０．４３（Ｐ＜０．０１）。结果提示，分化程度低、临床期别高的卵巢癌细胞增殖快，ＰＣＮＡ的检测有助于鉴别上皮性卵巢肿瘤的良、恶性，并有可能作为上皮性卵巢癌的预后指标。

关键词：卵巢肿瘤免疫组织化学增殖细胞核抗原病理

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正交试验考查MTT方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素

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癌症 1997年第6期16卷 459-460页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室

正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报... 详细信息

正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报道的具体做法各不相同，且实验结果受...

关键词：大肠肿瘤正交试验 MTT法药敏实验

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诱导胚胎干细胞向神经细胞分化方法的研究与探讨

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细胞生物学杂志 2004年第2期26卷 145-148页

作者：顾文佳庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室发育生物学教研室沈阳110001

胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,... 详细信息

胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,分析了一些方法的原理并初步探讨其相关的分子机制,并提出一些可行性新方法。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化因其体外的可操作性、来源的广泛性及质量可控性将有可能成为临床上治疗神经系统疾病的有效方法。

关键词：诱导胚胎干细胞神经细胞分化 ES细胞神经系统疾病

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肿瘤导向治疗中免疫脂质体的研究现状

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癌症 1997年第3期16卷 238-240页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室

肿瘤导向治疗中免疫脂质体的研究现状方瑾宋今丹关键词肿瘤导向治疗免疫脂质体中图号Ｒ７３０．５单克隆抗体技术的应用使肿瘤化疗取得重大进展。由于单克隆抗体具有高纯度、高特异性的特点，在与抗癌药物偶联后可选择性地作用于肿瘤细... 详细信息

肿瘤导向治疗中免疫脂质体的研究现状方瑾宋今丹关键词肿瘤导向治疗免疫脂质体中图号Ｒ７３０．５单克隆抗体技术的应用使肿瘤化疗取得重大进展。由于单克隆抗体具有高纯度、高特异性的特点，在与抗癌药物偶联后可选择性地作用于肿瘤细胞，克服化疗药物对正常组织的损害，...

关键词：肿瘤导向治疗免疫脂质体

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大肠癌免疫脂质体导向紫杉醇的实验研究

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中国免疫学杂志 1998年第3期14卷 198-200页

作者：方瑾王芸庆宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

采用新型偶联剂ＳＡＴＡ，将抗人体大肠癌的单克隆抗体与载有紫杉醇的脂质体偶联制成免疫脂质体。检测结果显示，脂质体稳定性良好，４℃存放１０ｄ，内含物无明显渗漏。制成免疫脂质体后，单抗免疫活性不丧失。体外细胞毒实验结果显示... 详细信息

采用新型偶联剂ＳＡＴＡ，将抗人体大肠癌的单克隆抗体与载有紫杉醇的脂质体偶联制成免疫脂质体。检测结果显示，脂质体稳定性良好，４℃存放１０ｄ，内含物无明显渗漏。制成免疫脂质体后，单抗免疫活性不丧失。体外细胞毒实验结果显示，紫杉醇免疫脂质体对细胞生长的抑制作用有明显的靶向专一性，对人大肠癌细胞的体外细胞毒作用优于普通脂质体和游离药物，ＩＣ５０分别为两者的６．７０和８８．７倍。

关键词：大肠肿瘤免疫脂质体紫杉醇药物疗法

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p21活化蛋白激酶2在卵母细胞成熟中的作用

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中国生物工程杂志 2007年第6期27卷 27-30页

作者：程大也梁彬李丰中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

研究p21活化蛋白激酶2(p21-activated kinase2,PAK2)在爪蟾卵母细胞成熟中的作用。利用特异性抑制PAK2活性的PAK2-N端(PAK2-Nterminal,PAK2-NT)片段显微注射爪蟾卵母细胞。荧光显微镜下比较PAK2-NTmRNA注射组和未注射对照组卵母细胞胚... 详细信息

研究p21活化蛋白激酶2(p21-activated kinase2,PAK2)在爪蟾卵母细胞成熟中的作用。利用特异性抑制PAK2活性的PAK2-N端(PAK2-Nterminal,PAK2-NT)片段显微注射爪蟾卵母细胞。荧光显微镜下比较PAK2-NTmRNA注射组和未注射对照组卵母细胞胚泡破裂发生。共聚焦显微镜下,时间延迟摄影法观察两组卵母细胞胞质分裂过程中肌动蛋白和纺锤体的变化。与未注射PAK2-N端mRNA的对照组卵母细胞相比,注射组卵母细胞胚泡破裂发生无异常,但未见胞质分裂发生和极体形成。结果提示PAK2可能参与爪蟾卵母细胞胞质分裂过程。

关键词： p21活化蛋白激酶卵母细胞胞质分裂

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